专利名称：酰化胰高血糖素类似物的制作方法
技术领域：
本发明涉及酰化胰高血糖素类似物及其医疗用途，例如在治疗肥胖症和糖尿病中的用途。
背景技术：
肥胖症和糖尿病是日益加重的全球性健康问题，而且它们与多种疾病相关，特别是心血管疾病(cardiovascular disease, CVD)、阻塞性睡眠窒息、中风、外周动脉疾病、微血管并发症和骨关节炎。全球有2. 46亿人患有糖尿病，预计到2025年将会有3. 80亿人患糖尿病。许多人有其他心血管风险因素，包括高/异常LDL和甘油三酯以及低HDL。在患有糖尿病的人中，心血管疾病导致约50%的死亡，而且与肥胖症和糖尿病相关的发病率和死亡率突显了对有效治疗选择的医疗需要。前胰高血糖素原(pr印roglucagon)是158个氨基酸的前体多肽，其在组织中被差异性加工而形成多种结构上相关的胰高血糖素原(proglucagon)衍生肽，包括胰高血糖素 (glucagon, Glu)、胰高血糖素样肽_1 (GLP-I)、胰高血糖素样肽_2 (GLP-2)和胃泌酸调节素 (oxyntomodulin,0XM)。这些分子参与多种生理功能，包括葡萄糖体内平衡、胰岛素分泌、胃排空和肠生长，以及食物摄取调节。胰高血糖素是四个氨基酸的肽，其对应于前胰高血糖素原的53至81位氨基酸， 并具有序列 His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Ar g-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr。胃泌酸调节素(OXM)是 37 个氨基酸的肽，其包含胰高血糖素完整的四个氨基酸序列以及八肽羧基端延伸(前胰高血糖素原的82至89位氨基酸，其序列为Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala，被称为“中间肽 !(intervening peptide 1) ”或IP-1 ；因此，人胃泌酸调节素的完整序列为His-Ser-Gln-G Iy-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Va I-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala)。GLP-1 的主要生物活性片段作为30个氨基酸的C端酰胺化肽而产生，其对应于前胰高血糖素原的98至127位氨基酸。胰高血糖素帮助维持血液中的葡萄糖水平，这通过结合肝细胞上的胰高血糖素受体并经由糖原分解使肝释放以糖原形式储存的葡萄糖来实现。随着这些储存的耗尽，胰高血糖素刺激肝通过糖异生作用合成额外的葡萄糖。这些葡萄糖被释放入血流，防止低血糖的发生。此外，已证明胰高血糖素增加脂类分解并减轻体重。GLP-I通过增加葡萄糖刺激的胰岛素分泌来降低升高的血液葡萄糖水平，并主要通过减少食物摄取来促进体重减轻。胃泌酸调节素响应于食物摄入而释放进血液中，并与食物卡路里含量成比例。胃泌酸调节素的作用机制还不是很清楚。尤其是不清楚该激素的作用是否只通过胰高血糖素受体和GLP-I受体介导，还是通过一种或更多种尚未鉴定出的受体介导。已证明另一些肽结合并激活胰高血糖素和GLP-I受体(Hjort等，Journal ofBiological Chemistry, 269, 30121-30124，1994)，而且抑制体重增加并减少食物摄取(W0 2006/134340 ；WO 2007/100535 ；WO 2008/101017, WO 2008/152403, WO 2009/155257 和 WO 2009/155258)。已证明肽的稳定化为几种药物提供更好的药代动力学特性。尤其已证明添加一个或更多个聚乙二醇(PEG)或酰基能延长肽(例如，GLP-I和具有短血浆稳定性的其他肽)的
半衰期。在WO 00/55184A1 和 WO 00/55119 中公开了一系列肽(尤其是 GLP-1)的酰化方法。Madsen 等(J. Med. Chem. 2007,50,6126-6132)描述了在第 20 位酰化的 GLP-I (Liraglutide，利拉鲁肽)并提供了关于其稳定性的数据。在W02007/100535、W008/071972 和 Druce，M R 等，Endocrinology2009,150 (4)， 1712-1721中，也证明通过PEG化和C端酰化来使OXM稳定化能改善选定类似物的药代动力
学特性。最近已证明，胰高血糖素类似物的PEG化对测试化合物的药代动力学特性有显著作用(W02008/101017)，但也干扰这些化合物的效力。发明概述本发明提供具有下式的化合物R1-Z-R2其中R1是H、Cy烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式I的肽His~X2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-A la-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-Ala-X30 ； (I)其中X2 选自 Aib 或 kr ；X12 选自 Lys、Arg 和 Leu ；X16 选自 Arg 禾口 X ；X17 选自 ArgfPX;X20 选自 Arg、His 禾口 X ；X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 X;X27 选自 Leu 和 X ；X28 选自 Arg 禾口 X ；X30是X或不存在；其中X16、X17、X20、X24、X27、X28 和 X30 中的至少一个是 X ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys、Ser, Cys, Dbu, Dpr和Orn ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物(spacer)，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合；
前提是 Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-Y -Glu) -AAHDFVEWLLRA。 X30可以存在或不存在。在X30存在的那些实施方案中，可期望它是Lys。 在某些实施方案中，任何残基X (尤其是与亲脂取代基缀合的任何残基X)独立地 Lys> Glu 或 Cys0
在某些实施方案中， X16 选自 Glu、Lys 和 kr ； X17 选自 Lys 和 Cys ； X20 选自 His、Lys、Arg 禾口 Cys ； X24 选自 Lys、Glu 和 Ala ； X27选自Leu和Lys ；和/或 X28 选自 kr、Arg 和 Lys。 式I的肽中可存在的具体残基组合包括以下 X2是Aib以及X17是Lys X2是Aib以及X17是Cys X2是Aib以及X20是Cys X2是Aib以及似8是1^8 X12是Arg以及X17是Lys X12是Leu以及X17是Lys X12是Lys以及X20是Lys X12是Lys以及X17是Lys X16是Lys以及X17是Lys 父16是^^以及X17是Lys X17是Lys以及X20是Lys X17是Lys以及X21是Asp X17是Lys以及XM是Glu X17是Lys以及X27是Leu X17是Lys以及X27是Lys X17是Lys以及X28是Ser X17是Lys以及似8是Arg X20是Lys以及X27是Leu X21是Asp以及X27是Leu X2 是 Aib, X12 是 Lys 以及 X16 是 Ser ； X12 是 Lys, X17 是 Lys 以及 X16 是 Ser X12 是 Arg, X17 是 Lys 以及 X16 是 Glu X16 是 Glu，X17 是 Lys 以及 X20 是 Lys X16 是 kr，X21 是 Asp 以及 X24 是 Glu X17 是 Lys，X24 是 Glu 以及 X^ 是 Arg X17 是 Lys，X24 是 Glu 以及 X^ 是 Lys
