包含含酶聚合物粒子的酶组合物的制作方法

专利名称：包含含酶聚合物粒子的酶组合物的制作方法
包含含酶聚合物粒子的酶组合物本发明涉及一种包含含酶聚合物粒子的酶组合物，其可用于清净剂组合物，特别 是液体清净剂组合物。已知酶的稳定性受储存时的周围环境影响，如化学或物理因素可降低酶的稳定 性。特别是，在包含蛋白质敌对化合物的液体配制剂如液体清净剂中酶的稳定性是有问题 的，难以保持酶在这种液体配制剂中稳定。与液体清净剂相关的特别问题是它们通常含有 消化蛋白质的蛋白水解酶，因此存在于液体清净剂中的其它酶可被存在的蛋白酶减活化， 其中可发生蛋白水解和自体蛋白水解。在液体配制剂中使用包含聚合物与酶的混合物的粒子代替通常的液体酶产品可 具有几个优点；它可保持酶敌对化合物远离酶直至酶活性为所需的，且它可避免酶与液体 中活化酶的化合物直接接触。然而，由于较大粒子的光散射，在加入含酶的聚合物粒子以 后，液体配制剂可变得混浊。在加入以后粒子不会或仅轻微改变液体配制剂的外观以及它 们具有降低的沉降倾向也是重要的。此外，重要的是酶在合适的时间释放，例如对于液体清 净剂，酶一与洗涤水接触就释放。已存在若干尝试制备适于液体配制剂如液体清净剂的酶组合物。EP 356239 A2和EP 356240公开了含酶聚合物珠，其可通过从水溶性聚合物如聚 丙烯酸和酶在水不溶性液体中的水溶液的油包水(w/o)乳液中除去水或通过甲醛和脲凝 聚而制备。制备聚合物粒子的方法为单调的且不能制备小型酶聚合物粒子。除此之外，酶 的稳定性不令人满意。WO 93/22417 Al描述了包含(a)清净剂敏感成分如清净剂酶和(b)聚合物复合物 的聚合物胶囊，其中聚合物复合物包含(i)通过烯属不饱和单体乳液聚合形成的疏水性聚 合物芯，和(ii)亲水性聚合物，其选自合成非离子聚合物、多糖、改性多糖、蛋白质、改性蛋 白质、带有羟基的蛋白质和带有羧基的聚合物。然而，聚合物复合物难以制备。US 5，198，353描述了一种制备稳定酶分散体的方法，其包括在酶的存在下从水溶 液中沉淀水溶性聚合物如聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧甲基纤维素、瓜尔胶或聚羧酸。分 散体适于酶催液体清净剂。然而，实现的稳定不完全令人满意。WO 02/81616 Al描述了适于清净剂组合物的含水溶性或水分散性酶的粒子，其中 将酶分散在包含聚乙烯醇的基质中。粒子相当大，因此难以掺入液体清净剂组合物中。WO 02/96551 Al描述了包含胶态模板和围绕模板的聚合物的可溶性纳米-或微 胶囊。聚合物为聚两性电解质，例如等电点优选为PH4-9的蛋白质。它建议使用这些胶囊 包封洗衣用清净剂。制备纳米-或微胶囊的方法为单调的，且聚两性电解质为昂贵的。因此，本发明的目的是提供用于在包含蛋白质敌对化合物的液体配制剂如液体清 净剂中有效稳定酶的组合物。理想的是组合物可容易地掺入液体配制剂，特别是液体清净 剂组合物中。当掺入液体配制剂中时，组合物应不影响配制剂的外观。此外，组合物应容易 地制备。已令人惊讶地发现这些和其它目的通过呈含酶粒子形式的组合物实现，其中所述 粒子包含
i)至少一种酶，和ii)至少一种聚合物P，其选自具有C-C骨架的均聚物和共聚物，其中C-C骨架带 有可以酸形式或以中和形式存在的羧基，且其中C-C骨架基于聚合物P的总重量(即基于 聚合物P中重复单元的总重量)包含至少20重量％，例如20-98重量％衍生自单体B的疏 水性重复单元，所述单体B在25°C下的水溶性为至多30g/l，其中含酶粒子的体积平均粒径为50nm_100 μ m。因此，本发明涉及呈含酶粒子形式的酶组合物，其中所述粒子包含i)至少一种酶，和ii)至少一种如本文所定义的聚合物P，且其中含酶粒子的体积平均粒径为50nm_100 μ m。本发明酶组合物具有几个优点。包含聚合物P与酶的混合物的粒子改进了液体配 制剂如清净剂中酶的储存稳定性。含酶聚合物粒子可容易地由液体酶制剂制备，此外，聚合 物P为市售的或可容易地制备。由于粒子具有小尺寸，它们在配制剂中特别不可见，且不沉 降。由于酶存在于粒子中，酶不与环境直接接触，且周围环境中的酶敏感性化合物如液体清 净剂中的组分不与酶直接接触。酶敏感性化合物可为对于脂肪酶的类脂或对于蛋白酶的蛋 白质。除此之外，酶快速释放至它要起作用的介质中。关于清净剂，重要的是当清净剂在洗 涤过程期间被水稀释时释放酶。这通过充当释放体系的聚合物P的性能确保。因此，酶组 合物适于掺入清净剂组合物，特别是液体清净剂组合物中。因此，本发明还涉及清净剂组合 物，特别是液体清净剂组合物。本发明酶组合物含至少一种酶或酶混合物。在本发明上下文中，酶可为任何酶或不同酶的组合。因此，当提到“酶”时，这通常 应当理解包括一种酶或酶的组合。酶可为任何市售酶，特别是选自蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、纤维素酶、裂合酶、氧化 还原酶及其混合物的酶。还包括来自同一类酶(例如蛋白酶)的混合物。可优选掺入本发明组合物中的酶的类型包括氧化还原酶(EC 1.-.-._)、转移酶 (EC 2.-.-.-)、水解酶(EC 3.-.-.-)、裂合酶(EC 4.-.-.-)、异构酶(EC 5.-.-.-)和连接 酶(EC 6.-.-.-)及其混合物。应当理解酶变体(例如通过重组技术制备)包括在术语“酶”的含义内。这 种酶变体的实例例如公开于 EP 251，446 (Genencor)、WO 91/00345 (Novo Nordisk)、EP 525, 610 (Solvay)和 WO 94/02618 (Gist-Brocades NV)中。酶可基于手册酶命名法NC-IUBMB，1992分类，还见互联网的ENZYME网址 http://www. expasy. ch/enzyme/0 ENZYME为关于酶命名的信息库。它主要基于 Nomenclature Committee of the International Union of Biochemistry and Molecular Biology(IUB-MB)，Academic Press, Inc.，1992 的推荐，它描述了 提供有 EC (Enzyme Commission)号的表征酶的各个类型(Bairoch A. The ENZYME database, 2000, Nucleic Acids Res28 :304-305)。该IUB-MB酶命名法基于它们的基质特异性，有时基于它们的分子 机理；这种分类不反映这些酶的结构特征。多年前已推荐了基于氨基酸顺序相似性的种类中的某些糖苷水解酶的另一分类， 例如内切葡聚糖酶、木聚糖酶、半乳聚糖酶、甘露聚糖酶、葡聚糖酶和α-半乳糖苷酶。目前它们分为90个不同的种类见CAZy(ModO)互联网址(Coutinho, P. M. & Henrissat, B. (1999)碳水化合物-活性酶服务器连接(URL) :http //afmb. cnrs-mrs. fr/ cazy/ CAZY/index. html (对应文件:Coutinho，P. Μ. & Henrissat，B. (1999)碳水化合物-活性酶 综合数据库° 在"Recent Advances in Carbohydrate Bioengineering", H. J. Gilbert, G.Davies, B. Henrissat 禾口 B. Svensson 编 辑，The Royal Society of Chemistry, Cambridge,第 3-12 页；Coutinho, P. Μ. & Henrissat, B. (1999)。纤维素酶和其它碳水 化合物活性酶的模块结构综合数据库。在“Genetics，Biochemistry and Ecology of Cellulose Degradation，，，K. Ohmiya, K. Hayashi, K. Sakka, Y. Kobayashi, S. Karita 禾口 Τ. Kimura 编辑，Uni Publishers Co.，iTokyo,第 15-23 页中)。氧化还原酶在这里可使用适用于液体组合物中的氧化还原酶，例如过氧化物酶 或氧化物酶如漆酶。这里合适的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学 或基因改性的突变体。合适的过氧化物酶的实例为衍生自鬼伞属(Coprinus)菌株，例如灰 盖鬼伞(C. cinereus)或长根鬼伞(C. macrorhizus)，或杆菌属(Bacillus)菌株，如短小芽 胞杆菌(B.pumilus)的那些，特别是根据WO 91/05858的过氧化物酶。这里合适的漆酶包 括细菌或真菌来源的那些。包括化学或基因改性的突变体。合适的漆酶的实例为可由栓菌 属(Trametes)菌株，例如长绒毛栓菌(T. villosa)或变色栓菌(T. versicolor)，或鬼伞属 (Coprinus)菌株，例如灰盖鬼伞(C. cinereus)，或毁丝霉属(Myceliophthora)菌株，例如 嗜热毁丝霉(M. thermophila)得到的那些。在本发明上下文中优选的氧化还原酶为过氧化物酶(EC 1. 11. 1)、漆酶(EC 1. 10. 3. 2)和葡糖氧化酶(EC 1.1.3.4)。市售的氧化还原酶(EC 1._._._)的实例为
Gluzyme (可由Novozymes A/S得到的酶)。其它氧化还原酶可由其它供应商得到。优选的转移酶为以下子类中任一种中的转移酶a转移单碳基团的转移酶(EC 2. 1)；b转移醛或酮残基的转移酶(EC 2. 2)；酰基转移酶(EC 2. 3)；c羰基转移酶(EC 2. 4)；d转移不同于甲基的烷基或芳基的转移酶(EC 2. 5)；和e转移含氮基团的转移酶(EC 2. 6)。在本发明上下文中，一类最优选的转移酶为谷氨酰胺转移酶(蛋白质-谷氨酰胺 Y -谷酰基转移酶；EC 2. 3. 2. 13)。合适的谷氨酰胺转移酶的其它实例描述于WO 96/06931 (Novo Nordisk A/S)中。在本发明上下文中优选的水解酶为酯酶(EC 3. 1)，特别是羧酸酯水解酶(EC 3. 1. 1.-)，例如三酰甘油脂肪酶(EC 3. 1. 1. 3)；植酸酶(EC 3. 1. 3.-)，例如3-植酸酶(EC 3. 1. 3. 8)和6-植酸酶(EC 3. 1. 3. 26)；糖苷酶(EC 3. 2，其属于这里表述为“糖酶”的一 组)，例如α -淀粉酶(EC 3. 2. 1. 1)、β -淀粉酶(EC3. 2. 1. 2)；肽酶(EC 3. 4.-.-，也称作 蛋白酶)，和其它羰基水解酶。蛋白酶合适的蛋白酶包括动物、植物或微生物来源的那些。优选微生物来源。 包括化学或基因改性的突变体。蛋白酶可为丝氨酸蛋白酶，优选碱性微生物蛋白酶或胰 蛋白酶状蛋白酶。碱性蛋白酶的实例为枯草溶菌素，尤其是衍生自杆菌属的那些，例如枯 草溶菌素Novo、枯草溶菌素Carlsberg、枯草溶菌素309、枯草溶菌素147和枯草溶菌素168(W089/06279所述)。胰蛋白酶状蛋白酶的实例为胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和WO 89/06270中所述镰孢霉(Fusarium)蛋白酶。在本发明具体实施方案中，蛋白酶为丝氨酸蛋 白酶。丝氨酸蛋白酶或丝氨酸肽链内切酶(新命名)为一类肽酶，其通过丝氨酸残基在酶 的活性中心存在表征。丝氨酸蛋白酶丝氨酸蛋白酶为催化肽键水解，且其中在活性部位上存在主要是 丝氨酸残基的酶(White，Handler 和 Smith，1973"Principles of Biochemistry”，第 5 版， McGraw-Hill Book Company, NY,第 271-272 页)。细菌丝氨酸蛋白酶的分子量为20，000-45，000道尔顿。它们受二异丙基氟磷酸酯 抑制。它们水解简单的末端酯且在活性方面类似于真核胰凝乳蛋白酶，也为一种丝氨酸蛋 白酶。更狭义地讲，涵盖子类的碱性蛋白酶反映出一些丝氨酸蛋白酶的高PH最佳值，例如 ρΗ9· 0-11. 0(为检验，见 Priest (1977) Bacteriological Rev. 41711-753)。枯草杆菌酶(Subtilases):Siezen 等人，(1991)，Protein Eng.，4719-737 已推荐 了暂称为枯草杆菌酶的丝氨酸蛋白酶的一个子类。它们通过同源性分析先前称作枯草溶菌 素状蛋白酶的丝氨酸蛋白酶多于40个氨基酸顺序定义。枯草溶菌素先前定义为通过革兰 氏阳性细菌或真菌制备的丝氨酸蛋白酶，根据Siezen等人，现在为枯草杆菌酶的一个子类。 已识别了多种枯草溶菌素，并已确定大量枯草溶菌素的氨基酸顺序。