少一种脂肪酸氨基酸（FA-aa)或其盐。
[0234] 2.根据实施方案1的药物组合物，其中所述组合物是口服药物组合物。
[0235] 3.根据实施方案1和2的药物组合物，其中至少一种脂肪酸氨基酸（FA-aa)具有 通式：
其中R1是包含10至18个碳原子的脂肪酸链， R2是H(即氢）、CH3 (即甲基）或当R2共价连接至R4时是价键，且 R3是H或不存在，且 R4是氨基酸侧链，包括_ (CH2) 3_，此时共价连接至R2。
[0236] 4.根据实施方案3的药物组合物，其中所述氨基酸R4选自： i. 极性氨基酸侧链， ii. 非极性氨基酸侧链。
[0237] 5.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa是盐的形式（R3不 存在）。
[0238] 6.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa是具有一价阳离 子（诸如Na+或K +)的盐的形式。
[0239] 7.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa是其游离酸的形 式（R3是H)。
[0240] 8.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa的脂肪酸部分具 有至少12个碳原子。
[0241] 9.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa的脂肪酸部分具 有多至18个碳原子。
[0242] 10.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa包含12-18个碳 原子的脂肪酸部分。
[0243] 11.根据前述实施方案中任一项的口服药物组合物，其中所述脂肪酸部分是衍生 自棕榈酸的棕榈酰基。
[0244] 12.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa的氨基酸残基基 于选自以下的氨基酸：天冬氨酸（Asp)、谷氨酸（Glu)、肌氨酸（Sarc)、甘氨酸（Gly)、赖氨酸 (Lys)、精氨酸（Arg)、组氨酸（His)、谷氨酰胺（Gin)、天冬酰胺（Asn)、丝氨酸（Ser)、苏氨酸 (Thr)、酪氨酸（Tyr)和半胱氨酸（Cys)。
[0245] 13.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa的氨基酸残基基 于选自以下的氨基酸：天冬氨酸（Asp)、谷氨酸（Glu)、肌氨酸（Sarc)、甘氨酸（Gly)、谷氨 酰胺（Gin)、天冬酰胺（Asn)、丝氨酸（Ser)和苏氨酸（Thr)。
[0246] 14.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa的氨基酸残基基 于选自以下的氨基酸：天冬氨酸（Asp)、谷氨酸（Glu)、肌氨酸（Sarc)、甘氨酸（Gly)、谷氨 酰胺（Gin)和天冬酰胺（Asn)。
[0247] 15.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述FA-aa的氨基酸残基基 于选自以下的氨基酸：天冬氨酸（Asp)、谷氨酸（Glu)、谷氨酰胺（Gin)、天冬酰胺（Asn)和 肌氨酸（Sarc)。
[0248] 16.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述氨基酸侧链1?4是_ H(甘氨酸）。
[0249] 17.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述氨基酸残基是肌氨酸 (R4= - H (作为甘氨酸）且R1=_CH3)。
[0250] 18.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述脂肪酸氨基酸是N-棕 榈酰基-肌氨酸钠。
[0251] 19.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述脂肪酸氨基酸增加 HT29-MTX (E12)细胞的渗透性。
[0252] 20.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述生长激素化合物，其中 所述蛋白序列与人生长激素（SEQ ID NO 1)至少95%相同。
[0253] 21.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述生长激素化合物具有高 于30分钟的T %。
[0254] 22.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述生长激素化合物包含额 外的二硫键。
[0255] 23.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述生长激素化合物是生长 激素衍生物。
