免疫耐受部位形成剂和免疫抑制性细胞的诱引剂的制作方法

免疫耐受部位形成剂和免疫抑制性细胞的诱引剂的制作方法
【专利摘要】本发明提供一种能够高效地在目标部位诱导免疫耐受的药剂。一种免疫耐受部位形成剂和免疫抑制性细胞的诱引剂，其包含SEK?1005(Ser,3?羟基?N?[2?羟基?1?氧代?2?四氢?2?羟基?6?甲基?5?(2?甲基丙基)?2H?吡喃?2?基?丙基]?Leu?Pip(六氢?3?哒嗪羰基)?N?羟基?Ala?N?甲基?Phe?Pip?rho?内酯)或成纤维细胞生长因子(FGF)。
【专利说明】
免疫耐受部位形成剂和免疫抑制性细胞的诱引剂
技术领域
[0001] 本发明涉及形成免疫耐受部位的药剂和诱引免疫抑制性细胞的药剂。
【背景技术】
[0002] 在糖尿病等由生物功能衰竭所致的疾病的治疗中，器官/组织的移植是有效的治 疗法。但是，在异体移植的情况下会产生免疫排斥，而且在I型糖尿病那样因自身免疫引起 发病的疾病的情况下，患者在移植后需要持续服用免疫抑制剂。已知:免疫抑制剂通常非特 异性地抑制免疫功能，因而除了感染症和癌发生的危险性提高以外，作为副作用还会引起 高血压、高血糖、对肝脏或肾脏的损伤。
[0003] 另一方面，已知一种称为免疫耐受的状态。免疫耐受是指免疫系统对特定物质的 作用受到抑制，是按照将自身来源的物质识别为自身而不进行攻击的方式进行控制的系 统。另外已知，可按照下述方式产生免疫耐受:对于非自身、例如通过饮食经口摄取的物质， 也不产生过度的免疫应答。另外，一部分癌显示出通过获得免疫耐受而逃避了来自免疫系 统的攻击的现象。
[0004] 免疫耐受建立的原理尚存在许多不明之处，但已知有中枢性免疫耐受(对自身发 生反应的免疫细胞消失)和外周性免疫耐受(抑制具有反应性的免疫细胞/失去应答性)等。 此处，作为诱导外周性免疫耐受的生物体内的细胞种类，例如已知调节性T细胞(Treg)、髓 源性抑制细胞(MDSC)。在器官/组织移植时，若可确立建立对移植器官/组织的免疫耐受的 方法，则认为不需要施用免疫抑制剂。
[0005] 在专利文献1中，作为用于形成毛细血管丰富且适合于组织移植的部位的工具，示 出了以水凝胶(琼脂糖等)作为基体的工具，作为诱导血管生成的因子，示出了生长因子类 (bFGF、aFGF、TOGF、VEGF、TGF-β等）。但是，其是以营养和氧供给为目的而进行开发的，并没 有关于免疫耐受的记载。
[0006] 在非专利文献1中示出了利用专利文献1中记载的工具（使用bFGF+肝素作为诱导 因子）向形成于大鼠皮下的空隙内移植胰岛的研究结果。其报道了：尽管为异体移植，也能 够在未施用免疫抑制剂的情况下长时间不发生排斥地维持移植，但并未研究其原理。
[0007] 专利文献2中示出了通过将包含造血干细胞、造血祖细胞、成熟淋巴细胞或它们的 混合物的耐受原施用至门静脉内或静脉内来诱导免疫耐受的方法。但是，该技术需要细胞 移植，需要从骨髓等获得移植用细胞。
[0008] 专利文献3中示出了通过将包含骨髓细胞的耐受原在放射线照射后施用至骨髓内 来诱导免疫耐受的方法。但是，该技术需要细胞移植，需要从骨髓等获得移植用细胞。
[0009] 专利文献4中示出了一种免疫耐受诱导剂，其将细胞毒性细胞因子类(淋巴毒素等 对免疫细胞具有细胞毒活性的生理活性物质）和过敏性抗原、自身抗原或移植器官抗原作 为有效成分。但是，该技术中需要施用抗原和细胞毒性因子。此外，由于仅能够应对特定的 抗原，因此需要确定希望诱导耐受的因子。
[0010]专利文献5中示出了下述方法:藉由适当的间隔物在诱导耐受的对象的抗原上结 合包含构成A-B型毒素(霍乱毒素或肠毒素等）的B亚基的B细胞表位和/或T细胞表位的5~ 25个氨基酸所构成的肽，由此制成抗原特异性免疫耐受诱导剂。但是，该技术中需要设计、 制作、施用抗原特异性的药剂，此外仅能够应对特定的抗原，因此需要确定希望诱导耐受的 因子。
[0011]专利文献6中示出了下述方法:对个体施用抗原性物质或其抗原性部分、与增大个 体的细胞的C0X-2的活性和/或IFN- γ水平的至少一种物质，由此诱导对于抗原性物质的耐 受。但是，该技术中需要设计、制作、施用抗原特异性的药剂，此外仅能够应对特定的抗原， 因此需要确定希望诱导耐受的因子。
[0012]现有技术文献 [0013]专利文献
[0014] 专利文献1:日本专利3089299号说明书 [0015] 专利文献2:日本特开平10-306027号公报 [0016] 专利文献3:日本特开2001-172188号公报 [0017] 专利文献4:日本特开平6-65088号公报 [0018] 专利文献5:日本特开平10-120591号公报 [0019] 专利文献6:日本特表2004-522725号公报 [0020]非专利文献
[0021 ]非专利文献 1:American Journal of Transplantation 2014; 14:1533-1542.
[0022] 非专利文献2:Transplantation.2003Mar 15;75(5) :619-25.

