氨酰胺钠、N-十二烷酰基-L-谷氨酰胺、月桂酰 基天冬酰胺钠、N-十二烷酰基-L-天冬酰胺月桂酰基天冬氨酸钠、N-十二烷酰基-L-天 冬氨酸、月桂酰基谷氨酸钠、N-十二烷酰基-L-谷氨酸、月桂酰基半胱氨酸钠、N-十二烷 酰基-L-半胱氨酸、月桂酰基赖氨酸钠、N-十二烷酰基-L-赖氨酸、月桂酰基精氨酸钠、 N-十二烷酰基-L-精氨酸、月桂酰基组氨酸钠、N-十二烷酰基-L-组氨酸。
[0121] 在一个实施方案中，FA-aa可以选自在脂肪酸部分中包括14个碳原子的FA-aa的 组，所述组由以下组成：肉豆蔻酰基丙氨酸钠、N-十四烷酰基-L-丙氨酸、肉豆蔻酰基异亮 氨酸钠、N-十四烷酰基-L-异亮氨酸、肉豆蔻酰基亮氨酸钠、N-十四烷酰基-L-亮氨酸、肉 豆蔻酰基甲硫氨酸钠、N-十四烷酰基-L-甲硫氨酸、肉豆蔻酰基苯丙氨酸钠、N-十四烷酰 基-L-苯丙氨酸、肉豆蔻酰基脯氨酸钠、N-十四烷酰基-L-脯氨酸、肉豆蔻酰基苏氨酸钠、 N-十四烷酰基-L-苏氨酸、肉豆蔻酰基丝氨酸钠、N-十四烷酰基-L-丝氨酸、肉豆蔻酰基色 氨酸钠、N-十四烷酰基-L-色氨酸、肉豆蔻酰基缬氨酸钠、N-十四烷酰基-L-缬氨酸、肉豆 蔻酰基肌氨酸钠和N-十四烷酰基-L-肌氨酸、肉豆蔻酰基酪氨酸钠、N-十四烷酰基-L-酪 氨酸、肉豆蔻酰基甘氨酸钠、N-十四烷酰基-L-甘氨酸肉豆蔻酰基谷氨酰胺钠、N-十四 烷酰基-L-谷氨酰胺、肉豆蔻酰基天冬酰胺钠、N-十四烷酰基-L-天冬酰胺肉豆蔻酰基 天冬氨酸钠、N-十四烷酰基-L-天冬氨酸、肉豆蔻酰基谷氨酸钠、N-十四烷酰基-L-谷氨 酸、肉豆蔻酰基半胱氨酸钠、N-十四烷酰基-L-半胱氨酸、肉豆蔻酰基赖氨酸钠、N-十四烷 酰基-L-赖氨酸、肉豆蔻酰基精氨酸钠、N-十四烷酰基-L-精氨酸、肉豆蔻酰基组氨酸钠、 N-十四烷酰基-L-组氨酸。
[0122] 在一个实施方案中，FA-aa可以选自在脂肪酸部分中包括16个碳原子的FA-aa的 组，所述组由以下组成：棕榈酰基丙氨酸钠、N-十六烷酰基-L-丙氨酸、棕榈酰基异亮氨酸 钠、N-十六烷酰基-L-异亮氨酸、棕榈酰基亮氨酸钠、N-十六烷酰基-L-亮氨酸、棕榈酰 基甲硫氨酸钠、N-十六烷酰基-L-甲硫氨酸、棕榈酰基苯丙氨酸钠、N-十六烷酰基-L-苯 丙氨酸、棕榈酰基脯氨酸钠、N-十六烷酰基-L-脯氨酸、棕榈酰基苏氨酸钠、N-十六烷酰 基-L-苏氨酸、棕榈酰基丝氨酸钠、N-十六烷酰基-L-丝氨酸、棕榈酰基色氨酸钠、N-十六 烷酰基-L-色氨酸、棕榈酰基缬氨酸钠、N-十六烷酰基-L-缬氨酸、棕榈酰基肌氨酸钠和 N-十六烷酰基-L-肌氨酸、棕榈酰基酪氨酸钠、N-十六烷酰基-L-酪氨酸、棕榈酰基甘氨酸 钠、N-十六烷酰基-L-甘氨酸棕榈酰基谷氨酰胺钠、N-十六烷酰基-L-谷氨酰胺、棕榈酰 基天冬酰胺钠、N-十六烷酰基-L-天冬酰胺棕榈酰基天冬氨酸钠、N-十六烷酰基-L-天 冬氨酸、棕榈酰基谷氨酸钠、N-十六烷酰基-L-谷氨酸、棕榈酰基半胱氨酸钠、N-十六烷 酰基-L-半胱氨酸、棕榈酰基赖氨酸钠、N-十六烷酰基-L-赖氨酸、棕榈酰基精氨酸钠、 N-十六烷酰基-L-精氨酸、棕榈酰基组氨酸钠、N-十六烷酰基-L-组氨酸。
[0123] 在一个实施方案中，FA-aa可以选自包括18个碳原子的FA-aa的组，其中所述脂 肪酸部分衍生自硬脂酸。FA' aa因此可以选自：硬脂酰基丙氨酸钠、N-十八烷酰基-L-丙 氨酸、硬脂酰基异亮氨酸钠、N-十八烷酰基-L-异亮氨酸、硬脂酰基亮氨酸钠、N-十八烷酰 基-L-亮氨酸、硬脂酰基甲硫氨酸钠、N-十八烷酰基-L-甲硫氨酸、硬脂酰基苯丙氨酸钠、 N-十八烷酰基-L-苯丙氨酸、硬脂酰基脯氨酸钠、N-十八烷酰基-L-脯氨酸、硬脂酰基苏 氨酸钠、N-十八烷酰基-L-苏氨酸、硬脂酰基丝氨酸钠、N-十八烷酰基-L-丝氨酸、硬脂酰 基色氨酸钠、N-十八烷酰基-L-色氨酸、硬脂酰基缬氨酸钠、N-十八烷酰基-L-缬氨酸、硬 