这些包括大于6种来 自杆菌菌株的枯草溶菌素，即枯草溶菌素168、枯草溶菌素BPN'、枯草溶菌素Carlsberg、 枯草溶菌素 Y、枯草溶菌素 amyIosacchariticus 禾口 mesentericopeptidase (Kurihara 等人 (1972) J. Biol. Chem. 2475629-5631 ；Wells 等人(1983)Nucleic Acids Res. 117911-7925 ； Stahl 和 Ferrari(1984)J. Bacteriol.159811-819, Jacobs 等人(1985)Nucl. Acids Res. 138913-8926 ；Nedkov 等人(1985) Biol. Chem. Hoppe-Seyler 366421-430，Svendsen 等 人(1986)FEBS Lett. 1962沘_232)，来自放线菌目(actinomycetales)的一种枯草溶菌素， 来自普通高温放线菌(Thermoactinomyces vulgaris)的嗜热蛋白酶(Meloun等人(1985) FEBS Lett. 198195-200)，和一种真菌枯草溶菌素，来自白色念珠菌(Tritirachium album) 的蛋白酶 K(Jany 和 Mayer (1985)Biol. Chem. Hoppe-Seyler 366584-492)。为进一步参考， 以下转载了 Siezen等的表I。枯草溶菌素被很好地物理和化学地表征。除这些酶的主要结构(氨基酸顺序)的 知识外，已确定了枯草溶菌素的超过50高分辨率X射线结构，其描绘了基质的键合、过渡 态、产物、至少三种不同的蛋白酶抑制剂，并定义了天然变异的结构结果(Kraut (1977) Arm. Rev. Biochem. 46331—358)。枯草杆菌酶的一个子类，I-Sl包括“传统的”枯草溶菌素，例如枯草溶菌素168、枯 草溶菌素BPN'、枯草溶菌素Carlsberg(ALCALASE ，Novozymes A/幻和枯草溶菌素 DY。Siezen等人(supra)识别了枯草杆菌酶的另一子类，I-S2。子类I-S2蛋 白酶被描述为高碱性枯草溶菌素，且包括酶如枯草溶菌素pb92(maxaCAL , Gist-Brocades NV)，枯草溶菌素 309 ( SAVINASE , Novozymes A/S)，枯草溶菌素 147 ( ESPERASE , Novozymes A/S)，和碱性弹性蛋白酶 YaB。由酶物理和化学性能的知识和关于枯草杆菌酶催化活性、基质特异性、三级结构等的相关信息(Wells 等人(1987)Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. Α. 84 ； 1219-1223 ； Wells 等人(1986)Phil. Trans. R. Soc. Lond. Α. 317415-423 ；Hwang 和 Warshel (1987) Biochem. 262669-2673 ；Rao 等人，(1987)Nature328551_554 来看，已出现枯草杆菌酶基因 的无规则和定点突变，覆盖该领域的更近期出版物为Carter等人(1989)ftx)teinS 6M0-M8，其涉及 分解基质中特异性目标顺序的变体的设计(位置M和64) ；Graycar等人(199 Armals of the New York Academy of Sciences 67271-79，其讨论了大量先前出版的结果；和 Takagi (1993) Int. J. Biochem. 25307-312，其也评论了先前的结果。市售蛋白酶(肽酶)的实例包括Kannase 、Everlase , Esperase ,
Alcalase 、Neutrase 、Durazym 、Savinase 、Ovozyme 、Pyrase 、
Pancreatic Trypsin NOVO (PTN)、Bio-Feed Pro 和 Clear-LeilS Pro (所有都可由 Novozymes A/S, Bagsvaerd，Denmark 得到)。其它优选的蛋白酶包括 WO 01/58275 和 WO 01/58276所述的那些。其它市售的蛋白酶包括Ronozyme Pro, Maxatase , Maxacal 、 Maxapem 、Opticlean 、Propease 、Purafect ,和 Purrfect 0x (可由
Genencor International Inc., Gist-Brocades, BASF 或DSM Nutritional Products得 到)。市售蛋白酶的实例包括Lipex Lipoprime 、Lipopan Lipolase 、 Lipolase 、Ultra、Lipozyme 、Palatase 、Resinase , Novozym 435 禾口 Lecitase (所有可由 Novozymes A/s 得到)。脂肪酶合适的脂肪酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学或基因改性的突变 体。有用的脂肪酶的实例包括柔毛腐质霉(Humicola lanugi-nosa)脂肪酶，例如 如EP 258 068和EP 305 216所述，米黑根毛霉(Rhizomucor miehei)脂肪酶，例如如EP 238 023所述，假丝酵母菌属(Candida)脂肪酶，例如南极假丝酵母(C. antarctica)脂肪 酶，例如EP 214 761所述的南极假丝酵母脂肪酶A或B，假单胞菌属(I^eudomonas)脂肪 酶，例如类产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)和产碱假单胞菌(P. alcali-genes)脂 肪酶，例如如EP 218272所述，洋葱假单胞菌(P. c印acia)脂肪酶，例如如EP 331 376所 述，斯氏假单胞菌(P. stutzeri)脂肪酶，例如如BP 1，372，034所公开的，荧光假单胞菌 (P. fluorescens)脂肪酶，杆菌属(Bacillus)脂肪酶，例如枯草杆菌(B. subtilis)脂肪酶 (Dar-tois 等人，(1993) ,Biochemica et Biophysica acta 1131，253-260)，嗜热脂肪芽孢 杆菌(B. stearothermophiIus)脂肪酶(JP 64/744992)和短小芽孢杆菌(B. pumilus)脂肪 酶(W0 91/16422)。此外，可使用大量克隆脂肪酶，包括私-maguchi等人，(1991)，Genel03，61-67)所 述卡门培尔干酪青霉(Penicillium camenbertii)脂肪酶，Gchimada，Y.等人，(1989)， J. Biochem. 106,383-388)所述白地霉(Geotricum can-didum)脂肪酶，和各种根霉属 (Rhizopus)脂肪酶，例如戴尔根霉(R. delemar)脂肪酶(Hass, M. J 等人，(1991)，Gene109，117-113)，红泡刺藤(R. niveus)脂肪酶(Kugimiya 等人，(1992)，Biosci. Biotech. Bio-chem. 56，716-719)和米根霉(R. oryzae)脂肪酶。也可使用其它类型的脂肪分解酶如角质酶，例如如WO 88/09367所述衍生自门 多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)的角质酶，或衍生自豌豆根腐病菌(Fusarium solani pisi)的角质酶(例如如WO 90/09446所述)。其它市售的脂肪酶包括Lumafast (来自Genencor International Inc.的门 多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)脂肪酶)；Lipomax (来自 Gist-Brocades/ Genencor Int. Inc.的类产碱假单胞菌(P. pseudoalcaligenes)脂肪酶；和来自 Solvay 酶的杆菌属脂肪酶。其它脂肪酶可由其它供应商得到，例如Lipase P “Amano“ (Amano Pharmaceutical Co. Ltd.)0淀粉酶合适的淀粉酶(α和/或β)包括细菌或真菌来源的那些。包括化学 或基因改性的突变体。淀粉酶例如包括由地衣芽孢杆菌(B. Iicheniformis)的特殊菌株 得到的α-淀粉酶，其更详细地描述于英国专利说明书号1，296，839中。市售的淀粉酶为 Duramyl , Termamy 1 ,Fungamy 1 和 BAN (可由 Novozymes A/S 得到)以及 Rapidase 和 Maxamyl P (可由 Gist-Brocades 得到)。纤维素酶合适的纤维素酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学或基因改性 的突变体。合适的纤维素酶公开于US 4，435，307中，其公开了由特异腐质霉(Humicola insolens)产生的真菌纤维素酶。尤其合适的纤维素酶为具有颜色护理优点的纤维素酶。 这种纤维素酶的实例为欧洲专利申请号O 495 257中描述的纤维素酶。市售的植酸酶的实例包括Bio-Feed Phytase (Novozymes)、Ronozyme P(DSM Nutritional Products)、Natuphos (BASF)、Finase (AB Enzymes)，和 Phyzyme 产品系列 (Danisco)。其它优选的植酸酶包括WO 98/28408、WO 00/43503和WO 03/066847所述那 些。在本发明上下文中，术语“糖酶”不仅用于表示能分解尤其是5和6元环结构的碳 水化合物链(例如淀粉或纤维素)的酶(即糖苷酶，EC 3. 2)，而且表示能使碳水化合物，例 如6元环结构如D-葡萄糖异构成5元环结构如D-果糖的酶。相关糖酶包括如下(括号中为EC号)α-淀粉酶(EC 3. 2. 1. 1)、β-淀粉酶(EC 3. 2. 1. 2)、葡聚糖 1，4_ α -葡糖苷酶 (EC3. 2. 1. 3)、内切-1，4-β-葡聚糖酶(纤维素酶，EC 3.2. 1. 4)、内切-1，3 (4) - β -葡聚 糖酶(EC 3. 2. 1.6)、内切-1，4-β-木聚糖酶(EC 3. 2. 1. 8)、葡聚糖酶(EC3. 2. 1. 11)、几 丁质酶(EC 3. 2. 1. 14)、聚半乳糖醛酸酶(EC 3. 2. 1. 15)、溶菌酶(EC 3. 2. 1. 17), β -葡 糖苷酶(EC 3. 2. 1. 21)、α-半乳糖苷酶(EC 3. 2. 1. 22)、β -半乳糖苷酶(EC 3. 2. 1. 23)、 淀粉-1，6-葡糖苷酶(EC 3.2. 1.33)、木聚糖1，4-β-木糖苷酶(EC 3. 2. 1. 37)、葡聚糖内 切-1，3-β-D-葡糖苷酶(EC 3.2. 1. 39)、α-糊精内切-1，6-α-葡糖苷酶(EC3. 2. 1.41)、 蔗糖α-葡糖苷酶(EC 3.2. 1.48)、葡聚糖内切-1，3-α-葡糖苷酶(EC 3.2. 1.59)、葡聚 糖1，4- β -葡糖苷酶(EC3. 2. 1. 74)、葡聚糖内切-1，6- β -葡糖苷酶(EC 3.2.1. 75)、半乳 聚糖酶(EC3.2. 1.89)、聚阿拉伯糖内切-1，5-0-1^-阿拉伯糖酶(EC 3.2. 1.99)、乳糖酶 (EC3. 2. 1. 108)、壳聚糖酶(EC 3. 2. 1. 132)和木糖异构酶(EC 5. 3. 1. 5)。
