癌症的标志是持续的新血管形成，称为血管生成。血管生成素-1(Ang1)和Ang2是调控血管生成的关键途径的成员；Ang1和Ang2是结合内皮细胞特异性受体酪氨酸激酶Tie2的分泌因子。Ang1由外周细胞组成型分泌且经由Tie2受体稳定血管完整性。Ang2仅响应于刺激(例如伤口愈合、肿瘤生长)从内皮细胞释放且经由Tie2信号传导促进血管出芽并抑制外周细胞-内皮细胞相互作用。研究已表明，抑制Ang2比Ang1对于抑制血管生成更重要，但在某些其它研究中，Ang2和Ang1的抑制已显示益处(Cascone等人，JClinOnc(2012)30(4):441)。当与VEGF阻断剂阿柏西普(aflibercept)组合给药时，针对人Ang2的抗体已显示在小鼠异种移植肿瘤模型中抑制肿瘤生长且降低肿瘤血管分布(Daly等人,CancerRes(2013)73(1):108中的REGN910和WO2011014469中的H1H685P)。在Brown等人(MolCancerTher(2010)9(1):145)中，mAb3.19.3(人Ang2抗体)据报导以小于Ang2至少500倍的亲和力结合Ang1，而在WO2006068953的实施例4和9中，申请人公开了3.19.3对Ang1具有强交叉反应性，其中对Ang2的KD大约为5pM且对Ang1的KD大约为30pM。在SW620异种移植研究中，将3.19.3与DC101(结合鼠VEGFR2的单克隆抗体)组合给药。仍然需要提供通过以高亲和力结合人Ang2且中和人Ang2来抑制Ang/Tie2血管生成途径的替代抗体。具体而言，仍然需要提供以高亲和力结合人Ang2且中和人Ang2、但不以高亲和力结合或中和人Ang1的抗体。因此，本发明的一个实施方案提供包含轻链(LC)和重链(HC)的抗体，其中轻链包含轻链可变区(LCVR)且重链包含重链可变区(HCVR)，其中LCVR具有SEQIDNO:3中给出的氨基酸序列，且HCVR具有SEQIDNO:1中给出的氨基酸序列。本发明的某些抗体以大于本领域已知的人Ang2抗体的高亲和力结合人Ang-2。此外，本发明的某些抗体在肿瘤异种移植模型(诸如用于三阴性乳腺癌的EL1997、用于卵巢癌的SKOV3x.1和用于前列腺癌的PC3)中表明阳性反应，指示作为癌症治疗剂的潜能。此外，本发明的某些抗体相比于人Ang-1选择性结合人Ang-2，且避免对人Ang1的潜在脱靶责任。在一个其它实施方案中，本发明提供抗体，其中LC具有SEQIDNO:4中给出的氨基酸序列，且HC具有SEQIDNO:2中给出的氨基酸序列。在一个其它实施方案中，本发明提供包含两条轻链和两条重链的抗体，其中各轻链具有SEQIDNO:4中给出的氨基酸序列，且各重链具有SEQIDNO:2中给出的氨基酸序列。在一个其它实施方案中，本发明提供抗体，其中所述重链之一与所述轻链之一形成链间二硫键，且另一重链与另一轻链形成链间二硫键，且所述重链之一与另一重链形成两个链间二硫键。在一个其它实施方案中，本发明提供抗体，其中该抗体被糖基化。在一个实施方案中，本发明提供结合人Ang2(SEQIDNO:7)的抗体，其包含轻链(LC)和重链(HC)，其中轻链包含分别由氨基酸序列KASQDVYIAVA(SEQIDNO:8)、YWASTRDT(SEQIDNO:9)和HQYSSYPPT(SEQIDNO:10)组成的轻链互补决定区LCDR1、LCDR2、和LCDR3，且其中重链包含分别由氨基酸序列GYSFTDYNMV(SEQIDNO:11)、YIDPYNGGTGYNQKFEG(SEQIDNO:12)和ARTRDRYDVWYFDV(SEQIDNO:13)组成的重链互补决定区HCDR1、HCDR2和HCDR3。在一个实施方案中，本发明提供结合人Ang2(SEQIDNO:7)的抗体，其包含轻链(LC)和重链(HC)，其中轻链包含轻链可变区(LCVR)且重链包含重链可变区(HCVR)，其中LCVR具有SEQIDNO:3中给出的氨基酸序列，且HCVR具有SEQIDNO:1中给出的氨基酸序列。在一个其它实施方案中，本发明提供结合人Ang2(SEQIDNO:7)的抗体，其中LC具有SEQIDNO:4中给出的氨基酸序列，且HC具有SEQIDNO:2中给出的氨基酸序列。在一个其它实施方案中，本发明提供结合人Ang2(SEQIDNO:7)的抗体，其包含两条轻链和两条重链，其中各轻链具有SEQIDNO:4中给出的氨基酸序列，且各重链具有SEQIDNO:2中给出的氨基酸序列。在一个其它实施方案中，本发明提供结合人Ang2(SEQIDNO:7)的抗体，其中所述重链之一与所述轻链之一形成链间二硫键，且另一重链与另一轻链形成链间二硫键，且所述重链之一与另一重链形成两个链间二硫键。在一个其它实施方案中，本发明提供结合人Ang2(SEQIDNO:7)的抗体，其中该抗体被糖基化。在一个其它实施方案中，本发明提供对人Ang2的解离平衡常数KD小于约150pM的本发明抗体。本发明抗体的特征进一步在于与人Ang2的kon速率为约1×106M-1sec-1。本发明抗体的特征进一步在于与人Ang2的koff速率为约0.7×10-4sec-1。通过在37℃的结合动力学来确立KD、kon和koff值，如测定部分中的“结合动力学、亲和力和选择性”中所述。本发明抗体以高亲和力结合人Ang2。出于本公开的目的，术语“高亲和力”是指对人Ang2的KD小于约150pM。通过在37℃的结合动力学来确立KD值，如测定部分中的“结合动力学、亲和力和选择性”中所述。在一个实施方案中，本发明提供包含DNA分子的哺乳动物细胞，所述DNA分子包含：编码具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的多肽的多核苷酸序列；和编码具有SEQIDNO:2的氨基酸序列的多肽的多核苷酸序列，其中该细胞能够表达包含具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的轻链和具有SEQIDNO:2的氨基酸序列的重链的抗体。在一个实施方案中，本发明提供产生包含具有SEQIDNO:4的氨基酸序列的轻链和具有SEQIDNO:2的氨基酸序列的重链的抗体的方法，其包括在使得表达抗体的条件下培养本发明的哺乳动物细胞，且回收表达的抗体。在一个实施方案中，本发明提供通过本发明方法产生的抗体。在一个实施方案中，本发明提供包含本发明抗体和可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。在一个实施方案中，本发明提供治疗癌症的方法，其包括向有需要的患者施用有效量的本发明抗体。在一个其它实施方案中，本发明提供治疗癌症的方法，其包括向有需要的患者施用有效量的本发明抗体，其中所述癌症为乳腺癌、卵巢癌、胃癌、结肠直肠癌或肝细胞癌。在一个其它实施方案中，这些方法包括施用有效量的本发明抗体且同时、分开或依次组合施用一种或多种选自以下的抗肿瘤剂：顺铂、卡铂、脂质体多柔比星、多西他赛、环磷酰胺和多柔比星、诺维本、艾瑞布林、用于可注射悬浮液的紫杉醇蛋白结合颗粒、伊沙匹隆、卡培他滨、雷莫芦单抗、FOLFOX(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和奥沙利铂)、FOLFIRI(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和依立替康)和西妥昔单抗。在一个其它实施方案中，这些方法包括施用有效量的本发明化合物且同时、分开或依次组合施用一种或多种选自以下的免疫肿瘤学药剂：nivolumab、伊匹单抗(ipilimumab)、pidilizumab、派姆单抗(pembrolizumab)和durvalumab。在一个实施方案中，本发明提供治疗乳腺癌的方法，其包括向有需要的患者施用有效量的本发明抗体。