专利名称：整合酶抑制剂-3的制作方法
技术领域：
本发明涉及新的用于治疗HIV感染的基于吡啶的化合物。
背景技术：
被称为“人免疫缺损病毒”或者“HIV”的反录病毒是渐进地损坏免疫系统的复杂疾病的病原体。该疾病已知为获得性免疫缺陷综合征或AIDS。在2004年12月，全世界大约4千万人已被HIV感染，而且每年发生超过3百万的死亡。
反录病毒复制的特征包括反转录病毒基因组为原病毒DNA，而且其整合入宿主细胞基因组中。这些步骤对于HIV复制都是需要的，而且分别通过病毒编码酶、反转录酶和整合酶介导。
HIV感染遵循以下途径病毒颗粒结合至细胞表面受体和共同受体上，导致该病毒颗粒与细胞的融合。病毒的内容物被释放进入细胞质，并在此发生HIV基因组的反转录。通过一系列的步骤，形成双链原病毒DNA拷贝。该原病毒DNA在被称为前整合复合物(pre integration complex，PIC)的复合物中被转运至细胞核，该复合物包含整合酶以及其他病毒蛋白和可能的细胞蛋白。一旦在细胞核中，该原病毒DNA即通过整合酶的作用被整合入宿主细胞基因组中。在整合后，病毒基因组的转录和翻译可立即发生，导致病毒蛋白和新的病毒RNA基因组的形成。这些蛋白和基因组在细胞表面处组装，并且取决于细胞类型，可能在其他细胞内膜区室处组装。组装后的颗粒接着由细胞长出来，而且在该过程期间或者其后不久，通过病毒蛋白酶的作用成熟为感染性HIV颗粒。
将原病毒基因组整合至宿主细胞基因组中需要整合酶的作用，该整合酶在至少三个步骤，有可能四个步骤中实施该过程。第一步涉及病毒基因组组装形成稳定的核蛋白复合物；第二步，处理该基因组的3’端的两个核苷酸，形成具有游离的3’OH残基的交错末端；第三步中，这些末端转移至宿主细胞基因组中。最后的步骤涉及宿主基因组中插入部位的缺口添补和修复。对于整合酶是否进行该最后的步骤或者其是否通过细胞修复酶来实施仍存在一些猜测。
HIV感染目前能够用许多市场上销售的靶向反转录酶、蛋白酶或者进入细胞中的抑制剂来治疗。已知的是，用这些药物或者它们的组合来治疗HIV感染对于AIDS以及类似的疾病是有效的治疗方法。这些目前使用的抑制剂的缺点包括快速的应急反应以及发生率增加的抗性和多种副作用，并且因此需要新类型的抑制剂。
发明内容
在第一方面中，本发明提供治疗或者预防个体中HIV感染的方法，其包括向所述个体给药有效量的式(I)化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药，
其中 X选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O2)-和NR4，其中R4选自H和C1-3烷基； n是0或1； A是C6芳基或杂芳基； R1选自以下组中氢、卤素、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、-C1-10烷基-O-C1-10烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C1-10烷氧基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基、-NR5R6、-C6芳基NR5R6、-C6芳基-SO2-NR5R6、-C6芳基-杂环基、-C6芳基-SO2-杂环基；-杂芳基-R10；-Z-C1-6亚烷基-SO2-R12、-Z-(C2H4O)p-R12； 或者R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基； R2选自以下组中氢、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基以及-NR5R6、-杂芳基-C6-10芳基、-杂芳基-杂芳基； R3选自以下组中氢、氰基、卤素、-NO2、-C(O)NR5R6、-CH2NR5R6、-C(O)R7和-CO2R7； Z不存在或选自以下组中NR5、O、S、S(O)、S(O2)； p是1—3； R5和R6分别独立地选自以下组中氢、C1-10烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基C1-3烷基和C6-10芳基； R7是氢或C1-10烷基； R12是氢或C1-10烷基； R8是0—2个分别独立地选自以下组中的取代基 -OH、-SO2NH2、-OC(O)R7、-CO2R7、C1-10烷基、C1-10烷氧基、卤素、-NO2、和-NR5R6； R9选自以下组中氢、氰基、-SO2NH2、-R10、和-C(O)R10； R10选自OH、-C1-10烷基、-OC1-10烷基、-OC2-10烯基以及-Y-杂芳基；及Y不存在或选自-O-和-NR4-； R11选自以下组中氢、C1-10烷基、C1-10烷氧基；或R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基。
在第二方面中，本发明提供式(I)化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药在制备用于治疗或预防个体中HIV感染的药物中的应用。
在第三方面中，本发明提供式I化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药，
其中 X选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O2)-和NR4；其中R4选自H和C1-3烷基； n是0或1； A是C6芳基或杂芳基； R1选自以下组中氢、卤素、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、-C1-10烷基-O-C1-10烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C1-10烷氧基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基、-NR5R6、-C6芳基NR5R6、-C6芳基-SO2-NR5R6、-C6芳基-杂环基、-C6芳基-SO2-杂环基；-杂芳基-R10；-Z-C1-6亚烷基-SO2-R12、-Z-(C2H4O)p-R12； 或者R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基； R2选自以下组中氢、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基和-NR5R6、-杂芳基-C6-10芳基、-杂芳基-杂芳基； R3选自以下组中氢、氰基、卤素、-NO2、-C(O)NR5R6、-CH2NR5R6、-C(O)R7和-CO2R7； Z不存在或选自以下组中NR5、O、S、S(O)、S(O2)； p是1—3； R5和R6分别独立地选自以下组中氢、C1-10烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基C1-3烷基和C6-10芳基； R7是氢或C1-10烷基； R12是氢或C1-10烷基； R8是0—2个分别独立地选自以下组中的取代基 -OH、-SO2NH2、-OC(O)R7、-CO2R7、C1-10烷基、C1-10烷氧基、卤素、-NO2、和-NR5R6； R9选自以下组中氢、氰基、-SO2NH2、-R10、和-C(O)R10； R10选自OH、-C1-10烷基、-OC1-10烷基、-OC2-10烯基、和-Y-杂芳基；及 Y不存在或选自-O-和-NR4-； R11选自以下组中氢、C1-10烷基、C1-10烷氧基；或R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基。
在第四方面中，本发明提供包含根据上述第三方面的化合物以及药物学可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。
具体实施例方式 本发明的化合物具有抗病毒活性。发明人已发现本发明的化合物在受感染的细胞中抑制HIV复制，而且还表明这些化合物在体外抑制HIV整合酶的活性。
因此，在第一方面中，本发明提供治疗或预防个体中病毒感染的方法，其包括向所述个体给药有效量的式(I)化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药，
