一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法与流程

文档序号:12343426阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于包括以下步骤:

1)制备腺病毒液;

2)制备腺病毒卵黄抗体;

3)将所述腺病毒液与腺病毒卵黄抗体混合后对鸡进行免疫注射。

2.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于所述腺病毒液中的抗原成为为腺病毒I群血清4型。

3.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于步骤3)所述腺病毒液中病毒效价为108.5TCID50、108.0TCID50或107.5TCID50

4.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于步骤3)所述腺病毒卵黄抗体中抗体效价为1:4、1:8或1:16。

5.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于步骤3)中腺病毒液与腺病毒卵黄抗体的混合体积比是1:1。

6.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于步骤3)中所述注射的剂量是0.5mL。

7.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于步骤3)中腺病毒液与腺病毒卵黄抗体混合后先加入油佐剂乳化,油水混合制剂型,而后再对鸡进行免疫注射。

8.根据权利要求2所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于步骤1)所述腺病毒液是通过以下方法制备的:取分离鉴定株腺病毒I群血清4型,用灭菌生理盐水10倍稀释病毒液,接种已长满单层的鸡胚成纤维细胞,待细胞病变达到80%时,收获,反复冻融三次,测得的病毒含量为108.0TCID50,将检验合格的冻融液浓缩4倍后,为免疫原。

9.根据权利要求1所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于步骤2)所述腺病毒卵黄抗体是通过以下方法制备的:

A)制备腺病毒灭活疫苗;

B)取120日龄蛋鸡,每只胸部肌肉注射步骤A)所述疫苗2ml,10日后每只胸部肌肉再注射步骤A)所述疫苗2ml,10日后每只胸部肌肉再注射步骤A)所述疫苗2ml;

C)取步骤B)三免后的鸡卵,制备卵黄抗体。

10.根据权利要求9所述的一种针对腺病毒的多途径协同免疫方法,其特征在于步骤C)所述制备卵黄抗体,具体包括以下操作:将分离的蛋黄搅拌成均匀膏状,加入等体积注射用水,搅拌均匀后,65℃加热灭活30分钟;加入6倍量酸化水,重复3组;将各组降温至1~4℃;4℃静置2~5小时,14000转离心取上清;加入正辛酸终浓度为0.3%,室温放置5~12小时;卵黄液用孔径为0.45μm滤器过滤澄清,再用0.22μm滤器过滤除菌;经截留分子量为100KD超滤膜堆进行浓缩;加入终浓度为0.2%甲醛溶液,室温放置24小时,期间振摇4~6次。

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