本发明属于功能食品
技术领域：
，尤其涉及一种降低艾滋病患者病毒载量及提升T淋巴细胞CD4免疫力的复合制剂和应用。
背景技术：
：艾滋病，即获得性免疫缺陷综合征(AcquiredImmunodeficiencySyndrome，AIDS)，是在人免疫缺陷病毒直接或间接作用下，T细胞免疫缺陷，同时其他免疫细胞均不同程度受损，促使各种严重的机会性感染和肿瘤发生，导致死亡。艾滋病不仅已成为严重威胁人民健康的公共卫生问题，且已影响到经济发展和社会稳定。现代医学防治艾滋病采用的是抗病毒、提高机体免疫、控制和治疗各种机会性感染症，但药物作用单一，往往需要多药并用，药价昂贵，毒副作用大。中国艾滋病治疗用药主要依靠进口，年人均药品费用至少需人民币3万-5万元。同时，国家在艾滋病控制方面的投入也急剧增加。实验室检测是诊断艾滋病的主要依据，外周血病毒载量(viralload，VL)和CD4+T淋巴细胞(简称CD4细胞)检测已成为判定AIDS患者病情、预测临床进展和评价抗病毒治疗疗效的重要指标。CD4+T细胞是HIV感染的主要靶细胞，而其本身又是免疫反应的中心细胞；正常人的CD4+T细胞约占总的T淋巴细胞的65％，CD8+T细胞约占35％。人体感染了HIV后，其病理过程是免疫系统受损，主要表现为CD4+T细胞丢失、绝对数量减少、功能减退，同时CD8+T细胞数量增加，使CD4+/CD8+的比例失调。因此CD4+T细胞计数作为直接测定免疫细胞功能的方法，是HIV感染患者免疫系统损害状况最明确的指标。病毒载量检测是通过一种叫聚合酶链锁反应(PCR)的技术完成的，若病毒量在10,000copies/ml以下是“低”，100,000copies/ml以上是“高”。研究发现，CD4细胞数量相同的人，病毒量高者比低者病情恶化更快速。对于尚未服用抗HIV药的感染者，将病毒载量、CD4数量以及症状结合起来，可以帮助预测未来症状的发展，以帮助感染者决定是否开始服药。目前治疗艾滋病尚无安全有效药物。全球普及使用的核苷类和非核苷类的二十余种抗病毒化学药或鸡尾酒疗法(HAART)，只对HIV复制酶(HIV：逆转录酶、蛋白酶)有一定抑制作用，但对被HIV感染细胞无作用，即使HIV载量下降，但极易反弹，且其毒性太大及其耐药性，故疗效不佳。由于毒性大，只限于晚期患者使用加上价格昂贵，患者难于接受。因此急需研究出一种天然无毒害、副作用小的药物，即研究一种既能降低艾滋病患者病毒载量，又能提升T淋巴细胞CD4免疫力的纯天然药物。技术实现要素：本发明的目的是提供一种药材来源丰富、能够提高机体免疫功能、无毒副作用的纯天然复合制剂，所述复合制剂能够降低艾滋病患者病毒载量并提升T淋巴细胞CD4免疫力。本发明实现上述目的所采取的技术方案是，一种降低艾滋病患者病毒载量并提升T淋巴细胞CD4免疫力的复合制剂，由以下重量份的原料组成：当归10-14份、枸杞子12-16份、杏仁6-10份、甘草8-12份、肉苁蓉7-11份、巴戟天5-9份、洋藿叶13-17份、海参30-40份、鲍鱼12-16份、母砺9-13份、海藻20-30份、人参皂甙6-10份、淫羊藿皂甙8-12份。上述复合制剂中，所述的海参为日本刺参、北海道刺参、关西参、大连刺参、俄罗斯红参、乌枣参、白肛海地瓜、黑海参、白腹海参、红海参或小梅花参。上述复合制剂中，所述海参包括15-20份母海参，15-20份雄海参，其中母海参提取卵子后主要成分包括酸性黏多糖30-40％、硫酸软骨素25-35％、虾青素25-35％、硒元素10-30％；雄海参提取雄性精华细胞后主要成分包括精氨酸25-35％、胶原蛋白65-75％。上述复合制剂中，所述当归、枸杞子、杏仁、甘草、肉苁蓉、巴戟天、洋藿叶作为中药原料，经超临界萃取得中药原料粉。上述复合制剂中，所述鲍鱼、牡蛎、海藻分别粉碎过筛制成鲍鱼粉、牡蛎粉、海藻粉。上述复合制剂中，优选的，由以下重量份的原料组成：当归12份、枸杞子14份、杏仁8份、甘草10份、肉苁蓉9份、巴戟天7份、洋藿叶15份、海参36份、鲍鱼14份、牡蛎11份、海藻25份、人参皂甙8份、淫羊藿皂甙10份。