[0256] 24.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述生长激素化合物是包括 额外二硫键的化学修饰的生长激素变体。
[0257] 25.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述生长激素化合物是化学 修饰的生长激素，其中所述衍生物连接至内部氨基酸残基。
[0258] 26.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述生长激素化合物是包含 酰基衍生的化学修饰的生长激素。
[0259] 27.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物是液体。
[0260] 28.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物是含水制剂。
[0261] 29.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物包含少于10% (w/w)水。
[0262] 30.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物包含其它药物赋 形剂。
[0263] 31.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物进一步包含丙二 醇。
[0264] 32.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物进一步包含油， 诸如植物油或中性油。
[0265] 33.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物进一步包含油和 表面活性剂的混合物。
[0266] 34.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物进一步包含表面 活性剂诸如聚山梨醇醋20、聚山梨醇醋80、lauroglycol、capryol或labrasol 〇
[0267] 35.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物是SEDDS、SMEDDS 或SNEDDS制剂。
[0268] 36.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物是半固体组合 物。
[0269] 37.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其中所述组合物是固体口服组合 物，诸如片剂或胶囊的形式。
[0270] 38.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其进一步包含包衣，诸如肠溶或 延迟释放包衣。
[0271] 39.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其进一步包含蛋白酶抑制剂。
[0272] 40.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其进一步包含蛋白酶抑制剂。
[0273] 41.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其用作药物。
[0274] 42.根据前述实施方案中任一项的药物组合物，其用于治疗生长激素相关的疾病 或病症。
[0275] 43.用于增加生长激素化合物的生物利用率的方法，其包括在施用于个体的生长 激素化合物的药物组合物中包括FA-aa的步骤。
[0276] 44.用于增加生长激素化合物的血浆浓度的方法，其包括以下步骤：使个体的胃 肠道暴露于包含生长激素化合物和FA-aa的药物组合物，导致所述个体中所述生长激素化 合物的血浆浓度增加。
[0277] 45.实施方案44的方法，其中所述暴露通过口服施用所述药物组合物来实现。
[0278] 46.用于增加生长激素化合物的摄取的方法，其包括以下步骤：使个体的胃肠道 暴露于生长激素化合物和至少一种FA-aa，由此，与不包括至少一种FA-aa的暴露相比，所 述个体中所述生长激素的血浆浓度增加。
[0279] 47.用于治疗生长激素相关的疾病或病症的方法，其包括施用包含生长激素化合 物和至少一种FA-aa的药物组合物。
[0280] 48.用于增加生长激素化合物跨越肠壁的摄取的方法，其包括以下步骤：将包含 生长激素化合物和至少一种FA-aa的药物组合物施用于个体，由此，与当所述生长激素组 合物不包括至少一种FA-aa时获得的所述生长激素化合物的摄取相比，获得所述生长激素 化合物的增加摄取。
[0281] 49.实施方案44-48的方法，其中所述药物组合物通过实施方案2-39中任一项进 行描述。