其中 X选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O2)-和NR4； R4选自H和C1-3烷基； n是0或1； A是C6芳基或杂芳基； R1选自以下组中氢、卤素、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、-C1-10烷基-O-C1-10烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C1-10烷氧基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基、-NR5R6、-C6芳基NR5R6、-C6芳基-SO2-NR5R6、-C6芳基-杂环基、-C6芳基-SO2-杂环基；-杂芳基-R10；-Z-C1-6亚烷基-SO2-R12、-Z-(C2H4O)p-R12； 或者R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基； R2选自以下组中氢、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基和-NR5R6、-杂芳基-C6-10芳基、-杂芳基-杂芳基； R3选自以下组中氢、氰基、卤素、-NO2、-C(O)NR5R6、-CH2NR5R6、-C(O)R7和-CO2R7； Z不存在或选自以下组中NR5、O、S、S(O)、S(O2)； p是1—3； R5和R6相互独立地选自以下组中氢、C1-10烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基C1-3烷基和C6-10芳基； R7是氢或C1-10烷基； R12是氢或C1-10烷基； R8是0—2个相互独立地选自以下组中的取代基 -OH、-SO2NH2、-OC(O)R7、-CO2R7、C1-10烷基、C1-10烷氧基、卤素、-NO2、和-NR5R6； R9选自以下组中氢、氰基、-SO2NH2、-R10、和-C(O)R10； R10选自OH、-C1-10烷基、-OC1-10烷基、-OC2-10烯基、和-Y-杂芳基；且Y不存在或选自-O-和-NR4-； R11选自以下组中氢、C1-10烷基、C1-10烷氧基；或R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基。
R1优选地选自以下组中C6-10芳基和杂芳基。
R2优选地选自以下组中C6-10芳基和杂芳基。
n优选地是1。
R11优选地是氢。
A优选地是苯基。A更优选地是1，4-取代的苯基。
在另一个优选的实施方案中，A是吡啶基，优选为1，4-取代的吡啶基。
在进一步优选的实施方案中，A是选自以下组中的杂芳基吡咯烷基、呋喃基和噻吩。该杂芳基优选为2，5-取代的。本发明范围内的该类型的化合物的例子包括
其中R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基的化合物的例子包括
其中R1为-C6芳基-SO2-杂环基的化合物的例子包括
各C1-10烷基优选为C1-6烷基，更优选为C1-3烷基。
各C2-10烯基优选为C2-6烯基，更优选为C2-3烯基，并且甚至更优选为烯丙基。
式I的化合物优选为
在第二方面中，本发明提供式(I)化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药在制备用于治疗或预防个体中HIV感染的药物中的应用。
在第三方面中，本发明提供式I化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药，
其中 X选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O2)-和NR4； R4选自H和C1-3烷基； n是0或1； A是C6芳基或杂芳基； R1选自以下组中氢、卤素、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、-C1-10烷基-O-C1-10烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C1-10烷氧基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基、-NR5R6、-C6芳基NR5R6、-C6芳基-SO2-NR5R6、-C6芳基-杂环基、-C6芳基-SO2-杂环基；-杂芳基-R10；-Z-C1-6亚烷基-SO2-R12、-Z-(C2H4O)p-R12； 或者R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基； R2选自以下组中氢、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基和-NR5R6、-杂芳基-C6-10芳基、-杂芳基-杂芳基； R3选自以下组中氢、氰基、卤素、-NO2、-C(O)NR5R6、-CH2NR5R6、-C(O)R7和-CO2R7； Z不存在或选自以下组中NR5、O、S、S(O)、S(O2)； p是1—3； R5和R6相互独立地选自以下组中氢、C1-10烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基C1-3烷基和C6-10芳基； R7是氢或C1-10烷基； R12是氢或C1-10烷基； R8是0—2个相互独立地选自以下组中的取代基 -OH、-SO2NH2、-OC(O)R7、-CO2R7、C1-10烷基、C1-10烷氧基、卤素、-NO2、和-NR5R6； R9选自以下组中氢、氰基、-SO2NH2、-R10、和-C(O)R10； R10选自OH、-C1-10烷基、-OC1-10烷基、-OC2-10烯基、和-Y-杂芳基；且Y不存在或选自-O-和-NR4-； R11选自以下组中氢、C1-10烷基、C1-10烷氧基；或R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基， R1优选选自以下组中C6-10芳基和杂芳基。
R2优选选自以下组中C6-10芳基和杂芳基。
n优选为1。
R11优选是氢。
A优选为苯基。A更优选为1，4-取代的苯基。
在另一个实施方案中，A为吡啶基，优选为1，4-取代的吡啶基。
在进一步的实施方案中，A是选自以下组中的杂芳基吡咯烷基、呋喃基和噻吩。该杂芳基优选为2，5-取代的。本发明范围内的该类型的化合物的例子包括
其中R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基的化合物的例子包括
其中R1为-C6芳基-SO2-杂环基的化合物的例子包括
各C1-10烷基优选为C1-6烷基，更优选为C1-3烷基。
各C2-10烯基优选为C2-6烯基，更优选为C2-3烯基，并且甚至更优选为烯丙基。
式I的化合物优选是
在第四方面中，本发明提供包含根据上述第三方面的化合物以及药物学可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。
本文中所用术语“卤代”或“卤素”是指氟、氯、溴或碘。
本文中所用术语“烷基”，无论单独使用还是在化合物术语如NH(烷基)或N(烷基)2中使用，都是指单价的直链或支链烃基。例如，合适的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、2-、3-或4-甲基戊基、2-乙基丁基、正己基或2-、3-、4-或5-甲基戊基。
本文中所用术语“烯基”是指在碳原子之间具有一个或更多个双键的直链或支链烃基。合适的烯基包括但不限于乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、戊烯基和己烯基。
本文中所用术语“炔基”是指在碳原子之间具有一个或更多个叁键的直链或支链烃基。合适的炔基包括但不限于乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基和己炔基。
本文中所用术语“环烷基”是指环状烃基。合适的环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
本文中所用术语“芳基”是指C6-C10芳香烃基，例如苯基或萘基。
术语“芳基烷基”包括例如苄基。
单独或在化合物术语中使用的术语“杂环”包括单环、多环、稠合或者缀合的烃基，优选C3-6者，其中一个或更多个碳原子(而且合适的话，包括其上连接的氢原子)被杂原子替换，以提供非芳香基团。合适的杂原子包括O、N和S、S(O)以及S(O2)。如果两个或者更多个碳原子被替换，它们可以是被两个或者更多个相同或不同的杂原子替换。合适的杂环基的例子包括吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、喹啉基、异喹啉基、硫代吗啉基、二氧杂环己烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢吡咯基、内酰胺、磺内酰胺等。
优选的磺内酰胺包括
和
术语“杂芳基”包括5-或6-元杂芳香环，其包含一个或更多个选自O、N和S的杂原子。杂芳基的合适的例子包括四唑基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、噁唑基、噁二唑基等。该杂芳香环可与另外一个5-或6-元芳香环稠合形成一个双环芳香系统，如苯并呋喃。