X17 是 Lys，X27 是 Leu 以及父28是％1·；X17 是 Lys，X27 是 Leu 以及 X28 是 Arg;X20 是 Lys，X24 是 Glu 以及 X27 是 Leu ；X20 是 Lys，X27 是 Leu 以及父28是％1·；X20 是 Lys，X27 是 Leu 以及 X28 是 Arg;X16 是 kr，X20 是 His，X24 是 Glu 以及 X27 是 Leu ；X17 是 Lys，X20 是 His，X24 是 Glu 以及 X28 是 kr ；X17 是 Lys，X20 是 Lys，X24 是 Glu 以及 X27 是 Leu ；或X17 是 Cys，X20 是 Lys，X24 是 Glu 以及 X27 是 Leu。理想的是式I的肽仅含有一个这样类型的氨基酸，即其通过添加亲脂取代基而衍生化。例如，所述肽可含有仅一个Lys残基、仅一个Cys残基或仅一个Glu残基以提供给待与该残基缀合的亲脂取代基。本发明的化合物可在式I的肽序列内带有一个或更多个分子内桥。每个这样的桥在式I的两个氨基酸残基的侧链之间形成，所述两个氨基酸残基一般被线性氨基酸序列中的3个氨基酸所分隔开(即，在氨基酸A和氨基酸A+4之间形成)。更具体地说，所述桥可在残基对16和20、17和21、20和M或者M和28的侧链之间形成。两个侧链可通过离子相互作用或通过共价键彼此连接。因此，这些残基对可包含相反电荷的侧链，以通过离子相互作用形成盐桥。例如，一个残基可为Glu或Asp，而另一个可为Lys或Arg。Lys与Glu以及Lys与Asp的配对也能反应形成内酰胺环。合适的16和20位残基对的例子包括X16 是 Glu 以及 X20 是 Lys ；
X16 是 Glu 以及 X20 是 Arg ；X16 是 Lys 以及 X20 是 Glu ；和X16 是 Arg 以及 X20 是 Glu。合适的17和21位残基对的例子包括X17 是 Arg 以及 X21 是 Glu ；X17 是 Lys 以及 X21 是 Glu ；X17 是 Arg 以及 X21 是 Asp ；禾口X17 是 Lys 以及 X21 是 Asp。合适的20和M位残基对的例子包括X20 是 Glu 以及 X24 是 Lys ；
X20 是 Glu 以及 X24 是 Arg ；X20 是 Lys 以及 X24 是 Glu ；和X20 是 Arg 以及 X24 是 Glu。合适的M和28位残基对的例子包括X24 是 Glu 以及似8 是 Lys ；X24 是 Glu 以及 X28 是 Arg ；X24是Lys以及似8是6111 ；和X24 是 Arg 以及似8是6111。
Lys和Glu的配对(例如，形成内酰胺环)可以是特别期望的，尤其是在M和观位之间。显然的是，参与分子内桥的残基不能同时被亲脂取代基衍生化。因此，当残基X参与分子内桥时，至少一个另外的残基X与亲脂取代基缀合。不希望受到任何具体理论的约束，认为这种分子内桥稳定分子的α螺旋结构，并从而提高对GLP-I受体(以及可能的胰高血糖素受体)的效力和/或选择性。所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、Cy烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2;以及Z是具有式IIa的肽His-Ajb-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-A la-Ala-X20-X21-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IIa)其中X12 选自 Lys、Arg 和 Leu ；X16 选自 Ser 和 X;X17 是 X;X20 选自 His 和 X;X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 kr、Lys 和 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自GliuLys和Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)ZT，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。或者，所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、Cy烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2;以及Z是具有式IIb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-T hr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-Ala-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (lib)其中X12 选自 Lys、Arg 和 Leu ；X16 选自 Ser 和 X;X17 是 X;X20 选自 His 和 X;
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X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 Ser、Lys 和 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys和Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。前提是Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-y -Glu) -AAHDFVEWLLRA。所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、Cy烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2;以及Z是具有式IIIa的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-A la-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IIIa)其中X12 选自 Lys 禾口 Arg ；X17 是 X;X20 选自 HisfPX;X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 kr、Lys 和 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys和Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)ZT，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。或者，所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式IIIb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-A la-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IIIb)其中X12 选自 Lys 或 Arg;X17 是 X;X20 选自 His 和 X;