[0282] 方法和实施例 实施例1 A.用于制备GH化合物的通用方法 将编码生长激素多肽的基因重组插入质粒载体中。随后使用质粒载体转化合适的大肠 杆菌（凡cWi)菌株。可表达具有N端甲硫氨酸的hGH或GH变体，或hGH或GH变体可作 为MEAE融合体表达，随后将MEAE序列从其切割下来。
[0283] 对于本文所述的实例，在25%甘油中制备细胞储液，并储存在-80°C下。将甘油储 液菌株接种至LB板中，随后在37°C下孵育过夜。各板的内容物用LB培养基洗涤，并稀释到 500ml LB培养基中用于表达。在220 rpm振荡下，在37°C孵育培养物直到达到0D6(KI 0.6。 使用0. 2mM IPTG在25°C下进行随后的诱导6小时。最后通过离心收获细胞。
[0284] 随后将细胞悬浮于 10 mM Tris-HCl(pH = 9. 0)，其含有 0. 05% 吐温 20，2. 5 mM EDTA，10 mM半胱胺和4M尿素，并使用细胞破碎仪在30kPSI下破碎。通过离心收集上清 液，随后进行层析纯化。
[0285] 使用离子交换层析和疏水相互作用进行纯化，随后使用从CH0细胞表达的人二肽 基肽酶I (hDPPI)去除肽标签。最后的纯化通过等电沉淀（isoprecipitation)和离子交 换层析法实现。
[0286] 纯化还可通过使用以下技术（但不限于这些技术）来实现：离子交换层析法、疏水 作用层析法、亲和层析法、大小排阻层析法和本领域技术人员已知的基于膜的分离技术。
[0287] B.用于测试GH化合物的生物活性的通用方法（BAF测定） 在基于细胞的受体效价增殖测定（即BAF测定）中，测量GH化合物的生物活性。BAF-3 细胞（源自骨髓的鼠前-B淋巴样细胞系）的生长和存活是IL-3依赖性的。IL-3活化JAK-2 和STAT，它们是hGH在刺激后活化的相同介体。
[0288] 用含有hGH受体的质粒转染BAF-3细胞。在hGH刺激后能够增殖的克隆变成hGH 依赖性的细胞系，下文称作BAF3-GHR。所述细胞系以剂量相关生长模式对生长激素做出响 应，因此相对于hGH，可在增殖测定中用来评价不同GH化合物的作用。
[0289] 使BAF-3GHR细胞在饥饿培养基（不含hGH的培养基）中在37°C、5% C02下生长 24小时。将细胞离心，去除培养基，并将细胞重新悬浮于饥饿培养基中至2. 22xl05个细胞 /ml。将多份90 yL细胞上清液接种到微量滴定板（96孔NUNC-clone)中。将不同浓度的 给定生长激素化合物加入细胞中，将板在37°C、5% C02下孵育72小时。
[0290] AlamarBlue? (BioSource目录号Dal 1025)是一种氧化还原指示剂，其被细胞代 谢固有的反应还原，并因此提供活细胞数目的间接量度。将AlamarBlue?稀释6倍（5 yL AlamarBlue? + 25 yL饥饿培养基），并将30 yL稀释的AlamarBlue?加到每个孔中。然 后再将细胞孵育4小时。最后，使用544 nM的激发滤光片和590 nM的发射滤光片，在荧光 读板仪中，测量细胞的代谢活性。给定化合物的结果表示为所述化合物的EC5(I和平行运行 的wt hGH的EC5Q之间的比率。
[0291] C.用于评估生长激素化合物的药代动力学参数的通用方法 在雄性Sprague Dawley大鼠中，在静脉内（i.v.)和皮下（s.c.)单剂量施用后，研宄 实施例的化合物的药代动力学。
[0292] 将测试化合物在由甘氨酸20 mg/mL、甘露醇2 mg/mL、NaHC03 2. 5 mg/mL组成的稀 释缓冲液(调节pH至8.2)中稀释至1 mg/mL的终浓度。
[0293] 在重为250 g的雄性Sprague Dawley大鼠中研宄测试化合物。用25 G针以诸如 0. 1 ml体积中的15 nmol/大鼠（浓度150 nmol/ml)或60 nmol/kg体重的预定剂量，在尾 静脉i.v.或在颈部s.c.单次注射施用测试化合物。
[0294] 对于各测试化合物，可以根据下表2提供的时间表进行采血。
表2.用于研宄生长激素化合物的药代动力学的示例性血液采样时间表。
[0295] 表1中的值使用替代血液采样时间表获得，包括在给药前、0.08 h、0. 5 h、lh、2h、 处、711、1811、2411、4811、7211和9611的采样。
[0296] 在各采样时间，使用25 G针从尾静脉抽取0. 25 ml血液。将血液采样入EDTA包 被的试管中，储存在冰上，直到在4°C下以1200 x G离心10分钟。将血浆转移至Micronic 管中，并储存在-20 °C下直到分析。
[0297] 使用豚鼠抗hGH多克隆抗体作为捕捉剂（catcher)，和生物素化的hGH结合蛋白 (人GH受体的可溶性部分）作为检测剂，通过夹心ELISA测定测试化合物浓度。测定的检 测限值为0.2 nM。
[0298] 使用 WinNonlin Professional (Pharsight Inc.，Mountain View，CA，USA)，对各 测试化合物的平均浓度-时间概况进行非房室药代动力学分析。计算终末半衰期（t%)和 平均滞留时间（MRT)的药代动力学参数估计值。
