固体脂质纳米粒作为抗抑郁药物载体的应用
【专利摘要】本发明涉及固体脂质纳米粒作为抗抑郁药物载体的应用。具体为：配制0.1~0.2g姜黄素、0.1~0.3g叶酸、0.5~0.15g卵磷脂和0.001~0.0003g HU?211的混合氯仿溶液共10~20ml，然后加入含0.2~0.3g Myrj52的20~40ml水中，并在1000~1200rpm和70~80°C 下搅拌至混合溶液总体积剩余为5~8ml，再加入10~15ml冰水继续在1000~1200rpm和0~4°C 下搅拌2~3小时。离心弃上清液，冷冻干燥后0~4°C保存。固体脂质纳米粒作为抗抑郁药物载体，可以提高抗抑郁药物的水溶性和稳定性，增加药物的生物利用率，控制药物的释放，提高对抑郁症治疗的靶向性。
【专利说明】
固体脂质纳米粒作为抗抑郁药物载体的应用
技术领域
[0001]本发明属生物材料和药物学交叉领域，涉及脂质纳米粒作为抗抑郁药物载体的应用。
【背景技术】
[0002]抑郁症是一种危害全人类身心健康的常见情感障碍疾病，以显著而持久的心境低落为主要特征的综合征。抑郁症的终生患病率高达15%，15%的重度抑郁症可因自杀而导致死亡。
[0003]针对抑郁症的发病机制，目前的治疗药物存在显著副作用包括心脏毒性，性功能障碍和睡眠紊乱等，而且某些抗抑郁药物很难透过血脑屏障。为解决以上问题，本发明使用了低毒性的具有光谱性的姜黄素和易透过血脑屏障的地塞比诺(HU-211)。
[0004]尽管姜黄素已被证实具有抗抑郁作用，但水溶性低和生物相容性差的缺点限制其应用，HU-211同样也存在在生物系统中稳定性差的问题，基于纳米材料所发展的纳米复合体系为抑郁症的治疗提供了一种新的方法。
[0005]固体脂质纳米粒(Solid lipid nanoparticles，SLN)是20世纪90年代初发展起来的新一代亚微粒给药系统，是指以固态天然或合成的类脂如卵磷脂、三酰甘油等为载体，将药物包裹或夹嵌于类脂核中制成的固体胶粒给药系统。SLN被广泛应用于作为抗肿瘤药物的载体，作为经皮给药系统的载体，作为眼部给药系统的载体，作为肽类药物的载体和作为防晒品的载体。
【发明内容】
[0006]本发明的目的是提供一种固体脂质纳米粒作为抗抑郁药物载体的应用。
[0007]本发明提出的固体脂质纳米粒作为抗抑郁药物载体的应用，所述抗抑郁药物主要是指姜黄素和HU-211，具体步骤如下:
配制0.1-0.2g姜黄素、0.1-0.3g叶酸、0.5-0.15g卵磷脂和0.001-0.0003g HU-211 的混合氯仿溶液共10?20ml，然后加入含0.2?0.3g Myrj52的20?40ml水中，并在1000?1200rpm和70-80° C下搅拌至混合溶液总体积剩余为5?8ml，再加入10?15ml冰水继续在1000?1200rpm和O?4° C下搅拌2?3小时。离心弃上清液，冷冻干燥后O?4° C保存。
[0008]本发明中，所述的固体脂质纳米粒搭载抗抑郁药物后的平均粒子直径为20?300nm，表面zeta电位为-22.0~_21.3 mV。
[0009]固体脂质纳米粒优于其他纳米材料复合体系:(I)生物相容性好；(2)药物释放可控；(3)粒径小使其体内循环时间长；(4)载药量高；(5)生物可降解，生物可相容；(6)低毒性；(7)可透过血脑屏障。
[0010]为了实现上述目的，本发明利用低温乳化法，以姜黄素、叶酸、卵磷脂、HU-211和Myr j52为原料合成SLN搭载姜黄素和HU-211复合体系，并通过冷冻干燥得到样品。
[0011]本发明的有益效果在于:将固体脂质纳米粒包载姜黄素和HU-211纳米复合材料应用于抑郁症治疗，提高了姜黄素和HU-211治疗抑郁症的疗效，克服了姜黄素和HU-211的应用局限，为抑郁症的临床治疗提供了新的方法。
【附图说明】
[0012]图1为SLN搭载姜黄素和HU-211纳米复合体系透射电镜图。
[0013]图2为SLN搭载姜黄素和HU-211纳米复合体系zeta电位图。
[0014]图3为SLN搭载姜黄素和HU-211纳米复合体系释放药物的缓释曲线。
[0015]图4为SLN搭载姜黄素和HU-211对抑郁症模型PC12细胞的MTT。
[0016]图5为SLN搭载姜黄素和HU-211改善抑郁症模型小鼠运动能力。
[0017]图6为SLN搭载姜黄素和HU-211组织分布及靶向情况。
【具体实施方式】
[0018]实施例1
配制姜黄素(0.1?0.2g)，叶酸(0.1?0.3g)，卵磷脂(0.5?0.15g)和HU-211(0.001?