上述复合制剂中，优选的，由以下重量份的原料组成：当归10份、枸杞子12份、杏仁6份、甘草12份、肉苁蓉11份、巴戟天5份、洋藿叶13份、海参30份、鲍鱼16份、牡蛎13份、海藻20份、人参皂甙6份、淫羊藿皂甙12份。上述复合制剂中，优选的，由以下重量份的原料组成：当归13份、枸杞子16份、杏仁6份、甘草10份、肉苁蓉10份、巴戟天6份、洋藿叶14份、海参40份、鲍鱼12份、牡蛎11份、海藻25份、人参皂甙8份、淫羊藿皂甙10份。上述复合制剂中，所述的制剂为散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、软胶囊、口服液或丸剂。本发明还提供了一种所述的复合制剂在制备抗艾滋病的饮品、药品、保健品和或食品中的应用。本发明所述的鲍鱼、海参、牡蛎、海藻、当归、枸杞子、杏仁、甘草、肉苁蓉、巴戟天、洋藿叶均为市售产品。其中牡蛎味甘、咸，性平，牡蛎多糖粗品能有效增加正常小鼠的脾淋巴细胞转化率，对小鼠迟发型超敏反应(DTH)、自然杀伤细胞(NK)活性、抗体形成细胞活性溶血空斑形成细胞实验(PEC)、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、荷瘤小鼠脾细胞活性均起正向调节作用，并增强小鼠红细胞超氧化歧化酶(SOD)活性。牡蛎醇提取物可使大黄煎剂导致免疫功能低下，小鼠的外周血T细胞总数(ANAE)显著升高，而水提取物可使外周血淋巴细胞受丝裂原(PHA)刺激后的转化率显著升高。海参：甘咸，温，入心、肾二经，补肾益精，养血润燥，壮阳疗痿。治精血亏损，虚弱劳怯，阳痿，梦遗，小便频数，肠燥便艰。海参的药理活性十分广泛，几乎涵盖了当前对人类健康构成威胁的主要病症，被称为“百病之克星”。海参含海参粘多糖(酸性粘多糖)、海参皂苷(海参素)、海参多肽、18种氨基酸、海参胶原蛋白、牛磺酸等，还有大量人体所需的硒、锌、钙、锰、磷、铁等微量和常量有益元素。药理实验证明，海参能增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。海藻：性苦、咸，寒。归肝、胃、肾经。软坚散结，消痰，利水。天然海藻粉富含海藻多糖、甘露醇、氨基酸、蛋白质、维生素和钾、铁、钙、磷、碘、硒、钴等微量元素。海藻粉多糖可以与HIV(人获得性免疫缺陷病毒)结合，使其失活，从而抑制病毒的复制，防治艾滋病。鲍鱼：味甘、咸，性平，肉质有弹性。用于肝肾阴虚，骨蒸劳热，咳嗽；能滋阴清热，补肝明目等。含有丰富的蛋白质，还有较多的钙、铁、碘和维生素A等营养元素。能养阴、平肝、固肾，可调整肾上腺分泌，具有双向性调节血压的作用。营养价值极高，富含丰富的球蛋白；鲍鱼的肉中还含有一种被称为“鲍素”的成分，能够破坏癌细胞必需的代谢物质。本发明具有以下有益效果：(1)药食同源，药源丰富。本发明所用药材为海参、鲍鱼、牡蛎、海藻，是药食两用资源，药用历史悠久，在沿海地区多数可作为新鲜食用；药材来源丰富，利于推广。(2)与现有技术相比，本发明所述的复合制剂，提取母海参卵子及雄海参精华细胞，，并将中国传统中药——当归、枸杞子、杏仁、甘草、肉苁蓉、巴戟天、洋藿叶超临界提取物加入产品，同时配以使鲍鱼粉、牡蛎粉、海藻粉，实现了海洋生物技术与生命健康工程的有机结合。(3)本发明所述的复合制剂含有酸性粘多糖(酸性粘多糖具有修复胰岛细胞，提高机体免疫力的功能)、人参皂苷、淫羊藿皂苷等高活性因子，人体可以直接吸收，减少了营养成分的浪费。(4)本发明所述的复合制剂改变了传统食用鲍鱼、海参营养浪费严重的问题。(5)本发明的原料来源广泛，配方简单，制备方法简单，且产品质量稳定，利于生产应用。(6)配比合理：通过筛选组方中的种类和具体配比，得到活性成分最丰富、作用最强的复合制剂，各成分相互间起到相辅相成、协同增效的技术效果。