纳米颗粒、制备方法、及其用途与流程

技术特征：

1.两亲物包被的纳米颗粒，其中所述纳米颗粒包括：

-由生物可降解聚合物组成的固体核，其中任选所述固体核的内部包括溶剂分子，和

-布置在所述固体核上的两亲物壳，

-以及，任选存在的，附着于所述两亲物和/或所述固体核的一或多种抗原。

2.权利要求1的两亲物包被的纳米颗粒，其具有低于250nm的直径或者优选具有范围在50-200nm的大小。

3.权利要求1或2的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述生物可降解聚合物是合成聚合物，并且其中所述合成聚合物优选选自以下组中：聚丙交酯、聚乙交酯、聚乳酸聚乙醇酸共聚物、聚酯、聚醚、聚酐、聚烷基氰基丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚原酸酯、聚磷腈、聚氨基酸、和生物可降解的聚氨酯。

4.权利要求1-3任一项的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述生物可降解聚合物选自以下组中：聚(乳酸-共-乙醇酸)(PLGA)、聚(丙交酯-共-乙交酯)(PGA)、聚(乳酸)(PLA)、聚(ε-己内酯)PCL、聚(甲基乙烯基醚-共-马来酸酐)、PEG-PCL-PEG、和聚原酸酯。

5.权利要求1-4任一项的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述两亲物是表面活性剂或TLR(Toll样受体)激动剂。

6.权利要求5的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述两亲物是选自以下组中的表面活性剂：非离子、阴离子、和阳离子表面活性剂，并且其中所述两亲物优选为：

-选自以下组的非离子表面活性剂：聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、失水山梨醇脂肪酸酯、脂肪醇、烷芳基聚醚磺酸酯、和磺基琥珀酸钠的二辛酯，或

-选自以下组中的阴离子表面活性剂：十二烷基硫酸钠、脂肪酸的钠盐和钾盐、聚氧基硬脂酸酯、聚氧乙烯十二烷基醚、失水山梨醇倍半油酸酯、三乙醇胺、脂肪酸、和脂肪酸的甘油酯，或

-选自以下组中的阳离子表面活性剂：双十二烷基二甲基溴化铵、十六烷基三甲基溴化铵、苯扎氯铵、十六烷基三甲基氯化铵、二甲基十二烷基氨基丙烷、和N-十六烷基-N-乙基吗啉鎓乙基硫酸盐。

7.权利要求1-6任一项的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述两亲物是选自以下组中的表面活性剂：聚乙烯醇(PVA)、聚山梨醇酯20(Tween 20)、十二烷基硫酸钠(SDS)、胆酸钠和十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)。

8.权利要求1-5任一项的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述两亲物和/或所述一或多种抗原选自以下组中：TLR(Toll样受体)激动剂，并且其中所述两亲物和/或所述一或多种抗原优选选自以下组：TLR1激动剂、TLR2激动剂、和TLR4激动剂。

9.权利要求8的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述TLR激动剂选自以下组：脂多糖(LPS)或其衍生物、脂磷壁酸(LTA)、Pam(3)CysSK(4)((S)-[2,3-5w(棕榈酰基氧基)-(2-RS)-丙基]-N-棕榈酰基-(R)-Cys-(S)-Ser-(S)-Lys₄-OH或Pam₃-Cys-Ser-(Lys))、Pam3Cys(S-[2,3-双(棕榈酰基氧基)-(2RS)-丙基]-N-棕榈酰基-(R)-半胱氨酸或三棕榈酰基-S-甘油基半胱氨酸)、Cadi-05、ODN 1585、酵母聚糖、合成的三酰基化的和二酰基化的脂肽、MALP-2、三棕榈酰化的脂肽、具有2-氨基吡啶融合至五元含氮杂环的化合物、聚肌苷酸-聚胞苷酸(聚IC)、CpG寡脱氧核苷酸(ODN)、单磷酰基脂质A("MPL")、咪唑并喹啉化合物(例如酰胺取代的咪唑并喹啉胺)、苯并咪唑衍生物、C8-取代的鸟嘌呤核糖核苷酸、N7,C8-取代的鸟嘌呤核糖核苷酸、细菌热休克蛋白质-60(Hsp60)、肽聚糖、鞭毛蛋白质、甘露糖醛酸聚合物、flavolipins、糖醛酸磷壁酸、ssRNA(单链RNA)、dsRNA(双链RNA)、或其组合。