在一个其它实施方案中，这些方法包括施用有效量的本发明抗体且同时、分开或依次组合施用一种或多种选自以下的抗肿瘤剂：雷莫芦单抗、多西他赛、环磷酰胺和多柔比星、诺维本、艾瑞布林、用于可注射悬浮液的紫杉醇蛋白结合颗粒、伊沙匹隆和卡培他滨。在一个实施方案中，本发明提供治疗卵巢癌的方法，其包括向有需要的患者施用有效量的本发明抗体。在一个其它实施方案中，这些方法包括施用有效量的本发明抗体且同时、分开或依次组合施用一种或多种选自以下的抗肿瘤剂：雷莫芦单抗、顺铂、卡铂和脂质体多柔比星。在一个实施方案中，本发明提供治疗胃癌的方法，其包括向有需要的患者施用有效量的本发明抗体。在一个其它实施方案中，这些方法包括施用有效量的本发明抗体且同时、分开或依次组合施用雷莫芦单抗。在一个实施方案中，本发明提供治疗肝细胞癌的方法，其包括向有需要的患者施用有效量的本发明抗体。在一个其它实施方案中，这些方法包括施用有效量的本发明抗体且同时、分开或依次组合施用雷莫芦单抗。在一个实施方案中，本发明提供治疗结肠直肠癌的方法，其包括向有需要的患者施用有效量的本发明抗体。在一个其它实施方案中，这些方法包括施用有效量的本发明抗体且同时、分开或依次组合施用一种或多种选自以下的抗肿瘤剂：雷莫芦单抗、FOLFOX(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和奥沙利铂)、FOLFIRI(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和依立替康)和西妥昔单抗。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗中的本发明抗体。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗癌症的本发明抗体。在一个其它实施方案中，本发明提供用于治疗癌症的本发明抗体，其中所述癌症为乳腺癌、卵巢癌、胃癌、结肠直肠癌或肝细胞癌。在一个其它实施方案中，为了用于治疗癌症，同时、分开或依次组合施用本发明抗体与一种或多种选自以下的抗肿瘤剂：顺铂、卡铂、脂质体多柔比星、多西他赛、环磷酰胺和多柔比星、诺维本、艾瑞布林、用于可注射悬浮液的紫杉醇蛋白结合颗粒、伊沙匹隆、卡培他滨、雷莫芦单抗、FOLFOX(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和奥沙利铂)、FOLFIRI(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和依立替康)和西妥昔单抗。在一个其它实施方案中，为了用于治疗癌症，同时、分开或依次组合本发明化合物与一种或多种选自以下的免疫肿瘤学药剂：nivolumab、伊匹单抗、pidilizumab、派姆单抗和durvalumab。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗乳腺癌的本发明抗体。在一个其它实施方案中，为了用于治疗乳腺癌，同时、分开或依次组合本发明抗体与一种或多种选自以下的抗肿瘤剂：雷莫芦单抗、多西他赛、环磷酰胺和多柔比星、诺维本、艾瑞布林、用于可注射悬浮液的紫杉醇蛋白结合颗粒、伊沙匹隆和卡培他滨。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗卵巢癌的本发明抗体。在一个其它实施方案中，为了用于治疗卵巢癌，同时、分开或依次组合本发明抗体与一种或多种选自以下的抗肿瘤剂：雷莫芦单抗、顺铂、卡铂和脂质体多柔比星。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗胃癌的本发明抗体。在一个其它实施方案中，为了用于治疗胃癌，同时、分开或依次组合本发明抗体与雷莫芦单抗。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗肝细胞癌的本发明抗体。在一个其它实施方案中，为了用于治疗肝细胞癌，同时、分开或依次组合本发明抗体与雷莫芦单抗。在一个实施方案中，本发明提供用于治疗结肠直肠癌的本发明抗体。在一个其它实施方案中，为了用于治疗结肠直肠癌，同时、分开或依次组合本发明抗体与一种或多种选自以下的抗肿瘤剂：雷莫芦单抗、FOLFOX(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和奥沙利铂)、FOLFIRI(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和依立替康)和西妥昔单抗。在一个其它实施方案中，本发明提供本发明抗体用于制备用于治疗癌症的药物的用途。在一个其它实施方案中，本发明提供本发明抗体用于制备用于治疗癌症的药物的用途，其中所述癌症为乳腺癌、卵巢癌、胃癌、结肠直肠癌或肝细胞癌。在一个其它实施方案中，本发明提供本发明抗体与一种或多种选自以下的抗肿瘤剂同时、分开或依次组合用于制备用于治疗癌症的药物的用途：顺铂、卡铂、脂质体多柔比星、多西他赛、环磷酰胺和多柔比星、诺维本、艾瑞布林、用于可注射悬浮液的紫杉醇蛋白结合颗粒、伊沙匹隆、卡培他滨、雷莫芦单抗、FOLFOX(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和奥沙利铂)、FOLFIRI(甲酰四氢叶酸、氟尿嘧啶和依立替康)和西妥昔单抗。本发明抗体是工程改造的非自然存在的多肽复合物。本发明的DNA分子是非自然存在的DNA分子，其包含编码具有本发明抗体中的多肽之一的氨基酸序列的多肽的多核苷酸序列。本发明抗体被设计以具有工程改造的CDR且具有人来源抗体的一些部分(框架、铰链区和恒定区的全部或一部分)，所述部分与源自人基因组序列的框架和恒定区相同或基本上相同(基本上是人)。全人框架、铰链区和恒定区是那些人种系序列以及具有自然存在的体细胞突变的序列和具有工程改造的突变的那些。本发明抗体可包含源自其中含有一个或多个氨基酸取代、缺失或添加的全人框架、铰链或恒定区的框架、铰链或恒定区。此外，本发明抗体优选地在人中是基本上非免疫原性的。本发明抗体是IgG型抗体且具有4个经由链内和链间二硫键交联的氨基酸链(两个“重”链和两个“轻”链)。各重链由N末端HCVR和重链恒定区(“HCCR”)构成。各轻链由LCVR和轻链恒定区(“LCCR”)构成。当在某些生物系统中表达时，具有天然人Fc序列的抗体在Fc区中被糖基化。通常，糖基化发生于抗体的Fc区中的高度保守的N-糖基化位点处。N-聚糖通常附接至天冬酰胺。抗体同样可在其它位置处被糖基化。任选地，本发明抗体含有源自人IgG4Fc区的Fc部分，因为参与Fc受体介导的炎性机制或活化补体的能力降低，导致效应物功能降低。此外，某些本发明抗体含有IgG4-PAAFc部分。IgG4-PAAFc部分在229位处具有丝氨酸至脯氨酸突变，在235位处具有苯丙氨酸至丙氨酸突变，且在236位处具有亮氨酸至丙氨酸突变。S229P突变系是防止半抗体形成(IgG4抗体中的半分子的动态交换的现象)的铰链突变。F235A和L236A突变进一步减小已经低的人IgG4同种型的效应物功能。HCVR和LCVR区可进一步细分成散布有更保守区(称为框架区("FR"))的超变区(称为互补决定区("CDR"))。每一HCVR和LCVR由三个CDR和四个FR构成，其从氨基末端至羧基末端以下列顺序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在本文中，重链的三个CDR称为"HCDR1、HCDR2和HCDR3"且轻链的三个CDR称为"LCDR1、LCDR2和LCDR3"。CDR含有大部分与抗原形成特异性相互作用的残基。目前存在三种用于序列划定的抗体CDR指定系统。