[0299] D.用于使用E12细胞的单层测量体外生长激素化合物的跨上皮转运的方法 细胞培养 使 HT29-MTX (E12)细胞（Pharm Res.2001;18(8):1138-45 和 Pharm Res. 2007; 24 (7) : 1346-56)在补充10%胎牛血清（FBS)、1 %青霉素/链霉素、1 % L-谷氨酰 胺和1%非必需氨基酸的Dulbecco改良的Eagle培养基中生长。对于转运测定，将E12细 胞以每孔1〇 5个细胞的密度接种到12-孔Transwell?板（1.13 cm2, 0.4 ym孔径）中组 织培养物处理的聚碳酸酯滤器上。将细胞在37°C在5% C02的气氛中培养，并且每隔一天更 换培养基。转运实验在培养14-18天后进行。
[0300] 跨上皮转运 测量从供应室（顶侧）转运至接受室（基底侧）的GH化合物的量。
[0301] 在实验前，将E12细胞在上皮的两侧用转运缓冲液平衡60 min。然后去除缓冲液， 并且通过将测试溶液添加至供应室且将对应的转运缓冲液添加至接受室而起始实验。供应 样品（20 W)在实验的0 min和结束时获取。接受样品（200 W)定期（诸如每15 min) 获取。研宄通常在摇动板（30 rpm)上在37°C在5% C02-95% 02的气氛中进行。
[0302] 表观渗透率（Papp)被测量为相对于初始浓度和膜面积在一定期间内跨膜转移的 GH的量（通量八面积*初始浓度）。可以使用豚鼠抗hGH多克隆抗体作为捕捉剂，和生物 素化的hGH结合蛋白（人GH受体的可溶性部分）作为检测剂，通过夹心ELISA测定GH化 合物的浓度。测定检测限为0.2 nM.测定。
[0303] 可以使用闪烁计数器测量[3H]甘露醇（细胞旁路转运的标志物）的转运，以验证 上皮的完整性。
[0304] 在实验之前和实验过程中，监测细胞单层的跨上皮电阻（TEER)。TEER用连接至筷 针（Chopsticks)的EV0M?上皮伏欧表测量。
[0305] 实施例2 白蛋白结合剂的制备 4-(111-四唑-16-基-十六烷酰基氨磺酰基）丁酰基-(^6-丫6111-丫16111-(^6-#((：(0) CH2Br) Lys-〇H
化合物I 采用标准Fmoc-肽化学法在ABI433合成仪上，以ImM规模在固体支持物上合成化合 物 I。使用 Fmoc-〇EG-〇H 和 Fmoc-Glu-OtBu 保护的氨基酸，在 Fmoc-Lys (MTT) -Wang 树脂上 装配肽。将4-(16-lH-四唑-5-基-十六酰基氨磺酰基）丁酸与DCM/NMP中的DIC/NHS(2 当量）手动偶联过夜，TNBS测试显示反应完成。然后，树脂以穿流布置（flow through arrangement)用50 mL DCM/TFA/TIS/水（94:2:2:2)处理直到黄色消失，约20分钟，随后 用DIPEA/DMF洗涤并中和。溴乙酸（4 mM)/DCM/NMP (1:1)用1 mM HONSu和DIC的混合物 活化，过滤，将其添加至树脂，再添加1 mM DIPEA。1小时后，反应完成。树脂用80 mL TFA/ TIS/水（95:2. 5:2. 5)处理1小时。用N2流蒸发，通过添加Et20而沉淀，用Et20洗涤并干 燥。粗产物在制备型HPLC (2次运行）上纯化，用针对0. 1% TFA/水的30-80% 0. 1 TFA/ MeCN的梯度。收集级分，与约50% MeCN -起冻干，得到化合物I。
[0306] T0F-MS:质量 1272. 52 (M+1)。
[0307] 实施例3 白蛋白结合剂的制备： 以与上面实施例2中所述类似的方式，使用Fmoc-Lys (Mtt)-OH和Wang树脂制备以下 化合物。
[0308] 化合物II 1'0卩_]\^:质量 983.01 (]\1+1)。
[0309] 实施例4 白蛋白结合剂（化合物II)与hGH(Q84C Y143C L101C)的缀合 通过在环境温度下混合向310 ml 20 mM三乙醇胺，0.1 M NaCl，pH 8. 5中的4. 9 mg/ ml hGH(Q84C Y143C L101C)-半胱胺的溶液中添加387 mg TSPP (Tris(3-磺酸酯苯基）膦 水合物钠盐）。使反应运行两小时。
[0310] 将白蛋白结合剂化合物II溶解在20mM三乙醇胺，2 mM EDTA pH 8. 5中至10 mg/ml。将溶解的白蛋白结合物以3:1的比率添加至脱保护的hGH[Q84C Y143C L101C]。将 NaCl添加至溶液中以获得0. 4 M的NaCl的最终浓度。将反应在环境温度下运行2. 5小时， 随后放置在4摄氏度过夜，直到进行最后纯化，得到化合物GH-A3。
[0311] 实施例5 白蛋白结合剂（化合物I)与hGH(Q84C Y143C L101C)的缀合以与如实施例4中所述 类似的方式进行，得到化合物GH-A2。
[0312] 实施例6 缀合的化合物的GH-A2和GH-A3随后使用离子交换层析纯化，随后如渗滤进行缓冲液 交换。纯化还可通过使用以下技术（但不限于这些技术）来实现：离子交换层析法、疏水作 用层析法、亲和层析法、大小排阻层析法和本领域技术人员