本发明涉及一种具有抗肿瘤作用的药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术：
肿瘤是目前危害人类健康最严重的疾病之一，据WHO统计，肿瘤已成为人类健康头号杀手。传统的化学药物治疗和手术、放疗等结合，虽成功的提高了多种恶性肿瘤的治愈率，但由于较强的副作用以及耐药性，使得寻找新的治疗肿瘤的研究刻不容缓。
中药为中医治病的物质基础，中药在治疗癌症中具有多方位、多靶点、不易产生耐药等优势，符合肿瘤多因素、多环节致病的机理，其抗肿瘤的有效成分及作用机理研究已成为目前国内外研究的热点。
技术实现要素：
本发明的技术方案是提供了一种具有抗肿瘤作用的中药药物组合物。
本发明抗肿瘤的药物组合物，它是由下述重量配比的原料制备而成的制剂：干蟾皮1-9份、守宫1-9份、金荞麦30-50份、喜树果20-40份、西洋参6-16份、仙鹤草10-30份、灵芝6-24份。
优选地，所述组合物是由下述重量配比的原料制备而成的制剂：干蟾皮3-7份、守宫3-7份、金荞麦35-45份、喜树果25-35份、西洋参6-14份、仙鹤草15-25份、灵芝10-20份。
进一步优选地，所述组合物是由下述重量配比的原料制备而成的制剂：干蟾皮5份、守宫5份、金荞麦40份、喜树果30份、西洋参10份、仙鹤草20份、灵芝15份。
其中，所述组合物是前述原料的原生药粉或者水或有机溶剂提取物，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。
其中，所述制剂为口服制剂。进一步地，所述制剂为散剂、颗粒剂、片剂、混悬剂或胶囊剂。
本发明还提供了制备前述组合物的方法，它包含如下步骤：
(1)称取原料药；
(2)原料药直接打粉，或将原料药加水或有机溶剂提取，提取液浓缩，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成制剂。
其中，所述提取方法是：采用70％v/v的乙醇回流提取或水煎煮提取。
本发明还提供了前述组合物在制抗肿瘤药物中的用途。
干蟾皮Ganchanpi CORIUM BUFONIS为蟾蜍科(Bufonidae)动物中华大蟾蜍Bufobufo gargarizans Cantor的干燥皮，性凉，味甘、辛，有毒，归肝、脾、肺经。具有清热解毒，利水消胀的功效。用于小儿疳积，咽喉肿痛、肿瘤；外治痈肿疔疮。
守宫为为壁虎科动物无蹼壁虎Gekko swinhonis Guenther、多疣壁虎Gekko japonicus Dumeril et Biborn的干燥全体。夏秋捕捉，摔死或开水烫死，晒干或焙干。【性味归经】咸，寒。有小毒。【功能主治】祛风，活络，散结。骨髓炎，淋巴结结核，肿瘤。定惊，解毒。治中风瘫痪，历节风痛，风痰惊痫，瘰疬，恶疮。
金荞麦为寥科植物金荞麦Fagopyrum dibotrys(D.Don)Ham的干燥根茎。冬季采挖，除去茎和须根，洗净，晒干。【性味与归经】微辛、涩，凉。归肺经。【功能与主治】清热解毒，排脓祛瘀。用于肺痈吐脓，肺热喘咳，乳蛾肿痛。
喜树果为珙桐科植物喜树Camptotheca acuminata Decne.的果实。秋季果实成熟尚未脱落时采收，晒干。【性味】性寒，味苦、涩；有毒。【功能主治】抗癌，散结，破血化瘀用于多种肿瘤，如胃癌、肠癌、绒毛膜上皮癌、淋巴肉瘤等。
西洋参为五加科植物西洋参Pawajc quinquefolium L.的干燥根。均系栽培品，秋季采挖，洗净，晒干或低温干燥。【性味与归经】甘、微苦，凉。归心、肺、肾经。【功能与主治】补气养阴，清热生津。用于气虛阴亏，虛热烦倦，咳喘痰血，内热消渴，口燥咽干。
仙鹤草为蔷薇科植物龙芽草Agrimionia pilosa Ledeb.的千燥地上部分。夏、秋二季茎叶茂盛时采割，除去杂质，干燥。【性味与归经】苦、涩，平。归心、肝经。【功能与主治】收敛止血，截疟，止痢，解毒，补虚。用于咯血，吐血，崩漏下血，疟疾，血痢，痈肿疮毒，阴痒带下，脱力劳伤。
灵芝为多孔菌科真菌赤芝Ganoderma lucidum(Leyss.ex Fr.)Karst.或紫芝Ganoderma sinense Zhao,Xu et Zhang的干燥子实体。全年采收，除去杂质，剪除附有朽木、泥沙或培养基质的下端菌柄，阴干或在40～50℃烘干。性味与归经】甘，平。归心、肺、肝、肾经。【功能与主治】补气安神，止咳平喘。用于心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，虚劳短气，不思饮食。