KabatCDR定义(Kabat等人,“SequencesofProteinsofImmunologicalInterest,”NationalInstitutesofHealth,Bethesda,Md.(1991))基于抗体序列可变性。ChothiaCDR定义(Chothia等人,“Canonicalstructuresforthehypervariableregionsofimmunoglobulins”,JournalofMolecularBiology,196,901-917(1987)；Al-Lazikani等人,“Standardconformationsforthecanonicalstructuresofimmunoglobulins”,JournalofMolecularBiology,273,927-948(1997))基于抗体的三维结构和CDR环的拓扑学。除HCDR1和HCDR2外，ChothiaCDR定义与KabatCDR定义是相同的。NorthCDR定义(North等人,“ANewClusteringofAntibodyCDRLoopConformations”,JournalofMolecularBiology,406,228-256(2011))基于用大量晶体结构的亲和力传播聚类。出于本发明目的，使用三种方法的组合来定义CDR。在轻链CDR的情况下，使用NorthCDR定义。在HCDR1的情况下，使用Kabat和ChothiaCDR定义的杂合体。HCDR1的Kabat定义开始于重链的第一半胱氨酸之后的第九个残基且通常长度为5至7个残基，而HCDR1的Chothia定义开始于该半胱氨酸之后的第四个残基且通常长度为7至9个残基。通过Chothia起始位置和Kabat末端位置来定义本发明抗体的HCDR1。在HCDR2的情况下，使用KabatCDR定义。在HCDR3的情况下，使用North、Kabat和ChothiaCDR定义的杂合体。HCDR3的Kabat定义包含重链(本发明抗体的SEQIDNO:2)的残基99-110且通常开始于半胱氨酸之后的三个残基。HCDR3的Chothia定义与Kabat定义相同。HCDR3的North定义包含重链(本发明抗体的SEQIDNO:2)的残基97-110且通常在半胱氨酸残基之后立即开始。通过North起始位置和Kabat/Chothia/North末端位置来定义本发明抗体的HCDR3。可通过使编码HCVR的DNA可操作连接至编码重链恒定区的另一DNA分子来将编码HCVR区的分离DNA转化成全长重链基因。人以及其它哺乳动物重链恒定区基因的序列是本领域已知的。可例如通过标准PCR扩增获得涵盖这些区域的DNA片段。可通过使编码LCVR的DNA可操作连接至编码轻链恒定区的另一DNA分子来将编码LCVR区的分离DNA转化成全长轻链基因。人以及其它哺乳动物轻链恒定区基因的序列是本领域已知的。可通过标准PCR扩增获得涵盖这些区域的DNA片段。轻链恒定区可以是κ或λ恒定区。在序列可操作连接至表达控制序列之后，在宿主细胞中表达本发明的多核苷酸。表达载体通常可在宿主生物体中作为附加体或作为宿主染色体DNA的整合部分复制。通常，表达载体将含有选择标记(例如四环素、新霉素和二氢叶酸还原酶)以允许检测用期望DNA序列转化的细胞。本发明抗体可容易在哺乳动物细胞(诸如CHO、NS0、HEK293或COS细胞)中产生。使用本领域众所周知的技术培养宿主细胞。可通过众所周知方法将含有目标多核苷酸序列(例如，编码抗体的多肽和表达控制序列的多核苷酸)的载体转移至宿主细胞中，所述方法根据细胞宿主的类型而变化。可采用各种蛋白纯化方法，且此类方法是本领域已知的，且描述于，例如，Deutscher,MethodsinEnzymology182:83-89(1990)和Scopes,ProteinPurification:PrinciplesandPractice,第3版,Springer,NY(1994)。在本发明的另一个实施方案中，以分离形式提供抗体或编码其的核酸。如本文所使用，术语“分离”是指不含或基本上不含发现于细胞环境中的任何其它大分子物质的蛋白、肽或核酸。如本文所使用的“基本上不含”意指目标蛋白、肽或核酸包含大于80%(以摩尔计)、优选地大于90%和更优选地大于95%的存在的大分子物质。本发明抗体或包含其的药物组合物可通过肠胃外途径(例如，皮下和静脉内)施用。本发明抗体可单独与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂以单一或多个剂量施用于患者。本发明的药物组合物可通过本领域众所周知的方法制备(例如，Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy,第19版(1995),A.Gennaro等人,MackPublishingCo.)且包含如本文所公开的抗体和一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。术语“治疗(treating或treat或treatment)”是指减缓、中断、阻止、缓解、停止、减轻或逆转现有症状、病症、病况或疾病的进展或严重度。除非另外指明，如本文提及抗体对人Ang2的亲和力所使用的“结合”意指小于约1x10-8M、优选地小于约1x10-9M的KD，如通过本领域已知的常用方法(包括通过基本上如本文所述在25℃或37℃下使用表面等离振子共振(SPR)生物传感器)所测定。本文提及本发明化合物所使用的术语“选择性的”或“选择性”是指化合物以低于化合物结合其它蛋白(包括目标家族的成员，诸如人Ang1)约1000-、500-、200-、100-、50-或约10倍的KD结合目标(例如人Ang2)，如通过在25℃或37℃下的表面等离振子共振所测量。额外或可替代地，当通过下文实施例中所述的方法测定时，本发明的Ang2选择性抗体结合人Ang2，但不结合或仅最小水平地结合人Ang1。“有效量”意指本发明抗体或包含本发明抗体的药物组合物针对组织、系统、动物、哺乳动物或人诱发的研究者、医师或其他临床医师寻求的生物或医学反应或期望治疗效应的量。抗体的有效量可根据因素而变化，所述因素诸如疾病状态、个体的年龄、性别和体重以及抗体在个体内诱导期望反应的能力。有效量也是治疗有益效应胜过抗体的任何毒性或有害效应的量。通过下列非限制性实例来进一步说明本发明。实施例1：抗体表达和纯化抗体A的重链和轻链的可变区的多肽、完整重链和轻链氨基酸序列和编码其的核苷酸序列列于下文标题为"氨基酸和核苷酸序列"的部分中。此外，抗体A的轻链、重链、轻链可变区和重链可变区的SEQIDNO显示于表1中。可基本上如下所述制备并纯化本发明抗体(包括但不限于抗体A)。可用用于分泌抗体的表达系统使用最佳预定HC：LC载体比率(诸如1:3或1:2)或编码HC和LC两者的单一载体系统瞬时或稳定转染适当宿主细胞(诸如HEK293或CHO)。可使用许多常用技术中的任一者纯化其中已分泌抗体的经澄清培养基。例如，可将培养基便利地施加至已用相容缓冲液(诸如磷酸盐缓冲盐水(pH7.4))平衡的MabSelect柱(GEHealthcare)或KappaSelect柱(GEHealthcare，用于Fab片段)。可洗涤该柱以去除非特异性结合组分。可例如通过pH梯度(诸如20mMTris缓冲液(pH7)至10mM柠檬酸钠缓冲液(pH3.0)或磷酸盐缓冲盐水(pH7.4)至100mM甘氨酸缓冲液(pH3.0))洗脱结合抗体。可诸如通过SDS-PAGE检测抗体级分，然后可合并。根据预期用途，进一步纯化是任选的。可使用常用技术浓缩和/或无菌过滤抗体。可通过常用技术(包括大小排阻、疏水性相互作用、离子交换、多态或羟基磷灰石色谱)有效去除可溶性聚集物和多聚体。