(7)本发明经毒性试验未发现毒副作用，在临床治疗艾滋病中初步试用，反映良好，无明显毒副作用。具体实施方式下面结合实施例，更具体地说明本发明的内容。应当理解，本发明的实施并不局限于下面的实施例，对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。在本发明中，若非特指，所有的份、百分比均为重量单位，所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。下述实施例中的方法，如无特别说明，均为本领域的常规方法。实施例1根据复合制剂配方，称取当归12份、枸杞子14份、杏仁8份、甘草10份、肉苁蓉9份、巴戟天7份、洋藿叶15份、海参36份、鲍鱼14份、牡蛎11份、海藻25份、人参皂甙8份、淫羊藿皂甙10份，其中母海参18份、雄海参18份，分别提取母海参卵子及雄海参雄性精华细胞，母海参卵子提取物中主要成分包括酸性黏多糖33％、硫酸软骨素27％、虾青素26％、硒元素14％；雄海参提取雄性精华细胞后主要成分包括精氨酸29％、胶原蛋白71％；所述当归、枸杞子、杏仁、甘草、肉苁蓉、巴戟天、洋藿叶作为中药原料，经超临界萃取得中药原料粉；所述鲍鱼、牡蛎、海藻分别粉碎过筛制成鲍鱼粉、牡蛎粉、海藻粉。将各原料混合，进一步制备成复合液体制剂。实施例2根据复合制剂配方，称取当归10份、枸杞子12份、杏仁6份、甘草12份、肉苁蓉11份、巴戟天5份、洋藿叶13份、海参30份、鲍鱼16份、牡蛎13份、海藻20份、人参皂甙6份、淫羊藿皂甙12份，其中母海参15份、雄海参15份。实施例3根据复合制剂配方，称取当归13份、枸杞子16份、杏仁6份、甘草10份、肉苁蓉10份、巴戟天6份、洋藿叶14份、海参40份、鲍鱼12份、牡蛎11份、海藻25份、人参皂甙8份、淫羊藿皂甙10份，其中母海参20份、雄海参20份。对比例1根据复合制剂配方，称取海参56份、鲍鱼24份、牡蛎21份、海藻35份、人参皂甙18份、淫羊藿皂甙20份，其中母海参28份、雄海参28份，分别提取母海参卵子及雄海参雄性精华细胞，母海参卵子提取物中主要成分包括酸性黏多糖33％、硫酸软骨素27％、虾青素26％、硒元素14％；雄海参提取雄性精华细胞后主要成分包括精氨酸29％、胶原蛋白71％；所述鲍鱼、牡蛎、海藻分别粉碎过筛制成鲍鱼粉、牡蛎粉、海藻粉。将各原料混合，进一步制备成复合液体制剂。对比例2根据复合制剂配方，称取当归12份、枸杞子14份、杏仁8份、甘草10份、肉苁蓉9份、巴戟天7份、洋藿叶15份、鲍鱼34份、牡蛎21份、海藻35份、人参皂甙8份、淫羊藿皂甙10份，所述当归、枸杞子、杏仁、甘草、肉苁蓉、巴戟天、洋藿叶作为中药原料，经超临界萃取得中药原料粉；所述鲍鱼、牡蛎、海藻分别粉碎过筛制成鲍鱼粉、牡蛎粉、海藻粉。将各原料混合，进一步制备成复合液体制剂。试验例1急性经口毒性试验将实施例1中复合制剂以20000mg/kgBW剂量的样品给予动物灌胃后，未见动物有中毒症状，无动物死亡，试验结束解剖动物，大体观察未见异常；对小鼠的急性经口毒性剂量大于20000mg/kgBW，急性经口毒性属无毒。遗传毒性试验：三项遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验)结果均为阴性。90天喂养试验：以6000、3000、1500mg/kgBW(分别相当于人体推荐用量200、100、50倍)3个剂量的样品连续给大鼠灌胃90天，实验期间动物的生长发育良好，各剂量组的动物体重、增重量、进食量、食物利用率、血常规指标、血生化指标、脏器重量及脏器/体重比值与对照组比较，均无显著性差异(P>0.05)；大体解剖观察和组织病理学检查未见与样品有关的异常改变。在受试剂量范围内未见该样品对大鼠各项观察指标产生毒副作用。试验例2临床试验资料研究对象：2002年1月-2006年1月确诊并首次并发机会感染的60例HIV-1型AIDS患者进行CD4+T淋巴细胞检测。