一种用于治疗神经痛的药物组合物及其应用的制作方法

本发明属于药物领域，提供一种用于治疗神经痛的药物组合物及其应用。

背景技术：

神经病理性疼痛是一种“损害或疾病累及躯体感觉系统后直接导致的疼痛”。流行病学调查表明有7％-8％的人一生中经历过神经病理性疼痛的困扰(Pain,2008,136:380-387)。是一种难治且对人类有巨大危害的疾病(Physical Medicine and Rehabilitation Clinics of North America 2013,24,507-520)，神经病理性疼痛是一个持续的过程，病情可能反复出现，需要长期治疗。目前临床缺乏满意的安全有效的神经病理性疼痛药(Pain,2013,154:213-220),三环类抗抑郁药盐酸阿米替林的机制与阻断中枢神经对5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)的重摄取、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗作用和钠离子通道阻滞作用有关,在糖尿病引起的NNP和带状疱疹后遗神经痛中研究最多且疗效确切，但是副作用较多(药学实践杂志,2016,34:309-311)。nNOS-PSD-95解偶联是近年发现的神经病理性疼痛药物靶点(Brit.J.Pharmacol.2009,158:494-506)。nNOS-PSD-95解偶联剂4-(2-羟基-3,5-二氯苄胺基)-2-羟基苯甲酸(ZL006)能够特异性的抑制nNOS-PSD-95的偶联，对NMDAR、nNOS的生理功能没有影响，不影响其他类型的蛋白-蛋白相互作用，避免了直接干预NMDAR、nNOS可能引起的学习记忆障碍、行为异常等副作用，具有更好的安全性(Nature Medicine,2010,16:1439-1443)。ZL006口服无效，ZL006甲酯能够改善ZL006的脑组织分布(Bioorg Med Chem Lett.2016:2152-2155)，口服有效。神经病理性疼痛是由许多不同性质的损伤引起的共同结果(European Neuropsychopharmacology,2012,22:81-91)，多靶点药物可能更安全有效(药学学报，2004,14:2537-2541)。

本发明将盐酸阿米替林与ZL006甲酯以恰当的方式形成的组合物，通过发挥协同作用，从而发挥良好的镇痛作用。

技术实现要素：

解决的技术问题：本发明提供一种用于治疗神经痛的药物组合物及其应用。该药物组合物比单用盐酸阿米替林具有更好的疗效，在获得同样治疗效果的前提下，由于盐酸阿米替林给药浓度的减少，降低了不良反应发生的风险。

技术方案：一种用于治疗神经痛的药物组合物，包括盐酸阿米替林和ZL006甲酯。

上述药物组合物，由盐酸阿米替林和ZL006甲酯组成，所述盐酸阿米替林和ZL006甲酯的质量比为1:(3～6)。

优选的，盐酸阿米替林和ZL006甲酯的质量比为1:3。

上述药物组合物在制备治疗神经痛药物中的应用。

本发明中的药物组合物施用方式优选以口服形式给药，包括但不限于片剂、胶囊等。

有益效果：盐酸阿米替林通过阻断中枢神经对5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)的重摄取、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗作用和钠离子通道阻滞作用，ZL006甲酯可以解开PSD95-nNOS耦联从而避免过多NO生成，盐酸阿米替林和ZL006甲酯以适当的比例配合使用时具有增强或协同作用的效果，可以提高使用效果。在获得同样治疗效果的前提下，由于盐酸阿米替林给药浓度的减少，降低了不良反应发生的风险。

附图说明

图1为灌胃盐酸阿米替林，ZL006甲酯，盐酸阿米替林和ZL006甲酯联合给药组对小鼠神经病理性疼痛的的镇痛作用(机械痛)示意图。联合给药组的镇痛效果明显优于单独给药组。1：1％羧甲基纤维素钠混悬液，2：盐酸阿米替林(5mg/kg)，3：盐酸阿米替林(10mg/kg)，4：ZL006甲酯(30mg/kg)，5：盐酸阿米替林(5mg/kg)和ZL006甲酯(30mg/kg)联合给药，6：盐酸阿米替林(10mg/kg)和ZL006甲酯(30mg/kg)联合给药。

图2为灌胃盐酸阿米替林，ZL006甲酯，盐酸阿米替林和ZL006甲酯联合给药组对小鼠神经病理性疼痛的的镇痛作用(热痛)示意图。联合给药组的镇痛效果明显优于单独给药组。1：1％羧甲基纤维素钠混悬液，2：盐酸阿米替林(5mg/kg)，3：盐酸阿米替林(10mg/kg)，4：ZL006甲酯(30mg/kg)，5：盐酸阿米替林(5mg/kg)和ZL006甲酯(30mg/kg)联合给药，6：盐酸阿米替林(10mg/kg)和ZL006甲酯(30mg/kg)联合给药。

具体实施方式

以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明。应理解，这些实施例是用于说明本发明而不限于限制本发明的范围。