市售的糖酶的实例包括 Alpha-Gal 、Bio-Feed Alpha、Bio-Feed Beta、Bio-Feed plus、Bio-Feed wheat、Bio-Feed z、Novozyme 188、 Carezyme 、Celluclast 、Cellusoft 、Celluzyme 、Ceremyl 、 Citrozym 、Denimax 、Dezyme 、Dextrozyme 、Duramyl 、 Energex 、 Finizym 、 Fungamyl 、 Gamanase 、 Glucanex 、 Lactozym 、Liquezyme 、Maltogenase 、Natalase 、Pentopan 、 Pectinex 、Promozyme 、Pulpzyme 、Novamyl 、Termamyl 、 AMG (Amyloglucosidase Novo)、Maltogenase 、 Sweetzyme 和Aquazym (都可由Novozymes A/s得到)。其它糖酶可由其它供应商得 到，例如 Roxazyme 禾日 Ronozyme 产品系(DSM Nutritional Products)、 Avizyme 、Porzyme 禾口 Grindazyme 产品系列(Danisco、Finnfeeds),禾口 Natugrain (BASF)、pUrastar 禾口Purastar OxAm (Genencor)。其它市售的酶包括Maimaway 、Pectaway 、Stainzyme 和 Renozyme 本发明组合物优选包含蛋白酶(EC 3. 4. -. _)，特别是丝氨酸蛋白酶。在具体实施 方案中，组合物包含两种或更多种酶，其中第一种酶为蛋白酶，第二种酶选自葡糖苷酶(EC 3. 2.-.-)，特别是淀粉酶(EC 3. 2. 1. 1和3. 2. 1. 2)和纤维素酶(3. 2. 1. 4)，羧酸酯水解酶 (E. C. 3. 1.-.-)如脂肪酶(EC 3. 1. 1.-)，特别是三酰甘油脂肪酶(EC 3. 1. 1. 3)，裂合酶和 氧化还原酶。在更具体的实施方案中，第二种酶为脂肪酶，特别是三酰甘油脂肪酶。含酶粒子包含至少一种如本文所定义的聚合物P。聚合物P具有带有羧基(C00H) 且包含衍生自单体B的疏水性重复单元的C-C骨架，其中单体B在25°C下的水溶性为至多 30g/l，优选至多10g/l，特别是至多5g/l，尤其是至多lg/Ι。优选，聚合物P为存在于组合 物中或含酶粒子中的唯一合成聚合物，或占存在于组合物和因此的含酶粒子中的合成聚合 物总重量的至少90重量％。聚合物P中的羧基可直接，即借助单键，或借助二价基团如C1-C4亚烷基结构部分 (例如CH2或CH2-CH2)或式-C (0) O-Alk-的结构部分连接在聚合物骨架上，其中Alk为线性 或支化C2-C4亚烷基如1，2-亚乙基、1，3-亚丙基、1，4-亚丁基、2-甲基丙烷-1，2- 二基，且 其中羰基连接在聚合物骨架上。优选，羧基直接连接在C-C骨架上。羧基可以以酸性形式(C00H)或以中和形式，即以阴离子形式存在。聚合物P则包 含用于聚合物电中和的抗衡离子。合适的抗衡离子包括碱金属离子，例如钠或钾离子，NH4+ 和有机铵离子如单_、二 _、三-和四烷基铵，其中各个烷基结构部分可具有1-40个碳原子， 优选总计1-40个碳原子，且其中烷基结构部分可为未被取代或由羟基或NRR'基团取代 的，其中R和R'各自独立地选自氢或C1-C4烷基，且其中具有1-40个碳原子的烷基结构部 分可间隔有1个或多个，即1、2、3、4、5或6个不相邻的氧原子。羧基量的选择通常使得酸值，即可中和羧基的总数为10-700mgK0H/g聚合物P，特别是 30-600mg KOH/g 聚合物 P 或 50_500mg KOH/g 聚合物 P。技术人员清楚聚合物P的C-C骨架通常由C-C重复形成，其对应于具有可聚合C = C双键的聚合单体。形成聚合物P的单体一聚合，单体的可聚合C = C双键就形成聚合物P 的C-C骨架。因此，聚合物P中的重复单元通常对应于制备聚合物P时聚合的单体。因此， 本发明中所用术语“重复单元”、“聚合单体的单元”、“衍生自单体的单元”和“衍生自(聚 合)单体的重复单元”为同义词。羧基通常为形成聚合物P ( 一部分)C-C骨架的聚合单体A的一部分，即羧基为聚 合物P的C-C骨架那些重复单元的一部分，其衍生自单体A。这些单体A通常为单烯属不饱 和的且带有至少一个羧基。合适的单体A包括具有3-8个碳原子的单烯属不饱和单羧酸， 例如丙烯酸、甲基丙烯酸、巴豆酸、2-乙烯基乙酸、丙烯酸或甲基丙烯酸与羟基乙酸的酯。合 适的单体A还包括具有4-8个碳原子的单烯属不饱和二羧酸，例如富马酸、马来酸、衣康酸 和柠康酸。单体A还可包括上述单体的混合物。技术人员容易地理解在聚合物P的制备中，代替上述羧酸单体A或与其组合，可使 用相应的酐，例如丙烯酸酐、甲基丙烯酸酐、马来酸酐或衣康酸酐。在这种情况下，使主要得 到的聚合物经受水解，以将酐基团转化成羧基。聚合物P中单体A的量通常为2-80重量％，优选3-70重量％，特别是5_60重 量％，其基于聚合物P中重复单元的总重量，这对应于聚合物P的总重量。聚合物P的C-C骨架还包含衍生自单体B的疏水性重复单元，即聚合单体B形成 聚合物P的C-C骨架重复单元的另一部分。与羧基组合，衍生自单体B的重复单元赋予聚 合物P两亲性。疏水性重复单元可为通常具有2-200个，特别是2-100个，更优选2_50个碳原子， 包括形成C-C骨架的两个碳原子的烃重复单元。疏水性重复单元也可为包含至少一个优选选自0和N的杂原子(例如1、2、3或4 个杂原子)和至少一个具有至少一个，特别是至少两个碳原子，例如1-200个，特别是2-100 个，更优选2-50个碳原子的不可聚合烃基的重复单元。在这种情况下，烃结构部分借助杂 原子结构部分如0、N、C (0) 0 (=羧基)、C (0) N(羧酰胺)或C (0) NC (0)(环状或无环羧酰胺) 结合在聚合物的C-C骨架上。不可聚合烃基可为具有1-200个碳原子，优选2-100个碳原 子，特别是2-50个碳的线性或支化烷基，具有5-10个碳原子且任选由1、2、3个具有1_20 个碳原子的烷基取代的环烷基，和任选由1、2、3个具有1-20个碳原子的烷基取代的芳基如 苯基或萘基。如本发明所用术语Cn-Cm表示相应基团中的碳原子数。如本发明所用，术语“烷基”指线性或支化烷基，包括C1-C2tl烷基，例如甲基、乙 基、丙基、异丙基、正丁基、2-丁基、叔丁基、正己基、正庚基、正辛基、1，1，3，3-四甲基丁基、 2-乙基己基、壬基、正癸基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基、十七烷基、 十八烷基、二十烷基、二十二烷基、二十四烷基、三十烷基等。聚合物P中疏水性重复单元的量基于聚合物P中重复单元的总重量(对应于聚合 物P的总重量)为至少20重量％，优选至少30重量％，特别是至少40重量％。聚合物P 中疏水性重复单元的量通常为聚合物P总重量的20-98重量％，优选30-97重量％，特别是 40-95 重量 ％。
疏水性重复单元衍生自聚合疏水性单体B。疏水性单体B具有降低的水溶性，在 25°C下的水溶性通常不超过30g/l。特别是，疏水性单体B在25°C下的水溶性不超过IOg/ 1，特别是5g/l，尤其是lg/Ι。疏水性单体B可实际上不溶于水(即溶解度在检测极限以 下)或在25°C下水溶性为至少10_5g/l。这些疏水性单体B通常选自具有至少两个碳原子的单烯属不饱和烃单体和单烯 属不饱和非离子单体，其中所述单烯属不饱和非离子单体具有可聚合C = C双键、至少一个 优选选自0和N的杂原子(例如1、2、3或4个杂原子)和至少一个如上定义具有至少一个， 特别是至少两个碳原子，例如1-200个碳原子，特别是2-100个碳原子或3-100个碳原子， 更优选2-50个碳原子或3-50个碳原子的不可聚合烃基。疏水性单体还可选自具有羧基和 至少一个如上定义具有至少两个，特别是至少4个碳原子，例如2-100个，特别是4-100个， 更优选4-50个碳原子的不可聚合烃基的单烯属不饱和单体。当然，单体B还可选自至少一 种烃单体与至少一种其它单体的混合物，其中所述其它单体选自上述具有至少一个杂原子 的单烯属不饱和非离子单体和上述具有羧基和至少一个不可聚合烃基的单烯属不饱和单 体。合适的烃单体包含一个形成C-C骨架一部分的可聚合C-C双键，和任选一个或多 个，例如一个或两个其它烃基如优选具有1-98个碳原子，特别是1-48个碳原子的线性或支
化烷基。合适的烃单体包括烯烃，特别是具有优选2-100个碳原子，特别是2-50个碳原子 的α-烯烃，实例包括乙烯、丙烯、1-丁烯、2-丁烯、异丁烯、1-戊烯、1-己烯、1-庚烯、1-辛 烯、二异丁烯O-甲基-4，4-二甲基-1-戊烯)、1_壬烯、1-癸烯、1-十一碳烯、1-十二碳 烯、1-十四碳烯、1-十六碳烯、1-十八碳烯、1-二十碳烯、1-二十二碳烯、1-二十四碳烯、 1- 二十六碳烯、1- 二十八碳烯及其混合物，特别是C12 α -烯烃、C16 α -烯烃、C18 α -烯烃、 C2ch24 α -烯烃和C18_24 α -烯烃的工业混合物以及具有可聚合双键，特别是乙烯基或亚乙烯 基双键WC4-Cltl烯烃的低聚物，低聚物的实例包括分子量(数均)为140-2000道尔顿，特 别是的低聚丁烯和低聚异丁烯。合适的烃单体包括乙烯基芳族单体如苯乙烯、α-甲基苯 乙烯，和取代的苯乙烯如2-甲基苯乙烯、4-甲基苯乙烯、2_(正丁基)苯乙烯、4_(正丁基) 苯乙烯、2-(叔丁基)苯乙烯、4-(叔丁基)苯乙烯、2-(正癸基)苯乙烯和2-(正癸基)苯 乙火布ο合适的具有至少一个优选选自0和N的杂原子，和至少一个具有至少两个，特别是 至少两个碳原子的不可聚合烃基的非离子单烯属不饱和单体包括-C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯，特别是丙烯酸或甲基丙烯酸的酯，例如(甲基)丙烯 酸乙酯、(甲基)丙烯酸正丙酯、(甲基)丙烯酸异丙酯、(甲基)丙烯酸正丁酯、(甲基)丙 烯酸仲丁酯、(甲基)丙烯酸叔丁酯、(甲基)丙烯酸正己酯、(甲基)丙烯酸正庚酯、(甲 基)丙烯酸正辛酯、(甲基)丙烯酸1，1，3，3-四甲基丁酯、(甲基)丙烯酸2-乙基己酯、 (甲基)丙烯酸正壬酯、(甲基)丙烯酸正癸酯、(甲基)丙烯酸正十一烷酯、(甲基)丙烯 酸十三烷酯、(甲基)丙烯酸肉豆蔻酯、(甲基)丙烯酸十五烷酯、(甲基)丙烯酸棕榈酯、 (甲基)丙烯酸十七烷酯、(甲基)丙烯酸十九烷酯、(甲基)丙烯酸二十烷酯、(甲基)丙 烯酸山嵛酯、(甲基)丙烯酸二十四烷酯、(甲基)丙烯酸二十六烷酯、(甲基)丙烯酸三十 烷酯、(甲基)丙烯酸硬脂酯、(甲基)丙烯酸月桂酯；
-C4-C8 二羧酸双-C1-C5tl烷基酯，特别是富马酸、马来酸或衣康酸的酯，例如马来酸 二甲酯、富马酸二甲酯、马来酸二丁酯、富马酸二丁酯、马来酸二己酯、富马酸二己酯、马来 酸二辛酯和富马酸二辛酯，-C3-C8单羧酸的N-C2-C5tl烷基酰胺，特别是丙烯酸或甲基丙烯酸的N-烷基酰胺，例 如N-乙基(甲基)丙烯酰胺、N-正丙基(甲基)丙烯酰胺、N-异丙基(甲基)丙烯酰胺、 N-正丁基(甲基)丙烯酰胺、N-仲丁基(甲基)丙烯酰胺、N-叔丁基(甲基)丙烯酰胺、 N-正己基(甲基)丙烯酰胺、N-正庚基(甲基)丙烯酰胺、N-正辛基(甲基)丙烯酰胺、 N-l，l，3，3-四甲基丁基(甲基)丙烯酰胺、N-2-乙基己基(甲基)丙烯酰胺、N-正壬基 (甲基)丙烯酰胺、N-正癸基(甲基)丙烯酰胺、N-正十一烷基(甲基)丙烯酰胺、N-十三 烷基(甲基)丙烯酰胺、N-肉豆蔻基(甲基)丙烯酰胺、N-十五烷基(甲基)丙烯酰胺、 N-棕榈基(甲基)丙烯酰胺、N-十七烷基(甲基)丙烯酰胺、N-十九烷基(甲基)丙烯酰 胺、N-二十烷基(甲基)丙烯酰胺、N-山嵛基(甲基)丙烯酰胺、N-二十四烷基(甲基)丙 烯酰胺、N-二十六烷基(甲基)丙烯酰胺、N-三十烷基(甲基)丙烯酰胺、N-硬脂基(甲 基)丙烯酰胺、N-月桂基(甲基)丙烯酰胺；-C3-C8单羧酸的N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺，特别是丙烯酸或甲基丙烯酸的 N-烷基-N-烷基酰胺，例如N-甲基-N-乙基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正丙基(甲 基)丙烯酰胺、N-甲基-N-异丙基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正丁基(甲基)丙烯 酰胺、N-甲基-N-仲丁基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-叔丁基(甲基)丙烯酰胺、N-甲 基-N-正己基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正庚基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正辛 基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-1，1，3，3-四甲基丁基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-2-乙 基己基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正壬基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正癸基(甲 基)丙烯酰胺、N-甲基-N-正十一烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-十三烷基(甲基) 丙烯酰胺、N-甲基-N-肉豆蔻基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-十五烷基(甲基)丙烯酰 胺、N-甲基-N-棕榈基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-十七烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲 基-N-十九烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N- 