0.0003g)的混合氯仿溶液共10?20ml，然后加入含Myrj52(0.2?0.3g)的20?40ml水中并在1000?1200rpm和70?80° C下搅拌至混合溶液总体积约剩5?8ml，再加入10?15ml冰水继续在1000~1200rpn^P0~4°C下搅拌2?3小时。离心弃上清，冷冻干燥后O?4°C保存。
[0019]使用1~2%磷钨酸钠作为负染液，取少量材料溶液滴至铺有碳膜的铜网上，静置5?1min，用滤纸吸干悬液，再滴加l~2%(w/v)磷妈酸钠负染5?1min，于JEOL型透射电子显微镜下观察形态。材料Zeta电位使用Malvern zeta电位仪测量。
[0020]实施例2
2-5ml SLN搭载姜黄素和HU-211纳米复合材料溶液(10mg/ml)放入一个透析袋(截断大小14,000?20,000 Da)。然后透析袋放入400?500ml PBS溶液(pH 7.4)其中包含8?10%Tween-80 (v/v)并于100?2000rpm和36?38° C下揽摔。在特定的时间，取出4?5ml溶液，通过紫外分光光度计检测姜黄素的含量，同样体积的相同新鲜溶液加入以保持总体积不变。
[0021]实施例3
细胞培养过程加入皮质酮获得抑郁症细胞模型，PCl 2细胞培养于96孔板，细胞铺板24h后加入药物，设置对照。分组处理:皮质酮加PBS，对照，皮质酮加氟西汀，皮质酮加HU-211，皮质酮加Cur，皮质酮加Cur/SLNs，皮质酮加Cur/SLNs-HU_211。继续培养24h后，每孔加入20μ? MTT溶液(5mg/ml，即0.5%MTT)，继续培养4h。终止培养，吸去孔内培养液。每孔加入150μ1二甲基亚砜，摇床上低速振荡10?20min，使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD 490/560nm处测量各孔的吸光值。
[0022]实施例4
连续给药(皮质酮)2?3周建立小鼠抑郁症模型。之后分别给药处理2?3周后，运用行为学实验评价SLN搭载姜黄素和HU-211纳米复合材料对动物抑郁改善情况。分组处理:PBS，正常对照，氟西汀，HU-211，Cur，Cur/SLNs, Cur/SLNs-HU-211。转棒实验是评价动物运动能力的重要指标。末次给药后I?2h，将各组小鼠放置在转速为O?40转/分转棒上，记录小鼠在转棒上的停留时间。最后，取小鼠心肝脾肺肾脑分析测定药物组织分布情况，评价材料的分布及是否具有靶向性。
[0023]图1为SLN搭载姜黄素和HU-211纳米复合体系透射电镜图，平均粒子直径为20?300nmo
[0024]图2为SLN搭载姜黄素和HU-211纳米复合体系zeta电位图，表面zeta电位为-22.0—21.3 mV。
[0025]图3为SLN搭载姜黄素和HU-211纳米复合体系释放药物的缓释曲线，复合体系能够持续7天缓慢释放姜黄素，最多可释放约77%的药物。
[0026]图4为SLN搭载姜黄素和HU-211对抑郁症模型PC12细胞的MTT，以正常组细胞为对照为100%，单独皮质酮处理24小时细胞存活率为50%，阳性药物组氟西汀处理细胞存活率为93%，HU-211组细胞存活率为60%，姜黄素组细胞存活率为62%，SLN搭载姜黄素组细胞存活率为65%，SLN搭载姜黄素和HU-211组细胞存活率为73%。31^搭载姜黄素和冊-211复合体系相比于HU-211、姜黄素和SLN搭载姜黄素具有更好的保护PC12细胞免受皮质酮的毒害。
[0027]图5为SLN搭载姜黄素和HU-211改善抑郁症模型小鼠运动能力，各处理组在转棒上停留时间分别为247，300，300，247，242，270，293秒，SLN搭载姜黄素和HU-211复合体系相比于HU-211、姜黄素和SLN搭载姜黄素处理后的小鼠具有更强运动能力。
[0028]图6为SLN搭载姜黄素和HU-211组织分布及靶向情况，在脑中分布相比其他组织要高，且SLN搭载姜黄素和HU-211复合体系相比于姜黄素和SLN搭载姜黄素处理小鼠后，脑中姜黄素浓度要高。
【主权项】
1.固体脂质纳米粒作为抗抑郁药物载体的应用，其特征在于所述抗抑郁药物主要是指姜黄素和HU-211，具体步骤如下: 配制0.1-0.2g姜黄素、0.1-0.3g叶酸、0.5?0.15g卵磷脂和0.001-0.0003g HU-211 的混合氯仿溶液共10?20ml，然后加入含0.2?0.3g Myrj52的20?40ml水中，并在1000?1200rpm和70-80° C下搅拌至混合溶液总体积剩余为5?8ml，再加入10?15ml冰水继续在1000?1200rpm和O?4° C下搅拌2?3小时，离心弃上清液，冷冻干燥后0~4° C保存。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于所述的固体脂质纳米粒搭载抗抑郁药物后的平均粒子直径为20~30011111，表面26七3电位为-22.0~-21.3 mV。
【文档编号】A61K31/12GK105919973SQ201610262638
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月26日
【发明人】汪世龙, 朱融融, 贺晓烈
【申请人】同济大学