一种用于防治肝纤维化的制剂的制作方法_3

文档序号:8402230阅读:来源:国知局
液;将 果汁采用闪蒸浓缩装置在65°C,真空度为0. 095 Mpa条件下真空浓缩至原体积的1/4,得果 汁浓缩液;合并果渣和果汁浓缩液,混合均匀,通过大孔吸附树脂Diaion HP 2MGL柱,用蒸 馏水淋洗,调节I. 5 mL/min的流速至洗脱液呈无色透明后,改用pH4. 0的60%的乙醇溶液 洗脱,收集紫红色的色素洗脱液,洗脱液流速控制在I. 5 mL/min。将收集的紫红色洗脱液在 旋转蒸发仪中真空浓缩干燥或冷冻干燥,得桑葚提取物干粉,称重计算得率,样品避光干燥 保存;得到的桑葚提取物的收率为1. 15%,提取物中即花色素的含量达到24. 9%。
[0024] 香榧叶提取物的制备方法如下:将干燥的香榧叶置破碎提取器的容器中,加入 60%乙醇进行室温破碎提取3次,将原料打碎成匀浆状,且能通过20目筛的粒度;若香榧叶 干物重量为I kg则含水乙醇用量为6升,每次破碎提取时间为3分钟;将提取液抽滤,弃去 滤渣,合并的提取液在60°C,真空度为0. 095 Mpa条件下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸 浓缩,至原体积的1/6 ;将浓缩液采用体积比1: 2的石油醚萃取3次,弃去石油醚,水层再 采用体积比1: 2的乙酸乙酯萃取5次;合并萃取液,在旋转蒸发仪中进行减压浓缩干燥成干 粉,用研钵研细后得到香榧叶提取物干粉,提取物的收率达到12. 1%。
[0025] 黑米提取物的制备方法如下:将干燥的黑米置破碎提取器的容器中,加入重量比 1:8的70%乙醇进行室温破碎提取次,每次破碎提取时间为2分钟,将黑米打碎且能通过20 目筛的粒度;将提取液抽滤,合并的滤液在60°C,真空度为0. 095 Mpa条件下采用真空薄膜 浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/8 ;然后将浓缩液进行低温真空干燥成干粉,得到的 黑米提取物的收率为16. 6%。
[0026] 实施例3 该用于防治肝纤维化的制剂,由桑葚提取物、香榧叶提取物、黑米提取物、酵母硒按照 重量比45g: 35g : 20g: 500 yg混合均匀制成; 所述的桑椹提取物的制备方法如下:取新鲜桑葚,用压榨机榨汁后,离心处理或采用压 滤方法分离果汁与果渣;按照果渣重量为I kg则含水乙醇用量为3升的比例加入50%的乙 醇溶液,并加入盐酸调节pH 4.0,超声提取2次,每次40分钟;合并果渣提取液,采用闪蒸 浓缩装置在65°C,真空度为0. 095 Mpa条件下真空浓缩至原体积的1/5,得果渣浓缩液;将 果汁采用闪蒸浓缩装置在60°C,真空度为0. 095 Mpa条件下真空浓缩至原体积的1/6,得果 汁浓缩液;合并果渣和果汁浓缩液,混合均匀,通过大孔吸附树脂Diaion HP 2MGL柱,用蒸 馏水淋洗,调节〇. 5 mL/min的流速至洗脱液呈无色透明后,改用pH 3. 5的60%的乙醇溶液 洗脱,收集紫红色的色素洗脱液,洗脱液流速控制在1.0 mL/min ;将收集的紫红色洗脱液在 旋转蒸发仪中真空浓缩干燥或冷冻干燥,得桑葚提取物干粉,称重计算得率,样品避光干燥 保存;得到的桑葚提取物的收率为1. 13%,提取物中即花色素的含量达到21. 4%。
[0027] 香榧叶提取物的制备方法如下:将干燥的香榧叶置破碎提取器的容器中,加入 65%乙醇进行室温破碎提取2次,将原料打碎成匀浆状,且能通过20目筛的粒度;若香榧叶 干物重量为I kg则含水乙醇用量为8升,每次破碎提取时间为2分钟;将提取液抽滤,弃去 滤渣,合并的提取液在60°C,真空度为0. 095 Mpa条件下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸 浓缩,至原体积的1/8 ;将浓缩液采用体积比I: I. 5的石油醚萃取3次,弃去石油醚,水层再 采用体积比1:1. 5的乙酸乙酯萃取3次;合并萃取液,在旋转蒸发仪中进行减压浓缩干燥成 干粉,用研钵研细后得到香榧叶提取物干粉,提取物的收率达到10. 8%。
