甘草次酸在制备抗辐射产品中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及医药、食品、饮料等技术领域，具体地说是涉及甘草次酸的新用途，即 甘草次酸在制备抗辐射产品中的新应用。
【背景技术】
[0002] 随着核技术广泛应用于军事、科技、医疗和生产中，人们与各种射线接触的机会日 益增多，遭受辐射损伤的可能性也越来越大。辐射作用于生物体时，引起电离并产生自由 基，进而发生一系列的生物化学反应，改变细胞膜的通透性，攻击DNA、RNA和蛋白质大分 子，导致细胞丧失正常的功能。人体中的淋巴细胞对电离辐射最为敏感，其他依次为性腺细 胞、增殖的骨髓细胞、肠上皮细胞、表皮细胞、肝细胞等。因此，辐射对人体的损伤主要表现 在免疫系统、造血系统和生殖系统。对抗辐射药物的研制虽然经过几十年的不懈努力，发现 了一些有效药物，但现在可使用的抗辐射药物仍较少，包括雌激素如尼尔雌醇和含硫化合 物氨磷汀，但副作用较多。含硫辐射防护剂表现出了较好的预防作用，但其毒副作用明显， 只有在达到中毒剂量时才显示出抗福射活性。
[0003] 天然产物含有结构多样的化学成分，其中许多具有免疫调节、抗氧化和清除自由 基等作用，能够通过多靶点减缓辐射对人体的损伤，并且具有毒副作用小的优点，成为辐射 防护药物研究的热点。天然产物中的活性成分黄酮类、多糖类和皂苷类等对受到辐射的动 物和人细胞具有良好的防护作用。（参考文献：赵璐等，天然活性成分抗辐射作用的研究进 展，药学服务与研究，2012; 12 (2) :86-89.)
[0004] 甘草（Glycyrrhiza)是多年生草本植物，属豆科甘草属，以根及根茎入药，是我 国传统中草药，性平，味甘，具有补脾益气、清热解毒、祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的功 效；有抗氧化、调节机体免疫力等多种药理学活性。甘草中所含主要药理学活性物质是甘 草酸及其盐（即甘草甜素），以及在体内的水解活性成分甘草次酸和甘草黄酮等成分。甘 草次酸（817〇71'1'1161:;[11；^3(^(1，64)，属五环三砲类化合物，别名0-甘草亭酸 ；30-轻 基-11-氧-12-齐墩果烯-30酸，相对分子量为470. 68,具有抗炎、抗组胺、抗肿瘤和降血糖 等多种生物学作用，其化学结构式如式（I )所示：
[0005]
[0006] 申键等报道了甘草醇总提取物不同剂量照射后灌胃给药对不同辐射剂量的小 鼠均具有明显的保护作用（申键，等，甘草提取物抗辐射效应的研究，内蒙古大学学报， 2015,46(1) :75-80.)。王亚南等报道了甘草酸单铵盐对微波辐射造成的机体功能失衡 有一定的保护作用，其机制可能与清除自由基、提高机体抗氧化能力有关（王亚南，等， 甘草酸单铵盐对微波辐射大鼠血液损伤防护作用的实验研究，世界中西医结合杂志， 2013, 8(5) :445-447)。
[0007] 目前尚无文献报道甘草次酸与辐射防护相关。
【发明内容】
[0008] 本发明的目的在于提供甘草次酸的新用途，具体是甘草次酸在制备抗辐射产品中 的应用。
[0009] 本发明通过大量筛选抗辐射作用的植物提取物和单体过程中，发现了甘草次酸具 有抗辐射作用，并且发现甘草次酸的抗辐射作用强于甘草醇总提取物、甘草水总提取物、甘 草酸（甘草皂苷）和甘草黄酮的作用。本发明显示将甘草次酸提前给予将要接受辐射的细 胞或动物，可以提高细胞存活率和减少细胞凋亡，增加小鼠的生存率和改善辐射小鼠小肠 组织损伤，表明甘草次酸具有抗辐射损伤作用。
[0010] 本发明提供了甘草次酸在制备抗辐射产品中的应用。
[0011] 本发明所述的抗辐射产品，为预防或治疗辐射损伤的药物、保健食品、保健饮料 等。
[0012] 本发明所述的药物，为甘草次酸作为唯一活性成份或包含甘草次酸的药物组合 物。
[0013] 本发明所述的药物中，甘草次酸的含量为>50% wt%，最优为多98% wt%。
[0014] 本发明所述的药物中，甘草次酸按常规药剂学可以制成各种剂型，所述的剂型包 括片剂、胶囊剂、颗粒剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、膏剂、贴剂或注射剂等中的一种或 多种，采取口服、外用、注射（包括静脉注射、静脉滴注、肌肉注射或皮下注射等中的一种或 多种）等中的一种或多种给药途径进行辐射及其直接相关疾病的预防、保护或治疗。
[0015] 本发明所述的辐射，为核辐射、电离辐射等。
[0016] 本发明经细胞实验、动物实验证实，甘草次酸可以提高γ射线辐射后细胞和动物 的存活率，减少γ射线引起的细胞凋亡，改善辐射小鼠小肠组织的病变，说明甘草次酸具 有抗辐射保护作用。
[0017] 本发明提供了一种新的天然产物能够通过多靶点减缓辐射对人体的损伤，并且具 有毒副作用小的优点；甘草次酸将成为一种新型的辐射防护药物。本发明也为预防或治疗 辐射损伤提供了新的手段。
【附图说明】
[0018] 图1.甘草次酸对6°Co辐射C57小鼠后生存率的影响。
[0019] 图2.甘草次酸对6°Co辐射C57小鼠后肠道损伤的病理组织学观察，其中A为OGy， B为4Gy，C为4Gy+甘草次酸。
【具体实施方式】
[0020] 现结合实施例和附图，对本发明作详细描述，但本发明的实施不仅限于此。
[0021] 本发明所用试剂和原料均市售可得或可按文献方法制备。
[0022] 除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
[0023] 实施例1.甘草次酸对辐射引起细胞损伤的保护作用
[0024] I. 1实验材料
[0025] 甘草次酸，购自大连美仑生物技术有限公司。
[0026] 人脐静脉内皮细胞株（HUVEC)购自中科院上海细胞库。
[0027] 1. 2实验方法
[0028] I. 2. IMTT法检测甘草次酸对辐射所致细胞损伤的保护作用
[0029] 实验分为对照组（未接受辐射、未给药）、模型组（接受辐射、未给药）、给药组（接 受辐射、给药）。
[0030] 取对数生长期的HUVEC细胞以1.0 X IO5Ail的密度接种于96孔板中，每孔100 μ L， 接种24h后待细胞全部贴壁，换成无血清的DMEM培养基继续孵育8h进行平衡，平衡后将各 孔中DMEM培养基移除，对照组和模型组换成正常细胞培养液、给药组加入100 μ L含有终浓 度10 μ M的化合物（甘草次酸、甘草酸、甘草黄酮）的细胞培养液，共同孵育24h后，一次性 给予20Gy6°C〇- γ射线辐射，继续培养24h，MTT法检测细胞存活率。
[0031] 1. 2. 2流式细胞术检测细胞凋亡
[0032] 取对数生长期的HUVEC细胞以1.0 XlOVml的密度接种于6孔板中，每孔2ml，24h 细胞贴壁生长后，平衡8h，移除DMEM，给药组加入2ml含有终浓度10 μ M甘草次酸的细胞培 养液，共同孵育24h后，一次性给予20Gy6°C〇- γ射线辐射，继续培养24h后，消化细胞并离 心收集，按Annexin V -PI凋