二十烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-山 嵛基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-二十四烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-二十六烷 基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-三十烷基(甲基)丙烯酰胺、N-甲基-N-硬脂基(甲基) 丙烯酰胺、N-甲基-N-月桂基(甲基)丙烯酰胺；-C2-C5tl链烷酸乙烯基酯，例如乙酸乙烯酯、丙酸乙烯酯、丁酸乙烯酯、新戊酸乙烯 酯、月桂酸乙烯酯、肉豆蔻酸乙烯酯、硬脂酸乙烯酯和叔碳酸乙烯酯；-乙烯基-C1-C4tl烷基醚，例如甲基乙烯基醚、乙基乙烯基醚、丙基乙烯基醚、异丙 基乙烯基醚、正丁基乙烯基醚、2-丁基乙烯基醚、叔丁基乙烯基醚、正己基乙烯基醚、正庚 基乙烯基醚、正辛基乙烯基醚、1，1，3，3-四甲基丁基乙烯基醚、2-乙基己基乙烯基醚、壬基 乙烯基醚、正癸基十二烷基乙烯基醚、十三烷基乙烯基醚、十四烷基乙烯基醚、十五烷基乙 烯基醚、十六烷基乙烯基醚、十七烷基乙烯基醚、十八烷基乙烯基醚、二十烷基乙烯基醚、 二十二烷基乙烯基醚、二十四烷基乙烯基醚、三十烷基乙烯基醚；-马来酸N-C1-C4tl烷基酰亚胺，例如N-甲基马来酰亚胺、N-乙基马来酰亚胺、N-丙 基马来酰亚胺、N-异丙基马来酰亚胺、N-正丁基马来酰亚胺、N-2- 丁基马来酰亚胺、N-叔 丁基马来酰亚胺、N-正己基马来酰亚胺、N-正庚基马来酰亚胺、N-正辛基马来酰亚胺、N-1，1，3，3_四甲基丁基马来酰亚胺、N-2-乙基己基马来酰亚胺、N-壬基马来酰亚胺、N-正癸基 马来酰亚胺、N-十二烷基马来酰亚胺、N-十三烷基马来酰亚胺、N-十四烷基马来酰亚胺、 N-十五烷基马来酰亚胺、N-十六烷基马来酰亚胺、N-十七烷基马来酰亚胺、N-十八烷基马 来酰亚胺、N- 二十烷基马来酰亚胺、N- 二十二烷基马来酰亚胺、N- 二十四烷基马来酰亚胺、 N-三十烷基马来酰亚胺；及其混合物。合适的具有羧基和至少一个具有至少两个，特别是至少4个碳原子，例如2-200 个，特别是4-100个，更优选4-50个碳原子的不可聚合烃基的单烯属不饱和单体例如包括 单烯属不饱和C4-C8 二羧酸的单酯，例如马来酸或富马酸与链烷醇的单酯，和单烯属不饱和 C4-C8 二羧酸单羧酰胺，例如马来酸或富马酸与烷基胺或二烷基胺的单羧酰胺。实例特别包 括马来酸或富马酸与C2-C4tl链烷醇的单酯，例如马来酸单-正丁酯、马来酸单-2- 丁酯、马 来酸单-正己酯、马来酸单-正庚酯、马来酸单-正辛酯、马来酸单-1，1，3，3-四甲基丁酯、 马来酸单-2-乙基己酯、马来酸单-壬酯、马来酸单-正癸酯、马来酸单-十二烷酯、马来酸 单-十三烷酯、马来酸单-十四烷酯、马来酸单-十五烷酯、马来酸单-十六烷酯、马来酸 单-十七烷酯、马来酸单-十八烷酯、马来酸单-二十烷酯、马来酸单-二十二烷酯、富马酸 单-正丁酯、富马酸单-2-丁酯、富马酸单-正己酯、富马酸单-正庚酯、富马酸单-正辛酯、 富马酸单-1，1,3,3-四甲基丁酯、富马酸单-2-乙基己酯、富马酸单-壬酯、富马酸单-正 癸酯、富马酸单-十二烷酯、富马酸单-十三烷酯、富马酸单-十四烷酯、富马酸单-十五烷 酯、富马酸单-十六烷酯、富马酸单-十七烷酯、富马酸单-十八烷酯、富马酸单-二十烷酯 和富马酸单-二十二烷酯，以及马来酸或富马酸与C2-C40烷基胺或二 -C1-C4tl烷基胺的单羧 酰胺。聚合物P还可含其它不同于上述单体A和B的单体C的聚合单元。合适的其它单 体C包括优选为中性且优选在25°C下水溶性通常大于50g/l的单烯属不饱和单体。合适的 单体C包括-丙烯腈、甲基丙烯腈、甲基丙烯酸酯，-单烯属不饱和单-和二-C3-C8羧酸羟基-C2-C4烷基酯，特别是丙烯酸和甲基丙烯 酸羟基-C2-C4烷基酯，例如丙烯酸2-羟基乙酯、丙烯酸3-羟基丙酯、丙烯酸2-羟基丙酯、 丙烯酸4-羟基丁酯、甲基丙烯酸2-羟基乙酯、甲基丙烯酸3-羟基丙酯、甲基丙烯酸2-羟 基丙酯和甲基丙烯酸4-羟基丁酯；-N-乙烯基内酰胺，特别是具有5-8个环原子的那些，例如N-乙烯基吡咯烷酮、 N-乙烯基哌啶酮、N-乙烯基吗啉酮和N-乙烯基己内酰胺，-具有1-6个，特别是1-4个碳原子的脂族羧酸的N-乙烯基酰胺，例如N-乙烯基 甲酰胺、N-乙烯基乙酰胺和N-乙烯基丙酰胺；-单烯属不饱和C3-C8单羧酸的酰胺、羟基-C1-C4烷基酰胺和C1-C4烷氧基-C1-C4 烷基酰胺，例如丙烯酰胺、甲基丙烯酰胺、N-(甲氧基甲基)(甲基)丙烯酰胺、N-(乙氧基甲 基)(甲基)丙烯酰胺、N-甲氧基乙基)(甲基)丙烯酰胺、N-乙氧基乙基)(甲基) 丙烯酰胺等；-具有聚醚基团，特别是具有聚-C2-C4氧化烯基团，尤其是具有聚氧乙烯基团的单 烯属不饱和单体，其中聚醚基团优选分子量(数均)为100-5000。这些特别包括聚-C2-C4 亚烷基二醇的乙烯基和烯丙基醚，和单烯属不饱和C3-C8单-和C4-C8 二羧酸与聚-C2-C4亚烷基二醇的单酯和二酯，特别是这种聚-C2-C4亚烷基二醇的丙烯酸和甲基丙烯酸单酯。单体C的聚合单元的量基于聚合物P的重量通常不超过20重量％，特别是不超过
10重量％。在本发明的优选实施方案中，聚合物P为包含至少一种如上定义具有一个或多个 羧基的单烯属不饱和单体A的聚合单元(即重复单元)A和至少一种如上定义疏水性单体B 的聚合单元(即重复单元)B的共聚物。在优选的聚合物P中，聚合单元A与聚合单元B的摩 尔比，和因此聚合单体A与聚合单体B的摩尔比通常为1 20-10 1，优选1 20-5 1， 特别是1 15-5 1，尤其是1 10-2 1。在优选的聚合物P中，聚合单元A与聚合单 元B的重量比，和因此聚合单体A与聚合单体B的重量比通常为2 98-80 20，特别是 3 97-70 30，更优选5 95-60 40。优选聚合单元A和聚合单元B的总量，和因此聚 合单体A和聚合单体B的总量构成聚合物P的至少80重量％，特别是至少90重量％，更优 选至少95重量％。特别优选聚合单体A和聚合单体B —起构成聚合物P的至少99重量％ 或它们为形成聚合物P的唯一单体。尤其优选聚合物P基本上由重复单元A和B组成。聚合单元A通常选自衍生自单烯属不饱和C3-C8单羧酸如丙烯酸、甲基丙烯酸、巴 豆酸、2-乙烯基乙酸、丙烯酸或甲基丙烯酸与羟基乙酸的酯和单烯属不饱和C3-C8 二羧酸如 富马酸、马来酸、衣康酸和柠康酸的重复单元。优选的单体A选自丙烯酸、甲基丙烯酸、马来 酸、衣康酸和巴豆酸，特别选自丙烯酸、甲基丙烯酸和马来酸。技术人员容易地理解在聚合 物P的制备中，代替上述羧酸单体A或与其组合，可使用相应的酐如丙烯酸酐、甲基丙烯酸 酐、马来酸酐或衣康酸酐。在这种情况下，使主要得到的聚合物经受水解，以将酐基团转化 成羧基。单体B如上定义。优选的单体B选自C2-C5tl烯烃、乙烯基芳族化合物、C3-C8单羧 酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8单羧 酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl链烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、马来 酸N-C1-C4tl烷基酰亚胺及其混合物。特别是，单体B选自C2-C5tl烯烃、乙烯基芳族化合物、 C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl链烷酸乙烯基酯。优选单体B包含至少一种C2-C5tl烯烃，任选与至少一种选自乙烯基芳族化合物、 C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、 C3-C8单羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C1-C50链烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基 醚、马来酸N-C1-C4tl烷基酰亚胺及其混合物的其它单体B组合，特别是至少一种C2-C5tl烯烃， 任选与至少一种选自乙烯基芳族化合物和C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯的其它单体B组合。 在其中单体B包含至少一种C2-C5tl烯烃的聚合物P中，C2-C50烯烃的量优选为聚合单元(或 单体)B总量的至少50摩尔％，特别是至少70摩尔％或至少80摩尔％。如果存在其它单 体B，则它们通常不超过聚合单元(或单体)B总量的50摩尔％，特别是30摩尔％或20摩 尔％。在混合物中，不同于C2-C5tl烯烃的烯属不饱和单体B的量例如为聚合单元(或单体) B总量的0. 5-50摩尔％，特别是1-30摩尔％，尤其是2-20摩尔％。优选一种或多种C2-C5tl 烯烃为唯一的单体B或总计为聚合单元(或单体)B总量的至少99摩尔％。在本发明第一个特别优选的实施方案中，聚合单元A(和因此单体A)包含聚合马 来酸的单元。在该特别优选的实施方案中，马来酸的聚合单元的摩尔量总计为单元(或单 体)A总量的至少50摩尔％，特别是至少70摩尔％，尤其是至少80摩尔％。单元(或单体)A的其余部分如果存在的话，通常衍生自上述烯属不饱和单羧酸如丙烯酸或甲基丙烯酸。特 别是，聚合单元A为聚合马来酸或马来酸与至少一种优选选自丙烯酸和甲基丙烯酸及其混 合物的烯属不饱和单羧酸的混合物的单元，其中马来酸的量为聚合单元(或单体)A总量的 至少50摩尔％，特别是至少70摩尔％或至少80摩尔％。在混合物中，烯属不饱和单羧酸的 量例如为聚合单元(或单体)A总量的0. 5-50摩尔％，特别是1-30摩尔％，尤其是2-20摩 尔％。优选马来酸为唯一的单体A或总计为聚合单元(或单体)A总量的至少99摩尔％。在该特别优选的第一实施方案中，单体B优选选自C2-C5tl烯烃、乙烯基芳族化合 物、C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰 胺、C3-C8单羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl链烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl 烷基醚、马来酸N-C1-C4tl烷基酰亚胺及其混合物。特别是，单体B选自C2-C5tl烯烃、乙烯基芳 族化合物、C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl链烷酸乙烯 基酯。在第一特别优选实施方案的聚合物P中，优选下述那些聚合物P，其作为单体B包 含至少一种C5-C5tl烯烃，任选与至少一种选自C2-C4烯烃、乙烯基芳族化合物、C3-C8单羧酸 C2-C50烷基酯、C4-C8 二羧酸双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8单羧 酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C5tl链烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、马来酸 N-C1-C40烷基酰亚胺及其混合物的其它单体B组合，更优选至少一种C5-C5tl烯烃，任选与至 少一种选自C2-C4烯烃、乙烯基芳族化合物和C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯的其它单体B组合。 在该特别优选的第一实施方案的聚合物P中，其中单体B包含至少一种C2-C5tl烯烃，C2-C50 烯烃的量优选为聚合单元(或单体)B总量的至少50摩尔％，特别是至少70摩尔％或至 少80摩尔％。如果存在其它单体B，则它们通常不超过聚合单元(或单体)B总量的50摩 尔％，特别是30摩尔％或20摩尔％。在混合物中，不同于C2-C5tl烯烃的烯属不饱和单体B 的量例如为聚合单元(或单体)B总量的0. 5-50摩尔％，特别是1-30摩尔％，尤其是2-20 摩尔％。优选一种或多种C2-C5tl烯烃为唯一的单体B或总计为聚合单元(或单体)B总量 的至少99摩尔％。在第一特别优选实施方案的聚合物P中，聚合单体A(即马来酸或其与一种或多种 上述烯属不饱和单羧酸的混合物)与聚合单体B的摩尔比优选为1 10-10 1，特别是 1:5-5: 1。在该实施方案的优选聚合物P中，聚合单元A与聚合单元B的重量比，和因 此聚合单体A与聚合单体B的重量比通常为10 90-80 20，特别是15 85-70 30， 更优选20 80-60 40。优选聚合单元A和聚合单元B的总量，和因此聚合单体A和聚合 单体B的总量构成该第一特别优选实施方案的聚合物P的至少80重量％，特别是至少90 重量％，更优选至少95重量％。