[0072] 根据一个实施方式，以lmg/cm2-5mg/cm2、优选约2mg/cm2的比例将包含如下物质 的组合物施用至皮肤：
[0073]-相对于组合物的重量，0.005wt% -0.02wt%、优选 0.007wt% _0.015wt%、更优 选0. 009wt% -0.Ollwt%的褐藻掌状海带提取物；
[0074]-相对于组合物的重量，0?OOlwt% _0? 05wt%、优选0? 003wt% _0?Olwt%、更优选 0? 004wt% -〇? 006wt%的酵母水解物；
[0075]-相对于组合物的重量，0? 05wt% _0? 5wt%、优选0?lwt% _0? 3wt%、更优选 0. 15wt% -〇. 25wt%的抗坏血酸或抗坏血酸的一种酯。
[0076] 最后，本发明的第三主题涉及褐藻掌状海带提取物、酵母水解物和抗坏血酸或抗 坏血酸的一种酯的组合在如下方面的用途：i)增高I型胶原或其前体（I型前胶原）的合 成；并同时，ii)具有选自如下的至少一种其它作用：个体皮肤中的整合素的表达、弹性蛋 白的合成和GAG的表达。
[0077] 本发明还涉及包含如下物质的化妆品组合物在治疗或预防皮肤老化（特别是皮 肤真皮的老化，优选年龄超过30岁的个体中的皮肤老化）方面的用途：化妆学上可接受的 赋形剂，以及褐藻掌状海带提取物、酵母提取物和抗坏血酸或抗坏血酸的一种酯的组合。
[0078] 特别是，本发明使得能够减少皱纹和细纹的密集度并恢复构成真皮的细胞外基质 的结构。通过恢复胶原纤维网，为皮肤表面带来紧致的效果。可通过面部轮廓觉察到该紧 致效果。
【具体实施方式】
[0079] 通过如下实施例，对本发明进行更详细的描述。
[0080] 实施例1 :针对成纤维细胞的测试
[0081] 通过正常的人成纤维细胞（NHF)研究本发明的由提取物构成的组合对于I型前胶 原合成的影响。前胶原是胶原的前体形式，被分泌到细胞外基质中并在该处切掉末端从而 生成胶原亚基。这些胶原分子的组合将会随后生成胶原纤维。
[0082] 材料和方法
[0083] 1?细胞模型
[0084] _类型：正常的人成纤维细胞（NHF，捐献者年龄：37岁），通过在培养中传代而老 化（第20次传代）。
[0085] -培养条件：37°C，5%C02。
[0086] -培养基：（Invitrogen21090-22)，补充有 2mML-谷氨酰胺、50UI/ml青霉 素-50μg/ml链霉素、10%FCS(BiowestS1810)。
[0087] -测试培养基：处于胎牛血清（FCS)中的1 %培养基。
[0088] 以下表中指明的浓度将活性剂溶于培养基中。
[0089]
[0090] 2?培养和处理
[0091] 通过ELISA技术由老化的成纤维细胞的培养物上清液对这些细胞的I型前胶原合 成进行评价。
[0092] 以7500个细胞/孔的比率，将NHF在96孔微板中培养24小时。在80 %汇合时， 用含有待测活性剂或者参照物的测试培养基替换培养基。将细胞孵育72小时。随后，对培 养物上清液进行回收，并储存于-20°C下等待测定。针对细胞层，实施对总蛋白（BCA)的测 定。
[0093] 利用ELISA试剂盒（Takara)对I型前胶原进行测定。
[0094]I型前胶原的量以ng/mg蛋白计。
[0095] 结果
[0096] 在各实验中，利用Student检验（未配对系列）对一系列的对照值和处理值进行 比较。对于P〈〇. 05的值而言，差异显著。
[0097] 1.单独的活性剂的效果
[0098] 单独测试的各活性剂所获得的结果在下表中示出。
[0099]
[0100]S=显著
[0101] 这些结果在下文用于：相对于由各活性剂单独获得的值计算出的期望的理论效 果，对这些活性剂中的两种或三种的组合的效果进行比较。
[0102] 2.两种活性剂（包括一种基于酵母提取物的活性剂）的组合的效果
[0103] 下表汇集了活性剂与酵母提取物的不同组合所获得的结果。
[0104]
[0105] 当将上述各组合获得的结果与由上述部分1中获得的值计算出的期望的理论效 果进行比较时，应注意的是，基于酵母提取物的组合并未提供任何可测得的协同效果。组合 所测得的活性均小于计算的活性。
[0106]
[0107] 3.两种活性剂（包括一种基于抗坏血酸的活性剂）的组合的效果
[0108] 下表中示出了基于抗坏血酸-2-葡糖苷的不同组合所获得的结果。
[0109]
[0110] 对于所述三种组合中的两种，抗坏血酸-2-葡糖苷非常显著地加强了I型前胶原 的合成。下表的结果还证实了，酵母提取物看起来不是用于刺激I型前胶原合成的组合（在 该例子中与抗坏血酸组合）中的良好候选物。
[0111]
[0112] 4.三种活性剂（包括一种基于抗坏血酸的活性剂和一种基于酵母提取物的活性 剂）的组合的效果
[0113] 下表中汇集了三种活性剂的这些不同组合所获得的结果。
[0114]
[0115] 下面，将所述三种活性剂的组合所测得的活性与由各活性剂分别获取的活性计算 出的理论活性进行比较。
[0116]
[0117]
[0118] 对于该组合，发现测得的活性略低于由在前测试中计算的期望活性。
[0119] 未观察到此类组合对皮肤老化进行处理时存在协同能力。
[0120]
[0121]
[0122] 该组合对I型前胶原的合成表现出协问效应。这是由十，友现在包含褐藻掌状海 带提取物、酵母提取物和抗坏血酸的组合的情况下，测得的活性非常显著地大于期望值。
[0123] 另外，非常出乎预料地发现，在本发明的组合的情况下，与在前的组合相比，未测 量到与酵母提取物的存在相关的负面效果，与此相反，在I型前胶原的合成方面测量到的 积极效果远大于之前测试的所有组合的测量效果或计算效果。
[0124] 因此，该组合作为化妆品组合物的形式，在抵御皮肤老化迹象的出现方面特别有 益。
[0125] 实施例2 :针对在存活条件下维持的衰老皮肤模型的测试
[0126] 本研究的目的在于，探索化妆品制剂对于离体的人皮肤外植体的表皮结构和真皮 结构的抗老化活性。
[0127] 通过使葡萄糖胺聚糖（或GAG)可视化，对I型胶原进行免疫标记，对弹性蛋白进 行免疫标记并对整合素0-1进行免疫标记，对该活性进行评价。
[0128] 由针对年龄为50岁的女士的腹部整形外科手术制备直径为10mm的外植体。在 37°C下于富集有5%C02的潮湿气氛中，将外植体在存活条件下置于BEM(BI〇-EC外植体培 养基）培养基中。
[0129] 研究的条件：
[0130] 对本发明的不同的化妆品组合物和比较组合物进行测试。本发明的化妆品组合物 包含本发明的组合，所述组合由褐藻掌状海带提取物、酵母提取物和抗坏血酸酯构成。
[0131] 因此，各化妆品组合物包含：
[0132] -以干重计〇? 01 %的Seanergilium?BG/BASF(掌状海带提取物）；
[0133] -以干重计