每个烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂环基或杂芳基可任选被以下基团取代C1-C3烷基、C6芳基、烷基芳基、OH、OC1-C3烷基、卤素、CN、NO2、CO2H、CO2C1-C3烷基、CONH2、CONH(C1-C3烷基)、CON(C1-C3烷基)2、三氟甲基、NH2、NH(C1-C3烷基)或N(C1-C3烷基)2。例如，任选取代的芳基可以是4-甲基苯基或4-羟基苯基，而取代的烷基可以是2-羟基乙基、三氟甲基或二氟甲基。每个芳基可任选地与二氧戊环稠合。任意的上述取代基可任选地被任选的取代基取代。
任选的取代基还包括合适的氮保护基(参见＂Protective Groups in OrganicSynthesis＂Theodora Greene and Peter Wuts，third edition，Wiley Interscience，1999)。
式I化合物的盐优选是药物学可接受的，但应认识到，非药物学可接受的盐也在本发明的范围之内，因为它们在制备药物学可接受的盐时可用作中间体。
术语“药物学可接受的衍生物”可包括任意的药物学可接受的盐、水合物或前药，或在给药于个体时能够(直接或间接地)提供式I的化合物或其抗菌活性的代谢物或残余物的任意其他化合物。
合适的药物学可接受的盐包括但不限于药物学可接受的无机酸的盐，该无机酸例如是盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、磺酸和氢溴酸，或者是药物学可接受的有机酸的盐，该有机酸例如是乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、马来酸、羟基马来酸、富马酸、苹果酸、柠檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯基乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水杨酸、磺胺酸、天冬氨酸、谷氨酸、乙二胺四乙酸、硬脂酸、棕榈酸、油酸、月桂酸、泛酸、单宁酸、抗坏血酸和戊酸。
碱盐包括但不限于那些与药物学可接受的阳离子所形成的盐，如钠、钾、锂、钙、镁、锌、铵、烷基铵，如由三乙胺形成的盐，烷氧基铵如与乙醇胺形成的盐，以及由乙二胺、胆碱或氨基酸如精氨酸、赖氨酸或组氨酸形成的盐。有关药物学可接受的盐的类型以及形成方法的通用信息对于本领域技术人员是已知的，并且描述在常规教科书中，例如“Handbook of Pharmaceutical salts”P.H.Stahl，C.G.Wermuth，1st edition，2002，Wiley-VCH。
碱性含氮基团可用以下物质进行季铵化低级烷基卤化物，如是甲基、乙基、丙基和丁基氯化物、溴化物和碘化物，二烷基硫酸酯，如二甲基硫酸酯和二乙基硫酸酯，等等。
本发明还包括式I化合物的前药。本发明还包括治疗或者预防个体中能够通过抑制AIDS而得到治疗或预防的疾病以及能够通过抑制整合酶而得到治疗的其他疾病的方法，其包括给药式(I)化合物的前药。具有游离氨基、酰胺基、羟基或羧基的式I化合物能够被转化为前药。
前药包括如下的化合物，其中氨基酸残基或者两个或更多个(如2、3或4个)氨基酸残基的多肽链通过肽键共价地连接在式I化合物的游离氨基、羟基和羧酸基团上。所述氨基酸残基包括通常用3个字母符号表示的20种天然氨基酸，以及4-羟基脯氨酸、羟基赖氨酸、demosine、isodemosine、3-甲基组氨酸、正缬氨酸、beta-丙氨酸、gamma-氨基丁酸、瓜氨酸、高胱氨酸、高丝氨酸、鸟氨酸和甲硫氨酸砜。前药还包括其中碳酸酯、氨基甲酸酯、酰胺和烷基酯通过羰基碳前药侧链共价连接在式I的上述取代基上的化合物。前药还包括式I化合物的磷酸衍生物(如酸、酸的盐、或酯)，其通过磷—氧键连接在式I化合物的游离羟基上。
应认识到，式I的化合物可具有不对称中心，并且因此能够存在一种以上的立体异构体形式。本发明因而还涉及在一个或多个不对称中心处以基本上纯的异构体形式存在的化合物，例如超过约90％ee，如约95％或97％ee或超过99％ee，以及它们的混合物，包括外消旋化合物。这些异构体可通过不对称合成法来制备，例如使用手性中间体或者通过手性拆分。
在第四方面中，本发明提供包含根据第三方面的化合物以及药物学可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物。
本发明的组合物可包含以下描述的其他治疗剂，并且可根据药物制剂领域技术人员已知的技术，例如使用常规的固体或液体载体或者稀释剂、以及适合于所希望的给药方式的药学添加剂(如赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、调味剂等)，配制成制剂。
本发明的化合物可通过任何合适的途径给药，例如非胃肠道给药，如皮下、静脉内、肌内或脑池内注射或输注技术(如无菌注射水溶液或非水溶液或混悬液)。
药物制剂包括那些用于口服、直肠、鼻、局部(包括颊和舌下)、阴道或非胃肠道(包括肌肉内、皮下和静脉内)给药者，或者是适合于吸入或吹入给药的剂型。本发明的化合物与常规佐剂、载体或稀释剂一起由此可被制成药物组合物及其单元剂型的形式，而且在此等形式下，其可以固体使用用于口服给药，如片剂或填充胶囊，或者以液体使用用于口服给药，如溶液、混悬液、乳液、酏剂或者填充上述物质的胶囊，用于直肠给药的栓剂，或者是用于非胃肠道(包括皮下)使用的无菌注射液。
除灵长类动物如人以外，各种其他动物也可用根据本发明的方法来治疗。例如，可治疗包括但不限于牛、羊、山羊、马、狗、猫、豚鼠、大鼠或其他牛、绵羊、马、狗、猫、啮齿动物或鼠种的哺乳动物。然而，该方法也可施用于其他物种如禽类(如鸡)上。
用上述方法治疗的个体是哺乳动物，包括但不限于牛、羊、山羊、马、狗、猫、豚鼠、大鼠或其他牛、绵羊、马、狗、猫、啮齿动物或鼠种的动物，并且优选是人，男人或女人。
术语“有效量”是指将在组织、系统、动物或人中诱发为研究人员、兽医、医生或其他临床医生所找寻的生物或医学反应的组合物量。
在此所用术语“组合物”意欲包括含有特定量的特定成分的产品，以及任何由特定量的特定成分直接或间接产生的产品。术语“药物学可接受的”是指所述载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂的其他成分相容，而且对接受者没有损害性。
术语“给药”化合物应被理解为是指向需要治疗的个体提供本发明的化合物。
用于给药本发明化合物的药物组合物常规情况下可以剂量单元形式存在，而且可通过药学领域中众所周知的方法来制备。所有的方法包括以下步骤使所述活性成分与构成一种或多种辅助成分的载体相缔合。通常情况下，该药物组合物是通过以下方法制备的使活性成分与液体载体或者细的固体载体或者这两者均匀且充分地混合，如果需要，可接着将该产品成型为所希望的制剂。在该药物组合物中，活性目标化合物的量足以对疾病的过程和状况产生所希望的效果。在此所用术语“组合物”意欲包括含有特定量的特定成分的产品，以及任何由特定量的特定成分直接或间接产生的产品。
该药物组合物可为含水或油性无菌注射混悬液的形式。该混悬液可根据本领域已知的方法，使用那些上述提到的合适的分散剂或湿润剂来配制。所述无菌注射制剂也可以是在非毒性的非胃肠道可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射液或混悬液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的载体和溶剂有水、Ringer溶液以及等渗氯化钠溶液。另外，无菌固定油通常被用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可以使用任何温和的固定油，包括合成的甘油单酸酯或甘油二酸酯。再者，脂肪酸如油酸也可用于制备注射剂。
本发明的药物组合物及方法可进一步包括通常用于治疗上述病症的其他治疗活性化合物。本领域技术人员根据常规的药学原理可选择用于联合治疗的合适药剂。治疗剂的组合可协同作用以实现对上述各种疾病的治疗或预防。使用该方法，人们则能够在更低剂量的各种药剂的情况下实现治疗效果，并由此减少潜在的副作用。
在与本发明的化合物一起组合使用其他治疗剂时，它们的使用量可如PhysicianDesk Reference(PDR)中所标注的，或者由本领域技术人员来确定。
在治疗或预防需要抑制HIV或HIV整合酶的病症时，合适的剂量水平通常是约0.01—500mg/kg体重/天，该剂量可单次或分成多次给药。剂量水平优选为每天约0.1—250mg/kg、更优选每天约0.5—100mg/kg。合适的剂量水平可以是每天约0.01—250mg/kg、每天约0.05—100mg/kg、或每天约0.1—50mg/kg。在该范围内，所述剂量可以是每天0.05—0.5、0.5—5或5—50mg/kg。对于口服给药，组合物优选以片剂的形式提供，该片剂中活性成分的含量可以是1.0—1000毫克，特别是1.0、5.0、10.0、15.0、20.0、25.0、50.0、75.0、100.0、150.0、200.0、250.0、300.0、400.0、500.0、600.0、750.0、800.0、900.0和1000.0毫克，对待治疗的患者进行症状性剂量调节。该化合物可按每天1—4次、优选每天一次或二次的方案来给药。
