溶剂（乙醇：蓖麻油：水的体积 比为1:10:89)制成混悬液，配成所需的浓度；
[0043] 人参二醇组总皂苷（PDS)，上海中药创新研究中心，批号20070806,试验时配制方 式同20⑶-原人参二醇；地西泮，购自上海信谊药厂，批号110801 ;用CMC-Na配成0.1 mg/ ml ；
[0044] 间氯苯哌嗪，购自sigma，批号MKBK9966V ;实验时，用生理盐水配成0. 4mg/ml。
[0045] 3、动物分组、给药方式及给药剂量
[0046] 按体重将小鼠随机分组，每组8只，具体为：
[0047] 对照组：皮下注射生理盐水，0· 05ml/10g ;
[0048] mCPP组（即模型组）：皮下注射，剂量为2mg/kg ;
[0049] 地西泮组：灌胃给药，剂量为2mg/kg ;
[0050] 20 (S)-原人参二醇低剂量（L组）：腹腔注射，剂量为I. 5mg/kg ;20 (S)-原人参二 醇中剂量（M组）：腹腔注射，剂量为3mg/kg;20(S)-原人参二醇高剂量（H组）：腹腔注射， 剂量为7. 5mg/kg。
[0051] 人参二醇组总皂苷（I3DS)组同20 (S)-原人参二醇组。
[0052] 灌胃剂量为0. 2ml/10g，腹腔注射剂量为0. lml/10g，皮下注射剂量为 0. 05ml/10g。为保持刺激的一致性，每个小鼠都给与三个刺激：灌胃、腹腔注射和皮下注射。 小鼠都是在灌胃一小时以及腹腔注射半小时后进行高架十字迷宫检测，并在检测前20分 钟皮下注射mCPP进行造模，对照组则皮下注射生理盐水。
[0053] 4、实验方法：
[0054] 采用十字迷宫为工具，高架十字迷宫包括两个开臂，两个闭臂，中央有一开阔部。 各组小鼠检测前一天在高架十字迷宫上适应2分钟/小鼠。检测当天，皮下注射mCPP或者 相应溶剂20分钟后，小鼠置于一个60 X 60 X 35cm的黑盒子中，让其熟悉环境5分钟后，将 小鼠置于高架十字迷宫中央开阔部，头朝开臂。图像分析系统自动记录5分钟动物进入开 臂（亮区）的时间，距离，访问次数。每只小鼠测试完毕，用10%乙醇溶液擦拭迷宫清除动 物遗迹，用干布擦净后进行下一只小鼠的测试。
[0055] 5、统计处理：采用t检验进行P值计算。
[0056] 6、实验结果：
[0057] 6. 1对mCPP诱导焦虑模型小鼠高架十字迷宫小鼠行为学的影响：结果见表1
[0058] 表1 :对mCPP诱导焦虑模型小鼠高架十字迷宫行为学的影响
[0059]
[0061] 注：与mCPP模型组比，*p〈0. 05，**p〈0. 01(另外，表中的数据：以mCPP焦虑模型组 小鼠检测的时间，距离和访问次数的原始数据作为底数，设定为基数1，其他组别小鼠检测 的时间，距离和访问次数与mCPP组对应参数的原始数据相除，得到表格中的数据。）
[0062] 表1结果显示：
[0063] 与正常组小鼠相比，皮下注射mCPP造模能显著降低小鼠亮近端、亮远端和整个亮 区的访问时间、访问距离和访问次数，表明mCPP能诱导小鼠焦虑；
[0064] 与焦虑模型组小鼠相比，地西泮能显著逆转mCPP造模组小鼠焦虑的行为，L、M、H 剂量的20 (S)-原人参二醇也能明显逆转mCPP组模型小鼠焦虑行为，即地西泮和如上三个 剂量20(S)_原人参二醇能显著增加模型小鼠在亮近端、亮远端和整个亮区的访问时间、访 问距离和访问次数，且与模型组相比，具有显著性差异。
[0065] 人参二醇组总皂苷（H)S)具有一定的减轻mCPP组模型小鼠焦虑行为的作用趋势， 中剂量和高剂量组亮远端的访问次数增加具有统计学上的意义，但在其他的组别和访问时 间和访问距离上未见有统计学的差异。
[0066] 结果表明：20(S)_原人参二醇具有明显对抗小鼠焦虑的作用；人参二醇组总皂苷 (ros)具有一定的减轻模型小鼠焦虑行为的作用趋势，其作用不及2〇 (S)-原人参二醇。
[0067] 6. 2其他剂量对mCPP诱导焦虑模型小鼠高架十字迷宫小鼠行为学的影响：结果见 表2
[0068] 表2 :其他剂量20 (S)-原人参二醇对抗小鼠焦虑的作用的主要数据汇总：
[0070] 表 2 结果显不：0· 125mg/kg, 0· 25mg/kg, 0· 5mg/kg, 15mg/kg, 30mg/kg 与 60mg/kg 剂量的20 (S)-原人参二醇能明显逆转mCPP组模型小鼠焦虑行为，即如上剂量PH)能显著 增加模型小鼠在亮近端、亮远端和整个亮区的访问时间、访问距离和访问次数，且与模型组 相比，具有显著性差异。
[0071] 结果表明：20⑶-原人参二醇具有明显对抗小鼠焦虑的作用。
[0072] 实验例2 :以明暗箱检测20 (S)-原人参二醇对抗间氯苯哌嗪（mCPP)诱导的小鼠 焦虑模型的作用
[0073] 1、实验动物：同实施例1。
