4,4' -二溴 二吲哚甲烷，得率约85%。
[0057]【动物实验】
[0058] 材料
[0059]分别将I3C、DM、5-氯-吲哚-3-甲醇（5-C1-I3C)、5, 5' -二氯-二吲哚甲 烷（5, 5' -C1-DM)、5_戊基-吲哚-3-甲醇（5-C5-I3C)、5, 5' -二戊基-二吲哚甲烷 (5, 5' -C5-DIM)、5_ 甲氧基-吲哚-3-甲醇（5-M0E-I3C)、5, 5' -二甲氧基-二吲哚甲 烷（5, 5' -M0E-DM)、5_ 硝基-吲哚-3-甲醇（5-N0-I3C)、5, 5' -二硝基-二吲哚甲 烷（5, 5' -N0-DM)、N-甲基-吲哚-3-甲醇（N-Me-I3C)、N，N' -二甲基-二吲哚甲烷 (N,N' -Me-DM)、N-甲氧基-吲哚-3-甲醇（N-M0E-I3C)、N,N' -二甲氧基-二吲哚甲 烷（N,N' -M0E-DM)、2_戊基-吲哚-3-甲醇（2-C5-I3C)、2, 2' -二戊基-二吲哚甲烷 (2,2' -C5-DM)、2-甲氧基-吲哚-3-甲醇（2-M0E-I3C)、2,2' -二甲氧基-二吲哚甲烷 (2, 2'-M0E-DM)、1_ 丁基-2-甲基-吲哚-3-甲醇（lBu-2Me-I3C)、1，1' -二丁基-2, 2' -二 甲基-二吲哚甲烷（1，1'Bu-2, 2'Me-DM)、4_ 溴-吲哚-3-甲醇（4-Br-I3C)及 4, 4' -二 溴-二吲哚甲烷（4, 4' -Br-DM)用玉米油溶解配成3.Omg/ml口服储液备用。
[0060] 实验方法
[0061] 将健康雄性200~250g重的4月龄大鼠230只，分成23组每组10只，随机分 为模型对照组及分别用I3C、DM、5-氯-吲哚-3-甲醇（5-Cl-I3C)、5,5' -二氯-二吲 哚甲烷（5,5' -C1-DM)、5-戊基-吲哚-3-甲醇（5-C5-I3C)、5,5' -二戊基-二吲哚甲 烷（5, 5' -C5-DM)、5_甲氧基-吲哚-3-甲醇（5-M0E-I3C)、5, 5' -二甲氧基-二吲哚 甲烷（5, 5' -MOE-DM)、5_硝基-吲哚-3-甲醇（5-N0-I3C)、5, 5' -二硝基-二吲哚甲 烷（5, 5' -NO-DM)、N-甲基-吲哚-3-甲醇（N-Me-I3C)、N，N' -二甲基-二吲哚甲烷 (N,N' -Me-DM)、N-甲氧基-吲哚-3-甲醇（N-M0E-I3C)、N,N' -二甲氧基-二吲哚甲 烷（N,N' -MOE-DM)、2_戊基-吲哚-3-甲醇（2-C5-I3C)、2, 2' -二戊基-二吲哚甲烷 (2,2' -C5-DM)、2-甲氧基-吲哚-3-甲醇（2-M0E-I3C)、2,2' -二甲氧基-二吲哚甲烷 (2, 2'-M0E-DM)、1_ 丁基-2-甲基-吲哚-3-甲醇（lBu-2Me-I3C)、1，1' -二丁基-2, 2' -二 甲基-二吲哚甲烷（1，1'Bu-2, 2'Me-DM)、4_ 溴-吲哚-3-甲醇（4-Br-I3C)及 4, 4' -二 溴-二吲哚甲烷（4, 4' -Br-DM)治疗的治疗组。
[0062] 用10%的水合氯醛0. 3ml/100g腹腔注射麻醉，大鼠仰卧位固定，充分暴露视野， 牙周刻度探针测量牙周健康时牙周探诊深度并记录（〇.5_)以备参考，口腔检查探针分离 上颁第一磨牙颊颚侧牙龈约1mm，0. 2mm的结扎丝经第一磨牙远中邻间隙进入，绕牙颈部一 圈，近中旋紧，断端位于切牙与磨牙间的切牙间隙处，结扎丝尽量置于牙龈沟内，同法结扎 对侧上颁第一磨牙。结扎当日起10%的高糖水替代饮水，每7天测一次牙周探诊深度直至 第4周，牙周探诊深度与牙周健康时牙周探诊进行比较，差值大于1_预计牙周炎模型已建 立。
[0063] 结扎4周后，肉眼观察可见大鼠牙龈红肿，探诊易出血并可探及牙周袋。每组随即 选一只大鼠脊椎脱臼法处死，取双侧上颁骨，4%的多聚甲醛固定48小时，修整标本，仅保 留磨牙区段颁骨及牙周组织，颊舌向摄X片，观察是否有牙槽骨吸收。去除软组织，苏木素 标记15秒以清除显示釉牙骨质界。采集标本数码照片，牙周刻度探针最为测量标记，测量 上颁第一磨牙颊颚侧6个定位点釉牙骨质界至相应牙槽壻顶的距离，取均值，明确炎症模 型成功。模型对照组正常饲养，治疗组每日灌胃一次对应储液 8〇mg/kg。