脂酰基肌氨酸钠和N-十八烷酰基-L-肌氨酸、硬脂酰基酪氨酸钠、N-十八烷酰基-L-酪 氨酸、硬脂酰基甘氨酸钠、N-十八烷酰基-L-甘氨酸硬脂酰基谷氨酰胺钠、N-十八烷酰 基-L-谷氨酰胺、硬脂酰基天冬酰胺钠、N-十八烷酰基-L-天冬酰胺硬脂酰基天冬氨酸钠、 N-十八烷酰基-L-天冬氨酸、硬脂酰基谷氨酸钠、N-十八烷酰基-L-谷氨酸、硬脂酰基半胱 氨酸钠、N-十八烷酰基-L-半胱氨酸、硬脂酰基赖氨酸钠、N-十八烷酰基-L-赖氨酸、硬脂 酰基精氨酸钠、N-十八烷酰基-L-精氨酸、硬脂酰基组氨酸钠、N-十八烷酰基-L-组氨酸。
[0124] 在一个实施方案中，FA-aa可以选自包括18个碳原子的FA-aa的组，其中所述脂肪 酸部分衍生自油酸。FA'aa因此可以选自：油酰基丙氨酸钠、N-(E)_十八碳（ 〇ctadeC)-9-烯 酰基-L-丙氨酸、油酰基异亮氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-异亮氨酸、油酰基亮 氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-亮氨酸、油酰基甲硫氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯 酰基-L-甲硫氨酸、油酰基苯丙氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-苯丙氨酸、油酰基 脯氨酸钠、N-(E)-十八碳-9-烯酰基-L-脯氨酸、油酰基苏氨酸钠、N-(E)-十八碳-9-烯 酰基-L-苏氨酸、油酰基丝氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-丝氨酸、油酰基色氨 酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-色氨酸、油酰基缬氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰 基-L-缬氨酸、油酰基肌氨酸钠和N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-肌氨酸、油酰基酪氨 酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-酪氨酸、油酰基甘氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰 基-L-甘氨酸油酰基谷氨酰胺钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-谷氨酰胺、油酰基天冬酰 胺钠、N- (E)-十八碳-9-烯酰基-L-天冬酰胺油酰基天冬氨酸钠、N- (E)-十八碳-9-烯 酰基-L-天冬氨酸、油酰基谷氨酸钠、N-(E)-十八碳-9-烯酰基-L-谷氨酸、油酰基半胱氨 酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-半胱氨酸、油酰基赖氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰 基-L-赖氨酸、油酰基精氨酸钠、N-(E)_十八碳-9-烯酰基-L-精氨酸、油酰基组氨酸钠、 N- (E)-十八碳-9-烯酰基-L-组氨酸。
[0125] 在一个实施方案中，其中FA-aa在脂肪酸部分中具有12个碳原子，FA-aa基于选 自以下的氨基酸：谷氨酰胺（Gin)、谷氨酸（Glu)、天冬氨酸（Asp)、肌氨酸（Sarc)、亮氨酸 (Leu)、缬氨酸（Val)、酪氨酸（Tyr)和色氨酸（trp)。
[0126] 在一个实施方案中，其中FA-aa在脂肪酸部分中具有14个碳原子，FA-aa基于选 自以下的氨基酸：谷氨酰胺（Gln)、谷氨酸（Glu)、D-谷氨酸（D-Glu)、亮氨酸（Leu)、缬氨酸 (Val)和肌氨酸（Sarc)。