【发明内容】

[0023] 发明所要解决的课题
[0024] -直以来，用于糖尿病治疗的朗格汉斯岛（胰岛）的移植、以及为了补充其他激素 或蛋白质的缺乏而进行的分泌这些物质的细胞的移植不仅限于使用动物的研究水平，在临 床上也进行了许多尝试。但是，作为细胞或组织的提供者的供体的数量有限，难以对所有期 待的患者进行该治疗法。
[0025] 近年来，正在确立由胚胎干细胞(ES细胞）、人工诱导的多能干细胞（iPS细胞)等各 种干细胞向各种功能性细胞的分化诱导法。若可确立分化诱导法，则能够无尽地供给分泌 细胞，能够对所有期待的患者实施细胞移植疗法。
[0026] 但是，作为细胞移植所面临的共同的问题，存在由受体的免疫系统产生的排斥反 应和移植部位的问题。通常，为了控制排斥反应而进行免疫抑制剂的施用，但存在变得易感 染、恶性肿瘤的发生概率升高等问题。另外，免疫抑制剂的施用需要每年150万日元的比较 高额的医疗费用。
[0027] 因此，本发明的课题在于提供一种有用的药剂，其能够高效地在特定的部位诱导 免疫耐受，通过将细胞移植至该部位，能够不必施用在移植时需要的免疫抑制剂及自身免 疫疾病的治疗剂等。
[0028] 若能够进行不发生排斥反应或自身免疫反应的移植，则可寄希望于由他人或患者 来源的iPS细胞分化诱导和制作的细胞、组织、器官的移植。但是，对作为胰岛移植对象的I 型糖尿病来说，由于发病的原因是对自身细胞的自身免疫反应，因此即便在如非专利文献2 中报道的那样移植了来自患者的辟田胞或胰岛时，移植细胞也会因自身免疫反应而死亡。对 于如该例所示那样因自身免疫反应而发病的疾病，即便在由患者来源的iPS细胞分化诱导、 制作的细胞、组织、器官的移植的情况下，也需要某些抑制免疫反应的治疗。
[0029]用于解决课题的手段
[0030]为了解决上述课题，本发明提供一种免疫耐受部位形成剂，其包含SEK-1005或成 纤维细胞生长因子(FGF)。另外，本发明提供一种调节性T细胞（Treg)或髓源性抑制细胞 (MDSC)等免疫抑制性细胞的诱引剂，其包含结构式（I)所示的环状肽SEK-1005或FGF。
[0031] 发明的效果
[0032] 根据本发明，通过使用SEK-1005或FGF，能够将Treg、MDSC等免疫抑制性细胞诱引 至目标部位。其结果，形成免疫耐受部位，在异体细胞、组织移植中所必需的免疫抑制的必 要性减小或消失，移植后不需要永久服用免疫抑制剂。此外，由免疫抑制剂的副作用导致的 各种感染症和肿瘤发生的风险消失，由免疫抑制剂的副作用导致的对器官的损伤及高血 压、高血糖等的风险也消失。另外，由于诱导针对整个移植组织的免疫耐受，因而具有不以 特定分子为对象的优点。
[0033] 另外，本发明的药剂在学术上成为分析免疫耐受机理的有用模型。
【附图说明】
[0034]图1是示出由皮下埋入有含SEK-1005的琼脂糖棒或不含SEK-1005的琼脂糖棒的大 鼠组织回收的细胞的流式细胞术的结果的图。纵轴表示CD4+细胞中的作为调节性T细胞的 指标的⑶4+F〇Xp3+细胞的比例。
[0035]图2是示出由皮下埋入有含SEK-1005的琼脂糖棒或不含SEK-1005的琼脂糖棒的大 鼠组织回收的细胞的流式细胞术的结果的图。纵轴表示CD3+细胞中的作为细胞毒性T细胞 的指标的CD8+细胞相对于CD4+的比例。
[0036]图3是示出Treg抑制试验的结果的图。左图（组1)表示加入了 lyg/mL抗CD3抗体以 提供增殖刺激时的结果，中央图（组2)表示除了 lyg/mL抗CD3抗体外还加入了2.5 X 104个含 有大量调节性T细胞的⑶4+且⑶25+的细胞时的结果，右图（组3)表示未加入抗⑶3抗体时的 结果。
[0037]图4是示出含SEK-1005的琼脂糖棒的周围组织的基因表达分析的结果的图。左上 图中用火山图示出所有基因表达。右上图中用火山图示出趋化因子/细胞因子相关基因的 表达。下图中，用热图示出调节性T细胞相关的趋化因子/细胞因子相关基因的表达。
[0038]图5是示出由皮下埋入有含bFGF的琼脂糖棒或不含bFGF的琼脂糖棒的大鼠组织回 收的细胞的流式细胞术的结果的图。纵轴表示CD4+细胞中的作为调节性T细胞的指标的CD4+ Foxp3+细胞的比例。
[0039]图6是示出由皮下埋入有含bFGF的琼脂糖棒或不含bFGF的琼脂糖棒的大鼠组织回 收的细胞的CDllb/c和粒细胞的流式细胞术的结果的图。
[0040]图7是示出含bFGF的琼脂糖棒的周围组织的基因表达分析的结果的图。（a)中用火 山图示出趋化因子/细胞因子相关基因的表达。（b)中用热图示出调节性T细胞相关的趋化 因子/细胞因子相关基因的表达。
【具体实施方式】
[0041 ]本发明的免疫耐受部位形成剂和免疫抑制性细胞的诱引剂以SEK-1005或FGF作为 有效成分。
[0042] (SEK-1005)
[0043] SEK-1005(结构式:C45H7〇N8〇i3,名称：Ser，3-羟基-N-[2-羟基-1-氧代-2-四氢-2-羟基-6-甲基-5-(2-甲基丙基)-2H-吡喃-2-基-丙基]-Leu-Pip(六氢-3-哒嗪羰基)-N-羟 基-Ala-N-甲基-Phe-Pip-rho-内酯)为下述结构式所示的化合物，是由放线菌高贵链霉菌 (Streptomyces nobi 1 is)的培养液或其干固物分离出的环状肽。
[0044]
[0045]用于得到SEK-1005的放线菌高贵链霉菌可以由公共保藏机构获得。例如，可以使 用在日本理化学研究所以JCM4274保藏的菌、在美国以ATCC19252保藏的菌、在荷兰以 CBS198.65保藏的菌。得到SEK-1005的方法没有特别限制，可以由放线菌高贵链霉菌和其他 天然物得到，也可以通过生物工程的方法或有机化学的方法来合成。作为由放线菌高贵链 霉菌得到SEK-1005的具体方法，可以参照国际公开第W096/12732号等。