[0064] 检测方法
[0065] 用药前撤出结扎先，测量各组临床指标作为基线标准，用药期间每隔5天测量一 次临床指标（0、5、10、15天），直至实验结束（治疗15天）。
[0066]B0P标准：10%的水合氯醛腹腔注射麻醉，固定，牙周探针探至袋底或牙龈沟底， 去除探针后观察30秒看有无出血，在HE染色镜下观察牙龈情况。
[0067] 采用免疫组化SP法测得IL-6灰度值。
[0068] 实验测得各项数据如下表1:
[0069]表 1 :
[0070]
[0071] 由于正常大鼠牙槽嵴顶至釉牙骨质界的距离〈0. 25mm，而模型对照组及治疗组中 上述间距明显高于该数值，与正常健康大鼠相比存在明显的差异，因此建模是成功的。
[0072] 实验中治疗后的各组大鼠较模型组症状表现上明显减轻，而且治疗组的IL-6灰 度值都明显低于模型对照组，因此吲哚-3-甲醇、牙周炎时表达显著增高的细胞因子之一， 而本实施例中二吲哚甲烷及其衍生物可以明显降低炎症大鼠中的IL-6灰度值，因此很显 然溃疡抑制牙周炎的加重并逐渐治愈的目的。
【主权项】
1. 具有下述结构式（I)的用于吲哚-3-甲醇在治疗顽固性牙周炎药物的应用，其中，R1为氢或C1-C10烷基或C1-C10烷氧基；R2为氢或C1-C10烷基或C1-C10烷氧 基；R5为氢或卤素取代基或硝基；R4、R6、R7均为氢。2. 根据权利要求1所述的吲哚-3-甲醇在治疗顽固性牙周炎药物的应用，其特征在于： 所述结构式（I)中，R5为卤素取代基或硝基，虹、1?2、1?4、1?6、1?7均为氢。3. 根据权利要求1所述的吲哚-3-甲醇在治疗顽固性牙周炎药物的应用，其特征在于： 所述结构式（I)中，R1为C1-C10烷基或C1-C10烷氧基，1?2、1?4、1?5、1?6、1?7均为氢。4. 根据权利要求1所述的吲哚-3-甲醇在治疗顽固性牙周炎药物的应用，其特征在于： 所述结构式（I)中，R2为C1-C10烷基或C1-C10烷氧基，虹、1?4、1?5、1?6、1?7均为氢。5. 具有下述结构式（II)的二吲哚甲烷在治疗顽固性牙周炎药物的应用，其中，R1和R1'为氢或C1-C10烷基或C1-C10烷氧基；R2和R2'为氢或C1-C10烷基或C1-C10烷氧基；R5和R5'为氢或卤素取代基或硝基；R4、R6、R7、R4'、R6'、R7'均为氢。6. 根据权利要求5所述的二吲哚甲烷在治疗顽固性牙周炎药物的应用，其特征在于： 所述结构式（II)中，R5和R5'同时为卤素取代基或硝基，R1、R2、R4、R6、R7、R1'、R2'、R4'、 R6'、R7'均为氢。7. 根据权利要求5所述的二吲哚甲烷在治疗顽固性牙周炎药物的应用，其特征在于： 所述结构式（II)中，R1和R1'同时为C1-C10烷基或C1-C10烷氧基，R2、R4、R5、R6、R7、 R2'、R4'、R5'、R6'、R7' 均为氢。8. 根据权利要求5所述的二吲哚甲烷在治疗顽固性牙周炎药物的应用，其特征在于： 所述结构式（II)中，R2和R2'同时为C1-C10烷基或C1-C10烷氧基，Rl、R4、R5、R6、R7、 R1'、R4'、R5'、R6'、R7' 均为氢。
【专利摘要】本发明提出了吲哚-3-甲醇、二吲哚甲烷及其衍生物用于治疗顽固性牙周炎药物的应用，吲哚-3-甲醇、二吲哚甲烷及其衍生化合物通过抑制基底细胞有丝分裂，可以用于顽固性牙周炎的治疗。DIM和I3C及其衍生化合物可有效降低顽固性牙周炎的发病症状并逐渐治愈，可以成为治疗顽固性牙周炎的候选药物分子。同时，本发明所使用的小分子药物易于获取，价格低廉，性质稳定，便于保存和运输，具有广阔的应用前景。
【IPC分类】C07D209/08, A61P1/02, C07D209/12, A61K31/404
【公开号】CN104940194
【申请号】CN201510353279
【发明人】张勇
【申请人】安徽四正医药科技有限公司
【公开日】2015年9月30日
【申请日】2015年6月24日