抗体在这些色谱步骤之后的纯度大于95%。产物可立即在-70℃下冷冻或可冻干。表1:SEQIDNO抗体AHCVR1LCVR3重链2轻链4测定结合动力学、亲和力和选择性可在25℃或37℃下通过使用表面等离振子共振(SPR)生物传感器(诸如BIAcore®2000、BIAcore®3000或BIAcore®T100(GEHealthcare))根据本领域已知方法测定本发明抗体对可溶性Ang2的多种物种(诸如人、食蟹猴、小鼠、兔和狗)的结合动力学、亲和力和选择性。可从R&DSystems购买人Ang2。可使用下列方法制备用于捕获抗体的蛋白A表面。可使用EDC/NHS胺偶联方法(Biacore#BR-1000-50)将可溶性蛋白A(Calbiochem，#539202)固定于CM4(Biacore#BR-1005-34)或CM5(Biacore#BR-1000-99)上。简而言之，可通过以5μl/min或10μL/min注入EDC/NHS的1:1混合物7分钟来活化所有4个流通室的表面。然后，可将可溶性蛋白A在10mM乙酸盐缓冲液(pH4.5)中稀释，且以5μl/min或10μL/min的流速在流通室(Fc)2、3或4上固定7分钟。可通过以5μl/min或10μL/min注入乙醇胺7分钟来封闭仍保留于芯片表面上的未反应位点。运行缓冲液可以是HBS-EP+(Biacore#BR-1006-69)。可以1μg/mL或2μg/mL通过稀释至运行缓冲液中来制备抗体样品。可使用两倍连续稀释在运行缓冲液中而制备范围为200nM至3.1nM的离散浓度的Ang2配体。每一分析循环可由以下5个单独步骤的系列组成：(1)将抗体捕获于单独流通室(Fc2、Fc3和Fc4)上，(2)以50μL/min将250μL(300秒表面接触时间)离散浓度的Ang2注入(使用kinject)所有Fc上，(3)返回缓冲液流20分钟以监测解离相，(4)用10mM甘氨酸(pH1.5)的10μL(30秒接触时间)注入来再生芯片表面，(5)用HBS-EP+运行缓冲液的15μL(45秒接触时间)注入来平衡芯片表面。可使用标准双重参照处理所得数据且使用Biacore2000评估软件4.1版拟合至1:1结合模型以测定缔合速率(kon，M-1s-1单位)、解离速率(koff，s-1单位)。平衡解离常数(KD)的计算可从下列关系KD=koff/kon来计算，且以摩尔单位呈现。H1H685P-293HEK是表达于293HEK细胞中的人IgG1Ang2抗体，其利用HCVR序列(来自WO2011014469的SEQIDNO:18)和LCVR序列(来自WO2011014469的SEQIDNO:20)。3.19.3-293HEK是表达于293HEK细胞中的人IgG1抗体，其结合Ang2且利用3.19.3HCVR序列(来自WO2009097325的SEQIDNO:2)和MEDI1LCVR序列(来自WO2009097325的SEQIDNO:3)。在基本上如该测定中所述进行的实验中，抗体A以分别大约比H1H685P-293HEK和3.19.3-293HEK低4倍和8倍的KD结合人Ang2(表2)。在基本上如该测定中所述进行的实验中，抗体A分别以80、107、109、210和140pM的亲和力结合人、食蟹猴、小鼠、兔和狗Ang2(表3)。表2。表3。用Kinexa的测量亲和力可使用KinExA3200仪器(SapidyneInst.Inc.)测量结合动力学。简而言之，可使人Ang2共价偶联至琼脂糖珠且可在KinExA3200上检测游离Mab与该珠的结合。为了测量KD，可将含有Mab(1pM、2pM或5pM)且具有渐降连续稀释人Ang2的个别管在25℃下于含有1mg/mlBSA的PBS中孵育几天。在孵育之后，可测定每一平衡样品中的游离Mab。可使用N-曲线分析用KinExA软件测定Kd值。在基本上如该测定中所述进行的实验中，抗体A以比H1H685P-293HEK低约8倍的KD结合人Ang2(表4)。表4抗体KD(pM)95%置信区间抗体A0.11pM<0.0004pM-0.56pMH1H685P-293HEK0.87pM0.15pM-2.2pM抗体A经由固相ELISA测定抑制人Ang2与人Tie2的相互作用可在固相体外ELISA测定中测量本发明抗体对人Ang2与其受体人Tie2的结合的阻断。对于该测定，可在室温下用4μg/ml(100μl中)重组人Tie2-Fc(R&DSystems#313-TI)过夜包被高结合96孔ELISA板(Costar#2592)。可用TBST(Tris缓冲盐水，含有0.05%Tween20)将板洗涤3次，然后可用300μl/孔封闭缓冲液(0.5%BSA/D-PBS)(BSA：JacksonImmunoResearch编号001-000-162；无IgG，无蛋白酶)在室温下在轨道振荡器上封闭1-2小时。在封闭步骤期间，在单独聚丙烯多孔板中，可添加75μl2X测试抗体(1:3连续稀释于封闭缓冲液中)与75μl2X生物素化人Ang2(R&DSystems编号BT623)(也稀释于封闭缓冲液中)。然后可将抗体/生物素化Ang2混合物在37℃下孵育1小时(最终生物素化Ang2浓度为100ng/ml)。可从Tie2-Fc包被的ELISA板去除封闭溶液，其后可添加50μl/孔抗体/生物素化Ang2混合物(在一式两份孔中)。然后可将板在轨道振荡器上于室温下孵育2小时，用板密封器覆盖。然后可将板洗涤3次，其后可添加100μl/孔链霉抗生物素蛋白-HRP(R&DSystems#DY998，可以1:200稀释于封闭缓冲液中)。然后可将板在轨道振荡器上于室温下孵育45分钟，使用板密封器覆盖。然后可将板再次洗涤3次。然后可通过添加100μl/孔单组分TMB底物(可升温至室温)(Surmodics/BioFXLabs#TMBW-1000-01)来使板显色。可使显色在室温下进行10分钟(可使用铝箔覆盖板)。可用100μl/孔酸终止溶液(TMB终止溶液，Surmodics/BioFXLabs#LSTP-1000-01)终止显色。可在轨道振荡器上混合板，其后可在450nm下在ELISA阅读器(MolecularDevicesSpectraMax190)上使用SOFTmaxPRO5.4.1软件(MolecularDevicesCorp.)进行读数。A450值反映了保留结合Tie-2-Fc的生物素化Ang2的量。A450值的减小反映了生物素Ang2与Tie-2-Fc的结合的阻断。可用GraphPadPrism6使用Log转换的X值计算Ang2结合Tie-2的抑制的IC50值。可对log转换数据实施非线性回归(曲线拟合)分析(S形剂量反应，可变斜率)以获得IC50值。如果进行实验多于一次，则可计算实验之间的几何平均IC50值(和95%置信区间)。在基本上如该测定中所述进行的实验中，抗体A以剂量依赖性方式特异性阻断Ang2与Tie-2的结合，导致0.027nM的几何平均IC50值(n=2)(95%置信区间0.00089-0.8029nM)。抗体A和H1H685P-293HEK具有相当的中和IC50值。Ang2诱导的Tie-2磷酸化、而非Ang1介导的磷酸化的中和。可在基于细胞的测定中测量本发明抗体对人Tie-2的基于细胞的体外抑制，其中Ang1和Ang2以剂量依赖性方式结合人Tie-2且诱导人Tie-2磷酸化。可使用基于细胞的体外测定评估抗体A以剂量依赖性方式选择性中和Ang2、而非Ang1介导的Tie-2受体磷酸化的能力。可分别包括Ang2抗体、Ang1/2交叉反应性抗体和对照人IgG4PAA同种型抗体作为阳性和阴性对照。可通过稳定转染全长人Tie-2受体(在C末端处具有3XFLAG标签)来生成CHO-Tie-2细胞系。