[0046]关于SEK-1005,只要具有免疫耐受诱导作用，则一部分氨基酸残基可以缺失，或者 可以附加有其他氨基酸残基，或者一部分氨基酸残基可以被置换为其他氨基酸残基，这样 的化合物也包含在本发明的范围内。此外，只要维持免疫耐受诱导作用，SEK-1005也可以形 成盐，还可以在分子中实施各种修饰，这样的化合物也包含在本发明的范围内。作为修饰的 例子，可以举出糖链、烷基、氨基、羧基、巯基、羟基、磺酰基、天然氨基酸、非天然氨基酸、D-氨基酸等的附加等。SEK-1005可以为水合物，也可以为无水物。SEK-1005例如可以溶解在丙 酮、乙醇、丙醇、氯仿、二氯甲烷、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、N-甲基-2-吡咯烷酮、乙醚、乙 酸乙酯、四氢呋喃、聚乙二醇等适当的溶剂中来使用。
[0047]关于SEK-1005的药理作用、作为药剂的利用等，已有各种报道。例如，在日本特开 2008-260692号公报中记载了一种药物组合物，其含有SEK-1005，具有创伤治愈促进作用、 过敏性和非过敏性炎症抑制作用、短期的免疫抑制作用、抗菌作用、细胞因子诱导作用等。 另外，在日本特开平10-259134号公报中记载了一种包含SEK-1005的创伤治愈促进剂。但 是，关于SEK-1005的免疫耐受部位形成作用并未进行报道。
[0048] (FGF)
[0049] FGF只要是属于FGF家族的蛋白质就可以使用，优选bFGF(碱性成纤维细胞生长因 子）、成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)或aFGF(酸性成纤维细胞生长因子），更优选bFGF或 FGF-2。FGF的来源没有特别限制，在用于人的情况下，优选人来源的FGF。另外，FGF的序列优 选为全长，但只要具有免疫耐受部位形成作用和免疫抑制性细胞诱引作用，也可以为部分 片段。另外，序列可以为野生型，只要具有免疫耐受部位形成作用和免疫抑制性细胞诱引作 用，也可以为在野生型的序列中置换、缺失、插入和/或附加有1个~几个氨基酸的序列。FGF 可以为重组生产的FGF，也可以为化学合成的FGF。另外，FGF也可以使用市售的FGF。
[0050](免疫耐受部位形成和免疫抑制性细胞诱引剂）
[0051 ]本发明的以SEK-1005或FGF作为有效成分的免疫耐受部位形成剂和免疫抑制性细 胞的诱引剂通过诱引Treg、MDSC等具有免疫抑制能力的细胞，能够在施用部位诱导免疫耐 受。
[0052](免疫耐受部位形成剂）
[0053]本发明的以SEK-1005或FGF作为有效成分的免疫耐受部位形成剂特别是可以适合 用作移植胰岛或由干细胞人工分化诱导的假胰岛等时的免疫耐受部位形成剂。通过应用于 预定移植的部位(移植部位），将免疫抑制性细胞诱引至该移植部位，不易发生与移植相伴 的排斥反应。作为应用免疫耐受部位形成剂的体组织，没有特别限制，可以举出皮下组织 等。使免疫耐受部位形成剂与皮下组织接触时的部位没有特别限制，可以为皮下组织的表 面(与真皮的边界部分），也可以为皮下组织的内部。
[0054]免疫耐受部位形成剂可以仅由SEK-1005或FGF构成，也可以包含其他成分。作为其 他成分，可以举出赋形剂、崩解剂、粘结剂、润滑剂、表面活性剂、助溶剂、稳定剂、等渗剂、助 悬剂、乳化剂、缓冲剂、溶剂等。在免疫耐受部位形成剂包含SEK-1005或FGF以外的成分的情 况下，关于SEK-1005或FGF在免疫耐受部位形成剂中的含量，只要是SEK-1005或FGF能够作 为免疫耐受部位形成剂的有效成分发挥出其效果的程度就没有特别限制。
[0055] 上述SEK-1005或FGF在免疫耐受部位形成剂中的含量例如为下述量：在使SEK-1005 或 FGF 与体组织接触后 7 天~ 14 天后 ，与不使用SEK-1005 或 FGF 的情况相比 ，在该体组织 中能够诱引1.3倍~3倍的⑶4+F〇Xp3+细胞的量。
[0056]另外，SEK-1005或FGF在免疫耐受部位形成剂中的含量为在该体组织中能够诱引 下述程度的CD4+F〇Xp3+细胞的量:在使SEK-1005或FGF与体组织接触后7天~14天后，利用流 式细胞仪分析时的⑶4+细胞中的F 〇xp3+细胞的比例多于10%，例如为15%以上。关于上述 ⑶4+细胞中的F〇xp3+细胞的比例，没有特别的上限，例如，SEK-1005或FGF在免疫耐受部位形 成剂中的优选含量为:在使SEK-1005或FGF与体组织接触后7天~14天后，利用流式细胞仪 分析时的CD4+细胞中的F 〇xp3+细胞的比例为50 %以下的程度，另外，例如为40 %以下的程 度。
[0057] 使免疫耐受部位形成剂与体组织接触的方法没有特别限制。例如可以举出：将可 以包含上述其他成分的SEK-1005或FGF与具有生物相容性的材料等其他材料一同埋入体内 并使SEK-1005或FGF缓慢地释放的方法;定期地通过注射等进行施用的方法等。从容易确保 免疫耐受部位形成剂与体组织的接触时间的方面出发，与生物相容性材料一同埋入体内并 缓慢地释放的方法在去除免疫耐受部位形成剂后能够确保可对移植材料移植的空隙，因此 优选。使免疫耐受部位形成剂进行接触的体组织的大小(面积等)没有特别限制，可以根据 治疗方法等进行选择。
[0058] 具有生物相容性的材料只要能够释放出免疫耐受部位形成剂就没有特别限制。例 如，由水凝胶、水凝胶的干燥物、海绵、多孔体高分子块、多孔体、多孔片、多孔膜等构成。