然而应理解的是，对于任意具体患者的具体剂量水平以及给药频率是可以变化的并且取决于根据各种因素，包括所用具体化合物的活性、该化合物的代谢稳定性和作用时间长短、年龄、体重、总的健康状况、性别、饮食、给药方式和时间、排泄速率、药物组合、具体病症的严重程度、以及主体正进行的治疗。
为能够更清楚地理解本发明的本质，以下将参考下列非限制性的实施例来描述其优选实施方案。
实施例 方法 HPLC条件 所有的HPLC测量都是在Waters2690Alliance System上进行的。
方法1 柱 Waters C18 5 uM Symmetry Column(Part#WAT046980)，30℃，流速0.7mL/min，254nM下测量的光谱 缓冲液 缓冲液A100％水，缓冲液B100％乙腈，缓冲液C2％含水甲酸 梯度(线性梯度曲线6)
方法2 柱 Merck C18 Chromolith Column(Part#1.02129.0001)，在30℃下，流速4mL/min，254nM下测量的光谱 缓冲液 缓冲液A100％水，缓冲液B100％乙腈，缓冲液C2％含水TFA 梯度(线性梯度曲线6) 通用路线1核心结构的合成
实施例1制备4，6-二苯基-2-硫代-1，2-二氢-3-吡啶甲腈(路线1)
氰基硫代酰胺(1.0g，9.98mmol)和二苯甲酰基甲烷(2.24mg，9.98mmol)在无水乙醇(20mL)中的悬浮液用三乙胺(催化，500μL)处理，然后回流2小时。反应混合物冷却至室温，形成黄色沉淀，过滤，得到黄色固体的4，6-二苯基-2-硫代-1，2-二氢-3-吡啶甲腈(1.02g，35％)。
1H NMR(300MHz，D6DMSO)δ 7.11(1H，s，吡啶基H)，7.56(6H，m，ArH)，7.73(2H，m，ArH)，7.86(2H，d，J＝7.2Hz，ArH)； MS(ESI+)m/z289(M+1)；MS(ESI-)m/z287(M-1). 实施例2制备4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-1H-吡啶-2-酮以及4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-2-硫代-1，2-二氢-吡啶-3-腈(路线2) 2.1 制备(E)-3-呋喃-2-基-1-噻吩-2-基-丙烯酮
将氢氧化钠水溶液(2.0M，30mL)滴加至2-乙酰基噻吩(10g，8.65mL，79.3mmol)和2-呋喃-甲醛(6.92g，72.0mmol)在乙醇(50mL)中的溶液内。室温下搅拌过夜后，该混合物通过添加(500mL)进行稀释，然后用乙酸乙酯(250mL)萃取。有机相干燥(Na2SO4)，干燥，然后在0℃下放置过夜。所得晶体过滤并用己烷(25mL)和乙醇(10mL)洗涤，得到(E)-3-呋喃-2-基-1-噻吩-2-基-丙烯酮(10.3g，70％)。
MS(ESI+)m/z205(M+1) 2.2制备4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-1H-吡啶-2-酮
由该反应产生的所有烟雾都通过漂白阱排出 向(E)-3-呋喃-2-基-1-噻吩-2-基-丙烯酮(1.0g，4.90mmol)和2-氰基-硫代乙酰胺(453mg，5.39mmol)在DMSO(14mL)中的溶液内吹入稳定的氮气流。该混合物被冷却至0℃，然后在20分钟的时间内分批地添加叔丁醇钾(1.65g，14.7mmol)。反应液温热至90℃并剧烈搅拌3小时，同时仍吹入N2。反应物被冷却至室温，然后缓慢地转移至在冰浴中冷却的4M盐酸(65mL)中(N.B.HCN的释放)，将温度保持在低于20℃。该溶液进行搅拌，直至气体的形成停止(约10分钟)，然后过滤，并用水和乙醇洗涤沉淀物，形成纯的产物(983mg，83％产率)，为淡棕色固体。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.87，m，1H，Ar-H；7.84，m，1H，Ar-H；7.67，dd，1H，J1.2，5.1Hz，Ar-H；7.31，m，2H，Ar-H；7.17，dd，1H，J3.9，5.1Hz，Ar-H；6.68，m，2H，Ar-H. MS(ESI+)m/z244(M+1) 2.3制备4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-2-硫代-1，2-二氢-吡啶-3-腈
由该反应产生的所有烟雾都通过漂白阱排出 向(E)-3-呋喃-2-基-1-噻吩-2-基-丙烯酮(1.0g，4.90mmol)和2-氰基-硫代乙酰胺(540mg，5.39mmol)在DMSO(14mL)中的溶液内吹入稳定的氮气流。该混合物被冷却至0℃，然后在15分钟的时间内分批地添加叔丁醇钾(1.65g，14.7mmol)。反应液温热至50℃并剧烈搅拌，同时仍吹入O2。完成后，反应物被冷却至室温，然后缓慢地转移至在冰浴中冷却的4M盐酸(65mL)中(N.B.HCN的释放)，将温度保持在低于20℃。该溶液进行搅拌，直至气体的形成停止(约30分钟)，然后过滤，用水和乙醇洗涤沉淀物。该沉淀物用醚进行研磨，然后过滤。沉淀物用热的冰乙酸研磨，并在冷却下过滤，形成纯的产物(617mg，44％产率)，其是单体和二聚体的混合物，为橙色固体。
1H NMR(CDCl3)δ 7.70，s，1H，Ar-H；7.58，m，1H，Ar-H；7.52，dd，2H，J1.2，3.9Hz，Ar-H；7.24，dd，1H，J1.2，5.1Hz，Ar-H；6.91，dd，1H，J3.6，5.1Hz，Ar-H；6.55，dd，1H，J1.8，3.6Hz，Ar-H. MS(ESI+)m/z 567(二聚体M+1) 实施例3制备4-呋喃-3-基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-腈(路线3)
将3-糠醛(4.8g，50.0mmol)、2-乙酰基噻吩(8.26g，65.5mmol)、氰基乙酸乙酯(5.66g，50.0mmol)和乙酸铵(37.19g，482.5mmol)放置在烧瓶中，并溶解在无水乙醇(50mL)中。反应混合物在室温下搅拌3天，其中形成黄色固体。反应液过滤，而黄色固体用水、接着用乙醇洗涤，然后抽干1小时，形成松散的黄色固态产物6.1g(46％)。
1H NMR(D6DMSO，300MHz)δ 12.67(bs，1H，杂-H)，8.58(s，1H，呋喃的H-2)，8.05(dd，J 3.9Hz，1.2Hz，1H，噻吩的H-5)，7.93(t，J 1.5Hz，1H，呋喃的H-4)，7.88(appd，J 4.5Hz，1H，呋喃的H-5)，7.26(dd，J 4.8Hz，3.6Hz，1H，噻吩的H-4)，7.22(dd，J 1.8Hz，0.9Hz，1H，噻吩的H-3). HPLC方法2 98.92％/2.18min. MS(ESI+)m/z 291(M+23). 实施例4制备三氟-甲烷磺酸3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基酯以及2-溴-4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-烟酸腈(路线4) 4.1制备三氟-甲烷磺酸3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基酯
在0℃和N2下将4-呋喃-3-基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-腈(2.00g，7.45mol)放入装有无水吡啶(20mL)的烧瓶中并同时搅拌。将三氟甲磺酸酐(Triflicanhydride)(2.5mL，14.9mmol)滴加至悬浮反应液中。在加入三氟甲磺酸酐时产生一些烟雾。在搅拌数分钟后，开始时的亮黄色变暗，在0℃下，悬浮液在15分钟的时间过程中缓慢地转变为暗棕色溶液。之后撤除所述浴，反应混合物进行搅拌，同时温热至室温，然后在该温度下搅拌0.5小时，接着减压蒸发，形成黑/棕色固体，将其加入氯仿中。将该氯仿溶液加至硅胶柱上，并用氯仿洗脱。收集包含所述产物的部分并减压蒸发，形成米色固体1.753g，58.7％。
1HNMR(CDCl3，300MHz)δ 8.33(s，1H，呋喃的H-2)，7.83(d，J3.6Hz，1H，噻吩的H-5)，7.69(s，1H，吡啶基H).7.63(m，2H，呋喃的H-4和H-5)，7.21(app t，1H，噻吩的H-4)，6.97(s，1H，噻吩的H-2). HPLC方法2 97.5％/2.86min. MS(ESI+)m/z 401(M+1). 4.2制备2-溴-4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-烟酸腈
使4-呋喃-2-基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-腈(2.51g，9.34mmol)、五氧化磷(3.18g，22.4mmol)、四丁基溴化铵(3.39g，10.8mmol)在无水甲苯(120mL)中加热回流18小时。该混合物冷却至室温并真空浓缩。残留物进行快速色谱纯制(氯仿)，得到2-溴-4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-烟酸腈(1.2g，39％)，其为黄色固体。