[0074] 2、实验药物及配制：同实施例1。
[0075] 3、动物分组、给药方式及给药剂量：同实施例1。
[0076] 4、实验方法：
[0077] 明暗箱包括一个明箱一个暗箱，中间有过渡空间。各组小鼠检测前一天在明暗箱 上适应2分钟/小鼠。检测当天，皮下注射mCPP或者相应溶剂20分钟后，小鼠置于明暗箱 的明箱区内，软件分析系统自动记录5分钟内动物进入明区和暗区的时间，访问次数。
[0078] 5、统计处理：采用t检验进行P值计算。
[0079] 6、实验结果：
[0080] 6. 1对mCPP造模小鼠明暗箱行为学的影响：结果见表3
[0081] 表3 :对mCPP造模小鼠明暗箱行为学的影响
[0083] 注：与 mCPP 模型组比，*ρ〈0· 05,林p〈0. 01
[0084] 表3结果显示：mCPP在2mg/kg剂量下，对昆明种小鼠在明箱的访问次数和明箱累 计访问时间上有减少的作用，且与正常组比较有显著性差异（P〈〇. 01)。
[0085] 2mg/kg剂量的地西泮能显著增加 mCPP诱导的焦虑模型昆明种小鼠在明箱的访问 次数和明箱累计访问时间，且与模型组相比有显著性差异。
[0086] 低、中剂量、高剂量20 (S)-原人参二醇有增加 mCPP诱导的焦虑模型小鼠在明箱的 访问次数和明箱访问时间的作用，且与模型组相比有显著性差异。
[0087] 人参二醇组总皂苷（ros)对昆明种小鼠在明箱的访问次数和明箱累计访问时间 上不具有明显的作用，不具有明显减轻mCPP造模小鼠明暗箱焦虑行为的作用。
[0088] 结果表明：20(S)_原人参二醇具有明显对抗小鼠焦虑的作用；人参二醇组总皂苷 (ros)减轻模型小鼠焦虑行为的作用不及2〇(s)-原人参二醇。
[0089] 6. 2其他剂量20 (S)-原人参二醇对抗小鼠焦虑的作用的主要数据汇总：见表4
[0090] 表4 :其他剂量对mCPP造模小鼠明暗箱行为学的影响
[0092] 表 4 结果显不：0· 125mg/kg, 0· 25mg/kg，0· 5mg/kg，15mg/kg，30mg/kg 及 60mg/kg 剂量的20 (S)-原人参二醇有增加 mCPP诱导的焦虑模型小鼠在明箱的访问次数和明箱访问 时间的作用，且与模型组相比有显著性差异。
[0093] 结果表明：20(S)_原人参二醇具有明显对抗小鼠焦虑的作用。
[0094] 虽然，上文中已经用一般性说明、【具体实施方式】及试验，对本发明作了详尽的描 述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见 的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的 范围。
【主权项】
1. 20 (S)-原人参二醇在制备抗焦虑药物中的应用。2. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述焦虑为焦虑症，包括广泛性焦虑症、 分离焦虑、选择性缄默症、惊恐障碍、社交焦虑症、场所恐惧症或特殊恐惧症。3. 根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为含有20 (S)-原人参二醇的制 剂，所述制剂由20(S)_原人参二醇单独制成或与药学上可接受的载体组成。4. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述制剂为注射剂、片剂、胶囊剂、口服 液、气雾剂、贴剂、颗粒剂、舌下片或滴丸剂。5. 根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述药学上可接受的载体是指药学领域 常规的药物载体，选自填充剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、增溶剂、助悬剂、润湿剂、色素、香 精、溶剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种。6. 根据权利要求1-5任一项所述的应用，其特征在于，20 (S)-原人参二醇的拟临床用 量为 l_500mg。
【专利摘要】本发明涉及20(S)-原人参二醇的新用途，具体涉及20(S)-原人参二醇在制备抗焦虑药物中的应用。实验结果显示：20(S)-原人参二醇可以治疗焦虑症，效果优于现有技术。
【IPC分类】A61K31/575, A61P25/22
【公开号】CN104997791
【申请号】CN201410167000
【发明人】许长江, 张文静, 韩琪园, 虞沁澜, 汪沁琳, 杨子荣, 惠永正
【申请人】上海中药创新研究中心
【公开日】2015年10月28日
【申请日】2014年4月24日