] 如本文所用，术语"药学上可接受的载体"指用于治疗剂给药的载体，包括各种 赋形剂和稀释剂。该术语指运样一些药剂载体：它们本身并不是必要的活性成分，且施用 后没有过分的毒性。合适的载体是本领域普通技术人员所熟知的。在《雷明顿药物科学》 巧emington's Pharmaceutical Sciences，Mack 化b. Co.，N.J. 1991)中可找到关于药学上 可接受的赋形剂的充分讨论。
[0184] 本发明的药物剂型包括：固体制剂、液体制剂或注射剂，较佳地为注射剂。
[0185] 本发明药物的施用对象为哺乳动物，优选人类。 阳186] 优选地，每天一次或多次施用本发明的药物或组合物，例如1、2、3、4、5或6次。其 中给药途径包括但并不限于：口服给药，注射给药，腔内给药，透皮给药；优选的注射给药 包括：静脉注射，肌肉注射，皮下注射，腔内注射，烦内注射。在施用本发明的药物或组合物 时，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，运些都是在熟练医师技能范围之内 的。本发明组合物的安全有效量通常至少约85毫克/千克体重/天，而且在大多数情况下 不超过约115毫克/千克体重/天。较佳地的剂量是约100毫克/千克体重/天。
[0187] 本发明还提供了一种治疗癌症的方法，所述方法包括步骤：给予需要的对象施用 安全有效量的所述的组合物或所述的药物。 阳18引与现有技术相比，本发明具有W下主要优点：
[0189] (1)经所述祀分子修饰的纳米载体在粒径高达200nm时仍可有效跨越血脑屏障进 入脑部，同时还可W实现与脑肿瘤细胞表面的神经肤受体的高特异性结合，进而实现对脑 肿瘤细胞的强有力的祀向作用；
[0190] (2)所述组合物在所述祀分子的作用下可有效跨越血脑屏障进入脑部，同时可高 特异性地与脑肿瘤细胞结合，进而显著提高脑肿瘤细胞内的抗肿瘤药物的浓度，实现对脑 肿瘤细胞的强有力的杀灭作用； 阳191] (3)所述复合物或所述组合物对正常组织或细胞几乎无毒副作用； 阳192] (4)所述复合物或所述组合物在化Cl水溶液、PBS水溶液或血清中具有良好的 分散性与稳定性，无沉淀或团聚现象发生，极大地有利于临床上脑肿瘤无创性的给药与治 疗；
[0193] (5)使用所述复合物或所述组合物制备的药物治疗脑肿瘤的方法具有无创、可高 效抑制脑肿瘤细胞的生长、成本低等优点；
[0194] (6)由于多肤类受体在肿瘤细胞上表达密度较高，通过对其受体亚型（如Yi或Y 2) 进行祀向，可将抗癌药物高效主动地送至肿瘤细胞，进而可显著提高药物利用率并降低药 物的毒副作用。
[0195] 下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，运些实施例仅用于说明本发明 而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条 件或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。 阳196] 除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意 义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文 中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
[0197] 通用测试方法 阳19引透射电镜（TEM)分析
