一种重组腺病毒疫苗制剂及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域中一种重组腺病毒疫苗制剂及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 腺病毒在自然界分布广泛，在众多哺乳动物和禽类中都发现其存在；因其对人致 病性小且不诱导癌变，装载容量大，宿主细胞广，繁殖滴度高，成为近年来病毒载体研究热 点。但即使是含有稳定剂的液体重组腺病毒制剂对温度也较为敏感，给运输、保存带来较大 困难，这在很大程度上限制了其在临床上的应用。到目前为止，长期保存的重组腺病毒制剂 基本是保存在_2〇°C。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种安全、稳定性好、有效期长的重组腺病毒疫苗制剂及 其制备方法。
[0004] 一种重组腺病毒疫苗制剂，包括冷冻保护剂、蔗糖、L-组氨酸的组成；为了更好的 保护重组腺病毒原液活性，所述冷冻保护剂中还含有三羟甲氨基甲烷、氯化镁、氯化钠、吐 温-80、乙二胺四乙酸、无水乙醇。所述冷冻保护剂各组分的重量体积比为 ：
[0006] 所述重组腺病毒制剂原液与所述冷冻保护剂的比例是重组腺病毒制剂原液：冷冻 保护剂=1 : (0.5~2)。
[0007] -种重组腺病毒疫苗制剂的制备方法，包括如下步骤：
[0008] 将重组腺病毒制剂原液按含腺病毒量I. 0*1012VP/ml的浓度用冷冻保护剂进行稀 释，混匀后无菌过滤，注入西林瓶中，充氮加塞、扎盖；灯检后放入_20°C保存。其中冷冻保 护剂由蔗糖、L-组氨酸组成；其成品按《中国药典》（2010版）三部所述方法检定，合格。
[0009] 用本发明配方及方法制备获得的重组腺病毒疫苗制剂，经TCID50滴度检测实验 证明，制剂保持了重组腺病毒原有活性；并经过36个月的稳定性实验证明稳定性良好。与 现有技术相比，本发明工艺合理，安全性、稳定性好，有效期长，为采用重组腺病毒作为载体 的基因治疗的临床试验提供很好的应用前景。
【具体实施方式】
[0010] 实施例1
[0011] 冷冻保护剂配方：三羟甲胺基甲烷：1. 5g，氯化钠9. lg，蔗糖75g，氯化镁0. 15g，吐 温-80 0. 2g，乙二胺四乙酸0. 02g，L-组氨酸I. 3g，无水乙醇lg。
[0012] 制备：
[0013] 按配方将各组分混合，加冷却至4°C的注射用水至200ml，搅拌溶解，混合均匀，再 将重组腺病毒原液2*10 14VP量加入，混合均匀，补加注射用水至1000ml，搅拌混合均匀，无 菌过滤、灌装，充氮压塞、扎盖，灯检后，放入-20°C冷冻保存。
[0014] 实施例2
[0015] 冷冻保护剂配方：三羟甲胺基甲烷：1. 0g，氯化钠5. 6g，蔗糖10g，氯化镁0. 2g，吐 温-80 0. 3g，乙二胺四乙酸0. 04g，L-组氨酸4. 5g，无水乙醇5g。
[0016] 制备：
[0017] 按配方将各组分混合，加冷却至4°C的注射用水至200ml，搅拌溶解，混合均匀，再 将重组腺病毒原液2*10 14VP量加入，混合均匀，补加注射用水至1000ml，搅拌混合均匀，无 菌过滤、灌装，充氮压塞、扎盖，灯检后，放入-20°C冷冻保存。
[0018] 实施例3
[0019] 冷冻保护剂配方：三羟甲胺基甲烷：1. 3g，氯化钠4. 5g，蔗糖50g，氯化镁0. lg，吐 温-800.1 g,乙二胺四乙酸0. 015g，L-组氨酸3g，无水乙醇7. 5g。
[0020] 制备：
[0021] 按配方将各组分混合，加冷却至4°C的注射用水至200ml，搅拌溶解，混合均匀，再 将重组腺病毒原液2*10 14VP量加入，混合均匀，补加注射用水至1000ml，搅拌混合均匀，无 菌过滤、灌装，充氮压塞、扎盖，灯检后，放入-20°C冷冻保存。
【主权项】
1. 一种重组腺病毒疫苗制剂，其特征在于制剂处方中包括冷冻保护剂、蔗糖、L-组氨 酸的组成。2. 如权利要求1所述的重组腺病毒疫苗制剂，其特征在于所述保护剂中还包含三羟甲 氨基甲烷、氯化镁、氯化钠、吐温-80、乙二胺四乙酸、无水乙醇。3. 如权利要求2所述的重组腺病毒疫苗制剂，其特征在于所述制剂处方各组分质量体 积比为：4. 如权利要求1所述的重组腺病毒疫苗制剂，其特征在于：所述重组腺病毒制剂原液 与所述冷冻保护剂的比例是重组腺病毒制剂原液：冷冻保护剂=1 : (0.5~2)。5. -种重组腺病毒疫苗制剂的制备方法，其特征在于该方法包括如下步骤： 将重组腺病毒制剂原液按含腺病毒量1. 〇*l〇12VP/ml的浓度用冷冻保护剂进行稀释， 混匀后无菌过滤，注入西林瓶中，充氮加塞、扎盖；灯检后放入_20°C保存；其中冷冻保护剂 由蔗糖、L-组氨酸组成。6. 如权利要求5所述的方法，其特征在于所述冷冻保存剂中还有三羟甲氨基甲烷、氯 化镁、氯化钠、吐温-80、乙二胺四乙酸、无水乙醇；所述冷冻保护剂各组分质量体积比为：所述重组腺病毒制剂原液与所述冷冻保护剂的比例是重组腺病毒制剂原液：冷冻保护 剂=1 : (0· 5 ~2)。
【专利摘要】本发明涉及生物技术领域中一种重组腺病毒疫苗制剂的制备方法。本发明目的是提供一种重组腺病毒疫苗制剂。本发明的技术方案是：一种重组腺病毒疫苗制剂，包括重组腺病毒原液及制剂处方。生产上述重组腺病毒疫苗制剂的方法步骤如下：(1)按制剂处方配制好缓冲溶液，最后加入病毒原液，混合均匀后，无菌过滤，分装于西林瓶中；充氮压塞、扎盖。(2)将分装重组腺病毒疫苗制剂灯检后放入-20℃保存。可保存至少24个月。
【IPC分类】A61K47/34, C12N15/861, A61K39/235, A61K48/00
【公开号】CN105267960
【申请号】CN201410261625
【发明人】戴东升, 安俊, 杨仁佳, 焦进安, 王星星, 陈婧, 周鹏, 王斐
【申请人】亚宝药业太原制药有限公司
【公开日】2016年1月27日
【申请日】2014年6月13日