[0059] 作为构成水凝胶的材料，可以举出羟丙基甲基纤维素（HPMC)、羧甲基纤维素钠 (CMC-Na)、羟乙基纤维素(HEC)等纤维素衍生物、明胶、海藻酸、白蛋白、胶原蛋白、淀粉、琼 脂糖、葡聚糖、支链淀粉、果胶、透明质酸、壳多糖、壳聚糖等天然高分子的化学交联体、由放 射线照射或热处理得到的交联体、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇、聚甲基丙烯酸-2-羟乙酯、聚丙烯酸-2-羟乙酯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸等合成高分子的化学 交联体、由放射线照射或热处理得到的交联体、以及构成上述高分子的单体的共聚物的交 联体、聚阴离子与聚-L-赖氨酸等聚阳离子的聚离子络合物膜等。
[0060] 作为海绵，可以举出上述高分子的多孔体，例如纤维素、琼脂糖、壳聚糖或胶原蛋 白的海绵。
[0061] 作为构成多孔体的材料，可以举出明胶、有机硅、磷灰石等有机或无机的材料。
[0062] 使免疫耐受部位形成剂与体组织接触的次数没有特别限制，可以通过1次接触形 成所期望的移植部位(免疫耐受部位），也可以通过多次接触形成所期望的移植部位(免疫 耐受部位）。另外，使免疫耐受部位形成剂与体组织接触的时间没有特别限制。免疫耐受部 位形成剂优选为下述构成：SEK-1005或FGF持续地从一次性埋入的具有生物相容性的材料 等释放到体组织中，优选在1天~35天、更优选在2天~28天、进一步优选在3天~21天、特别 优选在4天~14天的期间使SEK-1005或FGF持续地从具有生物相容性的材料等释放到体组 织中。
[0063] SEK-1005或FGF的量可根据移植细胞或移植组织的大小等适当调整。
[0064]使用本发明的免疫耐受部位形成剂形成的免疫耐受部位能够用于各种移植材料 的移植。特别是适合于在发挥其功能时移植的部位不受限制的移植材料的移植。作为这样 的移植材料，可以举出分泌激素、细胞因子、神经递质、酶等生理活性物质的组织或细胞。具 体而言，可以举出胰岛、肝实质细胞、肾上腺、甲状旁腺、产生促红细胞生成素的细胞（肾小 管间质细胞等）、产生生长激素的细胞(脑垂体前叶的GH分泌细胞等)等。此外，还能够用于 由成体干细胞、iPS细胞等诱导性多能干细胞、胚胎干细胞(ES细胞)等人工分化诱导而制作 的功能细胞的移植。
[0065] 作为移植到使用本发明的免疫耐受部位形成剂而形成的免疫耐受部位的移植材 料，可以举出能够成活于移植部位的组织(包括器官）、细胞等，可以是来源于生物体的移植 材料，也可以是人为地制作的移植材料。此处，由于本发明的免疫耐受部位形成剂能够形成 免疫反应受到抑制的部位(免疫耐受部位），因而，作为上述移植材料，不仅可以使用同种细 胞或组织或者同种微小组织，还可以使用异种细胞或组织或者异种微小组织中的任一种。 在使用同种细胞或组织或者同种微小组织的情况下，不仅可以使用同种同系组织或细胞、 同种同系微小组织，还可以使用同种异系组织或细胞、同种异系微小组织中的任一种。异种 组织或细胞、异种微小组织、同种异系组织或细胞、同种异系微小组织通常在不实施特别的 处置而移植到皮下时会迅速地被排斥，但通过移植到本发明的移植部位(免疫耐受部位）， 免疫反应受到抑制，能够避免排斥，因而在使用这样的细胞等的情况下，也能够提供理想的 移植用的部位。需要说明的是，"同种"是指种相同，"异种"是指种不同，"同种同系"是指"种 相同、有共同的遗传性组成"，"同种异系"是指"种相同、遗传性组成不同"。
[0066] 将组织移植到使用本发明的免疫耐受部位形成剂而形成的免疫耐受部位对于各 种疾病的治疗有用。特别是，对于需要根据日常血糖值的变动来控制胰岛素分泌的胰岛素 依赖型糖尿病来说，与其他内分泌疾病相比，由移植带来的症状减轻效果及生活品质的改 善效果大。因此，本发明的免疫耐受部位形成剂在用于治疗胰岛素依赖型糖尿病的胰岛移 植部位的形成中使用的情况下其有用性特别大。
[0067] 这种糖尿病的主要病例为因自身免疫反应而发病的I型糖尿病。但是，在II型糖尿 病的治疗中也有用。即，II型糖尿病进展时，胰腺细胞的容积降低，作为目前的治疗法是施 用胰岛素，但在这种情形下，通过将胰岛移植到使用本发明的免疫耐受部位形成剂而形成 的免疫耐受部位，也能够进行治疗。此外，关于II型糖尿病，如果考虑到其是由于身体的胰 岛素抵抗性大于胰腺的胰岛素产生能力而导致糖尿病，则从需要施用胰岛素之前的阶段起 出于预防性的用意进行移植也是有效的。
[0068] 此外，利用本发明的免疫耐受部位形成剂，能够形成在移植他人组织的情况下也 可维持免疫反应抑制状态的移植部位(免疫耐受部位）。因此，例如在胰岛素依赖型糖尿病 的治疗中的胰岛移植中由于使用由他人提供的组织而通常在移植后需要持续服用免疫抑 制剂，但通过使用本发明的免疫耐受部位形成剂，能够进行减少或省去免疫抑制剂服用的 胰岛移植。胰岛素依赖型糖尿病的主要患者群为I型糖尿病，其发病原因为自身免疫反应。 能够形成免疫反应受到抑制的移植部位(免疫耐受部位)时，还可望保护移植胰岛免受自身 免疫反应的损害，从长时间保持移植胰岛的功能的方面出发，本方法的有用性也高。
[0069](免疫抑制性细胞诱引剂）
[0070]本发明的以SEK-1005或FGF作为有效成分的免疫抑制性细胞的诱引剂特别是可以 适合在移植由胰岛或干细胞人工分化诱导的假胰岛等时使用。通过应用于预定移植的部位 (移植部位），将免疫抑制性细胞诱引至该移植部位，不易产生与移植相伴的排斥反应。作为 应用免疫抑制性细胞诱引剂的体组织，没有特别限制，可以举出皮下组织等。使免疫抑制性 细胞诱引剂与皮下组织接触时的部位没有特别限制，可以为皮下组织的表面(与真皮的边 界部分），也可以为皮下组织的内部。
[0071]免疫抑制性细胞诱引剂可以仅由SEK-1005或FGF构成，也可以包含其他成分。作为 其他成分，可以举出赋形剂、崩解剂、粘结剂、润滑剂、表面活性剂、助溶剂、稳定剂、等渗剂、 助悬剂、乳化剂、缓冲剂、溶剂等。在免疫抑制性细胞诱引剂包含SEK-1005或FGF以外的成分 的情况下，关于SEK-1005或FGF在免疫抑制性细胞诱引剂中的含量，只要是SEK-1005或FGF 能够作为免疫抑制性细胞诱引剂的有效成分发挥出其效果的程度就没有特别限制。