1H(300 MHz，CDCl3)δ 6.66(dd，J＝3.7，1.8Hz，1H，H4-呋喃)，7.17(dd，J＝5.0，3.7Hz，1H，H4-噻吩)，7.56(dd，J＝5.0，0.9Hz，1H，H3-噻吩)，7.68(7.70(dd，J＝3.7，0.9Hz，1H，H5-噻吩或H5-呋喃)，7.81(dd，J＝3.7，0.9Hz，1H，H5-噻吩或H5-呋喃)，8.01(s，1H，H5-吡啶). HPLC方法299.1％/2.27min MS(ESI+)m/z 333(M[Br81]+1)，331(M[Br79]+1) 实施例5制备3-乙酰基-4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-1H-吡啶-2-酮4-异丙基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-羧酸酰胺(路线5) 5.1制备3-乙酰基-4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-1H-吡啶-2-酮
4-呋喃-2-基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-腈用甲基溴化镁处理，得到3-乙酰基-4-呋喃-2-基-6-噻吩-2-基-1H-吡啶-2-酮。
5.2制备4-异丙基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-羧酸酰胺
4-异丙基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-腈用85％硫酸水溶液在100℃下处理20分钟，得到4-异丙基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-羧酸酰胺。
合成取代的苯乙酮化合物 实施例6制备1-[4-(吗啉-4-磺酰基)-苯基]-乙烷酮
将4-乙酰基苯磺酰氯(500mg，2.3mmol)在无水二氯甲烷(10mL)中的溶液冷却至0℃，然后滴加吗啉溶液(220μL，2.51mmol，在5mL二氯甲烷中)进行处理。该反应混合物接着通过滴加三乙胺(478μL，3.4mmol，在5mL二氯甲烷中)进行处理，并同时使温度保持在0℃。添加完成后，反应液在0℃下保持2小时，然后温热至室温，并在氮气氛下搅拌过夜。之后，该反应混合物减压浓缩至干。所得的固体用水(20mL)稀释，过滤，并进一步用50mL水洗涤，然后干燥，得到标题化合物白色固体状的1-(4-(4-吗啉基磺酰基)苯基)乙烷酮(595mg，96％)。
1H NMR(300 MHz，DMSO)δ 2.66(3H，s，CH3)，2.91(4H，m，吗啉H)，3.63(4H，m，吗啉H)，7.88(2H，d，J＝8.7Hz，ArH)，8.19(2H，d，J＝8.7Hz，ArH). MS(ESI+)m/z 270(M+1). HPLCpolar(merck)99％/0.95min. 合成侧链 实施例7制备4-溴甲基-3-碘-苯甲酸甲酯
使用在US4499299中描述的方法。
实施例8制备4-溴甲基-3-氨磺酰基-苯甲酸甲酯
4-甲基苯甲酸甲酯(20g)与氯磺酸(21g)一起在140℃下加热5小时。将该反应混合物缓慢地倾倒在冰-水中，并收集沉淀物，用水洗涤并干燥，形成磺酰氯b(9.9g，35％)。
在冰浴中，将25％氨水(8mL)滴加至磺酰氯b(2g)在二乙基醚(40mL)中的溶液内。该混合物保持冷却2小时，然后过滤，用水洗涤并干燥，形成磺酰基酰胺c(1.6g，90％)。
化合物c如US4499299中所述进行酯化，形成化合物d。
化合物d(1.6g)、N-溴琥珀酰亚胺(1.77g)和0.03当量的过氧化苯甲酰与四氯化碳(50mL)一起混合并回流12小时。进行快速色谱纯制(己烷/乙酸乙酯3:1)，得到化合物e(800mg，36％)。
实施例9制备2-氨基-4-(甲苯-4-磺酰基氧基甲基)-苯甲酸甲酯
将反应物f溶解在四氢呋喃/二乙基醚(2:1)中，并用DIBAL-H在-78℃下处理，然后温热至0℃，并继续搅拌4小时。该混合物在室温下搅拌给药，然后进行常规后处理，得到所希望的产物g(33％)。
化合物g与p-甲苯磺酸(1.0当量)在甲苯中回流2小时，形成所希望的化合物h(74％)。
实施例10制备5-溴甲基-噻吩-2-羧酸甲酯
2-噻吩甲醇(5mL，52.8mmol)在二氯甲烷(100mL)中的溶液用叔丁基-二甲基甲硅烷基氯(11.94g，79.2mmol)处理，然后滴加二异丙基乙基胺(18.4mL，105.6mmol)进行处理。反应混合物在室温和氮气氛下搅拌过夜。之后，反应液进一步用50mL的二氯甲烷稀释，而合并的有机相顺序地用水、0.1M盐酸、最终水(3 x 100mL分别)洗涤。合并的有机相干燥(MgSO4)并减压浓缩，然后进行柱色谱纯制(10％乙酸乙酯/汽油)，得到所希望的红色油状的叔丁基-二甲基-(噻吩-2-基甲氧基)-硅烷(i)(11.7g，97％)。
在氮气氛下，化合物i(2.0g，8.7mmol)在无水四氢呋喃(50mL)中的溶液在-40℃下通过滴加n-丁基锂(1.6M己烷溶液，6.6mL，10.5mmol)进行处理，并在-40℃下保持1.5小时。之后，将CO2(g)(过量)吹入反应混合物中1小时，并同时使反应液温热至0℃。最后，添加氯化铵水溶液(40mL)，由此使反应停止，然后用乙酸乙酯萃取。合并的有机相用水洗涤，干燥(MgSO4)并减压浓缩，得到所希望的油状的5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-噻吩-2-羧酸(j)(1.49g，62％)。
MS(ESI-)m/z 271(M-1). 化合物j(200mg，0.73mmol)在二氯甲烷(30mL)中的溶液用重氮甲烷气体(过量，通过碱性分解
而产生的)进行处理。当反应完全时，减压除去二氯甲烷，得到所希望的油状的5-(叔丁基-二甲基-硅烷基氧基甲基)-噻吩-2-羧酸甲酯(k)(210mg，100％)。
将化合物k，(236mg，0.82mmol)在四氢呋喃(10mL)中的溶液冷却至0℃，然后用四丁基氟化铵(1M四氢呋喃溶液，1.64mL，1.64mmol)处理，并在0℃下保持20分钟。该反应液温热至室温，然后进一步搅拌2小时。之后，将该反应混合物倾倒在盐水(50mL)中，并用乙酸乙酯(3 x 50mL)萃取。合并的有机相干燥(MgSO4)，然后减压浓缩，得到所希望的油状的5-羟甲基-噻吩-2-羧酸甲酯(l)(120mg，84％)。
向装有二氯甲烷(50mL)的烧瓶中顺序地加入三苯基膦(228mg，0.87mmol)、咪唑(59.3mg，0.87mmol)和溴(44.6μL，0.87mmol)。反应混合物接着通过滴加化合物1(100mg，0.58mmol，在二氯甲烷(5mL)中)进行处理，然后在室温和氮气下搅拌4小时。当反应完全时，将该混合物减压浓缩至干，然后进行快速色谱纯制(20％乙酸乙酯/石油)，得到所希望的5-溴甲基-噻吩-2-羧酸甲酯(m)，其为无色晶体(115mg，84％)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 3.89(3H，s，CH3)，4.67(2H，s，CH2)，7.10(1H，m，噻吩基1H)，7.64(1H，d，J＝3.6Hz，噻吩基1H). HPLC方法292％/1.14min. 通用路线2化合物合成
实施例11制备4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-苯甲酸甲酯(步骤A1)
4-呋喃-3-基-2-氧代-6-噻吩-2-基-1，2-二氢-吡啶-3-腈(53mg，1.98mmol)在无水丙酮(5mL)中的溶液用4-溴甲基-苯甲酸甲酯(500mg，2.18mmol)、碳酸钾(685mg，4.96mmol)和碘化钠(催化剂，1％)处理。反应混合物在氮气氛下回流8小时，然后冷却至室温，形成乳状沉淀物。之后，反应混合物用水(10mL)稀释，接着过滤，形成膏状固体的4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-苯甲酸甲酯(770mg，93％)。
1H NMR(300MHz，D6DMSO)δ 3.84(3H，s，Me)，5.66(2H，s，CH2)，7.25(2H，m，噻吩基1H)，7.67(2H，d，J＝8.7Hz，芳基H)，7.83(1H，dd，J＝4.9，1.2Hz，呋喃基1H)，7.88(1H，s，ArH)，7.95(1H，t，J＝2.1Hz，呋喃基1H)，7.99(2H，d，J＝8.7Hz，芳基H)，8.09(1H，dd，J＝3.9，0.9Hz，噻吩基1H)，8.55(1H，m，呋喃基1H)， MS(ESI+)m/z 417(M+1) HPLC方法2 100％/2.67min. 使用实施例11中描述的方法，由此制备表1中的化合物 表1用实施例11的方法制备的化合物