X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 kr、Lys 和 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自GliuLys和Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)ZT，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。前提是Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-y -Glu) -AAHDFVEWLLRA。所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、Cy烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2;以及Z是具有式IVa的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-A la-Ala-His-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IVa)其中X12 选自 Lys 禾口 Arg ；X17 是 X;X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 kr、Lys 和 Arg ；其中X 选自 Glu、Lys 和 Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。或者，所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式IVb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-A la-Ala-His-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IVb)其中X12 选自 Lys 禾口 Arg ；X17 是 X;X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；
X28 选自 Ser、Lys 和 Arg ；其中X 选自 Glu、Lys 和 Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。前提是Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基 Y -Glu) -AAHDFVEWLLRA。或者，所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式V的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Lys-A Ia-Ala-His-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Leu-X28 ； (V)其中X^是Ser或不存在；X17 是 X，其中X 选自 Glu、Lys 和 Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。在本发明的某些实施方案中，式I的肽可具有序列HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDKKAAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAKDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLKRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLKA ；HSQGTFTSDYSRYLDSKAAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSLYLDSKAAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRAK ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSAKHSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLKSA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVKffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSCAAHDFEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSCAAHDFVEWLLSA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAACDFVEWLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDKSAAHDFVEffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSAK ；
H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAARDFVAffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAKDFVAffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLKAH-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAKDFVAffLLSAH-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVAffLLKA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDKKAAHDFVAffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSRYLDSKAAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVKffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSLYLDSKAAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSCAAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAACDFVEWLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDK () KAAE () DFVEffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVE () WLLK () AH-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAK () DFVE () WLLRA ；H-AibQGTFTSDYSKYLDSK () AAHE () FVEffLLKA ；或H-Aib-QGTFTSDYS KYLDSK () AAKE () FVEWLLRA.