[0127] 在一个实施方案中，其中FA-aa在脂肪酸部分中具有16个碳原子，FA-aa基于选 自以下的氨基酸：脯氨酸（Pro)、谷氨酰胺（Gln)、谷氨酸（Glu)、D-谷氨酸（D-Glu)、天冬氨 酸（Asp)、D-天冬氨酸（D-Asp)和肌氨酸（Sarc)。
[0128] 在一个实施方案中，其中FA-aa在脂肪酸部分中具有16个碳原子，FA-aa基于选 自以下的氨基酸：天冬氨酸（Asp)、谷氨酸（Glu)和肌氨酸（Sarc)。
[0129] 在一个实施方案中，其中FA-aa在脂肪酸部分中具有16个碳原子，FA-aa基于选 自以下的氨基酸：谷氨酰胺（Gln)、谷氨酸（Glu)和肌氨酸（Sarc)。
[0130] 在一个实施方案中，根据本发明的FA-aa的氨基酸残基是不是由遗传密码编码的 氨基酸。
[0131] 在一个实施方案中，根据本发明的FA-aa的氨基酸残基是肌氨酸。
[0132] 在一个实施方案中，根据本发明的FA-aa的氨基酸残基是不是由遗传密码编码的 氨基酸的游离酸或盐形式。
[0133] 在一个实施方案中，根据本发明的FA-aa的氨基酸残基在是游离酸肌氨酸或肌氨 酸盐形式的盐。
[0134] 在本发明的一个实施方案中，口服药物组合物包含至少一种生长激素化合物和至 少一种 FA-aa。
[0135] 生长激素化合物 如本文所使用的术语"生长激素化合物"意指这样的生长激素分子，其保留SEQ ID N0 1标识的人生长激素的至少一些功能性和包括连接生长激素变体中的C53与C165和C182 与C189或相应的氨基酸残基的两个分子内二硫键的其整体结构。生长激素蛋白的结构由 三个环（L1-3)连接的四个螺旋（螺旋1-4)和C末端片段构成。在人生长激素中，螺旋1 由AA残基6-35定义，螺旋2由AA残基71-98定义，螺旋3由AA残基107-127定义，且螺 旋4被定义为AA残基155-184。
[0136] BAF测定频繁用于测定生长激素蛋白或化合物（参见下文）的生物活性。
[0137] 如本文所使用的术语"生长激素变体"和"生长激素类似物"意指这样的生长激素 蛋白，其具有衍生自天然存在的生长激素的结构、例如由SEQ ID NO 1标识的人生长激素的 结构的氨基酸序列。该术语因此用于生长激素蛋白，其中所述生长激素序列的一个或多个 氨基酸残基已经被其他氨基酸残基取代和/或其中一个或多个氨基酸残基已经从生长激 素缺失和/或其中一个或多个氨基酸残基已经被添加和/或插入至生长激素。
[0138] 如本文所使用的术语"生长激素衍生物"是指经化学修饰的生长激素蛋白或其类 似物，其中所述修饰是酰胺、碳水化合物、烷基、酯、聚乙二醇化等的连接形式。
[0139] 根据本发明的生长激素衍生物是经以下修饰的天然存在的生长激素或生长激素 类似物：例如，通过在生长激素骨架的一个或多个位置上化学引入侧链，或者通过氧化或还 原生长激素中氨基酸残基的基团，或者通过将游离羧酸基团转化成酯基或酰胺基。其他衍 生物通过酰化经由生长激素序列中的单个氨基酸突变引入的游离巯基而获得。本文中，术 语"酰化的生长激素"覆盖通过将一个或多个亲脂性取代基任选经由接头连接至生长激素 蛋白而对生长激素的修饰。
[0140] "亲脂性取代基"在本文中理解为由连接至生长激素蛋白或类似物（任选经由接 头）的脂肪酸或脂肪二酸组成的侧链。
[0141] 生长激素衍生物因此是人生长激素或人生长激素类似物，其包含至少一个连接至 一个或多个氨基酸的共价修饰，诸如连接至生长激素或生长激素变体或类似物的一个或多 个氨基酸侧链中的共价修饰。
[0142] 术语"生长激素融合体"在本文中用于这样的蛋白分子，其包括借助肽键连接至第 二蛋白序列的生长激素序列，其通常通过使用重组表达载体表达融合蛋白而获得，所述重 组表达载体连接编码所述生长激素序列的DNA序列与编码所述第二蛋白的DNA序列，任选 地包括接头序列。生长激素融合体包括，但不限于，包含一个或多个抗体Fc区和/或白蛋 白蛋白的融合体。