实施例12制备4-(3-氰基-4，6-二苯基-吡啶-2-基硫烷甲基)-苯甲酸(步骤A2)
4，6-二苯基-2-硫代-1，2-二氢-3-吡啶甲腈(122mg，0.42mmol)在DMF(2mL)中的溶液用氢氧化钾水溶液(1M，1.05mL，1.05mmol)处理，然后搅拌10分钟。接着添加4-溴甲基-苯甲酸(100mg，0.46mmol)，并使该混合物搅拌过夜。所得的澄清溶液用1M HCl(1mL)处理，得到乳状沉淀物，其进行过滤，形成棕色固体的4-(3-氰基-4，6-二苯基-吡啶-2-基硫烷甲基)-苯甲酸(165mg，92％)。
1H NMR(300 MHz，D6DMSO)δ 4.78(2H，s，CH2)，7.52-7.63(8H，m，ArH)，7.73-7.76(2H，m，ArH)，7.87(2H，d，J＝8.7Hz，ArH)，7.92(1H，s，ArH)，8.22-8.25(2H，m，ArH)； MS(ESI+)m/z423.(M+1)；MS(ESI-)m/z421(M-1). HPLC方法2 98％/2.45min. 实施例13制备4-呋喃-3-基-2-[4-(2H-四唑-5-基)-苄基氨基]-6-噻吩-2-基-烟酸腈(步骤B)
在密封的压力试管中使2-(4-氰基-苄基氨基)-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-烟酸腈(140mg，0.37mmol)、四丁基氟化铵水合物(48mg，0.183mmol)、三甲基甲硅烷基叠氮化物(73uL，0.55mmol)和DMF(1mL)搅拌混合，然后加热至90℃持续36小时。冷却至室温后，反应液用乙酸乙酯(20mL)稀释并用盐酸(1.0M，20mL)洗涤。有机相干燥(Na2SO4)，过滤并真空浓缩，得到橙色固体(182mg)，该固体进行快速色谱纯制(20％乙酸乙酯/己烷—100％乙酸乙酯)，得到橙色固体的4-呋喃-3-基-2-[4-(2H-四唑-5-基)-苄基氨基]-6-噻吩-2-基-烟酸腈(29mg，19％)。
1H NMR(300 MHz，D6DMSO)δ 4.70(d，J＝6.0Hz，2H，NHCH2)，7.15(m，1H，H4-呋喃)，7.17(dd，J＝5.0，3.7Hz，1H，H4-噻吩)，7.40(s，1H，H5-吡啶)，7.66(d，J＝8.3Hz，2H，H3-芳香)，7.71(dd，J＝5.0，0.9Hz，1H，H3-噻吩)，7.89(t，J＝1.8Hz，1H，H5-呋喃)，7.93(dd，J＝3.7，0.9Hz，1H，H5-噻吩)，7.96(d，J＝8.3Hz，2H，H4-芳香)，8.44(t，J＝1.8Hz，H2-呋喃). HPLC方法292.2％/1.97min MS(ESI+)m/z 426(M+1)；MS(ESI-)m/z 424(M-1) 使用实施例13中所述的方法，制备表2中的化合物 表2按照实施例13的方法制备化合物
实施例14制备4-[(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氨基)-甲基]-苯甲酸甲酯(步骤C)
将三氟-甲烷磺酸3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基酯(80mg，0.20mmol)放置在反应烧瓶中，然后用无水DMF(10mL)溶解。添加三乙胺(111μL，0.79mmol)，然后添加甲基4-(氨基甲基)-苯甲酸HCl(81mg，0.40mmol)。反应混合物在80℃搅拌。反应4小时后，添加水(10mL)，由此使反应停止。形成的亮橙色固体通过过滤进行收集，然后抽干，得到暗的膏状固体(72.5mg，87％)。
HPLC方法2 91.7％/2.62min. MS(ESI+)m/z 416(M+1). 1H NMR(CDCl3，300MHz)8.06(app t，呋喃的H2)，7.92(app d，JAA’BB’8.7Hz，挨着COOMe的2xArH)，7.59(app d，J3.9Hz，噻吩的H5)，7.48(t，J1.8Hz，呋喃的H5)，7.43(app d，JAA’BB’8.4Hz，挨着CH2NH的2 x ArH)，7.37(dd，J5.1Hz，1.5Hz，呋喃的H4)，7.03(dd，J 5.1 Hz，3.6Hz，噻吩的H4)，6.99(s，吡啶的1H)，6.80(app d，J 2.4 Hz，噻吩的H2)，4.77(s，CH2)，3.80(s，CH3). 使用实施例14中所述的方法，制备表3中的化合物 表3按照实施例14的方法制备的化合物
实施例15制备4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基)-苯甲酸甲酯(步骤C)
使2-溴-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-烟酸腈(160mg，0.513mmol)以及4-甲氧基羰基-苯酚钠(89mg，0.513mmol)在DMF(2mL)中于90℃下搅拌18小时，然后冷却至室温。该混合物用盐酸(2.0M，5mL)稀释，然后搅拌15分钟。所得的沉淀物通过过滤进行收集，然后进行快速色谱纯制(50％氯仿/己烷)，得到白色固体的4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基)-苯甲酸甲酯(141mg，68％)。
1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ 3.95(s，3H，OCH3)，6.97(dd，J＝2.3，0.9Hz，1H，H4-呋喃)，7.08(dd，J＝5.0，3.7Hz，1H，H4-噻吩)，7.37(d，J＝8.7Hz，2H，H2-芳香)，7.42(dd，J＝5.0，1.4Hz，H3-噻吩)，7.43(s，1H，H5-吡啶)，7.59(dd，J＝3.7，1.4Hz，1H，H5-噻吩)，7.61(m，1H，H2或H5-呋喃)，8.14(d，J＝8.7Hz，2H，H3-芳香)，8.31(m，1H，H2或H5-呋喃). HPLC方法2 97.6％/2.28min MS(ESI+)m/z 403(M+1) 使用实施例15中所述的方法，制备表4中的化合物 表4按照实施例15的方法制备的化合物
实施例16制备4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-苯甲酸(步骤D)
4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-苯甲酸甲酯(720mg，1.74mmol)在THF(30mL)中的溶液用含水氢氧化锂(1M，10.43mL，10.43mmol)处理，并在50℃下搅拌8小时，然后冷却至室温。该混合物用水(5mL)稀释，接着用1M盐酸调节为酸性，形成淡黄色沉淀物，其进行过滤，形成淡黄色固体的4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-苯甲酸(670mg，96％)。
1H NMR(300 MHz，D6DMSO)δ 5.65(2H，s，CH2)，7.25(2H，m，噻吩基1H)，7.64(2H，d，J＝8.1Hz，芳基H)，7.83(1H，d，J＝4.8Hz，furylH)，7.88(1H，s，ArH)，7.95(1H，t，J＝1.8Hz，furylH)，7.97(2H，d，J＝8.1Hz，芳基H)，8.10(1H，d，J＝3.9Hz，噻吩基1H)，8.56(1H，m，furylH)，12.95(1H，br s，CO2H). MS(ESI+)m/z 403(M+1)；MS(ESI-)m/z 401(M-1). HPLC方法2100％/2.45min. 实施例17合成3[3-氰基-4-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基氧基甲基-3-氯-噻吩-5-羧酸。
化合物5、2-取代的4-羧基-(3-溴甲基)-噻吩化合物6通过上述方法进行制备。3-溴-4-甲基噻吩3是由3-甲基噻吩根据Syn.Com.1981；11(1)；25-28中的方法得到的。
实施例184-氰基-5-[3-氰基-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基氧基甲基]-噻吩-2-羧酸甲酯。
在室温下使2-甲基噻吩与溴(2.0eq)在醋酸中反应2小时，形成二溴化物2。化合物2用Buli和干冰被羰基化，形成化合物3，其产率为74.4％，然后羧酸基被酯化，形成化合物4，产率为75.1％。
化合物4和CuCN(5.0eq)的混合物回流5小时，得到氰化物6，产率为51％。进行溴化，得到所希望的溴化物7。
根据实施例11中的方法，使中间产物7与4-呋喃-3-基-2-氧代-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-1，2-二氢-吡啶-3-腈反应，形成所希望的产物4-氰基-5-[3-氰基-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基氧基甲基]-噻吩-2-羧酸甲酯。