[0072] 上述SEK-1005或FGF在免疫抑制性细胞诱引剂中的含量例如为下述量:在使SEK-1005 或 FGF 与体组织接触后 7 天~ 14 天后 ，与不使用SEK-1005 或 FGF 的情况相比 ，在该体组织 中能够诱引1.3倍~3倍的⑶4+F〇Xp3+细胞的量。
[0073]另外，SEK-1005或FGF在免疫抑制性细胞诱引剂中的含量为在该体组织中能够诱 引下述程度的CD4+F〇Xp3+细胞的量:在使SEK-1005或FGF与体组织接触后7天~14天后，利用 流式细胞仪分析时的⑶4+细胞中的F 〇xp3+细胞的比例多于10 %，例如为15 %以上。关于上述 ⑶4+细胞中的F〇xp3+细胞的比例，没有特别的上限，例如，SEK-1005或FGF在免疫抑制性细胞 诱引剂中的优选含量为:在使SEK-1005或FGF与体组织接触后7天~14天后，利用流式细胞 仪分析时的CD4+细胞中的F 〇xp3+细胞的比例为50 %以下的程度，另外，例如为40 %以下的程 度。
[0074]使免疫抑制性细胞诱引剂与体组织接触的方法没有特别限制。例如可以举出：将 可以包含上述其他成分的SEK-1005或FGF与具有生物相容性的材料等其他材料一同埋入体 内并使SEK-1005或FGF缓慢地释放的方法;定期地通过注射等进行施用的方法等。从容易确 保免疫抑制性细胞诱引剂与体组织的接触时间的方面出发，与生物相容性材料一同埋入体 内并缓慢地释放的方法在去除免疫抑制性细胞诱引剂后能够确保可对移植材料进行移植 的空隙，因此优选。使免疫抑制性细胞诱引剂进行接触的体组织的大小(面积等)没有特别 限制，可以根据治疗方法等进行选择。
[0075] 具有生物相容性的材料只要能够释放出免疫抑制性细胞诱引剂就没有特别限制。 例如，由水凝胶、水凝胶的干燥物、海绵、多孔体高分子块、多孔体、多孔片、多孔膜等构成。
[0076] 作为构成水凝胶的材料，可以举出羟丙基甲基纤维素（HPMC)、羧甲基纤维素钠 (CMC-Na)、羟乙基纤维素(HEC)等纤维素衍生物、明胶、海藻酸、白蛋白、胶原蛋白、淀粉、琼 脂糖、葡聚糖、支链淀粉、果胶、透明质酸、壳多糖、壳聚糖等天然高分子的化学交联体、由放 射线照射或热处理得到的交联体、聚乙烯醇、聚乙烯基吡咯烷酮、聚乙二醇、聚甲基丙烯酸-2-羟乙酯、聚丙烯酸-2-羟乙酯、聚丙烯酰胺、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸等合成高分子的化学 交联体、由放射线照射或热处理得到的交联体、以及构成上述高分子的单体的共聚物的交 联体、聚阴离子与聚-L-赖氨酸等聚阳离子的聚离子络合物膜等。
[0077] 作为海绵，可以举出上述高分子的多孔体、例如纤维素、琼脂糖、壳聚糖或胶原蛋 白的海绵。
[0078] 作为构成多孔体的材料，可以举出明胶、有机硅、磷灰石等有机或无机的材料。
[0079] 使免疫抑制性细胞诱引剂与体组织接触的次数没有特别限制，可以通过1次接触 形成所期望的移植部位(免疫耐受部位），也可以通过多次接触形成所期望的移植部位(免 疫耐受部位）。另外，使免疫抑制性细胞诱引剂与体组织接触的时间没有特别限制。免疫抑 制性细胞诱引剂优选为下述构成:SEK-1005或FGF持续地从一次性埋入的具有生物相容性 的材料等释放到体组织中，优选在1天~35天、更优选在2天~28天、进一步优选在3天~21 天、特别优选在4天~14天的期间使SEK-1005或FGF持续地从具有生物相容性的材料等释放 到体组织中。
[0080] SEK-1005或FGF的量可根据移植细胞或移植组织的大小等适当调整。
[0081] 使用本发明的免疫抑制性细胞诱引剂形成的免疫耐受部位能够用于各种移植材 料的移植。特别是适合于在发挥其功能时移植的部位不受限制的移植材料的移植。作为这 样的移植材料，可以举出分泌激素、细胞因子、神经递质、酶等生理活性物质的组织或细胞。 具体而言，可以举出胰岛、肝实质细胞、肾上腺、甲状旁腺、产生促红细胞生成素的细胞（肾 小管间质细胞等）、产生生长激素的细胞(脑垂体前叶的GH分泌细胞等)等。此外，还能够用 于由成体干细胞、iPS细胞等诱导性多能干细胞、胚胎干细胞(ES细胞)等人工分化诱导而制 作的功能细胞的移植。
[0082]需要说明的是，在使用本发明的免疫抑制性细胞诱引剂形成的免疫耐受部位进行 移植时，优选将足以建立免疫耐受的数量的免疫抑制性细胞诱引至该移植预定部位后再进 行移植。具体地说，优选在使免疫抑制性细胞诱引剂与作为移植预定部位的体组织接触后7 天以后、优选10天以后再进行移植。
[0083]作为移植到使用本发明的免疫抑制性细胞诱引剂而形成的免疫耐受部位的移植 材料，可以举出能够成活于移植部位的组织(包括器官）、细胞等，可以是来源于生物体的移 植材料，也可以是人为地制作的移植材料。此处，由于本发明的免疫抑制性细胞诱引剂能够 形成免疫反应受到抑制的部位(免疫耐受部位），因而，作为上述移植材料，不仅可以使用同 种细胞或组织或者同种微小组织，还可以使用异种细胞或组织或者异种微小组织中的任一 种。在使用同种细胞或组织的情况下，不仅可以使用同种同系组织或细胞、同种同系微小组 织，还可以使用同种异系组织或细胞、同种异系微小组织中的任一种。异种组织或细胞、异 种微小组织、同种异系组织或细胞、同种异系微小组织通常在不实施特别的处置而移植到 皮下时会迅速地被排斥，但通过移植到本发明的移植部位(免疫耐受部位），免疫反应受到 抑制，能够避免排斥，因而在使用这样的细胞等的情况下，也能够提供理想的移植用的部 位。需要说明的是，"同种"是指种相同，"异种"是指种不同，"同种同系"是指"种相同、有共 同的遗传性组成"，"同种异系"是指"种相同、遗传性组成不同"。
