超临界流体的气体或其 中溶解了活性成分的固体溶剂一起释放出该活性成分时，此种低温-低压条件是尤其有用 的，并且所以所得的颗粒尺寸分布变得宽并且平均颗粒尺寸变得过大。此外，当活性成分对 热敏感时，由于在制备纳米颗粒的程序期间的热，该低温-低压条件可以减少活性损失。另 外，因为在比常规压力条件低的压力条件下除去固体溶剂，所以高压设备是不需要的并因 此可以减少设备与操作的成本。
[0038] 当选择二元醇化合物作为固体溶剂时，可以将步骤（2)和（3)中的温度和压力分 别设置到10-40°C，优选15-30°C和50-400大气压，优选70-200大气压。此种温度和压力 条件可以防止二元醇化合物或该二元醇化合物及其它固体脂肪的混合物由于反应容器中 的高温而熔融的情形，因此引起混合物中均匀分散的活性成分，表面活性剂，防凝结剂等的 晶体生长。结果是，不可能以纳米级获得均匀的细颗粒。
[0039] 下文中，现将用更多细节逐步地说明本发明的纳米颗粒的制备方法。
[0040] 在根据本发明的制备纳米颗粒的方法的步骤（1)中，制备含一种或多种活性成分 和固体溶剂的混合物。现如下描述其细节。
[0041] 根据本发明的一个优选的实施方案，步骤（1)包括：将一种或多种活性成分、固体 溶剂和任选地一种或多种表面活性剂添加到反应容器中并均匀地将它们熔融混合。
[0042] 根据本发明的其它优选的实施方案、步骤（1)包括：将一种或多种活性成分、固体 溶剂和任选地一种或多种表面活性剂添加到反应容器中并均匀地将它们熔融混合；迅速地 将该混合物冷却以便固化；粉碎该固化的混合物；向粉碎的粉末中添加一种或多种表面活 性剂和/或一种或多种非表面活性剂型防凝结剂或其水溶液并将它们均匀地混合；和在室 温下干燥该混合产物。
[0043] 根据本发明的另一个优选的实施方案、步骤（1)包括：将一种或多种表面活性剂 和固体溶剂添加到反应容器中，并均匀地将它们熔融混合；迅速地将该混合物冷却以便固 化；粉碎该固化的混合物；向粉碎的粉末中添加一种或多种表面活性剂和/或一种或多种 非表面活性剂型防凝结剂连同一种或多种活性成分或它们的水溶液并将它们均匀地混合； 和在室温下干燥该混合产物。
[0044] 根据本发明的另一个优选的实施方案、步骤（1)包括：将一种或多种活性成分、 固体溶剂和任选地一种或多种表面活性剂添加到反应容器中，进一步添加超临界流体的气 体，然后通过加热将该混合物熔融混合。
[0045] 根据本发明的另一个优选的实施方案、步骤（1)包括：将一种或多种活性成分、固 体溶剂和任选地一种或多种表面活性剂添加到反应容器中，通过将超临界流体的气体添加 到该混合物中将该混合物加压，然后将该混合物熔融混合，和将该熔融混合物喷雾到大气 压。
[0046] 根据本发明的另一个优选的实施方案、步骤⑴包括：将一种或多种活性成分、固 体溶剂和任选地一种或多种表面活性剂添加到反应容器中，通过添加超临界流体的气体将 该混合物加压，然后将该混合物熔融混合，和通过将该熔融混合物喷雾到大气压将它粉碎； 向粉碎的混合物中添加一种或多种表面活性剂和/或一种或多种非表面活性剂型防凝结 剂或其水溶液并将它们均匀地混合；和在室温下干燥该混合物。
[0047] 根据本发明的另一个优选的实施方案、步骤（1)包括：将一种或多种活性成分、固 体溶剂和任选地一种或多种表面活性剂添加到反应容器中并均匀地将该混合物熔融混合； 向熔融的混合物中添加一种或多种表面活性剂和/或一种或多种非表面活性剂型防凝结 剂或其水溶液并将它们均匀地混合；和迅速地将该混合物冷却以便固化；和将该固化混合 物粉碎和干燥。
[0048] 根据本发明的另一个优选的实施方案、步骤（1)包括：将固体溶剂和任选地一种 或多种表面活性剂添加到反应容器中，并均匀地将该混合物熔融混合；向熔融的混合物中 添加一种或多种活性成分和/或一种或多种表面活性剂和/或一种或多种非表面活性剂型 防凝结剂或其水溶液并将它们均匀地混合；迅速地将该混合物冷却以便固化；和将该固化 混合物粉碎和干燥。