[0199] 采用透射电镜对组合物的微观形貌进行分析，具体操作如下：将1 y L稀释后的组 合物分散至碳膜上，室溫下自然惊干。在200kV下，采用高分辨透射电镜巧化-2100(日本） 进行拍摄。 阳200] 粒径值L巧分析与分散性（PDI)分析 阳201] 采用动态光散射纳米粒度仪对组合物的粒径分布和分散性进行分析，具体操作如 下：将ImL稀释后的组合物溶液放入纳米粒子仪Nano-ZS(英国）中，在散射角173°时，测 定纳米粒子的粒径和分散性。
[0202] 细胞毒性试验（M1T实验）/细胞活性测试 阳203] 1.用含10%胎小牛血清得培养液配成单个细胞悬液，W每孔1. OX IO5个细胞接 种到96孔板，每孔体积150 y L。
[0204] 2.置于37 °C细胞培养箱内，培养2地。 阳205] 3.吸弃孔内培养上清液，加入含有TXT的新鲜培养液200 y L或含有相同浓度TXT 的组合物 NPY-LPHNP-TXT 溶液 200 y L。 阳206] 4.置于37°C细胞培养箱内，培养4h后，吸弃孔内的上清培养液，替换为不含任何 药物或纳米粒子组合物的新鲜培养液，继续培养4地。
[0207] 5.每孔加 MTT溶液巧mg/ml，PBS配制，抑=7. 4) 10 y L，置于37°C细胞培养箱内， 继续解育地，终止培养，吸弃孔内培养上清液。 阳208] 6.每孔加150 y L DMS0,振荡lOmin，使结晶物充分融解。 阳209] 7.选择550皿波长，在酶联免疫监测仪上测定并记录各孔的光吸收值。
[0210] 体外血脑屏障透过率实验 阳211] 1.将人脑微血管细胞HBMEC W 5X IO4个/cm2接种在transwell插件的垂直培养 系统上，用细胞电阻仪检测，细胞电阻率大于200 Q cm2时用于透过率实验，上侧供池为血管 侦U，下侧受池为脑侧。
[0212] 2.将待测定的样品加入上侧的供池后，在10、20、30、40、50和60分钟时间点从下 侧受池中取样，在每个时间点，根据所取样品的实测浓度和样品池中液体的量计算清除体 积。
[0213] 3.根据清除体积回归直线计算透过率。
[0214] 实施例1制备组合物NPY-LPHNP-TXT 阳21引 （1)包埋TXT的脂聚混合型（LPHNP)纳米载体的制备 阳216] 分别配制质量浓度为5mg/ml的PLGA聚合物的丙酬溶液IOml和质量浓度为 0. 15mg/ml的卵憐脂/0. 24mg/ml的DS阳-PEG (摩尔比：8. 5/1. 5)的乙醇溶液50ml，将该卵 憐脂/DSPE-PEG的乙醇溶液加热至65°C使卵憐脂/DSPE-PEG溶解。将PLGA的丙酬溶液滴 加入预热好的卵憐脂/DS阳-PEG的乙醇溶液中，室溫下揽拌化，用超滤离屯、管（IOKDa)离屯、 洗涂3次去除残留的有机溶剂和未反应物，得到聚乳酸-径基乙酸（PLGA)、卵憐脂和二硬脂 酷基憐脂酷乙醇胺-聚乙二醇物值SPE-PEG)复合的LPHNP纳米载体。将抗肿瘤药物TXT 溶解在PLGA丙酬溶液中，采用上述同样的方法，即可制得包埋有抗肿瘤药物TXT的纳米载 体 LPHNP-TXT。
[0217] 似纳米载体表面偶联祀分子NPY
[0218] 在邸ACd-乙基-(3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺）的催化下，利用祀分子NPY的 氨基与纳米载体LPHNP表面的簇基之间的化学反应，在纳米载体表面偶联祀分子NPY。