[0084] 将组织移植到使用本发明的免疫抑制性细胞诱引剂而形成的免疫耐受部位对于 各种疾病的治疗有用。特别是，对于需要根据日常血糖值的变动来控制胰岛素分泌的胰岛 素依赖型糖尿病来说，与其他内分泌疾病相比，由移植带来的症状减轻效果及生活品质的 改善效果大。因此，本发明的免疫抑制性细胞诱引剂在用于治疗胰岛素依赖型糖尿病的胰 岛移植部位的形成中使用的情况下其有用性特别大。
[0085] 这种糖尿病的主要病例为因自身免疫反应而发病的I型糖尿病。但是，在II型糖尿 病的治疗中也有用。即，II型糖尿病进展时，胰腺细胞的容积降低，作为目前的治疗法是施 用胰岛素，但在这种情形下，通过将胰岛移植到使用本发明的免疫抑制性细胞诱引剂而形 成的免疫耐受部位，也能够进行治疗。此外，关于II型糖尿病，如果考虑到其是由于身体的 胰岛素抵抗性大于胰腺的胰岛素产生能力而导致糖尿病，则从需要施用胰岛素之前的阶段 起出于预防性的用意进行移植也是有效的。
[0086] 此外，利用本发明的免疫抑制性细胞诱引剂，能够形成在移植他人组织的情况下 也可维持免疫反应抑制状态的移植部位(免疫耐受部位）。因此，例如在胰岛素依赖型糖尿 病的治疗中的胰岛移植中由于使用由他人提供的组织而通常在移植后需要持续服用免疫 抑制剂，但通过使用本发明的免疫抑制性细胞诱引剂，能够进行减少或省去免疫抑制剂服 用的胰岛移植。胰岛素依赖型糖尿病的主要患者群为I型糖尿病，其发病原因为自身免疫反 应。能够形成免疫反应受到抑制的移植部位(免疫耐受部位)时，还可望保护移植胰岛免受 自身免疫反应的损害，从长时间保持移植胰岛的功能的方面出发，本方法的有用性也高。另 外，利用本发明的免疫抑制性细胞诱引剂，可在应用部位长期、例如1〇〇天以上地持续免疫 耐受效果，因此，可长期维持胰岛等移植材料的功能和效果，具有治疗效果持久的有利效 果。
[0087] 实施例
[0088]下面举出实施例来具体说明本发明，但本发明不限定于下述方式。
[0089]实施例1.埋入有含SEK-1005的琼脂糖棒的部位的浸提液和免疫系统细胞的分析 [0090]将4.5%的琼脂糖溶液封入内径4mm的聚苯乙烯制的管中，之后在常温下放置，由 此使琼脂糖溶液凝胶化。将琼脂糖凝胶棒从聚苯乙烯制管中取出，切断为长度25mm。之后， 在-30°C的冰箱中保存1晚，由此使水冻结。将冷冻琼脂糖棒冷冻干燥，由此制作出多孔的干 燥琼脂糖棒。在该干燥琼脂糖棒上滴加2mg/ml的SEK-1005的乙醇溶液50μ1，使干燥琼脂糖 棒含有SEK-1005溶液，之后风干，由此使乙醇蒸发。
[0091]在琼脂糖棒埋入的那天，对ACI大鼠施用链脲霉素(STZ)(60mg/kg体重），由此诱发 糖尿病。在ACI大鼠的背部左右分别埋入一根含有100yg SEK-1005的长度25mm、直径4mm的 琼脂糖棒。10天后抽出琼脂糖棒。在埋入有琼脂糖棒的部位的周围形成了具有大量血管的 结缔组织。用剪刀切碎该组织，并进行匀化，从组织中回收细胞，通过Perco 11密度梯度离心 对免疫细胞进行纯化，利用流式细胞仪进行分析。
[0092]图1中示出利用流式细胞仪对CD4+和作为调节性T细胞的标志物的F〇xp3+进行分析 的结果。关于⑶4+细胞中的F〇xp3+细胞的比例，在将含SEK-1005的琼脂糖棒埋入皮下后，2天 时为18.3 %、7天时为20.8%、10天时为23.3%、14天时为27.3%。在通常的皮下组织中，该 比例为10%左右，可知:通过SEK-1005的作用，调节性T细胞(CD4+F 〇Xp3+的细胞)的比例升高 为2~3倍左右。
[0093]另一方面，如图2所示，关于⑶3+细胞中的细胞毒性T细胞(CD8+T细胞)相对于⑶4+ 细胞的比例，在将含SEK-1005的琼脂糖棒埋入皮下后，2天时为36.1 %、7天时为33.7%、10 天时为25.5%、14天时为23.9%，在通常的皮下组织中，该比例为30%左右，通常若埋入异 物则大多增加至50%以上，但通过SEK-1005的作用，抑制了其上升。
[0094] 进而，测定了浸提液中的TGF-βΙ的浓度。到埋入含SEK-1005的琼脂糖棒后7天为止 为0.7 ± 0. lng/ml，但之后TGF-m的浓度逐渐增加，在埋入后10天达到2.0 ± 1. Ong/ml，为埋 入有不含SEK-1005的琼脂糖棒的处置组的约3倍。之后逐渐降低。
[0095]比较例1.埋入有不含SEK-1005的琼脂糖棒的部位的免疫系统的细胞的分析 [0096]将4.5%的琼脂糖溶液封入内径4mm的聚苯乙烯制的管中，之后在常温下放置，由 此使琼脂糖溶液凝胶化。将琼脂糖凝胶棒从聚苯乙烯制管中取出，切断为长度25mm。之后， 在-30°C的冰箱中保存1晚，由此使水冻结。将冷冻琼脂糖棒冷冻干燥，由此制作出多孔的干 燥琼脂糖棒。
[0097]在琼脂糖棒埋入的那天，对ACI大鼠施用链脲霉素(STZ)(60mg/kg体重），由此诱发 糖尿病。在ACI大鼠的背部左右分别埋入一根不含SEK-1005的长度25mm、直径4mm的琼脂糖 棒。10天后抽出琼脂糖棒。用剪刀将埋入过琼脂糖棒的周围的组织切碎，进行匀化，从组织 中回收细胞，通过Percol 1密度梯度离心对免疫细胞进行纯化，利用流式细胞仪进行分析。 [0098]图1中示出对CD4+和作为调节性T细胞的标志物的F 〇xp3+进行分析的结果。关于作 为调节性T细胞的指标的CD4+及F〇xp3+的细胞在CD4+细胞中的比例，在将不含SEK-1005的琼 脂糖棒埋入皮下后，2天时为11.3%、7天时为10.5%、10天时为17.1%、14天时为11.3%。在 通常的皮下组织中，该比例为10%左右，通过不含SEK-1005的琼脂糖棒的作用，调节性T细 胞的比例略微升高，但其上升不明显。