本发明药物组合物由干蟾皮、守宫、金荞麦、喜树果等七味药组成。方中干蟾皮、守宫具消癥散结，破瘀止痛之功，为君药；金荞麦、喜树果攻削癌瘤，解毒散结，破血化瘀，为臣药；西洋参、仙鹤草、灵芝益气阴，安神志，养五脏，调和干蟾皮、守宫之毒性。共奏消癥解毒，益气活血，化瘀止痛之功。使正气得存，邪不能犯。
本发明组合物配方精当，抗肿瘤效果优良，疗效确切，副作用小，为临床抗肿瘤提供了一种新的选择。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
实施例1本发明药物组合物的制备
取干蟾皮5g、守宫5g、金荞麦40g、喜树果30g、西洋参10g、仙鹤草20g、灵芝15g，采用全方70％乙醇热回流提取3次，每次加10倍量70％乙醇、提取1小时，经浓缩干燥制得黑褐色块状或粉末状干浸膏。
取浸膏，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制得本发明药物。
实施例2本发明药物组合物的制备
取干蟾皮3g、守宫7g、金荞麦35g、喜树果35g、西洋参6g、仙鹤草25g、灵芝10g，据方中各药物有效成分性质不同分别采用水煎煮提取或乙醇热回流提取，各药物提取工艺参数如下：
干蟾皮：用水煎煮提取2次，第一次用12倍量水煎煮45分钟，第二次用8倍量水煎煮30分钟，滤过。合并滤液，减压浓缩、干燥，即得。
守宫：用水煎煮提取3次，每次10倍量水、提取1小时，滤过，合并滤液，浓缩，干燥，即得。
金荞麦：用50％乙醇回流提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩、干燥，即得。
喜树果：用70％的乙醇回流提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，减压浓缩、干燥，即得。
西洋参：用水煎煮提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，合并滤液，浓缩、干燥，即得。
仙鹤草：用70％的乙醇加热回流提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，减压浓缩、干燥，即得。
灵芝：先用95％乙醇加热回流提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，滤液减压浓缩至少量；药渣继续加水煎煮3次，每次10倍量、煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至少量，与醇提浓缩液混合一起继续浓缩，干燥，即得。
根据各药干浸膏收率及其处方量，按比例混合而成，1g浸膏相当于原生药6.43g。
取浸膏，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制得本发明药物。
实施例3本发明药物组合物的制备
取干蟾皮7g、守宫3g、金荞麦45g、喜树果25g、西洋参14g、仙鹤草15g、灵芝20g，采用全方水煎煮提取，提取3次，每次加10倍量水、提取1小时，经浓缩干燥制得深褐色块状或粉末状干浸膏。
取浸膏，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制得本发明药物。
实施例4本发明组合物的制备
取干蟾皮1g、守宫9g、金荞麦30g、喜树果40g、西洋参6g、仙鹤草30g、灵芝6g，采用全方70％乙醇热回流提取3次，每次加10倍量70％乙醇、提取1小时，经浓缩干燥制得黑褐色块状或粉末状干浸膏。
取浸膏，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制得本发明药物。
实施例5本发明组合物的制备
取干蟾皮9g、守宫1g、金荞麦50g、喜树果20g、西洋参16g、仙鹤草10g、灵芝24g，采用全方70％乙醇热回流提取3次，每次加10倍量70％乙醇、提取1小时，经浓缩干燥制得黑褐色块状或粉末状干浸膏。
取浸膏，再加入药学上可接受的辅料或辅助性成分，制得本发明药物。
以下通过实验例证明本发明的有益效果。
实验例1本发明药物组合物的抗肿瘤功效
1材料与方法
1.1试验药物
本发明药物组合物的配方；干蟾皮5g，守宫5g，金荞麦40g，喜树果30g，西洋参10g，仙鹤草20g，灵芝15g