[0143] 如本文所使用的术语"生长激素化合物"统指基本上保留人生长激素的功能特征 的生长激素分子。所述化合物因此可以是生长激素、生长激素融合蛋白、生长激素变体或类 似物或生长激素衍生物，还包括酰化的生长激素。
[0144] 在一个实施方案中，根据本发明的生长激素类似物相对于人生长激素包含小于8 个修饰（取代、缺失、添加）。
[0145] 在一个实施方案中，生长激素类似物相对于人生长激素包含小于7个修饰（取代、 缺失、添加）。在一个实施方案中，生长激素类似物相对于人生长激素包含小于6个修饰（取 代、缺失、添加）。
[0146] 在一个实施方案中，生长激素类似物相对于人生长激素包含小于5个修饰（取代、 缺失、添加）。在一个实施方案中，生长激素类似物相对于人生长激素包含小于4个修饰（取 代、缺失、添加）。在一个实施方案中，生长激素类似物相对于人生长激素包含小于3个修饰 (取代、缺失、添加）。在一个实施方案中，生长激素类似物相对于人生长激素包含小于2个 修饰（取代、缺失、添加）。
[0147] 在一系列实施方案中，生长激素的生长激素类似物与SEQ ID NO: 1标识的人生长 激素至少95、96、97、98或99%相同。
[0148] 生长激素化合物优选具有相比于野生型人生长激素增加的血浆T1/2。这可以由本 领域技术人员已知的各种方式提供，诸如稳定蛋白免于降解的点突变。生长激素化合物的 循环时间也可以通过共价或非共价地连接至血清蛋白而获得。血清白蛋白可以通过直接缀 合（任选地包括接头）或通过与生长激素或其变体的蛋白融合而使用。或者，化学连接至 白蛋白以及与抗体Fc区的融合或连接也可以同样进行考虑。非共价结合至白蛋白可以通 过使用白蛋白结合剂诸如共价键合至生长激素的酰基来获得。
[0149] 在一个实施方案中，所述生长激素化合物具有相比于人生长激素增加的T %，其中 所述T %在静脉内（i.v.)或皮下（S.C.)施用于大鼠后测量，如实施例1.C.中所述。注意 到，野生型人生长激素在所述测定中具有约12-14分钟的T L在一个实施方案中，所述生 长激素化合物具有高于30分钟的T L在进一步实施方案中，T %高于60分钟或1小时， 诸如高于2小时或优选高于4小时。
[0150] 在一个实施方案中，生长激素化合物是这样的生长激素衍生物，其是在生长激素 蛋白中的一个或多个氨基酸被酰化的生长激素或其变体。
[0151] 在一个实施方案中，生长激素化合物是这样的生长激素变体，其针对蛋白水解降 解是稳定化的（通过特定突变），并且此类变体可以在生长激素蛋白中的一个或多个氨基 酸被进一步酰化。
[0152] 针对蛋白水解降解稳定化（通过特定突变）的生长激素蛋白的非限制性实例可以 例如在 W02010/084173 和 W0 2011/089250 中找到。
[0153] 进一步指出且下面还描述的是，生长激素化合物的稳定化也可以通过在制剂中包 括蛋白酶抑制剂来获得。
[0154] 蛋白酶稳定化的生长激素蛋白变体包括其中引入额外二硫键的变体。额外二硫键 优选将L3连接至螺旋2。这可以通过引入两个额外的Cys aa残基来获得，在优选的实施方 案中，其取代对应于SEQ ID No. 1的H2中的AA84或AA85和L3中的AA143或AA144的位 置的野生型aa残基。根据本发明的生长激素变体因此可以优选包含对应于SEQ ID No. 1 中的 L73C/S132C、L73C/F139C、R77C/I138C、R77C/F139C、L81C/Q141C、L81C/Y143C、Q84C/ Y143C、Q84C/S144C、S85C/Y143C、S85C/S144C、P89C/F146C、F92C/F146C 或 F92C/T148C 的 突变对。在进一步实施方案中，生长激素变体包含对应于SEQ ID No. 1中的L81C/Y143C、 Q84C/Y143C、S85C/Y143C、S85C/S144C 或 F92C/T148C 的突变对。