可在HamsF-12(CellGro/Mediatech#10-080-CV)、10%热灭活FBS(LifeTechnologies/Invitrogen#10082-147)、1X抗生素-抗真菌剂(LifeTechnologies/Invitrogen#15240-062)、1.25mg/mlG418(CorningCellgro#30-234-CI)、10μg/ml嘌呤霉素(Calbiochem#540411)和0.078%碳酸氢钠(ThermoHyclone#SH30033.01)的完全培养基中维持CHO-Tie-2细胞。对于测定，可将CHO-Tie-2细胞以10,000个细胞/孔(在100ul生长培养基中)再悬浮至聚赖氨酸包被的96孔板(BDBiocoat#356640)的内部60个孔中。可将200μlD-PBS置于边缘孔中以减少蒸发。可将细胞在37℃、95%RH、5%CO2下孵育过夜。第二天，可将细胞洗涤一次且可用100μl含有0.1%BSA的无血清生长培养基(Sigma#A7979，低内毒素)替换培养基。然后可使细胞在37℃、95%RH、5%CO2下在无血清培养基中饥饿7.5至24小时。在饥饿时段期间，可将抗体(以6×最终浓度)以1:2连续稀释于聚丙烯板中含有0.1%BSA的无血清生长培养基中。还可将人Ang2(R&DSystems#623-AN，重构于D-PBS/0.1%BSA中)和人Ang1(R&DSystems#923-AN，重构于D-PBS/0.1%BSA中)在含有0.1%BSA的无血清生长培养基中稀释至6×最终浓度。然后可将抗体和Ang2或Ang1配体以1:1比率混合于聚丙烯板中且可在37℃下孵育1小时。然后可将抗体/配体混合物以50μl/孔添加至细胞中(每次处理三个孔)且可在37℃、95%RH、5%CO2下孵育13分钟至21小时。抗体的最终浓度范围可以是0.0625-283nM，且人Ang2和Ang1的最终浓度分别可以是0.3μg/ml(约6nM)和0.5μg/ml(约8.9nM)。在孵育时间之后，可迅速且完全从细胞去除培养基，且可在60μl/孔的冷1XTris裂解缓冲液(MesoScaleDiscovery#R60TX;150mMNaCl,20mMTrispH7.5,1mMEDTA,1mMEGTA,1%TritonX-100)中裂解细胞，所述缓冲液可含有新鲜添加的蛋白酶和磷酸酶抑制剂(1X蛋白酶抑制剂混合制剂，Sigma#P8340；1X磷酸酶抑制剂混合制剂2，Sigma#P5726；1X磷酸酶抑制剂混合制剂3，Sigma#P0044；1mM最终活化原钒酸钠(EMDChemicals#567540))。然后可将板置于冰上10分钟，随后可将其在4℃下置于低速轨道振荡器上25分钟。然后可将板密封且在-80℃下冷冻。在分析磷酸-Tie-2(用来自R&DSystems的人磷酸-Tie-2DuoSetELISA试剂盒，#DYC2720)前一天，可在4℃下用1XELISA包被缓冲液(Surmodics/BioFXLabs#COAT-1000-01)中的4μg/ml小鼠抗人总Tie-2捕获抗体包被高结合的ELISA板(GreinerBioOne,#655081)过夜。在测量磷酸-Tie-2当天，可将含有裂解物的板在冰上解冻。可用洗涤缓冲液(1XTBST，含有0.05%Tween20)洗涤包被的ELISA板且用300μl/孔封闭缓冲液(1%BSA(JacksonImmunoResearch#001-000-162；无IgG，无蛋白酶)、0.01%叠氮化钠)在室温下在轨道振荡器上封闭最少1小时(同时用板密封器覆盖)。在封闭期间，可将裂解物以1:5或1:10稀释于聚丙烯板中含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的冷裂解缓冲液中。可封闭ELISA板且洗涤4次，且可添加100μl/孔稀释裂解物(或磷酸-Tie-2ELISA标准品)并在室温下在轨道振荡器上孵育2小时，使用密封器覆盖。可将板洗涤4次且可添加100μl/孔HRP缀合小鼠抗磷酸酪氨酸(如所推荐稀释于小瓶中的TBST/0.1%BSA中)。然后可用密封器覆盖板，且在室温下在轨道振荡器上孵育2小时。然后可将板洗涤6次且可确保从孔去除液体。然后可通过添加100μl/孔单组分TMB底物(Surmodics/BioFXLabs#TMBW-1000-01)来使板显色。可使板在室温下显色20或30分钟，使用铝箔覆盖。可用100μl/孔酸终止溶液(TMB终止溶液，Surmodics/BioFXLabs#LSTP-1000-01)终止显色。然后可在轨道振荡器上混合板。可在450nm下在ELISA阅读器(MolecularDevicesSpectraMax190)上使用SOFTmaxPRO5.4.1软件(MolecularDevicesCorp.)读取ELISA板。可从标准曲线(4参数逻辑拟合)获得样品的磷酸-Tie-2值，且乘以稀释因子5或10。可通过下式来计算抑制百分比：(处理的pTie2值-单独Ang2处理的平均pTie2值)/(平均单独培养基的pTie2值-单独Ang2处理的平均pTie2值)*100。可用GraphPadPrism4使用Log转换的X值计算Ang2诱导的磷酸-Tie-2的抑制的IC50值。可对log转换数据进行非线性回归(曲线拟合)分析(S形剂量反应，可变斜率)以获得IC50值。如果进行实验多于一次，则可计算实验之间的几何平均IC50值(和95%置信区间)。在基本上如该测定中所述进行的实验中，抗体A以0.773nM的IC50(95%置信区间0.412-1.45nM)剂量依赖性地中和CHO-Tie-2细胞中的人Ang2诱导的磷酸-Tie-2(n=3)。此外，当与抗Ang1/2交叉反应性抗体3.19.3-293HEK相比时，抗体A不中和CHO-Tie-2细胞中的人Ang1诱导的磷酸-Tie-2。抗体A和H1H685P-293HEK具有相当的Ang2中和IC50值。Ang2诱导的血管发育的抑制可在小鼠视网膜的血管发育模型中测量Ang2抗体对生理学血管生成的体内抑制。可使用上述测定研究本发明抗体抑制小鼠视网膜中的生理学血管生成的能力。对于该测定，可将怀孕雌性的小鼠幼崽分娩的日期标记为P0(出生后第0天)。在分娩后，在第二天和第四天(P2和P4)，可向幼崽注入媒介物对照(PBS)或10mg/kg抗体A。在P5，可将小鼠处死且可收获眼睛，且可固定于福尔马林中5小时并可用PBS洗涤。然后可解剖视网膜，且可使用以1:200稀释的抗CD31(BDPharmingen；克隆MEC13.3；目录号553370)和以1:200稀释的抗SMA-FTIC(Sigma；Clone1A4，目录号F3777)染色。对于抗CD31处理的视网膜，可使用以1:400稀释的抗大鼠Alexa-647(JacksonImmunoResearch；目录号712-606-153)作为二级抗体。可通过使用NikonTi来获取视网膜，且可通过使用FIJI软件来定量血管进展、芽尖细胞数和重塑丛的血管密度。可使用共聚焦NikonA1获取高放大率图像。在基本上如该测定中所述进行的实验中，当与PBS对照组相比时，抗体A在3mg/kg、10mg/kg和30mg/kg类似地抑制血管进展，减小内皮尖端细胞数和血管密度，以及增加外周细胞覆盖率。当与PBS对照组相比时，对于所有治疗组，该数据具有统计学显著性且p<0.0001(表5)。表5。抗体A在PC3前列腺癌异种移植模型中的体内抗血管生成效应可在PC3前列腺癌异种移植模型中评估Ang2抗体和Ang2抗体与VEGFR2抗体的组合的抗血管生成效应。可用对照IgG1、DC101(抗VEGFR2鼠抗体)、抗体A、DC101+抗体A持续6天(2QW;20mg/kg)治疗携带大约250mm3体积的PC3异种移植肿瘤的小鼠，以10只小鼠/组随机化。在6天之后，可收集肿瘤，固定且切割。可针对CD105染色切割的肿瘤且可测定总血管面积。