在某些实施方案中，这些肽可以在以下标记“*”的位置带有亲脂取代基HSQGTFTSDYSKYLDS-K * -AAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLD-K * -KAAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAA-K * -DFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffL-K * -RA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLL-K * -A ；HSQGTFTSDYSRYLDS-K* -AAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSLYLDS-K * -AAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA-K * ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSA-K * ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAH DFVEffL-K * -SA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFV-K * -WLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDS-C * -AAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDS-C * -AAHDFVEffLLSA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAA-C * -DFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYS KYLD-K * -SAAHDFVEffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K * -AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSA-K * ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K * -AARDFVAffLLRA ；
H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-K * -DFVAffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLL-K * -A ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K * -AAHDFVEffLLKA ；
H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K * -AAHDFVEffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-K * -DFVAffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVAffLL-K * -A ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLD-K * -KAAHDFVAffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSRYLDS-K * -AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFV-K * -WLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSLYLDS-K * -AAHDFVEffLLSA ；
H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-C * -AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYS KYLDSKAA-C * -DFVEffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLD-S * -KAAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDK () K * AAE () DFVEffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK * 山 HDFVE () WLLK () A ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK * AAK () DFVE () WLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK () AAHE () FVEffLLK * A ；或H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK () AAK *E() FVEWLLRA.标记“()，，的残基参与分子内键合，例如内酰胺环。一个或更多个残基X的侧链与亲脂取代基缀合。例如，一个残基X的侧链可与亲脂取代基缀合。或者，两个或甚至多于两个残基X的侧链可与亲脂取代基缀合。例如，X16、X17、X20和X28中的至少一个可与亲脂取代基缀合。在这种情况下， X30可不存在。当X30存在时，其一般与亲脂取代基缀合。因此，所述化合物可仅具有一个亲脂取代基，其在16、17、20、24、27、观或30位，优选在16、17或20位，特别是在17位。或者，所述化合物可精确地具有两个亲脂取代基，每个取代基位于16、17、20、24、 27,28或30位中的一个位置。优选地，一个或两个亲脂取代基存在于16、17或20位中的一个位置。因此，化合物可在以下位置具有亲脂取代基16和17、16和20、16和M、16和27、 16 和 28 或者 16 和 30 ；17 和 20、17 和 24、17 和 27、17 和 28 或者 17 和 30 ；20 和 24,20 和 27,20和28或者20和30 ；在24和27,24和28或者24和30 ；27和28或者27和30 ；或者 28 和 30。在另一些实施方案中，所述化合物可在选自16、17、20、对、27、观或30位的另一些位置具有一个或更多个另外的亲脂取代基(总共三个或更多个)。但可期望的是，最多以这种方式衍生化两个位置。Z1可包含具有10至M个C原子(例如10至22个C原子，例如10至20个C原子)的烃链。其可具有至少11个C原子和/或18个C原子或更少。例如，所述烃链可含有12、13、14、15、16、17或18个碳原子。因此，Z1可为十二烷酰基、2-丁基辛酰基、十四烷酰基、十六烷酰基、十七烷酰基、十八烷酰基或二十烷酰基部分。当存在时，Z2可独立地是或者包含一个或更多个氨基酸残基。例如，Z2可以是 Y -Glu, Glu、β -Ala或ε -Lys残基，或4_氨基丁酰基、8_氨基辛酰基或8_氨基_3，6_ 二氧杂辛酰基部分。
Z1和Z2的某些组合是十二烷酰基-Y-Glu、十六烷酰基-Y-Glu、十六烷酰基-Glu、十六烷酰基-[3-氨基丙酰基]、十六烷酰基-[8-氨基辛酰基]、十六烷酰基-ε -Lys,2- 丁基辛酰基-Y _Glu、十八烷酰基-、-Glu和十六烷酰基_ [4_氨基丁酰基]。在一些具体的实施方案中，Z具有式HSQGTFTSDYSKYLD-K (十六烧酰基-Y-Glu) -KAAHDFVEffLLRA ；
HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffL-K (十六烧酰基-Y-Glu) -RA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAA-K (十六烧酰基-Y-Glu) -DFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLL-K (十六烧酰基-Y-Glu) -A ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AARDFVAffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLL-K (十六烧酰基-Y-Glu) -A ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVE () WLLK () A ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLKA ；HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLRA ；
H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-K (十六烧酰基-Y-Glu) -DFVAffLLRA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十二烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYS KYLDS-K (十六烷酰基 _ [3_ 氨基丙酰基])-AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基 _ [8_ 氨基辛酰基])-AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-ε -Lys) -AAHDFVEffLLSA ；HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基)-AAHDFVEffLLSA ；HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十八烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ；HSQGTFTSDYSKYLDS-K ([2- 丁基辛酰基]-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ；HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基 _ [4-氨基丁酰基])-AAHDFVEffLLSA ；HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十八烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLS A ；
HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-E) -AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基)-AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十八烧酰基-Y-Glu) -AAH DFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K ([2- 丁基辛酰基]-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基 _ [4-氨基丁酰基])-AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十八烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ；或H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-E) -AAHDFVEWLLSA.标记“()，，的残基参与分子内键合，例如内酰胺环。在另一实施方案中，Z具有式H-Aib-QGTFTSDYS-K (十六烧酰基-异 Glu) -YLDSKAAHDFVEffLLSA ；
H-Aib-QGTFTSDYSKYLD-K (十六烧酰基-异 Glu) -KAAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-K (十六烷酰基-异 Glu) -DFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFV-K (十六烧酰基-异 Glu) -WLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Lys) -AARDFVAffLLRA ；
H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAKDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDE-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHEFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAEDFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHDFVEWLLEA.在另一方面，Z具有式H-AibQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHDFVEffLLS ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHDFVEffLL ；在又一方面，Z具有式H-Aib-EGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基 _ 异 Glu) -AAHDFVEffLLSA ；本发明提供了具有下式的化合物R1-Z-R2其中R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式I的肽His-X2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-Al a-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-Ala-X30 ；其中X2 是 Aib 或 Ser ；X12 选自 Lys、Arg 或 Leu ；X16 是 Arg 或 X ；X17 是 Arg 或 X;X20 是 Arg、His 或 X ；X21 是 Asp 或 Glu;X24 是 Ala 或 X ；X27 是 Leu 或 X ；X28 是 Arg 或 X;X30是X或不存在；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys、Ser, Cys, Dbu, Dpr和Orn ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。前提是Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-y -Glu) -AAHDFVEWLLRA。X30可存在或不存在。在X30存在的那些实施方案中，可期望其为Lys。在某些实施方案中，任何残基X(尤其是任何与亲脂取代基缀合的残基X)独立地选自 Lys、Glu 或 Cys。所述化合物可具有式R1-Z-R2