[0049] 根据本发明的一个优选的实施方案，将一种或多种活性成分和固体脂肪添加到反 应容器中，其中固体溶剂的量是〇. 1-1000重量份每1重量份活性成分。在此阶段，必要时， 可以任选地向反应容器中添加0. 001-10重量份表面活性剂或0. 001-10重量份低级醇，或 70-80wt %该醇和20-30wt %作为助溶剂的水的混合物溶液，或0. 001-10重量份表面活性 剂和0. 001-10重量份低级醇的混合物，或70-80wt %该醇和20-30wt %作为助溶剂的水的 混合物溶液，基于1重量份活性成分。此外，优选地，基于100重量份固体溶剂，可以添加 0. 01-50重量份一种或多种非表面活性剂型防凝结剂的水溶液，该防凝结剂选自单糖、多 糖、食用纤维、树胶和蛋白质。
[0050] 当在固体溶剂中，或在包含上述低级醇的固体溶剂中与活性成分一起溶解时，该 任选添加的表面活性剂应当具有对该固体溶剂相对较大的溶解度以形成均相溶液。此外， 取决于活性成分的性能和所得的纳米颗粒的用途或使用目的，可以选择不同的表面活性 剂。当所得的纳米颗粒最终以水分散体的形式使用时，优选选择具有高HLB数值的表面活 性剂，并且当目的是增加内部吸收速率时，优选选择具有相对较低HLB数值的表面活性剂。
[0051] 如上所述，将活性成分和固体溶剂添加到反应容器中并且当必须时，进一步将表 面活性剂或低级醇或70-80wt%该醇和20-30wt%作为助溶剂的水的混合物进一步加入该 反应容器中，然后随着加热将该反应容器中的混合物逐渐熔融。如果有必要的话，可以在活 性成分和固体溶剂明显熔融之后添加表面活性剂和助溶剂。
[0052] 当反应容器内部的温度上升时，固体溶剂变得熔融，并且活性成分和表面活性剂 等溶解在其中。提高温度直到形成均相溶液。优选从可能的点开始搅拌，因为它会使混合 物的溶液更均匀和减少工作时间。搅拌成为可能的点取决于用于该方法的活性成分，表面 活性剂和固体溶剂的具体种类，然而搅拌开始点的确定将容易地在工作场所由本领域技术 人员作出。
[0053] 根据本发明其它优选的实施方案，如以上所提及的那样，如下制备含一种或多种 活性成分和固体溶剂的混合物：将一种或多种活性成分、固体溶剂和任选地一种或多种表 面活性剂添加到反应容器中；将它们均匀地熔融混合在一起；迅速地将所得的混合物冷却 以便固化；粉碎该固化的混合物；向所得的粉末中添加一种或多种表面活性剂和/或一种 或多种非表面活性剂型防凝结剂或其水溶液，并将它们均匀地混合；和在室温下干燥所得 的混合物。在以上方法中，干燥工艺不特别限于某些方法，但它应当在所使用的固体溶剂的 熔点下面进行。在此使用的术语"固体溶剂的熔点"是指随着温度上升第一次观察到固体 溶剂的表面熔融时的温度。
[0054] 根据本发明的另一个优选实施方案，当活性成分是对温度敏感或溶于水的那些如 肽、蛋白质或多糖时，如下制备包含活性成分和固体溶剂的混合物：首先，将一种或多种表 面活性剂和固体溶剂添加到反应容器中，并均匀地将它们熔融混合；迅速地将该熔融混合 物冷却以便固化；粉碎该固化的混合物；然后向所得的粉末中添加活性成分连同一种或多 种表面活性剂和/或一种或多种非表面活性剂型防凝结剂或其水溶液，并将它们均匀地混 合；和在室温下干燥所得的混合物。在以上方法中，干燥工艺不特别限于某些方法，但它应 当在所使用的固体溶剂的熔点下面进行。
[0055] 在通过快速冷却使混合物固化中，优选迅速地降低熔融混合物的溶液温度到10°C 或更小的温度。当缓慢进行冷却时，可能发生活性成分的晶体生长，并且在这样的情况下， 很难达到活性成分的纳米颗粒并且所获得的颗粒很可能具有宽的颗粒分布。
[0056] 通常通过例如，干燥碾磨等碾磨由快速冷却获得的固体产物。碾磨的颗粒的尺寸 越小，即颗粒的表面积越大，在以后的工艺如脂肪脱除工艺中越有利。在碾磨之后的颗粒尺 寸优选为1〇〇微米或更小，但不限于其。
[0057] 根据本发明的另一个优选的实施方案，如下制备含一种或多种活性成分和固体溶 剂的混合物：将一种或多种活性成分、固体溶剂和任选地一种或多种表面活性剂添加到反 应容器中；进一步向该混合物中添加超临界流体的气体（例如，C02气体）以形成亚临界或 超临界条件，和然后通过加热熔融所得的混合物。
[0058] 根据本发明的另一个优选的实施方案，如下制备含一种或多种活性成分和