在本发明第二特别优选的实施方案中，聚合单元A(和因此单体A)包含聚合单烯 属不饱和C3-C8单羧酸的单元，特别是丙烯酸或甲基丙烯酸的单元，任选与微量聚合单烯属 不饱和C4-C8 二羧酸的单元组合。在该特别优选的实施方案中，单烯属不饱和C3-C8单羧酸 的聚合单元的摩尔量总计为聚合单元(或单体)A总量的至少70摩尔％，特别是至少90摩 尔％，尤其是至少99摩尔％。因此，聚合单烯属不饱和C4-C8 二羧酸的单元的量不超过聚合 单元(或单体)A的30摩尔％，特别是10摩尔％，尤其是1摩尔％。在该第二特别优选的实施方案中，单体B优选选自C2-C5tl烯烃、乙烯基芳族化合物、C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰 胺、C3-C8单羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C5tl链烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷 基醚、马来酸N-C1-C4tl烷基酰亚胺及其混合物。特别地，单体B选自C2-C5tl烯烃、乙烯基芳族 化合物、C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl链烷酸乙烯基在第二特别优选实施方案的聚合物P中，优选下述那些聚合物P，其作为单体B包 含至少一种C3-C8单羧酸的C2-C5tl烷基酯，特别是至少一种丙烯酸或甲基丙烯酸的C2-C5tl 烷基酯，任选与至少一种选自C2-C4烯烃、乙烯基芳族化合物、C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、 C4-C8 二羧酸双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8单羧酸N-C1-C5tl烷 基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C5tl链烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、马来酸N-C1-C4tl烷基 酰亚胺及其混合物的其它单体B组合，更优选至少一种C3-C8单羧酸C2-C2tl烷基酯，特别是 至少一种丙烯酸或甲基丙烯酸C2-C2tl烷基酯，任选与至少一种选自C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷 基酰胺、C3-C8单羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺和C2-C5tl链烷酸乙烯基酯的其它单 体B组合。在该特别优选第二实施方案的聚合物P中，其中单体B包含至少一种C3-C8单羧 酸C2-C5tl烷基酯，C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯的量优选为聚合单元(或单体)B总量的至少 50摩尔％，特别是至少70摩尔％或至少80摩尔％。如果存在其它单体B，则它们通常不超 过聚合单元(或单体)B总量的50摩尔％，特别是30摩尔％或20摩尔％。在混合物中，不 同于C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯的烯属不饱和单体B的量例如为聚合单元(或单体)B总量 的0. 5-50摩尔％，特别是1-30摩尔％，尤其是2-20摩尔％。优选一种或多种C3-C8单羧酸 C2-C50烷基酯为唯一的单体B或总计为聚合单元(或单体)B总量的至少99摩尔％。在第二特别优选实施方案的聚合物P中，同样优选下述那些聚合物P，其作为单体 B包含至少一种C2-C4烯烃，任选与至少一种选自C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸 双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8单羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基 酰胺、C1-C50链烷酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、马来酸N-C1-C4tl烷基酰亚胺及其混合 物的其它单体B组合；更优选至少一种C2-C4烯烃，任选与至少一种选自C3-C8单羧酸C2-C5tl 烷基酯的其它单体B组合。在该特别优选第二实施方案的聚合物P中，其中单体B包含至 少一种C2-C4烯烃，C2-C4烯烃的量优选为聚合单元(或单体)B总量的至少50摩尔％，特别 是至少70摩尔％或至少80摩尔％。如果存在其它单体B，则它们通常不超过聚合单元(或 单体)B总量的50摩尔％，特别是30摩尔％或20摩尔％。在混合物中，不同于C2-C4烯烃 的烯属不饱和单体B的量例如为聚合单元(或单体)B总量的0. 5-50摩尔％，特别是1-30 摩尔％，尤其是2-20摩尔％。优选一种或多种C2-C4烯烃为唯一的单体B或总计为聚合单 元(或单体)B总量的至少99摩尔％。在第二特别优选实施方案的聚合物P中，同样优选下述那些聚合物P，其作为单体 B包含至少一种乙烯基芳族化合物如苯乙烯和/或α-甲基苯乙烯，任选与至少一种选自 C2-C50烯烃、乙烯基芳族化合物、C3-C8单羧酸C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸双-C1-C5tl烷基酯、 C3-C8单羧酸N-C2-C5tl烷基酰胺、C3-C8单羧酸N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C50链烷 酸乙烯基酯、乙烯基-C1-C4tl烷基醚、马来酸N-C1-C4tl烷基酰亚胺及其混合物的其它单体B组 合。在该特别优选的第一实施方案的聚合物P中，其中单体B包含至少一种乙烯基芳族化 合物，乙烯基芳族化合物的量优选为聚合单元(或单体)B总量的至少50摩尔％，特别是至少70摩尔％或至少80摩尔％。如果存在其它单体B，则它们通常不超过聚合单元(或单 体)B总量的50摩尔％，特别是30摩尔％或20摩尔％。在混合物中，不同于乙烯基芳族化 合物的烯属不饱和单体B的量例如为聚合单元(或单体)B总量的0. 5-50摩尔％，特别是 1-30摩尔％，尤其是2-20摩尔％。优选一种或多种乙烯基芳族化合物为唯一的单体B或总 计为聚合单元(或单体)B总量的至少99摩尔％。在第二特别优选实施方案的聚合物P中，聚合单体A与聚合单体B的摩尔比优选 为1 20-5 1，特别是1 10-3 1。在该实施方案的优选聚合物P中，聚合单元A与 聚合单元B的重量比，和因此聚合单体A与聚合单体B的重量比通常为2 98-50 50，特 别是3 97-50 50，更优选5 95-50 50。优选聚合单元A和聚合单元B的总量，和 因此聚合单体A和聚合单体B的总量构成该第二特别优选实施方案的聚合物P的至少90 重量％，特别是至少95重量％，更优选至少99重量％。除羧基和疏水性重复单元外，本发明聚合物P可含有聚-C2-C4氧化烯基团，尤其是 聚氧化乙烯基团，其中聚-C2-C4氧化烯基团的分子量(数均)优选为100-5000。聚-C2-C4 氧化烯基团的量通常不超过聚合物P的30重量％，特别是小于10重量％。在本发明特别 优选的实施方案中，聚合物P不含聚-C2-C4氧化烯基团。聚合物P的数均分子量Mn可为300-500000，特别是500-100000，特别 是700-50000，尤其是1000-30000。数均分子量Mn优选约500-1000000，更优选 1000-200000,特别是1500-100000，尤其是2000-50000。聚合物P的K值(根据 Fikentscher-Cellulosechemie 1932，第 13 卷，第 58-64 页和第 71-74 页)通常为 5-120， 特别是10-100，尤其是15-80(在20°C下作为在水或四氢呋喃中取决于K值浓度为0. 1-5 重量％的溶液测定)。聚合物可通过使合适的单烯属单体均聚或共聚而制备，所述单体经聚合形成聚合 物P。在聚合中，烯属双键聚合以形成C-C骨架。例如，聚合物P可通过使烯属不饱和单体A与同样为烯属不饱和单体的疏水性单 体B共聚而制备。如果单体B带有羧基，则也可通过使这些带有羧基的单体B均聚或通过 使所述单体B与其它单体A和/或B共聚而制备聚合物P。如果聚合物P含马来酸的单元， 则可在聚合反应中使用马来酸酐代替马来酸，然后使由聚合反应得到的聚合物水解。如果 聚合物P含马来酰亚胺的单元，则可在聚合反应中使用马来酸酐代替相应的马来酰亚胺， 然后使由聚合反应得到的聚合物与合适的胺反应，由此形成马来酰亚胺结构部分。同样，如 果聚合物P含二羧酸的单酰胺或单酯如马来酸的单酰胺或单酯的单元，则可在聚合反应中 使用相应的酐如马来酸酐代替相应的单酰胺，然后使由聚合反应得到的聚合物与合适的胺 或醇反应，由此形成单酰胺或单酯结构部分。单体A可以以其酸形式或以其盐，特别是其碱 金属盐的形式聚合。优选单体A以酸形式，或在马来酸的情况下以酐形式使用。适于制备聚合物P的方法包括单体A和B本体聚合、溶液聚合、悬浮聚合和乳液聚 合，优选溶液聚合和本体聚合。形成聚合物P的单体的聚合通常在引发剂的存在下引发，所述引发剂通过形成基 团而衰解。聚合引发剂通常基于形成聚合物P的单体以0. 05-10重量％，特别是0. 1-5重 量％的量使用。合适的引发剂例如为有机过氧化物和氢过氧化物，还有过二硫酸盐、过碳酸 盐、过氧化物酯、过氧化氢和偶氮化合物。引发剂的实例为过氧化氢、过二碳酸二环己基酯、过氧化二乙酰、过氧化二丁基、过氧化二戊基、过氧化二辛酰、过氧化二癸酰、过化二月桂 酰、过氧化二苯甲酰、过氧化双(邻甲苯基)、过氧化琥珀酰、过氧化甲基乙基酮、氢过氧化 二叔丁基、过氧化乙酰丙酮、过乙酸叔丁基酯、过马来酸叔丁基酯、过异丁酸叔丁基酯、过新 戊酸叔丁基酯、过辛酸叔丁基酯、过新癸酸叔丁基酯、过苯甲酸叔丁基酯、氢过氧化叔丁基、 氢过氧化异丙基苯、过新癸酸叔丁基酯、过新戊酸叔戊基酯、过新戊酸叔丁基酯、过苯甲酸 叔丁基酯、过氧-2-乙基己酸叔丁基酯和过氧二氨基甲酸二异丙基酯；还有锂、钠、钾和铵 过二硫酸盐、2，2'-偶氮双异丁腈、2，2'-偶氮双O-甲基丁腈)、2，2'-偶氮双[2-甲 基-N-(2-羟乙基)]丙酰胺、1，1'-偶氮双(1-环己烷甲腈)、2，2'-偶氮双(2，4_ 二甲 基戊腈)、2，2'-偶氮双(N，N' -二亚甲基异丁脒)二盐酸盐和2，2'-偶氮双(2-脒 基丙烷)二盐酸盐，和以下所述氧化还原引发剂体系。氧化还原氧化剂体系包含至少一种 氧化化合物，通常为过氧化物化合物，和至少一种还原化合物，例如还原硫化合物，例如碱 金属的亚硫酸氢盐、亚硫酸盐、硫代硫酸盐、连二亚硫酸盐、连四硫酸盐或其铵盐，或有机还 原剂，例如苯偶姻、二甲基苯胺、抗坏血酸、羟基甲烷亚磺酸盐，和亚硫酸氢盐在酮上的加合 物，例如丙酮-亚硫酸氢盐加合物。与引发剂或氧化还原引发剂组合，还可使用过渡金属催 化齐U，例如铁、钴、镍、铜、钒和锰的盐。合适的盐例如为硫酸铁(II)、氯化钴(II)、硫酸镍 (II)或氯化铜(I)。基于单体，还原过渡金属盐以0. I-IOOOppm的浓度使用。因此可使用 过氧化氢与铁(II)盐，如0. 5-30%过氧化氢与0. l-500ppm莫尔盐的组合。如果合适的话，可需要控制要制备的聚合物的分子量。为此，单体M的聚合通常在 调节剂的存在下进行。调节剂例如包括含SH基团的有机化合物，优选具有6-20个碳原子 的烷基硫醇如己基硫醇、辛基硫醇、2-乙基己基硫醇、正癸基硫醇、异癸基硫醇、正十二烷基 硫醇、叔十二烷基硫醇，极性硫醇如2-巯基乙醇、2-巯基丙醇、巯基丁醇、巯基乙酸(2-巯基 乙酸)、3_巯基丙酸、半胱氨酸和N-乙酰半胱氨酸，以及甲酸、异丙醇、烯丙醇、醛如丁醛、卤 化烃如三氯甲烷、三溴甲烷和四氯甲烷等。如果需要的话，聚合调节剂通常基于形成聚合物 P的单体以0. 05-2重量％，特别是0. 1-1重量％的量使用。所需反应温度和反应压力取决于聚合物的类型和要以已知方式聚合的单体的类 型。通常，聚合温度为10-250°C，特别是30-180°C。反应压力通常为0. 1-2500巴，特别是 0. 9-2000 巴。 如果聚合物P含聚-C2-C4氧化烯基团，尤其是聚氧化乙烯基团，则可如下引入这些 基团通过选择合适的具有聚-C2-C4氧化烯基团的单体C，或通过将具有聚-C2-C4氧化烯单 元的化合物接枝在预形成的聚合物P上，例如通过酯化或酰胺化反应，或通过使形成C-C骨 架的烯属不饱和单体在具有聚-C2-C4氧化烯基团的不可聚合化合物的存在下聚合。