剂量分配。试剂盒还可包括使用试剂盒和/或组合物的说明书。
[0043] 此外，本发明的水凝胶还可以是无菌的，并且含有所述水凝胶的试剂盒可用于保 存无菌水凝胶。所述水凝胶可通过无菌制造工艺进行灭菌或通过本领域已知的方法在包装 后进行灭菌。
[0044] 实施例
[0045] 包括以下实施例以证明本发明的某些非限制性方面。本领域技术人员应当了解， 以下实施例中所公开的技术代表了由申请人发现的在本发明的实施中良好地起作用的技 术。然而，本领域技术人员根据本公开内容应当了解，可在不脱离本发明精神和范围的前提 下对所公开的具体实施方案作出许多改动，并且仍然获得相同或类似的结果。
[0046] 实施例1
[0047] (示例性制剂）
[0048] 下列各表提供了包含嗜热菌蛋白酶和纤维素醚的多种水凝胶制剂的非限制性示 例。
[0049] 表1-嗜热菌蛋白酶/HEC水凝胶（在图2中）
[0050]
[0051] 过程：所用的HEC是来自亚什兰（美国）的Natrosol? 250Pharm。所用的缓冲液是 Tris缓冲液（10mM，pH 7. 5)。通过在Tris缓冲液中在70°C混合丙二醇和防腐剂（例如， 对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯）来制备水凝胶。在溶解（即，获得澄清溶液）后， 将溶液冷却到室温（RT)并且添加胶凝剂（HEC)。然后搅拌所述混合物直到均匀（即，没有 可见的胶凝剂HEC粒子），形成水凝胶。通过在DI水或Tris缓冲液（pH = 7. 5)中以适当 浓度混合嗜热菌蛋白酶、NaCl和CaCl2制得活性相。在均质化（将获得白色浆料）后，将活 性相添加到水凝胶中（以适当浓度）。将最终混合物在RT搅拌至少2h。获得平均粘度为 54, 876cps (标准偏差为251. 66,并且基于来自同一水凝胶的三个样品的三次单独测量）的 乳状水凝胶，所述平均粘度如在Brookfield粘度计（14号转子）上以IOrpm在RT下以30 秒所测量。嗜热菌蛋白酶在该制剂中在室温和4°C稳定6个月、12个月、18个月和24个月， 如通过酪蛋白消化法所测量。
[0052] 表2-嗜热菌蛋白酶/HEC水凝胶（图3中的"稀凝胶"）
[0053]
[0054] 过程：所用的HEC是来自亚什兰（美国）的Natrosol? 250Pharm。所用的缓冲液 是Tris缓冲液（10mM，pH 7.5)。通过在Tris缓冲液中在70°C混合丙二醇和防腐剂（例 如，对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯）来制备水凝胶。在溶解（即，获得澄清溶液） 后，将溶液冷却到室温（RT)并且添加胶凝剂（HEC)。搅拌所述混合物直到均匀（即，没有 可见的胶凝剂HEC粒子），形成水凝胶。通过在DI水或Tris缓冲液（pH = 7. 5)中以适当 浓度混合嗜热菌蛋白酶、NaCl和CaCl2制得活性相。在均质化（将获得白色浆料）后，将活 性相添加到水凝胶中（以适当浓度）。将最终混合物在RT搅拌至少2h。获得平均粘度为 64, 900cps (标准偏差为173. 21，基于来自同一水凝胶的三个样品的三次单独测量）的乳状 水凝胶，所述平均粘度如在Brookfield粘度计（14号转子）上以IOrpm在RT下以30秒所 测量。
[0055] 表3-嗜热菌蛋白酶/HEC水凝胶（图3中的"稠凝胶"）
[0056]
[0057] 过程：所用的HEC是来自亚什兰（美国）的Natrosol? 250Pharm。所用的缓冲液 是Tris缓冲液（10mM，pH 7.5)。通过在Tris缓冲液中在70°C混合丙二醇和防腐剂（例 如，对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯）来制备水凝胶。在溶解（即，获得澄清溶液） 后，将溶液冷却到室温（RT)并且添加胶凝剂（HEC)。搅拌所述混合物直到均匀（即，没有 可见的胶凝剂HEC粒子），形成水凝胶。通过在DI水或Tris缓冲液（pH = 7. 5)中以适当 浓度混合嗜热菌蛋白酶、NaCl和CaCl2制得活性相。在均质化（将获得白色浆料）后，将活 性相添加到水凝胶中（以适当浓度）。将最终混合物在RT搅拌至少2h。获得平均粘度为 170, 067cps (标准偏差为25, 516,并且基于来自同一水凝胶的三个样品的三次单独测量） 的乳状水凝胶，所述平均粘度如在Brookfield粘度计（14号转子）上以5rpm在RT下以60 秒所测量。