制备方法1(金1):采用全方水煎煮提取，提取3次，每次加10倍量水、提取1小时，经浓缩干燥制得深褐色块状或粉末状干浸膏，1g浸膏相当于原生药7.46g；
制备方法2(金2):采用全方70％乙醇热回流提取3次，每次加10倍量70％乙醇、提取1小时，经浓缩干燥制得黑褐色块状或粉末状干浸膏，易吸湿，1g浸膏相当于原生药7.01g；
制备方法3(金3):根据方中各药物有效成分性质不同分别采用水煎煮提取或乙醇热回流提取，各药物提取工艺参数如下：
干蟾皮：用水煎煮提取2次，第一次用12倍量水煎煮45分钟，第二次用8倍量水煎煮30分钟，滤过。合并滤液，减压浓缩、干燥，即得。
守宫：用水煎煮提取3次，每次10倍量水、提取1小时，滤过，合并滤液，浓缩，干燥，即得。
金荞麦：用50％乙醇回流提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，合并滤液，减压浓缩、干燥，即得。
喜树果：用70％的乙醇回流提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，减压浓缩、干燥，即得。
西洋参：用水煎煮提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，合并滤液，浓缩、干燥，即得。
仙鹤草：用70％的乙醇加热回流提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，减压浓缩、干燥，即得。
灵芝：先用95％乙醇加热回流提取3次，每次10倍量、提取1小时，滤过，滤液减压浓缩至少量；药渣继续加水煎煮3次，每次10倍量、煎煮1小时，滤过，滤液浓缩至少量，与醇提浓缩液混合一起继续浓缩，干燥，即得。
根据各药干浸膏收率及其处方量，按比例混合而成，1g浸膏相当于原生药6.43g。
给药时以0.5％羧甲基纤维素钠溶液配制，给药剂量以原生药g/kg表示。
注射用环磷酰胺：批号：12041725；规格：0.2g/瓶。江苏恒瑞医药股份有限公司，临用前用蒸馏水新鲜配制成所需浓度的溶液备用。
瘤株：S180小鼠，引自四川省中医药科学院。无菌条件下，用注射器抽出已接种瘤株的小鼠腹水，在显微镜下行细胞计数，用无菌生理盐水稀释成约107个/mL浓度的单细胞悬液。S180悬液以0.2mL/只接种于正常KM小鼠腋皮下；肝癌H22悬液以0.2mL/只接种于正常KM小鼠腹腔内。
1.2动物
KM小鼠，SPF级，全雄，体重18～22g，由四川省中医药科学院提供，动物合格证编号：SCXK(川)2008-19。
1.3主要仪器
JA1003A电子天平，上海精天电子仪器有限公司。
CX21FS1C生物显微镜，奥林巴斯(广州)工业有限公司。
2.统计学分析
所有数据均用均数±标准差计量资料采用one-way ANOVA分析，组间差异采用student T检验。
3.金仙胶囊对S180的抑瘤作用
将110只小鼠进行左侧腋窝皮下接种S180细胞悬液。次日按体重随机分为11组，每组10只。分别灌胃金1(2.5g/kg、5g/kg、10g/kg)、金2(2.5g/kg、5g/kg、10g/kg)、金3(2.5g/kg、5g/kg、10g/kg)、环磷酰胺(20mg/kg)。模型组则给予等体积的CMC-Na溶液，每日灌胃给药一次，连续给药两周。末次给药后24小时，分别称体重，颈椎脱臼处死动物，分离腋下肿瘤并立即称瘤重，取胸腺称重。计算肿瘤抑制率及胸腺指数，进行疗效评价，并将各组结果进行统计学处理。抑瘤率的计算采用如下公式：抑瘤率＝(1-实验组平均瘤重/对照组平均瘤重)×100％。抑瘤率<40％为无效；≥40％及统计学P<0.05为有效。结果见表1。
表1金仙胶囊对S180的抑瘤作用
与模型组比较*P<0.05，**P<0.01(下同)。
由表1可见，模型组平均瘤重大于1g，提示造模成功。
与模型组比较，环磷酰胺可显著减小肿瘤重量，其差异具有统计学意义，抑瘤率为65.4％，抑瘤作用显著。
采用三种制备方法制备的本发明药物组合物抑瘤率均大于40％，且瘤重与模型组比较差异具有统计学意义，说明均具有抑瘤作用，其中，采用第2种方法和第3种方法制备的组合物的抑瘤效果优良。
实验结果说明，本发明药物组合物具有良好的抗肿瘤作用，特别是对实体瘤的疗效确切。
综上，本发明药物组合物安全，抗肿瘤功效优良，特别是对实体瘤的疗效确切，具有较好的临床应用前景。