用于本发明中的聚合物P和适于制备它们的方法为本领域中已知的，例如由EP 412389、DE 3730885、DE 10251141、DE 19810404、EP 498634、DE 3926168、DE 3931039、DE 4402029,WO 93/17130、PCT/EP2007/062189、US 4, 414, 370,US 4, 529, 787,US 4,546，160、 US 6，858，678、US 6，355，727禾口Ullmann' s Encyclopedia of Industrial Chemistry,第 5 版，Waxes，第 A 28 卷，第 146 及随后各页，Verlag Chemie ffeinheim, Basel, Cambridge, New York, Tokio，1986已知。一些聚合物可市购，例如作为BASF SE的Sokalail 类型和 Joncryl 类型市购。本发明组合物呈粒子形式，其优选包含酶与聚合物P重量比为1 50-10 1，特别是1 40-5 1，更优选1 30-2 1，尤其是1 20-1 2或1 20-1 5的至少 一种酶和至少一种聚合物P。通常所述至少一种酶和所述至少一种聚合物P的总量基于含 酶粒子的重量为至少30重量％，优选至少40重量％，特别是至少50重量％，更优选至少70 重量％，尤其是至少80重量％或至少90重量％。本发明组合物可额外含有通常用于颗粒酶组合物中的其它组分。这些其它组分在 本发明中也称作配制添加剂。这些其它组分的量通常不超过70重量％，优选不超过60重 量％，特别是不超过50重量％，更优选不超过30重量％，尤其是不超过20重量％或10重量％。可掺入粒子中的其它组分例如包括多糖、蜡、酶活化剂或增强剂、填料、酶稳定剂、 增溶剂、交联剂、悬浮剂、粘度调节剂、轻质球、氯清除剂、增塑剂、颜料、盐、防腐剂和芳香 剂。合适的多糖可为未改性的天然存在的多糖或改性的天然存在的多糖。合适的多糖 包括纤维素、果胶、糊精和淀粉。淀粉可为可溶或不溶于水的。在本发明特别实施方案中，多 糖为淀粉。在本发明特别实施方案中，多糖为不可溶淀粉。来自广泛植物来源的天然存在 的淀粉为可溶的(或作为淀粉本身，或作为改性淀粉的起点)，相关淀粉包括例如来自以下 的淀粉稻、玉米、小麦、土豆、燕麦、木薯、西谷椰子、树薯、大麦、甘薯、高粱、山药、黑麦、粟、 荞麦、竹芋、芋头、芋类，且可例如为粉的形式。在本发明上下文中，木薯淀粉为其中优选的 淀粉；就这点而言，可提到木薯且木薯淀粉为各个同义词下已知的，包括木薯粉、树薯粉、树 薯和木薯。如本发明上下文中所用，术语“改性淀粉”表示天然存在的淀粉，其已经受至少 部分化学改性、酶催改性和/或物理或物理化学改性中一些种类，且通常相对于“母体”淀 粉具有改变的性能。本发明上下文中的“蜡”应当理解为熔点为25-150°C，特别是30-100°C，更特别地 35-85°C，最特别地40-75°C的聚合材料。蜡优选在室温，25°C下为固态的。下限优选在蜡开 始熔融的温度与粒子或包含粒子的组合物通常储存的温度之间设定合理的距离，20-30°C。 对于一些粒子，例如用于清净剂工业中的粒子，蜡的优选特征为蜡应为水溶性或水分散性 的，特别是在中性和碱性溶液中，使得当将本发明涂覆粒子引入水溶液中，即将它用水稀释 时，蜡应分解和/或溶解，提供掺入粒子中的活性物质快速释放和溶解在水溶液中。水溶性 蜡的实例为聚乙二醇(PEG)。其中可分散在水溶液中的水不溶性蜡为甘油三酯和油。对于 一些粒子，优选涂层含一些不可溶的蜡，例如进料粒子。蜡可为任何蜡，且可为化学合成的或由天然来源分离的蜡或其衍生物。因此，合适 的蜡选自下列非限定性蜡-聚乙二醇，PEG。具有不同分子大小的不同PEG蜡为市售的，其中具有低分子大 小的PEG也具有低熔点。合适的PEG的实例为例如来自BASF(Pluriol E系列)或来自 Clariant 或来自 heos 的 PEG 1500、PEG2000、PEG 3000、PEG 4000、PEG 6000、PEG 8000、 PEG 9000等。也可使用聚乙二醇的衍生物。-聚丙二醇(例如来自BASF的聚丙二醇PluriolP系列)和聚乙二醇-聚丙二醇 嵌段共聚物。也可使用聚丙二醇和聚乙二醇-聚丙二醇嵌段共聚物的衍生物。-在室温下为固体的非离子表面活性剂，例如具有高乙氧基水平的乙氧基化脂肪 醇，例如来自BASF的Lutensol AT系列，每分子具有不同量氧化乙烯的C16-C18脂肪醇，例如Lutensol AT11、AT13、AT25、AT50、AT80，其中数字表示氧化乙烯基团的平均数。作为 选择，可使用氧化乙烯、氧化丙烯的聚合物或其共聚物，例如嵌段聚合物，例如来自BASF的 Pluronic PE 6800。优选乙氧基化脂肪醇的衍生物。-由天然来源分离的蜡，例如巴西棕榈蜡(熔点80-880C )、小烛树蜡(熔点 68-70°C)和蜂蜡。其它天然蜡或其衍生物为衍生自动物或植物来源，例如海洋来源的蜡。 氢化植物油或动物脂同样适合。这种蜡的实例为氢化公牛脂、氢化棕榈油、氢化棉籽油和 /或氢化大豆油，其中如本发明所用术语“氢化”应理解为不饱和碳水化合物链的饱和，例 如在甘油三酯中，其中C = C双键转化成C-C单键。氢化棕榈油为例如由Hobum Oele und Fette GmbH-德国或 Deutsche Cargill GmbH-德国市购的。-脂肪醇，例如来自CondeaChemie GMBH-德国且熔点为55_60°C的线性长链脂肪 醇NAFOL 1822(C18，20，22)。脂肪醇的衍生物同样有用。-甘油一酯和/或甘油二酯，例如硬脂酸甘油酯为有用的蜡，其中硬脂酸酯为硬脂 酸和棕榈酸的混合物。其实例为来自Danisco hgredients，丹麦的Dimodan PM。-脂肪酸，例如氢化线性长链脂肪酸和脂肪酸的衍生物。-石蜡，即固体烃。-微晶蜡。其它合适的赌可在C. M. McTaggart 等人，Int. J. Pharm. 19,139(1984)或 Flanders 等人，Drug Dev. Ind. Pharm. 13，1001 (1987)中找到，在此将二者均引入作为参考。在本发明特别实施方案中，本发明蜡为两种或更多种不同蜡的混合物。在本发明 特别实施方案中，蜡选自PEG、乙氧基化脂肪醇、脂肪酸、脂肪酸醇和甘油酯。在本发明另一 特别实施方案中，蜡选自合成蜡。在更特别的实施方案中，本发明蜡为PEG或非离子表面活 性剂。在本发明最特别的实施方案中，蜡为PEG。合适的填料为水溶性和/或不溶性无机盐如细碎碱性硫酸盐、碱性碳酸盐和/或 碱性氯化物，粘土如高岭土(例如SPESWHITE ，English China Clay)、膨润土、滑石、 沸石、白垩、碳酸钙和/或硅酸钙。通常的填料为硫酸二钠和木素磺酸钙。其它填料为硅石、 石膏、高岭土、滑石、硅酸铝镁和纤维素纤维。合适的酶稳定或保护剂可分为几类，包括例如碱性或中性材料、还原剂、抗氧化剂 和/或第一过渡族金属离子的盐。这些各自可与其它相同或不同类的保护剂联合使用。碱 性保护剂的实例为碱金属硅酸盐、碳酸盐或碳酸氢盐，其通过活性中和例如氧化剂提供化 学清除效果。还原保护剂的实例为亚硫酸盐、硫代亚硫酸盐或硫代硫酸盐，而抗氧化剂的实 例为蛋氨酸、丁基化羟基甲苯(BHT)或丁基化羟基苯甲醚(BHA)。最优选的试剂为硫代硫酸 盐，例如硫代硫酸钠。酶稳定剂还可为硼酸盐、硼砂、甲酸盐、二羧酸和三羧酸，和所谓的可 逆性酶抑制剂如具有巯基的有机化合物或烷基化或芳基化硼酸。合适的交联剂包括例如酶相容性表面活性剂，例如乙氧基化醇，尤其是具有10-80 个乙氧基的那些。在涂覆粒子为清净剂配制剂的组分的情况下，粒子的溶解度是关键的。如本领域 技术人员已知，通过多种方法，许多试剂用于提高配制剂的溶解度，本领域通常已知的试剂 可在 National Pharmacopeia，s 中找至丨J。轻质球为具有低真密度的小粒子。通常，它们为内部具有空气或气体的空心球粒子。这种材料通常通过使固体材料膨胀而制备。这些轻质球可为无机性质或有机性质，例 如可由The PQ Corporation得到的PM系列(塑料空心球)。轻质球也可由多糖如淀粉或 其衍生物制备。Biodae 为由纤维素(造纸废品)制备的非空心轻质材料的实例，其可由 GranTek Inc得到。这些材料可单独或作为不同轻质材料的混合物包含在本发明粒子中。可将悬浮剂、调节剂(例如在洗涤应用中促进粒子溶解时的漂白作用)和/或溶 剂掺入粒子中。在本发明上下文中用于粒子中的增塑剂包括例如多元醇，例如糖、糖醇、甘油、甘 油三羟甲基丙烷、新戊二醇、三乙醇胺、单-、二 -和三甘醇或分子量小于1000的聚乙二醇 (PEG)；脲、邻苯二甲酸酯如邻苯二甲酸二丁酯或二甲酯；硫氰酸酯、非离子表面活性剂如 乙氧基化醇和乙氧基化磷酸酯和水。合适的颜料包括但不限于细碎增白剂，例如二氧化钛或高岭土，有色颜料，水溶性 着色剂，以及一种或多种颜料与水溶性着色剂的组合。可掺入粒子中的合适盐可为任何无机盐，例如硫酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、膦酸盐、 硝酸盐、氯化物或碳酸盐，或简单有机酸，特别是优选具有小于10个碳原子，例如6个或 更少碳原子的单_、二-或三羧酸的盐，例如柠檬酸盐、丙二酸盐、葡糖酸盐、乳酸盐、苹果 酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、甲酸盐、丙酸盐、丁酸盐或乙酸盐。这些盐中的阳离子的实例 为碱金属或碱土金属离子，以及铵离子或第一过渡族的金属离子，例如钠、钾、镁、钙、锌或 铝。阴离子的实例包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、亚硫酸根、硫酸氢根、硫代硫酸根、 磷酸根、磷酸一氢根、磷酸二氢根、次磷酸根、焦磷酸二氢根、四硼酸根、硼酸根、碳酸根、碳 酸氢根、偏硅酸根、柠檬酸根、苹果酸根、马来酸根、丙二酸根、琥珀酸根、乳酸根、甲酸根、 乙酸根、丁酸根、丙酸根、苯甲酸根、酒石酸根、抗坏血酸根或葡糖酸根。特别地，可使用硫 酸盐、亚硫酸盐、磷酸盐、膦酸盐、硝酸盐、氯化物或碳酸盐的碱金属或碱土金属盐，或简单 有机酸的盐，例如柠檬酸盐、丙二酸盐或乙酸盐。具体实例包括NaH2PCV Na2HPO4, Na3PO4, (NH4) H2PO4, K2HPO4, KH2PO4, Na2SO4, K2SO4, KHSO4, ZnSO4, MgSO4, CuSO4, Mg (NO3) 2、(NH4) 2S04、硼 酸钠、乙酸镁、甲酸镁、丙酸镁、乳酸镁、葡糖酸镁、柠檬酸镁、乙酸钙、甲酸钙、丙酸钙、乳酸 钙、葡糖酸钙、柠檬酸钙、乙酸锌、甲酸锌、丙酸锌、乳酸锌、葡糖酸锌、柠檬酸锌和柠檬酸钠。 盐可为水合盐，即具有结晶结合水的结晶盐水合物，例如如WO 99/32595所述。水合盐的 实例包括硫酸镁七水合物(MgS04(7H20))、硫酸锌七水合物(ZnS04(7H20))、硫酸铜五水合物 (CuSO4 (5H20))、磷酸氢二钠七水合物(Na2HPO4 (7H20))、硝酸镁六水合物(Mg (NO3) 2 (6H20))、 硼酸钠十水合物、柠檬酸钠二水合物和乙酸镁四水合物。在本发明的优选实施方案中，含酶粒子包含至少一种选自ai2+、Mg2+、Ca2+及其混合 物的至少一种二价金属阳离子的盐。合适的盐包括上述阴离子的盐，特别是硫酸的盐(硫 酸盐)、磷酸的盐(磷酸盐、磷酸单-和二氢盐和磷酸氢铵)，优选具有小于10个碳原子，例 如6个或更少碳原子的简单有机酸，特别是单_、二-或三羧酸的氯化物或盐，例如柠檬酸 盐、丙二酸盐、葡糖酸盐、乳酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、琥珀酸盐、甲酸盐、丙酸盐、丁酸盐或 乙酸盐，优选简单有机酸的盐。特别优选钙盐，尤其是简单有机酸的那些。这些盐的量的选 择通常使得含酶粒子基于酶的总重量含有0. 1-10重量％，特别是0. 5-8重量％，尤其是1-5 重量％至少一种二价离子。在本发明粒子中，聚合物和酶和任选其它组分通常作为均质混合物存在，即粒子中的成分分布为均勻或基本均勻的。然而，粒子也可具有芯壳结构。术语“芯壳结构”意指 粒子内的组分分布为不均勻的。而是，至少一种粒子组分主要位于粒子的内部区域，而至少 一种其它组分主要位于粒子的外部区域。在这些芯壳粒子中，酶优选位于粒子的内部区域。 在本发明特别优选实施方案中，粒子内的组分分布为均勻或基本均勻的。本发明组合物中粒子的粒度可变化。优选含酶粒子的体积平均粒径为 50nm-90 μ m,特别是100nm-80 μ m,更优选200nm-50 μ m,尤其是1-20 μ m,特别优选 0. 5-20 μ m。然而，体积平均粒径可小达50-500nm。通常，至少90重量％粒子的粒径为至 多150 μ m,优选至多100 μ m,更优选至多70 μ m,特别是至多50 μ m,尤其是至多30 μ m。