[0219] 具体制法如下：用憐酸缓冲液（PB巧作溶剂配制500 y g/mL的祀分子NPY溶 液，将50mg EDAC溶于10血祀分子溶液（冰浴），然后加入90血溶于PBS的LPHNP-TXT 悬浊液巧.Omg/mL)，将混合液置于室溫下磁力揽拌，反应4-2地，对样品进行离屯、 (20, OOOXg, 20min)，所得样品用PBS洗涂两次，最后冷冻干燥48h即可获得表面偶联有祀 分子且内部包埋有抗肿瘤药物的纳米载体的组合物NPY-LPHNP-TXT。 阳220] 结果 阳221 ] 实施例1所得组合物NPY-LPHNP-TXT中祀分子的含量为0.0 lwt%，抗肿瘤药物的 含量为8. Owt%。对所得组合物NPY-LPHNP-TXT进行透镜分析、粒径分析和分散性分析等测 试。 阳扣引 图1是实施例1所得组合物NPY-LPHNP-TXT的透射电镜图。从图1可W看出，组合 物NPY-LPHNP-TXT呈规则的类球形，运有利于肿瘤细胞内吞。此外，组合物NPY-LPHNP-TXT 颗粒间均匀分散，基本无团聚。 阳223] 图2是实施例1所得组合物NPY-LPHNP-TXT的DLS粒径分布图。从图2可W看出， 组合物NPY-LPHNP-TXT的粒径约为150皿。此外，DLS结果显示组合物NPY-LPHNP-TXT颗粒 的PDI小于0. 2。
[0224] 图3和表1是本发明实施例1所得组合物NPY-LPHNP-TXT分别在化Cl水溶液、 PBS水溶液和血清（serum)中放置1-15天的粒径变化图。从图3和表1可W看出，在S种 不同溶剂中，组合物的粒径均一、分散性好且粒径稳定在145~160nm之间，随着放置时间 的延长基本无团聚或沉淀现象发生。 阳掛]表1 阳226]
阳227] 实施例2组合物NPY-LPHNP-TXT对肿瘤细胞SK-N-BE2和肥C-1B-Y5的活性测试
[0228] 对实施例1所得组合物NPY-LPHNP-TXT进行细胞毒性试验，其中，细胞实验中所选 择的细胞分别为人脑肿瘤细胞SK-N-BE2和人子宫内膜瘤细胞HEC-1B-Y5。（购自美国标准 生物品收藏中屯、ATCC和美国Sciencell公司）
[0229] 测试结果如表2所示。
[0230] 表2组合物NPY-LPHNP-TXT对SK-N-BE2和肥C-1B-Y5的杀灭作用 阳 231]
阳23引从表2可W看出，多西他赛讯(T)对SK-N-BE2和肥C-1B-Y5细胞均具有优异的杀 灭效果，杀灭效果相当。 阳233] 相比于肥C-1B-Y5细胞，组合物NPY-LPHNP-TXT对人脑肿瘤细胞SK-N-BE2细胞具 有更优异的杀灭效果（如在40.0 y g/mL浓度下，人脑肿瘤细胞存活率分别为25%，而人子 宫内膜瘤细胞的存活率60%，两者相差了 140% )。运表明，组合物NPY-LPHNP-TXT能高选 择性地杀灭人脑肿瘤细胞并且具有优异的杀灭效果。 阳234] 图4是实施例2中人脑肿瘤细胞SK-N-BE2和人子宫内膜瘤细胞肥C-1B-Y5对组 合物NPY-LPHNP-TXT的摄取作用比较图。
[0235] 从图4可W看出，人脑肿瘤细胞SK-N-BE2对组合物NPY-LPHNP-TXT有明显的摄取 (图4左二中，可看见明显的代表纳米颗粒的绿色巧光），而子宫内膜瘤细胞肥C-1B-Y5几 乎无摄取。运表明，人脑肿瘤细胞对于本发明组合物NPY-LPHNP-TXT不仅存在高选择性摄 取，而且摄取量明显高于非脑类的细胞（如子宫内膜瘤细胞）。
[0236] 实施例3组合物NPY-LPHNP-TXT对不同肿瘤细胞的活性测试 阳237] 活性测试方法同实施例2,区别在于：细胞实验中所选择的肿瘤细胞包括：人脑 胶质瘤U-118MG、人星形细胞瘤SW1783细胞、人脑胶质母细胞瘤U-87MG细胞、人神经銷瘤 RT4-D6P2T细胞、人少突胶质细胞瘤BT142mut/-细胞、人神经母细胞瘤SK-N-BE2细胞、人神 经上皮细胞瘤SK-N-MC细胞。（购自美国标准生物品收藏中屯、ATCC和美国Sciencell公 司） 阳2