用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法
【专利摘要】本发明公开了用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法，选择plastic plus微载体作为细胞贴附生长的微载体；包括以下步骤：首先，称量plastic plus微载体15-45g/L；其次，每次用pH为7.4的2L PBS液清洗3遍；然后，加入2L PBS液浸泡微载体3h-4h；最后，121℃蒸汽灭菌三十分钟，冷却静置。本发明选用plastic plus微载体作为细胞生长的载体，该载体不含动物源的蛋白，满足生物安全的要求，避免在细胞培养过程中引入不必要的蛋白源，提高了微载体的使用性能；本发明通过PSB对微载体进行清洁，然后在进行121℃蒸汽灭菌，能很好的将微载体清洁、灭菌完全，避免了微载体为后续的工艺引入不必要的病菌。
【专利说明】用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及疫苗制备领域，具体地，涉及一种用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法。
【背景技术】
[0002]传统的制备流感病毒疫苗的方法是使用鸡胚制备的，国内使用鸡胚培养疫苗已经有50多年的历史。目前使用的流感疫苗主要是鸡胚制备的灭活的流感三价裂解疫苗，包括甲型流感病毒株、阳吧和乙型流感病毒株以及大流感疫苗。病苗株的主要来源是由1?)根据每年全球流感病毒的变化规律推荐的用于下一年度流感疫苗生产用流感病毒流行株的表面抗原来决定的，将1?)推荐的流行野毒株与鸡胚高产株双重感染产生重配或反遗传学重配，得到新的疫苗株，在鸡胚上具有高产的特性，但鸡胚存在有潜在污染的可能，以及潜在的鸡胚蛋白引起的变态反应，而且培养周期过长，不易于控制产量。不利于用于应对大规模的流感爆发；该传统工艺劳动强度大，耗时长、效率低，生产成本高；容易被环境污染；鸡胚不同批次间的差异大；难以扩大生产；鸡胚自身被细菌或其它病毒污染而致生产的疫苗存在质量及安全隐患；生产疫苗后的废胚数量多，无害化处理难度大，涉及生物安全和公共卫生问题。故后来使用细胞法制备流感疫苗，细胞法制备方法中用微载体作为细胞的载体，微载体在使用前须经过清洁。灭菌，传统的微载体的清洁、灭菌的方法多达到的效果不是很好。
【发明内容】
[0003]本发明提供一种用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法，克服现有微载体的清洁、灭菌的方法灭菌清洁的效果不好的问题，提高微载体的清洁度，避免对后续的接毒工艺带来杂质病菌。
[0004]本发明还提供一种微载体的应用。
[0005]本发明解决上述问题所采用的技术方案是:用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法，选择1)1118微载体作为细胞贴附生长的微载体。
[0006]选用微载体作为细胞生长的载体，该载体不含动物源的蛋白，满足生物安全的要求，避免在细胞培养过程中引入不必要的蛋白源。
[0007]用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法，包括以下步骤:
1)称量￠1118微载体 15-458凡；
2)每次用邱为7.4的21 ？88液清洗3遍；
3)加入21？88液浸泡微载体36-41！；
4)1211:蒸汽灭菌三十分钟，冷却静置。
[0008]？88为一种常用的缓冲溶液，能够彻底的清洁？1%丨化？1118微载体，且不会在清洁？1118微载体的过程中引入不必要的病菌和杂质；并且，？38的邱为7.4，基本呈中性，使得清洁完全后的1)1118微载体上不会残留有多余的偏酸或是偏见的液体，若是用于培养细胞的？1%1化？1118微载体上残留有偏酸或是偏见的液体，会对其所培养的细胞的生产产生影响，严重的会导致细胞脱水死亡；1211蒸汽灭菌为湿法灭菌，不仅能很好的将附着在微载体上的细菌清除，且具有较快的速度和效果。
[0009]微载体的应用，将如权利要求2所述制备的微载体应用到761*0细胞在生物反应器中的微载体悬浮培养。
[0010]综上，本发明的有益效果是:
1、本发明选用微载体作为细胞生长的载体，该载体不含动物源的蛋白，满足生物安全的要求，避免在细胞培养过程中引入不必要的蛋白源，提高了微载体的使用性能。
[0011]2、本发明通过？38对微载体进行清洁，然后在进行12IX:蒸汽灭菌，能很好的将微载体清洁、灭菌完全，避免了微载体为后续的工艺引入不必要的病菌。
【专利附图】
【附图说明】
[0012]图1是细胞法制备流感疫苗的工艺流程图。
【具体实施方式】
[0013]下面结合实施例及附图，对发明作进一步地的详细说明，但本发明的实施方式不限于此。
[0014]实施例:
如图1所示，用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法，选择￠1118微载体作为细胞贴附生长的微载体。
[0015]用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法，包括以下步骤:
1)称量￠1118微载体 15-458凡；
2)每次用邱为7.4的21 ？88液清洗3遍；
3)加入21？88液浸泡微载体36-41！；
4)1211:蒸汽灭菌三十分钟，冷却静置。
[0016]如上所述，可较好的实现本发明。
【权利要求】
1.用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法，其特征在于，选择plasticplus微载体作为细胞贴附生长的微载体。
2.根据权利要求1所述的用于制备疫苗工艺的微载体的清洁、灭菌的方法，其特征在于，包括以下步骤: 1)称量plastic plus 微载体 15_45g/L ； 2)每次用pH为7.4的2L PBS液清洗3遍； 3)加入2LPBS液浸泡微载体3h-4h ； 4)121°C蒸汽灭菌三十分钟，冷却静置。
3.微载体的应用，将如权利要求2所述制备的微载体应用到Ve1细胞在生物反应器中的微载体悬浮培养。
【文档编号】A61L2/07GK104450604SQ201410685334
【公开日】2015年3月25日 申请日期:2014年11月25日 优先权日:2014年11月25日
【发明者】高鹏, 符晓阳, 左红, 陶家春 申请人:成都威尔诺生物科技有限公司