粒 度可通过常规技术如光散射测定，例如如D. Dist 1 er，Wassrige Po 1 ymerdispersionen [Aqueos Polymer Dispersions], Wiley-VCH 1999，第 4· 2· 1 章，第 40 及随后各页， H. Auweter, D. Horn, J. Colloid Interf. Sci. 105 (1985) 399, D. Lilge, D. Horn, Colloid Polym. Sci. 269(1991)704 或 H. Wiese，D.Horn，J. Chem. Phys. 94(1991)6429 或 W.Brown， Dynamic Light Scattering Oxford University Press, 1992 所述。本发明粒子可包含1、2或更多个其它涂层。在本发明特别实施方案中，粒子包含 至少两个涂层。可将其它涂层施涂在粒子上以提供其它特征或性能。因此，例如其它涂层可实现 一种或多种如下效果(i)进一步保护粒子中的活性化合物以防环境中的敌对化合物。(ii)当将粒子引入液体介质(如酸介质)中时以理想速率溶解。(iii)提供粒子更好的物理强度。在本发明特别实施方案中，可根据已知以微囊包封技术例如借助作为界面聚合的 缩聚和就地聚合、凝聚、胶凝和螯合、溶剂萃取、蒸发和悬浮交联施涂外层。不同的涂覆技术 描述于“Microspheres,Microcapsules and Liposomes，，,编者Reza Arshady,Citus Books Ltd.和TO 97/24179中，在此将其引入作为参考。通常，酶粒子可为粉末形式或在液体介质中的分散体形式。通常在第一个步骤中 制备粉末，在第二个步骤中将其掺入液体介质，例如极性液体介质如含水液体或液体乳化 剂、乳化剂的液体混合物或其混合物，或非极性液体介质如液体烃或液体植物油或其混合 物中。在特别优选的实施方案中，液体介质为液体表面活性剂或表面活性剂的液体混合物 (液体乳化剂)或基于液体介质的重量含有至少80重量％至少一种液体表面活性剂或表面 活性剂混合物。特别地，液体表面活性剂的实例为非离子表面活性剂如醇烷氧基化物。这 种分散体还可含有各种添加剂，例如稳定以防沉降。液体介质的类型为次要的，主要取决于 酶粒子的意欲目的。然而，也可使用其中得到作为液体分散体的含酶粒子的方法。本发明组合物的制备可通过制备其粒子包含多种组分的颗粒物质的常用方法实 现。通常，将含活性物质的粒子的组分相互混合，然后通过常规方法加工以得到酶粒子。这 种方法也是本申请的主题。根据本发明合适的方法的实例为干燥方法，例如喷雾干燥、冷冻干燥、流化床干 燥、流化床涂布、随后喷雾干燥地制备皮克林分散体，和包括大粒子粉碎的步骤的方法，例 如微粉化、干磨或湿磨。优选，酶粒子的制备方法为喷雾干燥或乳液干燥，其中更优选喷雾干燥。喷雾干燥方法通常包括如下步骤制备酶和聚合物P的溶液，将该溶液在气体或液体中雾化以制备 小液滴(在气体中雾化相当于喷雾干燥方法，在水不溶混液体中雾化得到乳液)，并干燥这 些液滴以形成固体粒子。合适的干燥方法包括喷雾干燥和乳液方法。a)喷雾干燥方法，其中将液体含酶和含聚合物溶液在喷雾干燥塔中雾化以形成小 液滴，在其下降期间，将干燥塔干燥易形成含酶+聚合物的颗粒材料。这样可制备非常小的 粒子(Michael S. Showell (编者)；Powdered detergents ；Surfactant Science Series ； 1998 ；第 71 卷；第 140-142 页；Marcel Dekker)b)乳液方法，其中将含水液体含酶和含聚合物溶液在水不混溶性液体如石蜡油中 乳化。为使液滴的形成容易并稳定乳液，使用各种乳化剂和表面活性剂。可随后将来自液 滴的水通过蒸馏如共沸蒸馏，或如果水不混溶性液体为挥发性的，则优选通过将乳液喷雾 干燥而除去。对于乳液，干燥方法可为例如如EP 0356239所述的共沸蒸馏。同样优选将液体含酶和聚合物的溶液冷冻干燥的方法。本发明粒子还可通过粉碎方法制备，其中借助研磨较大粒子降低预形成的较大粒 子/团块等的粒度。这可在干粒子上(干磨)或使用粒子在液体中的分散体，所谓浆料(湿 磨)进行。根据本发明的优选实施方案，本发明组合物的制备通过喷雾干燥方法，即通过将 含至少一种酶和至少一种聚合物P的液体组合物喷雾干燥而实现。根据本发明特别优选的 实施方案中，本发明组合物的制备通过将含至少一种酶和至少一种聚合物P的含水组合物 喷雾干燥而实现。为此，在第一个步骤中，将含酶粒子的组分相互混合或溶于合适的溶剂或稀释剂 中。随后使所得悬浮液或溶液经受喷雾干燥方法。这里，将溶剂或稀释剂借助热气流除去， 其中存在于溶液或悬浮液中的活性物质粒子的组分形成细碎粉末，这可以以本身已知的方 式得到。作为选择，可将粒子的组分分别溶解或分散，并可使所得溶液或分散体经受伴随喷
雾干燥。在通过喷雾干燥方法制备本发明组合物中，粒子的组分将在第一个步骤中溶于或 悬浮在合适的溶剂或稀释剂中。优选的溶剂为含活性物质粒子的所有组分溶解且不破坏所 用酶的那些。合适溶剂的实例为-水，-C1-C4链烷醇如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、正丁醇、2-丁醇、异丁醇；-C1-C4脂族酸与C1-C4链烷醇的酯，例如乙酸乙酯、乙酸丁酯、丁酸甲酯；-优选具有4-10个C原子的脂族和脂环族醚，例如四氢呋喃、二烷、二乙醚、二 异丙醚、甲基叔丁基醚；-卤代烃如二氯甲烷、三氯甲烷、二氯乙烷；-环状或开链碳酸酯，例如碳酸亚乙酯、碳酸亚丙酯、碳酸二乙酯；-上述溶剂的混合物和上述溶剂与水的混合物。优选使含至少一种酶和至少一种聚合物P的含水组合物经受喷雾干燥。因此，溶 剂优选选自水或水和与水混合的有机溶剂的混合物。优选溶剂中水的量为至少50体积％。 更优选水为唯一的溶剂或稀释剂。优选水或水与有机溶剂的混合物的PH为pH6-9。
在第二个步骤中，随后在合适的喷雾设备中借助热气流将溶剂除去。为此，在合适 的设备中，将溶液或分散体喷入热气流中。喷入溶液或分散体可与热气流并流或逆流，优选 并流，即以与热气流相同的方向进行。适于喷入的设备为单材质或多材质喷嘴和圆盘雾化器。热气流，下文也称作干燥气体进入干燥设备中时的温度通常为50-200°C，特别是 70-180°C，尤其是100-160°C。当干燥气体离开干燥设备时，它的温度通常为40_120°C，特 别是60-10(TC。合适的干燥气体除空气外，特别为惰性气体，例如氮气、氩气或氦气，优选氮 气。在易挥发的溶剂的情况下，还可使用降低的温度，例如室温。通常，喷雾干燥在适于此目的的喷雾干燥塔中进行。这里，通常将待干燥的溶液 或分散体和干燥气体在顶部引入塔中。在塔的底部，将干活性物质粒子与气流一起排出 并在置于下游的设备如旋风器中与气流分离。除常规喷雾外，还可使用内部或外部流化床 (例如来自Mro称作FSD技术)进行附聚喷雾干燥操作，其中粒子形成聚集体以得到较大 块体。然而，形成的粒子的初级粒度优选在上述范围内，特别是不超过100 μ m,具体而言 50 μ m0如果合适的话，特别当它们具有特定粘性时，粒子具有传统喷雾干燥辅助剂。这 些为细碎固体，将其与溶液或分散体一起引入喷雾干燥设备中，并确保不发生凝集或结块。 合适的细碎固体特别为硅石，包括疏水性硅石、碱金属和碱土金属硅酸盐、碱土金属硅铝酸 盐、高度交联的聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、淀粉、高度交联的羧甲基淀粉钠或交联的羧甲基 纤维素钠。这些物质的粒度通常为100ym(D9CI值)以下。本发明组合物可用于任何需要酶的应用中。本发明组合物特别适于掺入含蛋白质 敌对物质的组合物，例如清净剂组合物，特别是含蛋白质敌对物质的液体组合物，例如液体 清净剂组合物中。因此，本发明涉及含至少一种如本发明所述酶组合物的清净剂组合物。本发明还涉及含至少一种如本发明所述酶组合物的液体组合物，特别是液体清净 剂组合物。在本发明清净剂组合物中，聚合物P保护酶直至将清净剂引入洗涤液中，将其充 分稀释以使粒子溶解并释放酶，使得可在污渍上起作用。本发明液体组合物可为适于包含本发明粒子的任何液体组合物。液体组合物可 为任何组合物，但特别合适的组合物为个人护理组合物、清洁组合物、织物加工组合物如漂 白、药物组合物、皮革加工组合物、燃料、纸浆或纸加工组合物、食品和饮料组合物和动物饲 料组合物。在本发明另一特别实施方案中，液体组合物为液体清净剂组合物。在本发明更特 别的实施方案中，液体组合物为洗衣用或洗碗用清净剂组合物。在本发明的特别实施方案中，液体组合物包含小于50%水。在本发明更特别的实 施方案中，液体组合物包含小于30%水。在本发明又一实施方案中，液体组合物包含小于 20% 水。如果液体组合物为液体清净剂组合物，则液体组合物可包含表面活性剂退增溶 (desolubilising)电解质，所述电解质以所述表面活性剂形成能稳定悬浮酶/聚合物粒子 的结构的浓度存在。
在特别实施方案中，液体清净剂组合物基于液体清净剂包含30-70重量％水。在 更特别的实施方案中，液体清净剂基于液体清净剂包含40-60重量％水。在最特别的实施 方案中，液体清净剂基于液体清净剂包含80-90重量％水。在本发明的特别实施方案中，液体清净剂组合物包含大于30 %但小于90 %水。包 含在液体清净剂组合物中的水的量特别为小于85重量％，更特别地小于75重量％，例如小 于60重量％液体清净剂。本发明液体清净剂组合物为通常用于洗衣或洗碗应用中的常规组合物。在特别实施方案中，组合物包含有效量的清净剂助洗剂。合适的助洗剂缩聚磷酸 盐，尤其是三聚磷酸钠，或较少优选焦磷酸钠或四磷酸钠、偏磷酸钠、碳酸钠、硅酸钠、正磷 酸钠、柠檬酸钠、次氮基三乙酸钠、膦酸盐如乙二胺四(亚甲基膦酸)钠、二亚乙基三胺五 (亚甲基膦酸)钠、乙酰二膦酸钠或氨基三(亚甲基膦酸)钠、乙二胺四乙酸钠或沸石。其 它较少优选的助洗剂包括以上钠盐的钾或锂类似物。助洗剂的比例通常为液体清净剂组合 物的约5重量％至约40重量％，通常10-35重量％，优选15-30重量％，更优选18- 重 量％，最优选20-27重量％。通常使用两种或更多种助洗剂的混合物，例如三聚磷酸钠与硅 酸钠和/或碳酸钠和/或与沸石；或次氮基三乙酸钠与柠檬酸钠。优选助洗剂至少部分作 为悬浮在组合物中的固体粒子存在。本发明还适用于制备未复配清净剂组合物或其中所有助洗剂以溶液存在的组合物。在特别实施方案中，本发明清净剂组合物包含一种或多种表面活性剂，所述表面 活性剂可为非离子，包括半极性和/或阴离子和/或阳离子和/或两性离子的。通常，表面 活性剂基于组合物以约0. 1-90重量％的量存在于液体组合物中。在特别实施方案中，表面 活性剂基于组合物以约10-60重量％的量存在于液体组合物中。在另一特别实施方案中， 表面活性剂基于组合物以约2-35重量％的量存在于液体组合物中。当清净剂包含表面活性剂时，清净剂通常含约至约40%阴离子表面活性剂， 例如线性烷基苯磺酸盐如甲苯磺酸盐、辛基苯磺酸盐或十二烷基苯磺酸盐、α -烯烃磺酸 盐、烷基硫酸盐(脂肪醇硫酸盐)、醇乙氧基硫酸盐、仲烷烃磺酸盐、α-磺基脂肪酸甲酯、 烷基-或烯基-琥珀酸、二烷基-或二烯基-磺基琥珀酸或皂。高度优选的阴离子表面活 性剂为线性烷基苯磺酸盐(LAS)材料。这种表面活性剂及其制备方法例如描述于美国专利 2，220，099和2，477，383中，在此将其引入作为参考。尤其优选线性直链烷基苯磺酸钠和 钾，其中烷基中平均碳原子数为约11-14。尤其优选钠C11-C14(如C12)LAS。其它有用的阴离 子表面活性剂描述于WO 99/00478，第11_13页中，在此将其引入作为参考。当清净剂包含表面活性剂时，清净剂通常含约0. 2%至约40%非离子表面活性 剂。合适的非离子表面活性剂包括氧化乙烯和/或氧化丙烯与具有至少一个NH-或OH基团 的疏水性化合物的反应产物。非离子表面活性剂的平均亲水亲脂平衡(HLB)通常为8-17， 优选9. 5-14，更优选12-14。疏水(亲脂)结构部分可为脂族或芳族性质且可容易地调整 与任何具体疏水性基团缩合的聚氧乙烯基团的长度以得到具有亲水与疏水元素之间的理 想平衡度的水溶性化合物。合适的非离子表面活性剂包括醇乙氧基化物，特别是链烷醇乙氧基化物、烷基苯 酚乙氧基化物如壬基酚乙氧基化物、烷基多糖苷、烷基二甲基胺氧化物、乙氧基化脂肪酸单 乙醇酰胺、脂肪酸单乙醇酰胺、聚羟基烷基脂肪酸酰胺或葡糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(“葡糖酰胺”)。这种有用的非离子表面活性剂另外描述于WO 99/0478，第13-14页中，在 此将其引入作为参考。清净剂还可含两性和/或两性离子表面活性剂。一列典型的阴离子、非离子、两性 和两性离子表面活性剂在1972年5月23日Norris发布的US3, 664，961中给出。这类尤其优选的非离子表面活性剂为含2-12摩尔氧化乙烯/摩尔醇的C9-C15伯 醇乙氧基化物，特别是含3-8摩尔氧化乙烯/摩尔醇的C12-C15伯醇乙氧基化物。另一类优选的非离子表面活性剂包括通式RO(CnH2nO)tZx的烷基多糖苷化合物，其 中Z为衍生自葡萄糖的结构部分；R为含12-18个碳原子的饱和疏水性烷基；t为0-10，且η 为2或3 ;Χ为1. 3-4，该化合物包含小于10%未反应的脂肪醇和小于50%短链烷基多糖苷。 