实施例19合成5-硝基-3-[3-氰基-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基-氧基甲基]-噻吩-2-羧酸以及4-硝基-3-[3-氰基-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基-氧基甲基]-噻吩-2-羧酸。
3-甲基-噻吩-2-羧酸甲酯进行硝化反应，得到两个异构体，它们通过快速色谱进行分离，形成3(7.8g，70％产率)和4(1.9g，17％产率)。这两个化合物通过NBS/BPO分别被转化为溴甲基化合物，分别得到1.0g的化合物5和0.8g的化合物6。侧链5和6通过实施例11中描述的方法偶联至核心上，然后通过实施例16中描述的方法进行水解，分别形成5-硝基-3-[3-氰基-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基-氧基甲基]-噻吩-2-羧酸(ES-MS532，M-H+)及其钠盐(Rt13.5min，方法2)以及4-硝基-3-[3-氰基-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基-氧基甲基]-噻吩-2-羧酸。
实施例20 合成′3-[3-氰基-4-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基氧基甲基]-5-碘-噻吩-2-羧酸甲酯
对来自上述实施例19的化合物3进行还原，得到化合物2。之后，进行重氮化反应，形成溴化物3。用NBS/BPO在CCl4中进一步进行溴化，得到新的侧链4。
碘代侧链6是按照上述方法制备的，然后通过实施例11中所述的方法偶联至所述核心上，形成′3-[3-氰基-4-呋喃-3-基-6-(4-吗啉-4-基-苯基)-吡啶-2-基氧基甲基]-5-碘-噻吩-2-羧酸甲酯(Es-MS，650，[M+Na+]。所述酯根据实施例16中所述的方法进一步被转化为酸及其钠盐(HPLC Rt 17.0min，方法2)。
实施例21.制备用于形成核心的数个醛类化合物 实验21a
所述羟甲基化合物是通过文献中的方法制备的(参考J.Antibiot.1995，48(11)，1336-44)。其通过Dess-Martin氧化反应被转化为需要的醛(2.8g，产率31％)。
实验21b
所述乙基酯是根据以下文献制备的J.Med.Chem.2004，47(14)，3642-3657。其进一步用DIBAL-H进行还原，形成相应的醛13a。
实验21c
所述羟基化合物是通过DIBAL-H还原所述乙基酯2c’而制得的，其用PCC氧化，形成所希望的醛2c，产率为45％。
实验21d
噁二唑1在-78℃下进行DIBAL-H还原，形成所希望的醛2，产率为30％。
实验21e
中间产物2是用以下参考文献中描述的方法制备的(37％产率)J.Org.Chem.1982，47，2216-17。该乙基酯4是用文献方法制备的(参考Gazz.Chim.Ital.1947，77，206-12)。用氢化铝锂还原后，得到醇5，其被氧化为醛6。
实验21f
异噁唑-5-羧酸可从TCI商购得到，将其转化为甲酯，然后通过DIBAL-H还原，得到异噁唑-5-甲醛(1.05g，产率60％)。
实验21g
所述醇5进行Dess-Martin氧化，得到所希望的醛6，其含有起始物4b’作为污染物。得到2g的粗醛5b，并直接用于核心的形成。
实施例21h
3.2g的化合物5是根据以下文献制备的Helv.Chim.Acta.1997，80，1528-1554，然后转化为相应的醛6。
实验21i
制备0.5g的醛4，其中三步总产率为6％(参考J.Med.Chem.1999，42，4961-4969)。
实施例21j
化合物4是根据以下文献制备的J.Hetero.Chem.1995，32，1693-1702。其接着用NaBH4/LiCl在乙醇溶液中进行还原。进一步通过Dess-Martin试剂进行氧化，形成所希望的醛6，其中2步的总产率为25％。
实施例21k
化合物4是根据以下文献制得的J.Chem.Soc.PT1.1988，1875-1880，然后转化为醛5。
实施例22制备(4-吗啉-4-基-苯基)-1，2-二氢吡啶-3-腈核心
接着，4-氟苯乙酮用作SNAr反应的反应物用于制备化合物3(项目5-8)。项目7得到最佳的结果。
(4-吗啉基)-苯乙酮(1)接着通过以下反应路线所示的方法被转化为核心(如4)
化合物4a-4c是用一锅反应制得的。
实施例23
如下表所示，通过NBS溴化甲基，得到三个侧链
根据实施例16中描述的方法，制备表5中的化合物 表5根据实施例16的方法制备的化合物
实施例17制备4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-N-(2H-四唑-5-基)-苯甲酰胺(步骤E)
在搅拌和氮气氛下将4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-苯甲酸(340mg，0.844mmol)溶解在无水THF(15mL)中。滴加三乙胺(236μL，1.69mmol)，然后该溶液在室温下搅拌15分钟，接着冷却至-5℃(冰/盐/水浴)。滴加氯甲酸异丁基酯(220μL，1.69mmol)，并在20分钟后，在2分钟的时间内滴加5-氨基四唑(144mg，1.69mmol)在无水DMF(1mL)中的溶液，然后添加三乙胺(236μL，1.69mmol)。撤除冷却浴，并使反应液温热至室温，接着搅拌18小时。真空除去挥发性物质，而残留物用1.0M HCl(20mL)和水(20mL)进行研磨。悬浮液进行超声处理以破碎所述材料，然后过滤。残留物用热的甲醇研磨，接着过滤，然后用2.0M NaOH(10mL)、水(10mL)洗涤，接着在50℃下真空干燥2小时，得到4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-N-(2H-四唑-5-基)-苯甲酰胺(205mg，52％)，其为淡棕色固体1H NMR(D6DMSO)δ 2.0(s，2H，CH2)，7.25(m，2H，H4-噻吩and H5-呋喃)，7.63(d，J＝8.3Hz，2H，H3-芳香)，7.83(dd，J＝5.0，1.2Hz，1H，H3-噻吩)，.7.88(s，1H，H5-吡啶)，7.94(m，1H，H2或H5-呋喃)，8.02(d，J＝8.3Hz，2H，H4-芳香)，8.11(dd，J＝3.7，1.2Hz，1H，H5-噻吩)，8.56(m，1H，H2或H5-呋喃)，10.47(s，1H，NH). MS(ESI-)m/z 468(M-1). 实施例18制备4-(3-氰基-4-呋喃-3-基-6-噻吩-2-基-吡啶-2-基氧基甲基)-苯甲酸钠(步骤F)
在搅拌下将酸(1mmol)溶解/悬浮于甲醇(1mL)中。添加氢氧化钠水溶液(2.0M，1mmol)(或者对于tris盐用tris水溶液(2.0M，1mmol))，然后所得的混合物在室温下搅拌10分钟。真空除去挥发性物质，并将残留物溶解在水(2mL)中，过滤(porsity 4 sinter)，然后冻干2天。
表6根据实施例18的方法制备的化合物
其他化合物和盐
*M3代表HPLC方法2. 实施例19生物学测试 使用以下测定技术来测试本发明化合物的生物学活性。
3’加工/链转移组合试验 所使用的3’加工/链转移组合试验程序类似于以下文献中公开的Ovenden等人Phytochemistry.2004 Dec；65(24)3255-9。该试验采用96孔板模式。简而言之，使400ng待测试的化合物与30nM的底物DNA一起温育，该底物DNA由标记有洋地黄毒苷(DIG)的经退火的U5LTR序列寡核苷酸(DIG；5’-ACTGCTAGAGATTTTCCAC ACTGACTAAAAGGGTC-DIG-3’)或标记有生物素(Bio)的经退火的U5LTR序列寡核苷酸(5’-Bio-GACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCAGT-3’)组成，这样每个底物都在相反的链上具有DIG或Bio标记。反应在37℃下进行2小时，将作为3’加工和链转移活性的结果所产生的产物结合至链霉抗生物素板上，并使用抗DIG碱性磷酸酶缀合物和对硝基苯基磷酸酯底物进行检测。
链转移特异性试验 该链转移特异性试验所采用的模式与上述3’加工/链转移组合试验的类似，不同之处在于其使用生物素化的底物，其具有经预先处理的LTR端(5’-Bio-GACCCTTTTAGTCAGTGTGGAAAATCTCTAGCA-3’)。