[0099]另外，如图2所示，通过埋入不含SEK-1005的琼脂糖棒，细胞毒性T细胞相对于⑶4+ 细胞的比例增加至40 %以上，另一方面，关于CD3+细胞中的毒性T细胞(CD8+)相对于CD4+细 胞的比例，在将含SEK-1005的琼脂糖棒埋入皮下的情况下，2天时为36.1 %、7天时为 33.7%、10天时为25.5%、14天时为23.9%，抑制了细胞毒性T细胞的增加。
[0100] 实施例2.集聚到埋入有含SEK-1005的琼脂糖棒的部位的⑶4+⑶25+细胞的免疫抑 制功能评价
[0101] 进行与实施例1同样的操作，在埋入琼脂糖棒-SEK-1005的第10天，回收埋入棒的 部位的周围的组织并进行匀化，由此从组织中回收细胞，通过Percoll密度梯度离心对免疫 细胞进行纯化，利用MACS磁珠采集出⑶4+且⑶25+的细胞(包含大量的组织浸润调节性T细胞 的级分）。
[0102] 由ACI大鼠另行制备⑶8+Τ细胞，利用荧光染料羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（CFSE: Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester)对该细胞进行了染色。使用96孔板，每一个孔 接种2.5 X 104个⑶8+T细胞、5 X 104个抗原呈递细胞，4.5天后通过流式细胞仪定量评价了细 胞增殖。将上述孔分成3组，组1加入lyg/mL抗⑶3抗体以提供增殖刺激，组2中除了 lyg/mL抗 ⑶3抗体外还加入了 2.5 X 104个CD4+且⑶25+的细胞。另一方面，组3中不加入抗⑶3抗体。
[0103] 将其代表性的流式细胞图示于图3。用荧光色素染色后的T细胞进行一次细胞分裂 时，荧光强度变为一半，再分裂一次时，荧光强度变为原来的四分之一。在图3的流式细胞图 的右图（组3)中，荧光强度减小的细胞为整体的6.3%。认为这是在培养中自然分裂的细胞。 另一方面，图3的左图所示的流式细胞图（组1)为加入了抗CD3抗体的细胞的分析结果，荧光 强度减小的细胞达到整体的42.4%，可知多数细胞在4.5天的培养期间中发生了细胞分裂。 孔中加入了抗⑶3抗体和2.5 X 104个由琼脂糖棒-SEK-1005的周围组织回收的⑶4+且⑶25+ 的细胞(包含大量的组织浸润调节性T细胞的级分)时的流式细胞图（组2)示于图3的中央的 图。通过进行细胞分裂而使荧光强度降低的细胞的比例为13.4%，与组1的42.4%相比大幅 降低。即，可知:从琼脂糖棒-SEK-1005的周围组织回收的CD4+且CD25+的细胞具有抑制T细胞 增殖的能力。
[0104] 实施例3.埋入的含SEK-1005的琼脂糖棒的周围组织的基因表达分析
[0105]进行与实施例1同样的操作，在埋入含SEK-1005的琼脂糖棒的第7天，回收埋入了 棒的部位的周围组织。回收的组织迅速浸渍到抑制R N A分解的R N A1 a t e r液（L i f e Technologies)中，抑制RNA分解。利用柱法提取组织中的RNA。所提取的RNA利用表达试剂盒 法(Affimetrix)进行扩增，并进行生物素标记，与大鼠基因组230 2.0阵列(Affimetrix)杂 交。利用Hewlett-Packard GeneArray Scanner G2500A读取信号。如此对含SEK-1005的琼 脂糖棒、作为对照的不含SEK-1005的琼脂糖棒的各3个周边组织进行了基因表达分析。对所 得到的荧光强度进行标准化、归一化，之后进行统计分析。关于标准化、归一化的基因表达 量，在含SEK-1005的琼脂糖棒组和作为对照的不含SEK-1005的琼脂糖棒组中进行统计学比 较，关于各基因的表达，按照在含SEK-1005的琼脂糖棒组中表达上升的情况下X轴的数值为 正的方式进行作图。X轴进行Log2转换来表示。另外，关于2组间的显著性差异，将P值进行-LoglO转换，在Y轴进行作图（火山图、图4左上）。
[0106] 网罗性基因表达分析的结果表明，在含SEK-1005的琼脂糖棒组中，在趋化因子/细 胞因子相关基因中，参与调节性T细胞的游走/诱导的基因的表达显著上升，不参与调节性T 细胞的游走/诱导的趋化因子/细胞因子相关基因的基因表达显著降低。将趋化因子/细胞 因子相关基因的表达用火山图示于图4的右上图。另外，将调节性T细胞相关的趋化因子/细 胞因子相关基因的表达用热图示出（图4下）。由此认为，在琼脂糖棒-SEK-1005的情况下，使 调节性T细胞相关的趋化因子/细胞因子相关基因表达上升，由此琼脂糖棒-SEK-1005周边 的调节性T细胞增加，抑制细胞毒性T细胞(CD8)，由此制备出对移植器官进行免疫耐受的环 境。
[0107] 实施例4.埋入有含bFGF的琼脂糖棒的部位的免疫系统细胞的分析
[0108] 将4.5%的琼脂糖溶液封入内径4mm的聚苯乙烯制的管中，之后在常温下放置，由 此使琼脂糖溶液凝胶化。将琼脂糖凝胶棒从聚苯乙烯制管中取出，切断为长度25mm。之后， 在-30°C的冰箱中保存1晚，由此使水冻结。将冷冻琼脂糖棒冷冻干燥，由此制作出多孔的干 燥琼脂糖棒。在该干燥琼脂糖棒上滴加1〇〇μ1 500μg/ml的bFGF溶液（科研制药FIBLAST Spray 500)，使干燥琼脂糖棒含有bFGF溶液。
[0109] 在琼脂糖棒埋入的那天，对ACI大鼠施用链脲霉素(STZ)(60mg/kg体重），由此诱发 糖尿病。在ACI大鼠的背部左右分别埋入一根含有50yg bFGF的长度25mm、直径4mm的琼脂糖 棒。在7天后抽出琼脂糖棒。在埋入了琼脂糖棒的部位的周围形成了具有大量血管的结缔组 织。回收这些组织并用剪刀切碎，进行匀化，通过Percoll密度梯度离心对免疫细胞进行纯 化，利用流式细胞仪进行分析。