[0155] 在一个实施方案中，生长激素化合物是生长激素衍生物，诸如只具有一个连接至 生长激素蛋白中的内部氨基酸残基的酰化基团的单取代的化合物，或其变体，诸如上述蛋 白酶稳定化的生长激素变体。
[0156] 适用于本发明的药物组合物的酰化的生长激素化合物的非限制性列表可以例如 在 TO2011/089255 中找到。
[0157] 包括如测量的T %的示例性化合物在下文列出。
[0158] 在本发明的一个实施方案中，将所述生长激素化合物溶解，并将所得溶液的pH调 节至目标pH值的值，所述值比生长激素化合物的pi高或低1个单位，可替换地2个单位， 且可替换地2. 5个pH单位，然后将所述得到的溶液冷冻或喷雾干燥。在一个实施方案中， 用非挥发性的酸或碱进行所述pH调节。
[0159] 所述生长激素化合物可以以下述量存在于根据本发明的药物组合物中：总药物组 合物的至多约20重量％，诸如至多约10重量％，或从约0. 1重量％，诸如从约1重量％。在 本发明的一个实施方案中，所述生长激素化合物以总组合物的约〇. 1重量％至约20重量％ 的量存在，在另一个实施方案中，以总组合物的约〇. 1重量％_15重量％、0. 1重量％_10重 量％、1重量％-8重量％或约1重量％-5重量％的量存在。但是，意图根据药学领域众所周 知的因素，可以选择生长激素化合物的特定水平，所述因素包括：生长激素在溶剂（例如水 溶液、极性有机溶剂）中的溶解度，或使用的任选的亲水组分或表面活性剂或其混合物，施 用模式，以及患者的大小和状况。
[0160] 每个单位剂量将合适地含有1 mg至200 mg生长激素化合物，例如约1 mg、5 mg、 10 mg、15 mg、20 mg、25 mg、50 mg、80 mg、90 mg、100 mg、150 mg、200 mg 生长激素化合物， 例如5 mg至200 mg生长激素化合物。在本发明的一个实施方案中，每个单位剂量含有10 mg至200 mg生长激素化合物。在另一个实施方案中，单位剂型含有10 mg至100 mg生长 激素化合物。
[0161] 在本发明的一个实施方案中，单位剂型含有20 mg至80 mg生长激素化合物。在 本发明的另一个实施方案中，单位剂型含有30 mg至60 mg生长激素化合物。
[0162] 在本发明的另一个实施方案中，单位剂型含有30 mg至50 mg生长激素化合物。此 类单位剂型适合于每天施用1-5次，这取决于特定治疗目的。
[0163] 多肽和肽（诸如生长激素）的生产是本领域众所周知的。通常，生长激素蛋白通 过这样的方法生产，所述方法包括：在合适的营养培养基中，在允许肽表达的条件下，培养 宿主细胞，所述宿主细胞含有编码（多）肽的DNA序列且能够表达所述（多）肽。对于包 含非天然氨基酸残基的（多）肽，应当修饰重组细胞，使得非天然氨基酸被掺入（多）肽中 (例如通过使用tRNA突变体）。
[0164] 药物组合物的配制 因此，本发明的一个目标是提供包含治疗活性量的生长激素化合物的药物制剂。浓度 可以在溶液中0.25 mg/ml至250 mg/ml变化，或在固体剂型中2.5 mg/g至250 mg/g变化。
[0165] 同样，FA-aa的浓度可以类似地在溶液中0. 25 mg/ml至250 mg/ml变化，或在固 体剂型中2. 5 mg/g至250 mg/g变化。
[0166] 在一个实施方案中，生长激素化合物和FA-aa的相对量是10:1至1:10 (W:W)，诸 如 5:1 至 1:5 (W:W)，2:1 至 1:2 (W:W)，或诸如约 1:1 (W:W)。
[0167] 优选的是，所述制剂具有2. 0至10. 0的pH。所述制剂可以进一步包括缓冲系统、防 腐剂、张度剂、螯合剂、稳