其中，男39例(65％)，女21例(35％)；年龄21～57岁，平均(35.2±9.2)岁。所有患者经检测确认为抗HIV-1阳性，且均未接受过抗病毒治疗，HIV-1型AIDA患者诊断依据《艾滋病诊断标准》。标本采集：用EDTAK2抗凝血负压真空采血管采集研究对象的外周静脉血5～10ml，采血时间均为上午8∶00～10∶00，24h内完成检测。检测仪器及试剂仪器：采用FACSCOUNT流式细胞计数仪，Truecount计数管，FACS溶血进行CD4+T细胞计数。CD4+T淋巴细胞检测方法：参照《全国艾滋病检测技术规范》和《CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南》仪器操作规程的要求进行。Immuno-Trol质控血同检测标本一同进行操作，在流式细胞检测的试管中加20μlCD4荧光标记抗体，然后加入混匀的抗凝血50μl，室温避光孵育15min。在标本中加入溶血素，室温避光孵育15min后上机检测，上机前应用CaliBRITETM磁珠及FACSCompTM软件校准流式细胞仪，将制备好的样本上机，使用MultiSETTM软件获取及自动分析检测结果。外周血病毒载量测定方法：取EDTA-K2抗凝全血，2000r/min离心10min分离血浆，置入-76℃冰箱冷冻保存备用，待标本收集完全后，取1100μl血浆，采用Real-timePCR在OBASAmpliPrep/COBASTaqMan全自动病毒载量仪上定量检测血浆中HIVRNA，扩增的靶核酸位置是HIVgag区，可扩增HIV-1M组的A-H亚型。病毒载量和CD4+T细胞水平测定结果：对60份标本中病毒载量进行检测(分别采用实施例1、对比例1、对比例2中复合制剂分别施用于20例病例-对患者保密)，其结果见表1。表1杨屯乡张宇村HIV感染者、AIDS病人CD4检测结果(部分示例)性别前CD4后CD4张某女57289高某女256415齐某某女183670吴某某女169474李某某男58220王某某男37206刘某某男145251宋某某女2991078王某某女167579王某女150367张某男132596张某某男156488其中表1中为对HIV感染者、AIDS病人CD4检测效果有改善的部分受试者数据，其服用的药物为实施例1中的复合制剂；对比例1、对比例2复合制剂的治疗效果没有明显改善，因此未在数据中列出。上述结果说明实施例1中的复合制剂具有明显优于对比例1、对比例2复合制剂的效果。下面以几个典型病例进行说明：齐某某，女，40岁，晚期病人，治疗前乏力、消瘦、腹泻、低热，CD480-125cell/ul，HIV载量3200cp/ml，服药2个月症状减轻，服药1年后复查CD4600-680cells/ul，HIV载量100cp/ml，病毒载量明显减低，CD4T淋巴细胞明显提升，症状也有明显改善。吴某某，女，46岁，中期病人，倦怠乏力、多汗、或疱疹、口腔黏膜溃疡不易愈合、皮肤瘙痒、心神不宁，CD4150-210cell/ul，HIV载量2300cp/ml，服药1个月症状减轻，服药1年后复查CD4400-500cells/ul，HIV载量300cp/ml，病毒载量明显减低，CD4T淋巴细胞明显提升，症状也有明显改善。临床结论：使用本发明的复合制剂后，患者原本表现的倦怠乏力、多汗、或疱疹、口腔黏膜溃疡不易愈合、皮肤瘙痒、消瘦、腹泻、心神不宁、烦躁失眠等气虚阴伤症状体征都有明显的改善。尽管发明人已经对本发明的技术方案做了较为详细的阐述和列举，应当理解，对于本领域一个熟练的技术人员来说，对上述实施例做出修改或者采用等同的替代方案，这对本领域的技术人员而言是显而易见，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。当前第1页1 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