[0110] 图5中示出对⑶4+和作为调节性T细胞的标志物的Foxp3进行分析的结果。关于⑶4+ 细胞中的F〇xp3+细胞的比例，在将含bFGF的琼脂糖棒埋入皮下后，2天时为25.4%、7天时为 24.4%、10天时为24.4%、14天时为26.4%。在通常的皮下组织或埋入了不含bFGF的琼脂糖 棒的皮下组织中，该比例为10%左右，可知，通过bFGF的作用，调节性T细胞的比例升高为2 ~3倍左右。
[0111] 另外，在埋入了琼脂糖棒-bFGF的组中，粒细胞标志物增加，可知也诱导了髓源性 抑制细胞(MDSC)(图6)。
[0112] 实施例5.埋入的含bFGF的琼脂糖棒的周围组织的基因表达分析
[0113]进行与实施例4同样的操作，在埋入含bFGF的琼脂糖棒的第7天，回收埋入了棒的 部位的周围组织。回收的组织迅速浸渍到抑制RNA分解的RNAlater液(Life Technologies) 中，抑制RNA分解。利用柱法提取组织中的RNA。所提取的RNA利用表达试剂盒法 (Affimetrix)进行扩增，并进行生物素标记，与大鼠基因组230 2.0阵列（Affimetrix)杂 交。利用Hewlett-Packard GeneArray Scanner G2500A读取信号。如此对含bFGF的琼脂糖 棒、作为对照的不含bFGF的琼脂糖棒的各3个周边组织进行了基因表达分析。对所得到的荧 光强度进行标准化、归一化，之后进行统计分析。关于标准化、归一化的基因表达量，在含 bFGF的琼脂糖棒组和作为对照的不含bFGF的琼脂糖棒组中进行统计学比较，关于各基因的 表达，按照在含bFGF的琼脂糖棒组中表达上升的情况下X轴的数值为正的方式进行作图。X 轴进行Log2转换来表示。另外，关于2组间的显著性差异，将P值进行-LoglO转换，在Y轴进行 作图(火山图）。网罗性基因表达分析的结果表明，在琼脂糖棒-bFGF组中，在趋化因子/细胞 因子相关基因中，参与调节性T细胞的游走/诱导的基因的表达显著上升，不参与调节性T细 胞的游走/诱导的趋化因子/细胞因子相关基因的基因表达显著降低。将趋化因子/细胞因 子相关基因的表达用火山图示于图7(a)。另外，图7(b)中用热图示出了调节性T细胞相关的 趋化因子/细胞因子相关基因的表达。
[0114]由此认为，在含bFGF的琼脂糖棒的情况下，使调节性T细胞相关的趋化因子/细胞 因子相关基因表达上升，由此含bFGF的琼脂糖棒-bFGF周边的调节性T细胞增加，抑制细胞 毒性T细胞(CD8)，由此制备出对移植器官进行免疫耐受的环境。
[0115] 实施例6.通过向埋入有含SEK-1005的琼脂糖棒的部位的胰岛移植进行的血糖值 的评价
[0116] 在埋入含有SEK-1005的琼脂糖棒的那天，对ACI大鼠施用链脲霉素(STZ)(60mg/体 重），诱发糖尿病。将通过与实施例1相同的方法制作的含有SEK-1005的琼脂糖棒夹着该ACI 大鼠的背骨分别埋入左侧和右侧的皮下，在2天后或10天后取出琼脂糖棒之后的背侧皮下 空间内各移植1500个由F344大鼠分离的胰岛。之后，研究血糖值的变动。其结果，在埋入2天 后取出琼脂糖棒并进行移植的情况下，血糖值为400mg/dl以上，未观察到降低，与此相对， 在埋入10天后取出琼脂糖棒并进行移植的情况下，血糖值降低至正常水平。由此暗示，为了 形成适合于移植的免疫耐受部位，在埋入含SEK-1005的琼脂糖棒后，需要一定程度的期间。 需要说明的是，在埋入不含SEK-1005的琼脂糖棒10天并除去棒后，在移植胰岛时血糖值未 降低。
【主权项】
1.SEK-1005或成纤维细胞生长因子(FGF)在制造免疫耐受部位形成剂中的使用，该 SEK-1005为Ser，3-羟基-N-[2-羟基-1-氧代-2-四氢-2-羟基-6-甲基-5-(2-甲基丙基)-2H-吡喃-2-基-丙基]-Leu-Pip(六氢-3-哒嗪羰基)-N-羟基-Ala-N-甲基-Phe-Pip-rho-内酯。2. 如权利要求1所述的在制造免疫耐受部位形成剂中的使用，其中，所述SEK-1005或 FGF包含生物相容性材料。3. 如权利要求2所述的在制造免疫耐受部位形成剂中的使用，其中，生物相容性材料为 水凝胶。4. 如权利要求1~3中任一项所述的在制造免疫耐受部位形成剂中的使用，其中，所述 SEK-1005或FGF在免疫耐受部位形成剂中的含量为下述量:在使SEK-1005或FGF与体组织接 触后7天~14天后，与不使用SEK-1005或FGF的情况相比，在该体组织中能够诱引1.3倍~3 倍的CD4+F 〇Xp3+细胞的量。 5. SEK-1005或FGF在制造免疫抑制性细胞诱引剂中的使用。6. 如权利要求5所述的在制造免疫抑制性细胞诱引剂中的使用，其中，所述SEK-1005或 FGF包含生物相容性材料。7. 如权利要求6所述的在制造免疫抑制性细胞诱引剂中的使用，其中，生物相容性材料 为水凝胶。8. 如权利要求5~7中任一项所述的在制造免疫抑制性细胞诱引剂中的使用，其中，所 述免疫抑制性细胞为调节性T细胞或髓源性抑制细胞。9. 如权利要求5~7中任一项所述的在制造免疫抑制性细胞诱引剂中的使用，其中，所 述SEK-1005或FGF在免疫抑制性细胞诱引剂中的含量为下述量:在使SEK-1005或FGF与体组 织接触后7天~14天后，与不使用SEK-1005或FGF的情况相比，在该体组织中能够诱引1.3倍 ~3倍的CD4+F 〇Xp3+细胞的量。
【文档编号】A61K38/18GK106039288SQ201610227582
【公开日】2016年10月26日
【申请日】2016年4月13日 公开号201610227582.6, CN 106039288 A, CN 106039288A, CN 201610227582, CN-A-106039288, CN106039288 A, CN106039288A, CN201610227582, CN201610227582.6
【发明人】岩田博夫, 桒原令, 滨口真英, 平野邦生, 坂口志文
【申请人】国立大学法人京都大学, 爱科来株式会社, 京都府公立大学法人