[0058] 表4-嗜热菌蛋白酶/HPMC水凝胶
[0059]
[0061] 过程：所用的HPMC是来自陶氏化学公司（美国）的Methocel K-15M。悬浮介质是 DI水。通过在Tris缓冲液中在70°C混合丙二醇和防腐剂（例如，对羟基苯甲酸甲酯和对 羟基苯甲酸丙酯）来制备水凝胶。在溶解（即，获得澄清溶液）后，将溶液冷却到室温（RT) 并且添加胶凝剂（HPMC)。搅拌所述混合物直到均匀（即，没有可见的胶凝剂HPMC粒子）， 形成水凝胶。通过在DI水中以适当浓度混合嗜热菌蛋白酶制得活性相。在均质化（将获 得白色浆料）后，将活性相添加到水凝胶中（以适当浓度）。将最终混合物在RT搅拌至少 2h。获得平均粘度为9, 400cps (标准偏差为100,并且基于来自同一水凝胶的三个样品的 三次单独测量）的乳状水凝胶，所述平均粘度如在Brookfield粘度计（14号转子）上以 IOrpm在RT下以30秒所测量。嗜热菌蛋白酶在该制剂中在室温和4°C稳定10个月，如通 过酪蛋白消化法所测量。
[0062] 表5-嗜热菌蛋白酶/HPC水凝胶
[0063]
[0064] 过程：所用的HPC(KlUcel?)来自亚什兰公司（美国）。悬浮介质是DI水。通过在 DI水中在RT混合甘油、苯氧乙醇和胶凝剂（HPC)来制备水凝胶。在溶解后形成水凝胶。通 过在DI水中以适当浓度混合嗜热菌蛋白酶和NaCl制得活性相。在均质化（将获得白色浆 料）后，将活性相添加到水凝胶中（以适当浓度）。将最终混合物在RT搅拌至少2h。获得 平均粘度为42, 633cps (标准偏差为1，205. 5,并且基于来自同一水凝胶的三个样品的三次 单独测量）的乳状水凝胶，所述平均粘度如在Brookfield粘度计（14号转子）上以IOrpm 在RT下以30秒所测量。嗜热菌蛋白酶在该制剂中在室温和4°C稳定10个月，如通过酪蛋 白消化法所测量。
[0065] 表6-嗜热菌蛋白酶/卡波普（Carbopol) 940水凝胶
[0066]
[0067] 过程：所用的卡波普940从留勃里佐尔（Lubrizol)(美国）获得。悬浮介质是Tris 缓冲液（10mM，pH = 7. 5)。通过在Tris缓冲液中在RT混合胶凝剂（卡波普940)来制备水 凝胶。在溶解后形成浑浊溶液。在用IM NaOH中和所述溶液后形成水凝胶。通过在Tris 缓冲液中以适当浓度混合嗜热菌蛋白酶制得活性相。将活性相添加到水凝胶中。将最终混 合物在RT搅拌至少2h。获得乳状水凝胶。嗜热菌蛋白酶活性在该制剂中被抑制，如通过酪 蛋白消化法所测量。
[0068] 表7-嗜热菌蛋白酶/聚季按盐（Polyquatemium)-IO水凝胶
[0069]
[0070] 过程：所用聚季铵盐-10 (U-Care Polymer JR-30M)来自陶氏化学公司（美国）。 悬浮介质是Tris缓冲液（lOmM，pH = 7. 5)。通过在Tris缓冲液中在RT混合胶凝剂（聚季 铵盐-10)来制备水凝胶。在溶解后形成水凝胶。通过在Tris缓冲液中以适当浓度混合嗜 热菌蛋白酶制得活性相。将活性相添加到水凝胶中。将最终混合物在RT搅拌至少2h。获 得乳状水凝胶。嗜热菌蛋白酶在该制剂中不稳定。在室温下储存1个月后，通过酪蛋白消 化法测量发现，活性损失约60 %。
[0071] 表8-嗜热菌蛋白酶/Hispagel水凝胶
[0072]
[0073] 过程：所用的Hispagel-200从科宁（Cognis)(美国）获得。悬浮介质是Tris缓 冲液（10mM，pH = 7. 5)。通过在Tris缓冲液中在RT混合胶凝剂（Hispagel-200)来制备水 凝胶。在溶解后形成水凝胶。通过在Tris缓冲液中以适当浓度混合嗜热菌蛋白酶制得活 性相。将活性相添加到水凝胶中。将最终混合物在RT搅拌至少2h。通过IM NaOH和固体 Tris缓冲物调节最终pH。获得乳状水凝胶。嗜热菌蛋白酶活性在该制剂中被抑制，如通过 酪蛋白消化法所测量。
[0074] 表9-嗜热菌蛋白酶/Aristoflex水凝胶
[0075]
[0076] 过程：所用的Aristo