专利名称：：一种异戊烯基黄酮及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种异戊烯基黄酮，以及该化合物在制备治疗乳腺癌药物中的应用。
背景技术：
：小叶莲(FructusSinopodophylli)为常用藏药，中国药典2005年版收载其来源为小檗科植物桃儿七尸0^^//"7/^"^,11(^^的干燥成熟果实。具有活血调经功能，常用于治疗多种妇科疾病。但是目前关于小叶莲的研究却少见报道。目前，从小叶莲中分离得到的主要化合物有木脂素类(lignanoids)化合物鬼臼毒素(podophyllotoxin)、去氧鬼臼毒素(deoxypodophyllotoxin)、4'-去甲去氧鬼臼毒素(4'-demethyldesoxypodophyllotoxin)。黄酮类(flavones)化合物槲皮素(quercetin)、8-异戊烯基山柰酚(8-prenylkaemfero1)和柠檬酚(citrusinol)。至今未见小叶莲及其化合物在抑制乳腺癌方面的报道。
发明内容本发明的目的在于提出一种异戊烯基黄酮，以及该化合物在制备治疗乳腺癌药物中的应用。本发明通过将小叶莲干燥粉碎，以80%95%乙醇回流提取2~4次，每次0.5-2小时，回收乙醇，浓縮至608(TC时相对密度为1.051.30的浸膏。将其均匀分散至水中，分别用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取，回收溶剂得到不同极性的萃取物；乙酸乙酯萃取部分经反复硅胶柱色谱(石油醚-丙酮或氯仿-甲醇洗脱)并通过SephadexLH-20纯化、氯仿-甲醇洗脱，得到一个新化合物，将其命名为8,2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚(8,2'-diprenylquercetin3-methylether)。8,2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚为黄色粉末，盐酸镁粉反应呈阳性。HR-ESI-MS:m々453.19118[M+H]+，给出分子式C26H2807。iH-NMR、13C-NMR、HSQC和HMBC数据见表1。该化合物为一新化合物，命名为8,2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚。表18，2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚的核磁数据Position'H-NMR(500MHz，methanol-*^)"C陽NMR(125MHz,methanol-^)HSQC(13C-NMR,ppm)訓BC(13C-NMR，ppm)2-161.83-140.34-180.45-跳766.26(1H,s)99.399.3106.2，107.9，160.7，163.17-163.18-107.99-156.210-106.2r-123.22,-129.43,-144.74,-148.35'6.75(1H,d，8.5)113.2113.2123.2，144.7，148.36,6.78(1H，d，8.5)122.5122.5129.4,148.3,161.8r'3.32(2H,d，7.0)22.422.4107.9，123.3,132.3，156.2，163.12"5.08(1H,m)123.3123.3107.93"-132.34"1.30(3H,s)17.717.7124.1,132.15"1.57(3H，d,1.0)25.925.9123.3,132.3r"3.42(2H，d，7.0)26.626.6123.2，124.1，129.4，132.1,144.72'〃5.01(1H,m)124.1124.1129.43'〃-132.14'〃1.48(3H，s)17.717.7123.3,132.35"'1.42(3H,d，1.5)25.725.7124.1,132.1-OCH33.56(3H,s)60.960.9140.34其结构式如下:该化合物对人乳腺癌细胞的抑制作用实验表明，其具有良好的抑制乳腺癌细胞的作用。具体实施方式实施例l干燥小叶莲药材，粉碎后约18kg，以8倍量95。/。乙醇回流提取2次，提取时间分别为2小时和1小时，回收乙醇，浓縮至7(TC时相对密度为1.10的浸膏约5.2kg。取约4.8kg，加10L蒸馏水充分搅拌至完全悬浮后，依次用石油醚、乙酸乙酯、水饱和正丁醇等体积萃取5次。萃取液减压回收溶剂，得各萃取部位。取乙酸乙酯部分274g，经硅胶柱(100~200目)色谱进行分离，氯仿-甲醇(10:0~0:10)梯度洗脱，根据TLC检测结果，在氯仿甲醇为40:130:1极性部位含有8,2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚，通过SephadexLH-20纯化、氯仿-甲醇(6:4)洗脱，得到8，2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚60mg。实施例2采用酸性磷酸酶法检测8,2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚对人乳腺癌细胞的抑制作用。人乳腺癌MDA-231细胞株和人乳腺癌T47D细胞株均用含体积分数为10%新生牛血清、100U/mL青霉素、100U/mL链霉素的DMEM培养基培养，37°C，95%湿度，5%0)2孵箱条件；常规2.5g/L胰蛋白酶消化传代。取对数生长期细胞消化后，制成细胞悬液按1.5xlOV孔的密度接种于96孔培养板，培养24h细胞完全贴壁之后，实验组分别加入不同浓度的化合物；空白对照组加入DMEM培养液。实验中，每个浓度设6个平行孔，作用24h、48h、72h后，弃去96孔板中的培养基，各孔用PBS100|iL洗2遍，弃PBS,加入1Ommol/L的硝基苯磷酸盐溶液lOOpL(O.lmol/L醋酸缓冲液配制，含O.P/。TritonX-IOO)，置于37。C孵育2h后，每孔加入lmol/L氢氧化钠10pL终止反应。用酶联免疫检测仪在405nm处检测光吸收度"值)记录结果，重复实验3次。结果表明，如表2所示，8,2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚具有较强的乳腺癌细胞抑制作用。表28，2'-二异戊烯基槲皮素3-甲醚对两种细胞株的ICso<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>权利要求1.一种异戊烯基黄酮类化合物8，2′-二异戊烯基槲皮素3-甲醚，其特征在于该化合物具有以下结构式所示的化学结构2.—种治疗乳腺癌的药物组合物，其特征在于含有如权利要求1所述的化合物，以及药学上可以接受的载体。3.如权利要求1所述的化合物在制备治疗癌症药物中的应用。4.如权利要求1所述的化合物在制备治疗乳腺癌药物中的应用。全文摘要本发明涉及一种异戊烯基黄酮，以及该化合物在制备治疗乳腺癌药物中的应用。所述的异戊烯基黄酮是从小叶莲中分离得到的一个新化合物，为8，2′-二异戊烯基槲皮素3-甲醚。对人乳腺癌细胞的抑制作用实验表明，其具有良好的抑制乳腺癌细胞的作用。文档编号C07D311/00GK101648934SQ200910092768公开日2010年2月17日申请日期2009年9月24日优先权日2009年9月24日发明者越孔,尚明英,肖军军,葛跃伟,蔡少青,马祥君申请人:北京大学