一种用于预防和治疗阿尔茨海默病的中药提取物及其应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于医药用途领域，具体涉及一种用于预防和治疗阿尔茨海默病的中药提 取物及其应用。
【背景技术】
[0002] 阿尔茨海默病（Alzheimer'sDisease，简称AD，又称老年性痴呆），是最为常 见的神经退行性疾病，也是至今为止造成痴呆主要原因。在所有的痴呆病人中，有高达 50%-60%为AD。AD已经成为一个重要的公共健康问题。有数据表明，在2001年全球拥有 2400万AD患者，随着人类寿命的增加，患者人数预计会每20年翻一番，至2040年，全球将 有8100万AD患者，这将给人类社会带来巨大的负担。因此，开发预防和治疗阿尔茨海默病、 改善阿尔茨海默病认知功能障碍的药物成为全球各国医疗工作者的研究重点，受到中西方 医学界的高度重视。
[0003] 目前，治疗AD的药物主要为乙酰胆碱酯酶（AchE)抑制剂、抗免疫炎症、钙离子拮 抗剂、抗氧化剂等药物，美国食品药品管理局已批准上市的药物如多奈哌齐、加兰他敏、尼 莫地平、盐酸美金刚等，这些药物只能暂时缓解患者认识功能减退，但不能延缓疾病发展， 而且上述有些药物具有严重的肝、肾毒性等不良反应，有些药物价格昂贵，患者及其家属难 以承受，所以仍需要开发良好疗效，毒副作用小，且价格适宜的新药物。近年来，国内外专家 学者开始关注中药与天然药物，并尝试进行治疗阿尔茨海默病的研究。
[0004]骨碎补为常用中药，始载于唐《本草拾遗》，味苦，性温，归肝、肾经，具有疗伤止痛、 补肾强骨之功效，主治跌仆闪挫、筋骨折伤、肾虚腰痛、筋骨痿软、耳鸣耳聋、牙齿松动等。中 医学认为肾气虚衰，致髓海不足，脑髓空虚而使脑组织萎缩、功能减退，而致呆痴，故治疗AD 时，补肾填精益髓是治疗之根本。骨碎补虽为补肾中药，但是关于骨碎补用于治疗AD却鲜 有报道。本发明以骨补脂为原料，发现了一种具有防治AD作用的中药提取物，疗效明显优 于骨碎补水提物，并且以药效关联的类型成分及指标性成分为综合考量，建立了稳定可靠、 适合实际生产的制备工艺和科学全面的质量控制方法，有利于进一步创新药物的研发。
【发明内容】
[0005]无论预防阿尔茨海默病（Alzheimer'sDisease，简称AD，又称老年性痴呆）的发 病或治疗已发病的AD患者，都需要长期服药，所以在保证疗效的基础上，应尽量减少用药 剂量，改进药物剂型，这就需要疗效更为优越的中药提取物的出现。为了解决现有技术的缺 陷，本发明的目的之一在于提供一种疗效优越、毒副作用小且价格适宜的用于预防和治疗 AD的中药提取物。
[0006]本发明的目的之二在于提供该提取物的制备方法。
[0007]本发明的目的之三在于提供一种用于预防和治疗阿尔茨海默病的胶囊。
[0008]本发明的目的之四在于提供一种用于预防和治疗阿尔茨海默病的片剂。
[0009] 本发明的目的之五在于提供一种用于预防和治疗阿尔茨海默病的颗粒剂。
[0010] 本发明的目的之六在于提供上述中药提取物在制备预防和治疗阿尔茨海默病保 健食品或药物制剂中的应用。
[0011] 为了实现上述目的，本发明采取下列技术方案：
[0012] 本发明提供一种用于预防和治疗AD的中药提取物的制备方法，所述制备方法如 下：
[0013] (1)原料粉碎：选取骨碎补干燥药材，粉碎成粗粉；
[0014] (2)提取：使用提取溶剂对步骤（1)获得的粗粉进行提取；具体操作为：使用常规 中药提取方法对步骤（1)获得的粗粉进行提取，提取次数为1-3次，每次提取溶剂用量为药 材质量的2-10倍，浸泡过夜，每次提取0. 5-2h，过滤，合并滤液，减压浓缩得浸膏；
[0015] (3)精制：利用液-液有机溶剂萃取法或大孔吸附树脂柱层析法对步骤⑵获得 的浸膏进行精制；
[0016] 其中，使用大孔吸附树脂柱层析法精制的过程如下：首先将步骤（2)中所得的所 述浸膏分散溶解于水中，使浸膏水溶液浓度为〇. 01-lg/mL;然后将浓度为0. 01-lg/mL的浸 膏水溶液通过大孔吸附树脂，吸附流速为3-9BV/h，树脂柱径高比为1 :3-1 :20,上样量以浸 膏量与树脂量之比计算为1 :1〇,上样液浓度为〇. 01-lg/mL，水或者0-5%乙醇洗脱1-3倍 树脂体积进行除杂，除杂流速为3-9BV/h，50-95 %乙醇洗脱3-7倍树脂体积，洗脱流速为 3-9BV/h，收集乙醇洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得本发明的中药提取物；