这类化合物和它们在清净剂中的用途公开于EP-BO 070 077, EP 75996和EP 94118中。通常可使用GB 1，123，846 或 khwartz，Perry 和 Berch 的 “Surface Active Agents and Detergents”中提到的任何表面活性剂。优选液体清净剂组合物的pH为碱性的，例如7. 5以上，尤其是7. 5-12,通常为 8-11，例如 9-10. 5。在特别实施方案中，液体清净剂组合物包含溶解的表面活性剂退增溶电解质。实 例包括氯化钠、硝酸钠、溴化钠、碘化钠、氟化钠、硼酸钠、甲酸钠或乙酸钠或相应的钾盐。然 而，特别地，电解质为需要在洗涤液中进行有用作用的盐。在特别实施方案中，溶液中电解质的浓度为大于3重量％，例如大于5重量％。在 另一实施方案中，溶液中电解质的浓度基于组合物的重量为6-20重量％，尤其是7-19重 量％，例如8-18重量％、9-17重量％、10-16重量％，例如11-15重量％溶液中的电解质。优 选调整电解质含量以提供在室温，0°C和40°C下至少3个月储存稳定性。清净剂组合物可含任何通常的次要成分，例如污垢悬浮剂(例如羧甲基纤维 素)、防腐剂如甲醛或四(羟甲基)楼盐、膨润土，或任何根据本发明保护的本发明所述 酶。如果使用漂白剂，则可便利地将漂白剂例如用亲水性密封剂，或在疏水性介质，例如如 EP-A-0238216或GB-A-2200377所述聚硅氧烷或烃中包封。本发明液体清净剂组合物还可含0-65 % w/w螯合剂。这种螯合剂可选自氨基羧酸 盐、氨基膦酸盐、多官能取代的芳族螯合剂、二磷酸盐、三磷酸盐、碳酸盐、柠檬酸盐、次氮基 三乙酸、乙二胺三乙酸、二亚乙基三胺五乙酸、烷基-或烯基琥珀酸、可溶性硅酸盐或层状 硅酸盐(例如来自Hoechst的SKS-6)及其混合物。其它螯合剂描述于WO 99/00478中。也可使用稳定剂将液体清净剂中的酶稳定在液相中，例如多元醇如丙二醇或甘 油、糖或糖醇、乳酸、短链羧酸如甲酸盐或乙酸盐、肽醛、硼酸，或硼酸衍生物，例如芳族硼酸 酯，或苯基硼酸衍生物如4-甲酰基苯基硼酸，组合物可如例如WO 92/19709和WO 92/19708 所述配制。特别优选的液体清净剂为含以下组分的那些量为5-12%的长链(例如Cich14)线 性烷基苯磺酸盐，量为0-3%的例如具有0-5个氧化乙烯单元的长链烷基或烷基醚硫酸盐； 量为1-5%的HLB为小于12的脂肪酸链烷醇酰胺和/或醇乙氧基化物；量为0-3%，例如 0. 1-1%的单-和二长链烷基磷酸盐的混合物；量为14-30%，例如14-18%或20-30%的三 聚磷酸钠(优选预水合有0.5-5重量％水)；任选量为至多10%，例如5-10%的碳酸钠，其 中三聚磷酸钠和碳酸钠的总量优选为20-30% ；量为0. 05-0. 5%的防再沉积剂如羧甲基纤维素钠；量为0. 5-0. 5%的荧光增白剂；任选以0. 1-15%的量存在的螯合剂，例如氨基膦酸 盐，例如二-和多胺的亚甲基膦酸盐，尤其是乙二胺四[亚甲基膦酸]钠或二亚乙基三胺六 [亚甲基膦酸]钠；以及常规次要添加剂如芳香剂、着色剂、防腐剂，其余为水，其中百分数 以整个液体清净剂的重量计。在稀释至以后液体清净剂的PH为6-13，优选7-12，更通 常为8-11，例如9-10. 5。本发明通过以下实施例进一步描述，所述实施例应理解为不限制本发明范围。I.原料:聚合物Pl 马来酸与C2ci-Cm单烯烃(摩尔比1 1)的共聚物，水解的，钠盐，根据EP 412389制备(见表1)，K值洸· 8 (在H2O中1 % )。P2 马来酸、C12烯烃和C2q-Cm烯烃(摩尔比1 0. 6 0. 4)的三聚物，水解的，钠 盐，根据EP 412389制备(见表1)，K值50. 1 (在H2O中1 % )。P3 马来酸、C12烯烃和苯乙烯(摩尔比1 0. 1 0.9)的三聚物，水解的，钠盐， 根据EP 412389制备(见表1)，K值52. 6 (在H2O中1 % )。P4 马来酸、C12烯烃、聚异丁烯(Mn 550)和苯乙烯(摩尔比1 0. 6 0. 2 0. 2) 的四聚物，水解的，钠盐，根据EP 412389制备(见表1)，K值观· 1 (在H2O中1 % )。P5 马来酸、C2ci-Cm烯烃和苯乙烯(摩尔比1 0. 7 0. 3)的三聚物，水解的，钠 盐，根据EP 412389制备(见表1)，K值65. 2 (在H2O中1 % )。P6 马来酸、C2ci-Cm烯烃和丙烯酸(摩尔比1 1 0. 5)的三聚物，水解的，钠盐， 根据EP 412389制备(见表1)，K值38. 9 (在H2O中1 % )。P7 马来酸、C12烯烃、C2q-Cm烯烃和丙烯酸(摩尔比1 0. 5 0. 5 0. 5)的四 聚物，水解的，钠盐，根据EP 412389制备(见表1)，K值57. 1 (在H2O中1 % )。P8 马来酸与C16烯烃(摩尔比1. 15 1)的共聚物，水解的，钠盐，根据EP412389， 但在聚合期间使用有机溶剂而制备(见表1)，K值10.8(在H2O中)。P9 马来酸、C12烯烃和聚异丁烯(Mn 550)(摩尔比1 0.8 0.2)的三聚物，水 解的，钠盐，根据EP 412389制备(见表1)，K值42. 4 (在H2O中1 % )。PlO 丙烯酸2-乙基己酯、甲基丙烯酸叔丁酯和丙烯酸(摩尔比 0.46 0. 15 0. 39)的三聚物，根据 EP 07115644. 2 制备。Pll 巴豆酸与乙酸乙烯酯(摩尔比10 90)的共聚物，K值37 (在四氢呋喃中)。P12 马来酸、(^单烯烃和异丁烯(摩尔比1 0.05 0.7)的三聚物，水解的，钠 盐，根据EP 412389制备。P13:乙烯与甲基丙烯酸(摩尔比92 8)的共聚物，钾盐，水乳液，根据PCT/ EP2007/062189 制备。P14:马来酸与Q6烯烃(摩尔比1 1)的共聚物，水解的，钠盐，根据EP 412389 制备(见表1)，K值60.4(在H2O中)。P15 马来酸与烯烃的共聚物，水解的，钠盐，Sokalan CP9(K值40，Mwl2000)。P16 苯乙烯、α -甲基苯乙烯和丙烯酸的共聚物(酸值，220mg K0H/g，Mw6000)，铵
盐水溶液。
P17 苯乙烯与丙烯酸的共聚物，钾盐水溶液，具有KOH的Joncryl HPD296。P18 苯乙烯与丙烯酸的共聚物(酸值，IlOmg KOH/g, Mw 4500)，用二甲基乙醇胺 中和的水溶液。P19 丙烯酸乙酯与丙烯酸(重量比0. 9 0. 10)的共聚物。P20:乙烯与甲基丙烯酸(重量比73 27)的共聚物，用二甲基乙醇胺中和的，水 溶液，根据 PCT/EP 2007/062189 制备。P21 马来酸和Cw烯烃和苯乙烯(摩尔比1 0.5 1)的三聚物，水解的，钠盐， 根据EP 412389制备(见表1)，K值33. 5 (在H2O中1 % )。P22 马来酸、C20-C24烯烃和丙烯酸2_乙基己酯(摩尔比1 0. 75 0. 75)的三 聚物，水解的，钠盐，根据EP 412389制备(见表1)，K值19. 7 (在H2O中1 % )。P23 叔丁基丙烯酰胺、丙烯酸乙酯和丙烯酸的三聚物，K值40(在乙醇中)，酸 值 77mg KOH/g。P24 马来酸与苯乙烯(摩尔比1 1)的改性共聚物的钠盐，用Mn为500的聚氧 化乙烯改性，根据WO 93/17310所述方法制备。马来酸与疏水性共聚单体的共聚物(聚合物P1_P9、P12、P14、P21和P2》通过类 似于EP 412389关于分散体I所述方法制备。表1
权利要求
1.包含含酶粒子的酶组合物，其中所述粒子包含i)至少一种酶，和ii)至少一种聚合物P，其中聚合物P选自具有C-C骨架的均聚物和共聚物，其中C-C骨架带有可以酸形式或 以中和形式存在的羧基，且其中C-C骨架基于聚合物P的总重量包含至少20重量％衍生自 单体B的疏水性重复单元，其中单体B在25°C下的水溶性为至多30g/l，且其中含酶粒子的体积平均粒径为50nm-100 μ m。
2.根据权利要求1的组合物，其中聚合物P选自具有包含如下单元的C-C骨架的共聚物a)至少一种单烯属不饱和C3-C8单羧酸或二羧酸(单体A)的聚合单元A，和b)至少一种疏水性单烯属不饱和单体B的聚合单元B，其中聚合单元A与聚合单元B的相对摩尔量为1 20-10 1。
3.根据权利要求2的组合物，其中聚合单元A为选自丙烯酸、甲基丙烯酸、马来酸、衣康 酸和巴豆酸及其混合物的聚合单烯属不饱和C3-C8单羧酸或二羧酸的单元。
4.根据权利要求3的组合物，其中聚合单元A包含聚合马来酸的单元。
5.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中聚合单元B为在25°C下水溶性为至多 10g/l的聚合单体B的单元。
6.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中单体B选自C2-C5tl烯烃、乙烯基芳族化合 物、C3-C8单羧酸的C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸的双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸的N-C2-C5tl 烷基酰胺、C3-C8单羧酸的N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C5tl链烷酸的乙烯基酯、乙烯 基-C1-C4tl烷基醚、马来酸的N-C1-C4tl烷基酰亚胺及其混合物。
7.根据权利要求6的组合物，其中单体B包含至少一种C2-C5tl烯烃或至少一种(2-(5(|烯 烃与至少一种其它单体B的组合，所述至少一种其它单体B选自乙烯基芳族化合物、(3-(8单 羧酸的C2-C5tl烷基酯、C4-C8 二羧酸的双-C1-C5tl烷基酯、C3-C8单羧酸的N-C2-C5tl烷基酰胺、 C3-C8单羧酸的N-C1-C5tl烷基-N-C1-C5tl烷基酰胺、C2-C50链烷酸的乙烯基酯、乙烯基-C1-C40 烷基醚、马来酸的N-C1-C4tl烷基酰亚胺及其混合物。
8.根据权利要求7的组合物，其中聚合单元A为聚合马来酸或马来酸与至少一种单羧 酸的混合物的单元，其中马来酸的量为聚合单元A的至少50摩尔％。
9.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中聚合物P中疏水性重复单元的量为聚合 物P的40-95重量％。
10.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中聚合物P的酸值为10-700mgKOH/g聚 合物P。
11.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中酶与聚合物P的重量比为 1 50-10 1。
12.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中含酶粒子的体积平均粒径为 50nm-90 μ m。
13.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中所述至少一种酶与所述至少一种聚合 物P构成含酶粒子的至少50%。
14.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中所述酶为蛋白水解酶。
15.根据前述权利要求中任一项的组合物，其包含至少一种选自ai2+、Mg2+、Ca2+及其混 合物的二价金属阳离子，所述阳离子呈所述阳离子的一种或多种盐的形式。
16.根据前述权利要求中任一项的组合物，其可通过将含所述至少一种酶和所述至少 一种聚合物P的液体组合物喷雾干燥而得到。
17.一种制备根据前述权利要求中任一项的组合物的方法，所述方法包括将含所述至 少一种酶和所述至少一种聚合物P的液体组合物干燥。
18.根据权利要求17的方法，其包括将含所述至少一种酶和所述至少一种聚合物P的 液体组合物喷雾干燥。
19.根据权利要求1-16中任一项的酶组合物在清净剂组合物中的用途。
20.根据权利要求19的用途，其为液体清净剂组合物。
21.一种包含至少一种根据权利要求1-16中任一项的酶组合物的清净剂组合物。
22.根据权利要求21的清净剂组合物，其为液体清净剂组合物。
全文摘要
本发明涉及一种包含含酶聚合物粒子的酶组合物，其可用于清净剂组合物，特别是液体清净剂组合物。在这些含酶粒子中，所述粒子包含i)至少一种酶，和ii)至少一种聚合物P，所述聚合物P选自具有C-C骨架的均聚物和共聚物，其中C-C骨架带有可以酸形式或以中和形式存在的羧基，且其中C-C骨架包含疏水性重复单元。
文档编号C11D3/386GK102144024SQ200980134456
公开日2011年8月3日 申请日期2009年7月7日 优先权日2008年7月7日
发明者D·伯克, H·普费斯特奈尔, 塔博阿达 L·赫瑞拉, O·西蒙森, S·马斯, V·施文德曼 申请人:巴斯夫欧洲公司, 诺和酶股份有限公司