[0028] 黑米提取物的制备方法如下:将干燥的黑米置破碎提取器的容器中,加入重量比 1:8的55%乙醇进行室温破碎提取2次,每次破碎提取时间为1分钟,将黑米打碎且能通过 20目筛的粒度;将提取液抽滤,合并的滤液在60°C,真空度为0.095 Mpa条件下采用真空薄 膜浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/8 ;然后将浓缩液进行低温真空干燥成干粉,得到 的黑米提取物的收率为18. 1%。
[0029] 实施例4 该用于防治肝纤维化的制剂,由桑葚提取物、香榧叶提取物、黑米提取物、酵母硒按照 重量比40g: 30g : 30g:400 yg混合均勾制成; 所述的桑椹提取物的制备方法如下:取新鲜桑葚,用压榨机榨汁后,离心处理或采用压 滤方法分离果汁与果渣;按照果渣重量为I kg则含水乙醇用量为3升的比例加入60%的乙 醇溶液,并加入盐酸调节pH 3.0,超声提取3次,每次50分钟;合并果渣提取液,采用闪蒸 浓缩装置在60°C,真空度为0. 095 Mpa条件下真空浓缩至原体积的1/4,得果渣浓缩液;将 果汁采用闪蒸浓缩装置在60°C,真空度为0. 095 Mpa条件下真空浓缩至原体积的1/4,得果 汁浓缩液;合并果渣和果汁浓缩液,混合均匀,通过大孔吸附树脂Diaion HP 2MGL柱,用蒸 馏水淋洗,调节I. 〇 mL/min的流速至洗脱液呈无色透明后,改用pH4. 0的55%的乙醇溶液 洗脱,收集紫红色的色素洗脱液,洗脱液流速控制在I. 5 mL/min。将收集的紫红色洗脱液在 旋转蒸发仪中真空浓缩干燥或冷冻干燥,得桑葚提取物干粉,称重计算得率,样品避光干燥 保存;得到的桑葚提取物的收率为1. 22%,提取物中即花色素的含量达到27. 5%。
[0030] 香榧叶提取物的制备方法如下:将干燥的香榧叶置破碎提取器的容器中,加入 65%乙醇进行室温破碎提取2次,将原料打碎成匀浆状,且能通过40目筛的粒度;若香榧叶 干物重量为I kg则含水乙醇用量为7升,每次破碎提取时间为1分钟;将提取液抽滤,弃去 滤渣,合并的提取液在60°C,真空度为0. 095 Mpa条件下采用真空薄膜浓缩装置进行闪蒸 浓缩,至原体积的1/7 ;将浓缩液采用体积比1: 1的石油醚萃取3次,弃去石油醚,水层再 采用体积比1: 2的乙酸乙酯萃取3次;合并萃取液,在旋转蒸发仪中进行减压浓缩干燥成干 粉,用研钵研细后得到香榧叶提取物干粉,提取物的收率达到9. 4%。
[0031] 黑米提取物的制备方法如下:将干燥的黑米置破碎提取器的容器中,加入重量比 1:7的65%乙醇进行室温破碎提取次,每次破碎提取时间为3分钟,将黑米打碎且能通过20 目筛的粒度;将提取液抽滤,合并的滤液在60°C,真空度为0. 095 Mpa条件下采用真空薄膜 浓缩装置进行闪蒸浓缩至原体积的1/7 ;然后将浓缩液进行低温真空干燥成干粉,得到的 黑米提取物的收率为15. 8%。
[0032] 以下通过相应的试验对本发明作进一步说明。
[0033] 试验一:本发明实施例1-4对四氯化碳诱导的大鼠抗肝纤维化的试验研宄。
[0034] 谷丙转氨酶(ALT)试剂盒、谷草转氨酶(AST)试剂盒、羟脯氨酸(HYP)试剂盒(南 京建成),透明质酸酶(HA)试剂盒、III型前胶原(PCIII)试剂盒(上海)。
[0035] 雄性大鼠,体重180_200g,清洁级(购自浙江省实验动物中心)。实验前一周饲以足 够的水和标准鼠料供自由食用。实验动物随机分为6组,每组10只,即正常组
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