在基本上如所述进行的实验中，当与对照IgG1组相比时，总血管面积在DC101治疗组中减小65%，在抗体A治疗组中减小69%，且在组合治疗组中减小84%。当与IgG1对照组相比时，对于所有治疗组，这些结果具有统计学显著性且p<0.0001。抗体A和抗VEGFR2抗体抑制体内肿瘤生长可经由体内异种移植模型测量本发明抗体的效力。可在皮下三阴性患者来源的乳腺癌模型(EL1997)和皮下卵巢异种移植模型(SKOV3x.1)中评价DC101(抗VEGFR2鼠抗体)、抗体A和其组合的抗肿瘤效力。可用稀释于PBS中的抗体每周两次经由腹膜内注射治疗携带肿瘤的小鼠。可通过在治疗过程期间每周两次肿瘤体积的三维卡尺测量来测定肿瘤生长。EL1997三阴性乳腺癌患者来源的异种移植物：可用媒介物对照、DC101单一治疗(20mg/kg)、抗体A单一治疗(20mg/kg)、环磷酰胺和多柔比星组合(分别为100mg/kg和10mg/kg)、DC101和抗体A组合或环磷酰胺、多柔比星、DC101和抗体A组合(以分别单一治疗浓度给药)治疗携带大约350mm3体积的EL1997三阴性乳腺癌患者来源的异种移植物(TNBCPDX)的免疫缺陷小鼠(以n=7只小鼠/组随机化)。可每周两次施用治疗，持续连续4周。在基本上如所述进行的实验中，DC101和抗体A单一治疗治疗组表现出分别35.2%和56.7%的T/C%(肿瘤体积变化)。两种抗体DC101和抗体A的组合导致19.9%的T/C%。此外，环磷酰胺、多柔比星、DC101和抗体A的组合导致0.4%的T/C%，且当与DC101和抗体A的组合相比时，肿瘤体积统计学显著性(p=0.0019)减小。单独化学治疗剂环磷酰胺和多柔比星的组合治疗导致32%的TC%。这些结果表明，用DC101或抗体A的单一疗法治疗是有效的，且其组合可能具有更大效力；添加化学治疗剂会进一步增强效力。SKOV3x.1卵巢异种移植物：可用媒介物对照、抗体A单一治疗(3、10或30mg/kg)、紫杉醇单一治疗(25mg/kg)或紫杉醇和抗体A的组合(分别为25mg/kg和10mg/kg)治疗携带大约350mm3体积的SKOV3x.1卵巢异种移植物的免疫缺陷小鼠(以n=10只小鼠/组随机化)。可每周两次施用治疗，持续连续4周。在基本上如所述进行的实验中，结果显示3、10和30mg/kg剂量的抗体A的T/C%值分别为39.1、32.5和27.3，且25mg/kg紫杉醇单一治疗的T/C%为20.3，其中与对照相比，p值<0.001。当与媒介物对照组相比时，25mg/kg紫杉醇和10mg/kg抗体A的组合增强两种单一治疗的效力，且显示T/C%为7.1%。SKOV3x.1卵巢异种移植物：可用媒介物对照、DC101单一治疗(20mg/kg)、紫杉醇单一治疗(25mg/kg)、DC101和抗体A组合(各自为25mg/kg)或紫杉醇DC101和抗体A组合(以分别单一治疗浓度给药)治疗携带大约250mm3体积的SKOV3x.1卵巢异种移植物的免疫缺陷小鼠(以n=10只小鼠/组随机化)。可每周两次施用治疗，持续连续4周。在基本上如所述进行的实验中，DC101的单一治疗治疗导致9.6%的T/C%，而两种抗体DC101和抗体A的组合当与媒介物对照组相比时导致0.1%的改善T/C%。与紫杉醇单一治疗的17.8%的T/C%相比，紫杉醇、DC101和抗体A的组合导致约-33%的肿瘤消退。这些结果表明，在异种移植模型中，用DC101的VEGFR2抑制在与抗体A组合时可能具有更大效力。该组合的益处在添加化学治疗剂的情况下得到进一步增强，导致肿瘤体积统计学显著性消退。氨基酸和核苷酸序列SEQIDNO:1(抗体A的HCVR)SEQIDNO:2(抗体A的HC)SEQIDNO:3(抗体A的LCVR)SEQIDNO:4(抗体A的LC)SEQIDNO:5(抗体A的LC的DNA)SEQIDNO:6(抗体A的HC的DNA)SEQIDNO:7(人Ang2)SEQIDNO:8(抗体A的LCDR1)SEQIDNO:9(抗体A的LCDR2)SEQIDNO:10(抗体A的LCDR3)SEQIDNO:11(抗体A的HCDR1)SEQIDNO:12(抗体A的HCDR2)SEQIDNO:13(抗体A的HCDR3)序列表<110>EliLillyandCompany<120>Ang2抗体<130>X20280<150>62/000,253<151>2014-05-19<160>13<170>PatentInversion3.5<210>1<211>121<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>1GlnValGlnLeuValGlnSerGlyAlaGluValLysLysProGlyAla151015SerValLysValSerCysLysAlaSerGlyTyrSerPheThrAspTyr202530AsnMetValTrpValArgGlnAlaProGlyGlnGlyLeuGluTrpMet354045GlyTyrIleAspProTyrAsnGlyGlyThrGlyTyrAsnGlnLysPhe505560GluGlyArgValThrMetThrThrAspThrSerThrSerThrAlaTyr65707580MetGluLeuArgSerLeuArgSerAspAspThrAlaValTyrTyrCys859095AlaArgThrArgAspArgTyrAspValTrpTyrPheAspValTrpGly100105110GlnGlyThrLeuValThrValSerSer115120<210>2<211>447<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>2GlnValGlnLeuValGlnSerGlyAlaGluValLysLysProGlyAla151015SerValLysValSerCysLysAlaSerGlyTyrSerPheThrAspTyr202530AsnMetValTrpValArgGlnAlaProGlyGlnGlyLeuGluTrpMet354045GlyTyrIleAspProTyrAsnGlyGlyThrGlyTyrAsnGlnLysPhe505560GluGlyArgValThrMetThrThrAspThrSerThrSerThrAlaTyr65707580MetGluLeuArgSerLeuArgSerAspAspThrAlaValTyrTyrCys859095AlaArgThrArgAspArgTyrAspValTrpTyrPheAspValTrpGly100105110GlnGlyThrLeuValThrValSerSerAlaSerThrLysGlyProSer115120125ValPheProLeuAlaProCysSerArgSerThrSerGluSerThrAla130135140AlaLeuGlyCysLeuValLysAspTyrPheProGluProValThrVal145150155160SerTrpAsnSerGlyAlaLeuThrSerGlyValHisThrPheProAla165170175ValLeuGlnSerSerGlyLeuTyrSerLeuSerSerValValThrVal180185190ProSerSerSerLeuGlyThrLysThrTyrThrCysAsnValAspHis195200205LysProSerAsnThrLysValAspLysArgValGluSerLysTyrGly210215220ProProCysProProCysProAlaProGluAlaAlaGlyGlyProSer225230235240ValPheLeuPheProProLysProLysAspThrLeuMetIleSerArg245250255ThrProGluValThrCysValValValAspValSerGlnGluAspPro260265270GluValGlnPheAsnTrpTyrValAspGlyValGluValHisAsnAla275280285LysThrLysProArgGluGluGlnPheAsnSerThrTyrArgValVal290295300SerValLeuThrValLeuHisGlnAspTrpLeuAsnGlyLysGluTyr305310315320LysCysLysValSerAsnLysGlyLeuProSerSerIleGluLysThr325330335IleSerLysAlaLysGlyGlnProArgGluProGlnValTyrThrLeu340345350ProProSerGlnGluGluMetThrLysAsnGlnValSerLeuThrCys355360365LeuValLysGlyPheTyrProSerAspIleAlaValGluTrpGluSer370375380AsnGlyGlnProGluAsnAsnTyrLysThrThrProProValLeuAsp385390395400SerAspGlySerPhePheLeuTyrSerArgLeuThrValAspLysSer405410415ArgTrpGlnGluGlyAsnValPheSerCysSerValMetHisGluAla420425430LeuHisAsnHisTyrThrGlnLysSerLeuSerLeuSerLeuGly435440445<210>3<211>107<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>3AspIleGlnMetThrGlnSerProSerSerValSerAlaSerValGly151015AspArgValThrIleThrCysLysAlaSerGlnAspValTyrIleAla202530ValAlaTrpTyrGlnGlnLysProGlyLysAlaProLysLeuLeuIle354045TyrTrpAlaSerThrArgAspThrGlyValProSerArgPheSerGly505560SerGlySerGlyThrAspPheThrLeuThrIleSerSerLeuGlnPro65707580GluAspPheAlaThrTyrTyrCysHisGlnTyrSerSerTyrProPro859095ThrPheGlyGlyGlyThrLysValGluIleLys100105<210>4<211>214<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>4AspIleGlnMetThrGlnSerProSerSerValSerAlaSerValGly151015AspArgValThrIleThrCysLysAlaSerGlnAspValTyrIleAla202530ValAlaTrpTyrGlnGlnLysProGlyLysAlaProLysLeuLeuIle354045TyrTrpAlaSerThrArgAspThrGlyValProSerArgPheSerGly505560SerGlySerGlyThrAspPheThrLeuThrIleSerSerLeuGlnPro65707580GluAspPheAlaThrTyrTyrCysHisGlnTyrSerSerTyrProPro859095ThrPheGlyGlyGlyThrLysValGluIleLysArgThrValAlaAla100105110ProSerValPheIlePheProProSerAspGluGlnLeuLysSerGly115120125ThrAlaSerValValCysLeuLeuAsnAsnPheTyrProArgGluAla130135140LysValGlnTrpLysValAspAsnAlaLeuGlnSerGlyAsnSerGln145150155160GluSerValThrGluGlnAspSerLysAspSerThrTyrSerLeuSer165170175SerThrLeuThrLeuSerLysAlaAspTyrGluLysHisLysValTyr180185190AlaCysGluValThrHisGlnGlyLeuSerSerProValThrLysSer195200205PheAsnArgGlyGluCys210<210>5<211>642<212>DNA<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>5gacatccagatgacccagtctccatcttccgtgtctgcatctgtaggagacagagtcacc60atcacttgtaaggccagtcaggatgtgtatattgctgtagcctggtatcagcagaaacca120gggaaagcccctaagctcctgatctattgggcatccacccgggacactggggtcccatca180aggttcagcggcagtggatctgggacagatttcactctcaccatcagcagcctgcagcct240gaagattttgcaacttactattgtcaccaatatagcagctatcctcctacgttcggcgga300gggaccaaggtggagatcaaacggactgtggctgcaccatctgtcttcatcttcccgcca360tctgatgagcagttgaaatctggaactgcctctgttgtgtgcctgctgaataacttctat420cccagagaggccaaagtacagtggaaggtggataacgccctccaatcgggtaactcccag480gagagtgtcacagagcaggacagcaaggacagcacctacagcctcagcagcaccctgacg540ctgagcaaagcagactacgagaaacacaaagtctacgcctgcgaagtcacccatcagggc600ctgagctcgcccgtcacaaagagcttcaacaggggagagtgc642<210>6<211>1341<212>DNA<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>6caggttcagctggtgcagtctggagctgaggtgaagaagcctggggcctcagtgaaggtc60tcctgcaaggcttctggttactcattcactgactacaacatggtgtgggtgcgacaggcc120cctggacaagggcttgagtggatgggatatattgatccttacaatggtggtactggctac180aaccagaagttcgagggcagagtcaccatgaccacagacacatccacgagcacagcctac240atggagctgaggagcctgagatctgacgacacggccgtgtattactgtgcgagaacgagg300gataggtacgacgtctggtacttcgatgtctggggccagggaaccctggtcaccgtctcc360tcagcctccaccaagggcccatcggtcttcccgctagcgccctgctccaggagcacctcc420gagagcacagccgccctgggctgcctggtcaaggactacttccccgaaccggtgacggtg480