10.权利要求1-5、8、和9任一项的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述两亲物是选自以下组中的TLR激动剂：LPS或其衍生物、和LTA，和/或其中所述一或多种抗原选自以下组：蛋白质和肽，并且其中所述一或多种抗原优选是α-毒素，更优选产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens)α-毒素或α-类毒素。

11.权利要求1-10任一项的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述两亲物和/或所述一或多种抗原是选自LPS或其衍生物的TLR4激动剂，并且其中所述LPS的衍生物优选选自以下组：单磷酰基脂质A(MPL)、3-O-脱酰基的单磷酰基脂质A(3D-MPL)、和吡喃葡萄糖基脂质A(GLA)。

12.权利要求11的两亲物包被的纳米颗粒，其中所述吡喃葡萄糖基脂质A(GLA)是化学式(I)的化合物：

或其药物可接收的盐，其中：

L₁、L₂、L₃、L₄、L₅和L₆是相同的或不同的并且独立地选自-O-、-NH-和-(CH₂)-；

L₇、L₈、L₉和L₁₀是相同的或不同的并且各自独立地不存在或者是-C(＝O)-；

Y₁是酸官能团并且优选为-OP(＝O)(OH)₂；

Y₂和Y₃是相同的或不同的并且各自独立地选自-OH、-SH、和酸官能团；

Y₄是-OH或-SH；

R₁、R₃、R₅和R₆是相同的或不同的并且独立地是C_8-20烷基；和

R₂和R₄是相同的或不同的并且独立地是C_6-20烷基，

并且其中

Y₂、Y₃和Y₄每个优选为-OH；和/或

R₁、R₃、R₅和R₆是相同的或不同的，并且优选地，独立地是C_8-13烷基；和/或

R₂和R₄是相同的或不同的，并且优选地，独立地是C_6-11烷基。

13.权利要求1-12任一项的两亲物包被的纳米颗粒，其可通过包含以下步骤或由以下步骤组成的方法获得：

(a)将(i)含有生物可降解聚合物的有机溶剂添加至(ii)含有两亲物的水成相，和

(b)将合并的有机溶剂和水成相以足以形成稳定乳剂的能量进行声波处理；和

(c)从所述稳定乳剂蒸发有机溶剂；

(d)以及，任选地，从至少部分剩余的水成相中分离所得的纳米颗粒，并优选将所得的纳米颗粒冻干，和/或将所得的纳米颗粒保存在不超过7℃的温度；

(e)以及，任选地，将所述一或多种抗原或包含所述一或多种抗原的组合物添加至剩余的水成相和/或所得的纳米颗粒。

14.用于制备权利要求1-13任一项的两亲物包被的纳米颗粒的方法，其中所述方法包括以下步骤或由以下步骤组成：

(a)将(i)含有生物可降解聚合物的有机溶剂添加至(ii)含有两亲物的水成相，和

(b)将合并的有机溶剂和水成相以足以形成稳定乳剂的能量进行声波处理；和

(c)从所述稳定乳剂蒸发有机溶剂；

(d)以及，任选地，从至少部分剩余的水成相中分离所得的纳米颗粒，并优选将所得的纳米颗粒冻干，和/或将所得的纳米颗粒保存在不超过7℃的温度；

(e)以及，任选地，将所述一或多种抗原或包含所述一或多种抗原的组合物添加至剩余的水成相和/或所得的纳米颗粒。

15.权利要求13的两亲物包被的纳米颗粒或权利要求14的方法，其中所述有机溶剂是非极性有机溶剂，并且其中所述非极性有机溶剂优选选自以下组中：乙酸乙酯、二氯甲烷、氯仿、四氢呋喃、六氟异丙醇、和六氟丙酮倍半水合物。

16.权利要求1-13任一项的两亲物包被的纳米颗粒，

用作免疫调节剂，特别是用作佐剂，

或者用于在对象中刺激免疫应答的方法。

17.权利要求1-13任一项的两亲物包被的纳米颗粒作为佐剂用于制备疫苗的用途，其中所述疫苗优选包含抗原。

18.用于在对象中刺激免疫应答的方法，包括向所述对象施用包含权利要求1-13任一项的一种或多种纳米颗粒的组合物。