HIV复制的抑制 将细胞接种在96孔微滴定板中，其浓度为50,000个细胞/50μl/孔，并且是在包含2μg/mL聚凝胺(polybrene)的RF-10(RF-10/2)中。化合物在RF-10/2中被制成4x最终浓度，然后将30μL添加至细胞中。将病毒(40μL，在包含1600pfu的RF-10/2中)添加至每个孔中，或添加40μL RF-10/2作为阴性对照，用于测试化合物的细胞毒性。24小时后，向每个孔中添加额外的90μL介质或包含1x化合物的介质。感染后4天时，从每个孔中除去100μL的介质，并用100μl包含或不包含化合物的新制介质替换。48小时后，收集上清液，并测定细胞外p24的浓度。将上清液稀释成1/10,000，并使用Vironostika p24分析试剂盒测试p24水平。计算EC50值，其为抑制HIV p24产生至无药对照组的50％时所需要的浓度。
4个本发明化合物的试验结果见如下所示，其中 ·IC50(3′-ST)代表3’加工/链转移组合试验的试验结果； ·IC50(ST)代表链转移特异性试验的试验结果；以及 ·EC50代表抑制HIV复制的结果。
表7描述了在这些试验中使用的“分级体系”。
表7试验分级体系 试验结果
IC50(3′-ST)+++ IC50(3′-ST)+++ IC50(ST)ND IC50(ST)ND EC50+++ EC50+ 表8其他试验的结果
在本说明书中，词语“包含”或类似的词语“包括”应被理解为，意味着包括所述的元件、整数或步骤、或者一组元件、整数或步骤，但并不排除任何其他的元件、整数或步骤、或者一组元件、整数或步骤。
在本说明书中提及的所有出版物都在此并入作为参考。对本说明书中所包括的文献、法案、材料、文章等的任何讨论都仅是为本发明提供背景。这并不意味着任意的或者全部的这些文件都构成部分现有技术基础或者是本发明技术领域中的常识如其在本申请的每项权利要求的优先权日之前已在任何地方存在一样。
本领域技术人员应认识到，在不偏离本发明的精神和范围的情况下，可对具体实施方案中所示的本发明进行多种改变和/或改进。因此，本发明的实施方案都只是说明性的，而非限制性的。
权利要求
1、治疗或者预防个体中病毒感染的方法，其包括向所述个体给药有效量的式I化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药，
其中
X选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O2)-和NR4；
R4选自H和C1-3烷基；
n是0或1；
A是C6芳基或杂芳基；
R1选自以下组中氢、卤素、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、-C1-10烷基-O-C1-10烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C1-10烷氧基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基、-NR5R6、-C6芳基NR5R6、-C6芳基-SO2-NR5R6、-C6芳基-杂环基、-C6芳基-SO2-杂环基、-杂芳基-R10、-Z-C1-6亚烷基-SO2-R12、-Z-(C2H4O)p-R12；
或者R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基；
R2选自以下组中氢、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基和-NR5R6、-杂芳基-C6-10芳基、-杂芳基-杂芳基；
R3选自以下组中氢、氰基、卤素、-NO2、-C(O)NR5R6、-CH2NR5R6、-C(O)R7和-CO2R7；
Z不存在或选自以下组中NR5、O、S、S(O)、S(O2)；
p是1—3；
R5和R6相互独立地选自以下组中氢、C1-10烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基C1-3烷基和C6-10芳基；
R7是氢或C1-10烷基；
R12是氢或C1-10烷基；
R8是0—2个相互独立地选自以下组中的取代基
-OH、-SO2NH2、-OC(O)R7、-CO2R7、C1-10烷基、C1-10烷氧基、卤素、-NO2、和-NR5R6；
R9选自以下组中氢、氰基、-SO2NH2、-R10、和-C(O)R10；
R10选自OH、-C1-10烷基、-OC1-10烷基、-OC2-10烯基、和-Y-杂芳基；且Y不存在或选自-O-和-NR4-；
R11选自以下组中氢、C1-10烷基、C1-10烷氧基；或R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基。
2、根据权利要求1的方法，其中R1选自以下组中C6-10芳基和杂芳基。
3、根据权利要求1或2的方法，其中R2选自以下组中C6-10芳基和杂芳基。
4、根据权利要求1—3之一的方法，其中n是1。
5、根据权利要求1—4之一的方法，其中R11是氢。
6、根据权利要求1—5之一的方法，其中A是苯基。
7、根据权利要求1—5之一的方法，其中A是吡啶基。
8、根据权利要求1—5之一的方法，其中A是选自以下组中的杂芳基吡咯烷基、呋喃基和噻吩，该杂芳基优选为2，5-取代的。
9、根据权利要求1的方法，其中所述式I化合物选自以下组中
10、根据权利要求1的方法，其中所述式I化合物选自以下组中
11、根据权利要求1的式I化合物，其选自以下组中
12、式I的化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药，
其中
X选自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O2)-和NR4；
R4选自H和C1-3烷基；
n是0或1；
A是C6芳基或杂芳基；
R1选自以下组中氢、卤素、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、-C1-10烷基-O-C1-10烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C1-10烷氧基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基、-NR5R6、-C6芳基NR5R6、-C6芳基-SO2-NR5R6、-C6芳基-杂环基、-C6芳基-SO2-杂环基、-杂芳基-R10、-Z-C1-6亚烷基-SO2-R12、-Z-(C2H4O)p-R12；
或者R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基；
R2选自以下组中氢、C6-10芳基、C6-10芳基C1-3烷基、杂环基、杂芳基、C1-10烷基、C2-10烯基、C2-10炔基、C3-10环烷基和-NR5R6、-杂芳基-C6-10芳基、-杂芳基-杂芳基；
R3选自以下组中氢、氰基、卤素、-NO2、-C(O)NR5R6、-CH2NR5R6、-C(O)R7和-CO2R7；
Z不存在或选自以下组中NR5、O、S、S(O)、S(O2)；
p是1—3；
R5和R6相互独立地选自以下组中氢、C1-10烷基、C3-6环烷基、C6-10芳基C1-3烷基和C6-10芳基；
R7是氢或C1-10烷基；
R12是氢或C1-10烷基；
R8是0—2个相互独立地选自以下组中的取代基
-OH、-SO2NH2、-OC(O)R7、-CO2R7、C1-10烷基、C1-10烷氧基、卤素、-NO2、和-NR5R6；
R9选自以下组中氢、氰基、-SO2NH2、-R10、和-C(O)R10；
R10选自OH、-C1-10烷基、-OC1-10烷基、-OC2-10烯基、和-Y-杂芳基；且Y不存在或选自-O-和-NR4-；
R11选自以下组中氢、C1-10烷基、C1-10烷氧基；或R1和R11连接在一起形成C3-4亚烷基。
13、根据权利要求12的化合物，其中R1选自以下组中C6-10芳基和杂芳基。
14、根据权利要求13的化合物，其中R2选自以下组中C6-10芳基和杂芳基。
15、根据权利要求12—14之一的化合物，其中n为1。
16、根据权利要求12—15之一的化合物，其中R11为氢。
17、根据权利要求12—16之一的化合物，其中A为苯基。
18、根据权利要求12—16之一的化合物，其中A为吡啶基。
19、根据权利要求12—16之一的化合物，其中A是选自以下组中的杂芳基吡咯烷基、呋喃基和噻吩。
20、根据权利要求12的化合物，其选自以下组中
21、根据权利要求12的化合物，其选自以下组中
22、根据权利要求12的化合物，其选自以下组中
23、药物组合物，其包含根据权利要求12—22之一的化合物以及药物学可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
全文摘要
本发明提供治疗或者预防个体中病毒感染的方法，其包括向所述个体给药有效量的式(I)化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药。本发明还涉及式(I)化合物或其药物学可接受的衍生物、盐或前药。
文档编号C07D409/14GK101484449SQ200780024196
公开日2009年7月15日 申请日期2007年4月30日 优先权日2006年4月28日
发明者D·I·罗兹, K·麦克法兰, E·D·约内斯, W·伊萨, J·J·戴德曼, N·崔 申请人:艾维克有限公司