tcgtggaactcaggcgccctgaccagcggcgtgcacaccttcccggctgtcctacagtcc540tcaggactctactccctcagcagcgtggtgaccgtgccctccagcagcttgggcacgaag600acctacacctgcaacgtagatcacaagcccagcaacaccaaggtggacaagagagttgag660tccaaatatggtcccccatgcccaccctgcccagcacctgaggccgccgggggaccatca720gtcttcctgttccccccaaaacccaaggacactctcatgatctcccggacccctgaggtc780acgtgcgtggtggtggacgtgagccaggaagaccccgaggtccagttcaactggtacgtg840gatggcgtggaggtgcataatgccaagacaaagccgcgggaggagcagttcaacagcacg900taccgtgtggtcagcgtcctcaccgtcctgcaccaggactggctgaacggcaaggagtac960aagtgcaaggtctccaacaaaggcctcccgtcctccatcgagaaaaccatctccaaagcc1020aaagggcagccccgagagccacaggtgtacaccctgcccccatcccaggaggagatgacc1080aagaaccaggtcagcctgacctgcctggtcaaaggcttctaccccagcgacatcgccgtg1140gagtgggaaagcaatgggcagccggagaacaactacaagaccacgcctcccgtgctggac1200tccgacggctccttcttcctctacagcaggctaaccgtggacaagagcaggtggcaggag1260gggaatgtcttctcatgctccgtgatgcatgaggctctgcacaaccactacacacagaag1320agcctctccctgtctctgggt1341<210>7<211>478<212>PRT<213>合成构建体<400>7TyrAsnAsnPheArgLysSerMetAspSerIleGlyLysLysGlnTyr151015GlnValGlnHisGlySerCysSerTyrThrPheLeuLeuProGluMet202530AspAsnCysArgSerSerSerSerProTyrValSerAsnAlaValGln354045ArgAspAlaProLeuGluTyrAspAspSerValGlnArgLeuGlnVal505560LeuGluAsnIleMetGluAsnAsnThrGlnTrpLeuMetLysLeuGlu65707580AsnTyrIleGlnAspAsnMetLysLysGluMetValGluIleGlnGln859095AsnAlaValGlnAsnGlnThrAlaValMetIleGluIleGlyThrAsn100105110LeuLeuAsnGlnThrAlaGluGlnThrArgLysLeuThrAspValGlu115120125AlaGlnValLeuAsnGlnThrThrArgLeuGluLeuGlnLeuLeuGlu130135140HisSerLeuSerThrAsnLysLeuGluLysGlnIleLeuAspGlnThr145150155160SerGluIleAsnLysLeuGlnAspLysAsnSerPheLeuGluLysLys165170175ValLeuAlaMetGluAspLysHisIleIleGlnLeuGlnSerIleLys180185190GluGluLysAspGlnLeuGlnValLeuValSerLysGlnAsnSerIle195200205IleGluGluLeuGluLysLysIleValThrAlaThrValAsnAsnSer210215220ValLeuGlnLysGlnGlnHisAspLeuMetGluThrValAsnAsnLeu225230235240LeuThrMetMetSerThrSerAsnSerAlaLysAspProThrValAla245250255LysGluGluGlnIleSerPheArgAspCysAlaGluValPheLysSer260265270GlyHisThrThrAsnGlyIleTyrThrLeuThrPheProAsnSerThr275280285GluGluIleLysAlaTyrCysAspMetGluAlaGlyGlyGlyGlyTrp290295300ThrIleIleGlnArgArgGluAspGlySerValAspPheGlnArgThr305310315320TrpLysGluTyrLysValGlyPheGlyAsnProSerGlyGluTyrTrp325330335LeuGlyAsnGluPheValSerGlnLeuThrAsnGlnGlnArgTyrVal340345350LeuLysIleHisLeuLysAspTrpGluGlyAsnGluAlaTyrSerLeu355360365TyrGluHisPheTyrLeuSerSerGluGluLeuAsnTyrArgIleHis370375380LeuLysGlyLeuThrGlyThrAlaGlyLysIleSerSerIleSerGln385390395400ProGlyAsnAspPheSerThrLysAspGlyAspAsnAspLysCysIle405410415CysLysCysSerGlnMetLeuThrGlyGlyTrpTrpPheAspAlaCys420425430GlyProSerAsnLeuAsnGlyMetTyrTyrProGlnArgGlnAsnThr435440445AsnLysPheAsnGlyIleLysTrpTyrTyrTrpLysGlySerGlyTyr450455460SerLeuLysAlaThrThrMetMetIleArgProAlaAspPhe465470475<210>8<211>11<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>8LysAlaSerGlnAspValTyrIleAlaValAla1510<210>9<211>8<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>9TyrTrpAlaSerThrArgAspThr15<210>10<211>9<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>10HisGlnTyrSerSerTyrProProThr15<210>11<211>10<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>11GlyTyrSerPheThrAspTyrAsnMetVal1510<210>12<211>17<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>12TyrIleAspProTyrAsnGlyGlyThrGlyTyrAsnGlnLysPheGlu151015Gly<210>13<211>14<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成构建体<400>13AlaArgThrArgAspArgTyrAspValTrpTyrPheAspVal1510当前第1页1 2 3