实施例1

神经病理性疼痛模型的制作方法

采用脊神经结扎法(segmental spinal nerve ligation，SNL)制备神经病理性疼痛模型。腹腔注射2％水合氯醛(0.2mL/l0g)麻醉小鼠，翻正反射消失后，固定小鼠于俯卧位。采用Kim和Chung的方法制作模型：在小鼠背部从L4-S2水平钝性分离长约3-5cm的正中皮肤切口，分离椎骨旁肌肉至第六腰椎突，暴露并切除右侧L5/L6关节突，部分咬开L6横突，从而能够暴露右侧的L4-L6脊神经，轻轻分离出L5神经，并用5-0丝线紧紧结扎L5。然后逐层缝合切口，碘伏消毒皮肤，继续饲养。术后动物出现步态异常，手术侧后肢除了轻度外翻、足趾紧收外，无其它畸形改变。

机械性痛觉阈值的测定方法

测定机械性刺激缩足反应阈值(paw withdrawal threshold，PWT)时，用von Frey纤维丝推算50％缩足阈值。50％缩足阈值的测定是指多次机械刺激能够引起50％缩足反应的机械力度，本实验使用接触刺激(Touch-test^TM sensory evaluator test，美国North coast medical,Inc.公司生产)采取up-and-down的方法测定小鼠后趾50％缩足阈值。依次使用0.02,0.04,0.07,0.16,0.4,0.6,1.0,1.4和2.0g的力度刺激后肢。将一有机玻璃箱(45cm×5cm×11cm)置于金属筛网上，待小鼠在有机玻璃箱中适应30分钟后，用Von Frey纤维丝垂直刺激小鼠后肢足底中部，持续时间≤4s，动物出现抬足或舔足行为视为阳性反应，反之为阴性反应。开始使用0.4的力度刺激，若没有缩足反应，则选择其上的一个力度0.6刺激后趾；若有缩足反应，则选择其下的一个力度0.16刺激后趾，依次类推，在出现一次与前一次不同的反应(有缩足反应至无缩足反应或无缩足反应至有缩足反应)时，继续依序刺激4次，一共6次，即完成50％缩足阈值的测定。若需要使用的力度超过2.0或低于0.02，该侧阈值则直接记为2.0或0.02，每次刺激间隔30s。在实验中尽量保持一致的测量手法，如力方向，加力速度和纤维丝弯曲程度，保持力的稳定性，力的撤除速度等。另外，对小鼠的反应判断标准尽量一致。50％缩足阈值的计算使用公式：50％缩足阈值＝10^log(X)+κδ(X为最后刺激使用的力度；κ为不同刺激方式的系数，在系数表中查找；δ是指各刺激力度相邻间距的平均数，此处δ＝0.224)

热痛痛觉阈值的测定方法

测定热刺激缩足反应阈值(paw withdrawal threshold，PWT)时，采用商业化的足底热刺激痛觉测定系统(UGO BASILE,Italy)测定缩足反应的潜伏期。将小鼠放置在位于玻璃平台上方的塑料小室内。玻璃平台的温度控制在22℃。用热光束刺激动物足底部。为了防止组织损伤，热光束的刺激时间限定在30秒内，如超过该限定值，辐射热光束自动关闭。痛觉阈值用开始辐射热光束刺激到动物将足从玻璃平台上移开的时间表示。为了保证实验的一致性，所以动物接受辐射热光束刺激的部位都在后足底的中心部位。

对神经病理性疼痛的镇痛作用(机械痛)

将已测定50％机械性刺激缩足反应阈值基线的小鼠进行SNL手术，于术后第7天，随机分组，分别灌胃给予等体积盐酸阿米替林(10mg/kg)，盐酸阿米替林(5mg/kg)，ZL006甲酯(30mg/kg)，盐酸阿米替林(10mg/kg)和ZL006甲酯(30mg/kg)，盐酸阿米替林(5mg/kg)和ZL006甲酯(30mg/kg)，等体积的1％羧甲基纤维素钠混悬液，测量其在给药前一小时(-1h)及给药后0.5、1、2、4、6、8、10、12、24小时的机械性刺激缩足反应阈值变化情况。用各组给药后12小时的药时曲线计算出曲线下面积(AUC，图1)。

对神经病理性疼痛的镇痛作用(热痛)

将已测定50％机械性刺激缩足反应阈值基线的小鼠进行SNL手术，于术后第7天，随机分组，分别灌胃给予等体积盐酸阿米替林(10mg/kg)，盐酸阿米替林(5mg/kg)，ZL006甲酯(30mg/kg)，盐酸阿米替林(10mg/kg)和ZL006甲酯(30mg/kg)，盐酸阿米替林(5mg/kg)和ZL006甲酯(30mg/kg)，等体积的1％羧甲基纤维素钠混悬液，于给药后0.5、1、2、4、6、8、10、12和24小时测定热痛反应的潜伏期。用各剂量组给药后12小时的药时曲线计算出曲线下面积(AUC，图2)。

以上实例只为说明本发明的技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术的人是能够了解本发明的内容并据以实施，并不能以此限制本发明的保护范围。凡根据本发明精神实质所做的等效变换或修饰，都应涵盖在本发明的保护范围之内。