[0017] 使用液_液有机溶剂萃取法精制的过程如下：首先将步骤（2)中所得的所述浸膏 分散溶解于水中，使浸膏水溶液浓度为〇. 01-lg/mL;然后将浓度为0. 01-lg/mL的浸膏水 溶液与中等极性有机溶剂充分混合萃取，溶液_溶剂体积比为〇. 5 :1-5 :1，静置分层后，收 集有机溶剂层，萃取1-3次，收集有机溶剂层，回收溶剂，减压干燥，即得本发明的中药提取 物；
[0018] 本发明的所述中药提取物中的总黄酮含量为20-90%，所述中药提取物中的新北 美圣草苷含量为2-20%。
[0019] 优选地，本发明的所述中药提取物中的总黄酮含量为40-80%。
[0020] 本发明所述的常规中药提取方法包括但不限于冷浸法提取、热浸法提取、热提取 法、热回流提取法、渗漉法、热提取法、碱提酸沉法、超声波法、微波萃取法、酶解法。
[0021] 进一步，本发明使用的提取试剂包括但不限于水、醇类、或其他有机溶剂。在本发 明的具体实施方案中，使用0-100%的乙醇进行提取。
[0022] 进一步，本发明使用的所述大孔吸附树脂为非极性、弱极性、中等极性大孔吸附树 脂中的任意一种。优选地，本发明的所述大孔吸附树脂为非极性大孔吸附树脂。非极性大 孔吸附树脂包括但不限于D-101型、AB-8型。
[0023] 可选择地，使用液-液有机溶剂萃取法精制时，可以先用非极性有机溶剂除杂质， 具体步骤为：将步骤（2)中所得的浸膏分散溶解于水中，使浸膏水溶液浓度为0. 01-lg/mL; 然后将浓度为0. 01-lg/mL的浸膏水溶液与非极性有机溶剂充分混合萃取，溶液-溶剂体积 比为0. 5 :1-5 :1，静置分层后，除去有机溶剂层，萃取1-3次，剩余水溶液层再使用中等极性 有机溶剂进彳丁萃取精制。
[0024] 进一步，上述除杂质步骤中使用的非极性有机溶剂包括但不限于二氯甲烷、石油 醚。
[0025]进一步，上述除杂质步骤中使用的中等极性有机溶剂包括但不限于正丁醇。
[0026]在本发明的具体实施方案中，本发明的中药提取物的制备方法如下：取骨碎补干 燥药材5000g，用20L60%乙醇浸泡过夜，加热回流提取2h，过滤，收集滤液，药渣再用10L 60 %乙醇提取两次，合并滤液，减压浓缩得得到相对密度为1. 15浸膏；将浸膏分散溶解于 水中，使浸膏水溶液浓度为lg/mL，上样于AB-8型大孔吸附树脂柱中，上样量以浸膏量与 树脂量之比计算为1 :1〇,吸附流速为3BV/h，静态吸附30min，以3倍树脂体积的水进行除 杂，除杂流速为5BV/h，然后以5倍树脂体积的75%乙醇洗脱，洗脱流速为5BV/h，收集乙醇 洗脱液，回收溶剂，减压干燥，即得所需的中药提取物；所述中药提取物中的总黄酮含量为 71. 38%、所述中药提取物中的新北美圣草苷含量为16. 41 %。
[0027]在本发明的具体实施方案中，本发明的中药提取物的制备方法如下：取骨碎补干 燥药材5000g，用20L60%乙醇浸泡过夜，加热回流提取2h，过滤，收集滤液，药渣再用10L 60 %乙醇提取两次，合并滤液，减压浓缩得得到相对密度为1. 15浸膏；将浸膏分散溶解于 水中，使水溶液浓度为lg/mL，与等体积石油醚充分混合萃取，静置分层后，除去有机溶剂 层，萃取3次，剩余水溶液层再与等体积正丁醇充分混合萃取，静置分层后，收集有机溶剂 层，萃取3次，收集有机溶剂层，回收溶剂，减压干燥，即得所需的中药提取物；所述中药提 取物中的总黄酮含量为63. 29 %，所述中药提取物中的新北美圣草苷含量为14. 27 %。
[0028]本发明的黄酮类物质的纯化和分离除了上面提到的液-液有机溶剂萃取法、大孔 吸附树脂柱层析法之外，还可以使用其他色谱方法，如硅胶吸附柱色谱法、聚酰胺吸附色谱 法。
[0029]本发明还提供了经过上述制备方法制备的中药提取物。
[0030]本发明的中药提取物也可经化学合成或结构修饰，生物合成或生物转化等途径获 得。
[0031]本发明的中