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其中R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式IIa的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-A la-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ；其中X12 选自 Lys、Arg 或 Leu ；X16 是 Ser 或 X ；X17 是 X ；X20 是 His 或 X;X21 是 Asp 或 Glu;X24 是 Ala 或 Glu ；X28 是 Ser、Lys 或 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys或Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。或者，所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、Cy烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2;以及Z是具有式IIb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-A la-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ；其中X12 选自 Lys、Arg 或 Leu ；Xl6 是 Ser 或 X ；X17 是 X;X20 是 His 或 X;X21 是 Asp 或 Glu;X24 是 Ala 或 Glu ；X28 是 Ser、Lys 或 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys或Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合；前提是Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-y -Glu) -AAHDFVEWLLRA。
所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、Cy烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式IIIa的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-A la-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ；其中X12 选自 Lys 或 Arg;X17 是 X ；X20 是 His 或 X;X21 是 Asp 或 Glu;X24 是 Ala 或 Glu;X28 是 Ser、Lys 或 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys或Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。或者，所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式IIIb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-A la-Ala-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ；其中X12 选自 Lys 或 Arg;X17 是 X ；X20 是 His 或 X;X21 是 Asp 或 Glu;X24 是 Ala 或 Glu ；X28 是 Ser、Lys 或 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自GliuLys或Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。前提是Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-y -Glu) -AAHDFVEWLLRA。
所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式IVa的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-A la-Ala-His-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ；其中X12 选自 Lys 或 Arg;X17 是 X ；X21 是 Asp 或 Glu;X24 是 Ala 或 Glu ；X28 是 Ser > Lys 或 Arg ；其中X 选自 Glu、Lys 或 Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。或者，所述化合物可具有式R1-Z-R2其中R1是H、C1^4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 NH2 ；以及Z是具有式IVb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-A la-Ala-His-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ；其中X12 选自 Lys 或 Arg;X17 是 X ；X21 是 Asp 或 Glu;X24 是 Ala 或 Glu ；X28 是 Ser、Lys 或 Arg ；其中X 选自 Glu、Lys 或 Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(ii)Z42，其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。前提是Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-y -Glu) -AAHDFVEWLLRA。另一方面，本发明提供了组合物，其包含与载体混合的本文所述化合物或者其盐或衍生物。在一些优选的实施方案中，所述组合物是可药用组合物，而且所述载体是可药用载体。所述盐可以是所述化合物的可药用酸加成盐，例如乙酸盐或氯化物盐。所述化合物用于防止体重增加或促进体重减轻。“防止”是指当与不治疗时相比抑制或减少体重增加，但不必然暗示体重增加完全停止。所述肽可引起食物摄取减少和/或能量消耗增加，使得对体重产生可观察到的作用。独立于其对体重的作用，本发明的化合物可具有对循环葡萄糖水平、葡萄糖耐受和/或对循环胆固醇水平的有益作用，能够降低循环LDL水平并增加HDL/LDL比值。因此，本发明的化合物可用于直接或间接治疗由超重所引起或以超重为特征的任何病症，例如治疗和/或预防肥胖症、病态肥胖症、 肥胖症相关炎症、肥胖症相关胆囊病、肥胖症引发的睡眠窒息。它们还可用于治疗糖尿病前期(pre-diabetes)、胰岛素抵抗、葡萄糖不耐受、2型糖尿病、I型糖尿病、高血压或致动脉粥样硬化性血脂异常(或者两个或更多个这些代谢风险因素的组合)、动脉粥样硬化 (atherosclerois)、动脉硬化(arteriosclerosis)、冠心病、外周动脉疾病、中风和微血管疾病。它们在这些病症中的作用可以是由于它们对体重的作用所致或与其相关，或者可以独立于该作用。因此，本发明提供了本发明的化合物在有此需要的患者中治疗上述病症的用途。本发明还提供了用于医学治疗方法(尤其是用于治疗上述病症的方法)的本发明的化合物。本发明还提供了本发明的化合物在制备用于治疗上述病症的药物中的用途。本发明的化合物可作为联合治疗的一部分与治疗糖尿病、肥胖症、血脂异常或高血压的药剂一起施用。在这种情况下，可一起或分别给予两种活性药剂，而且可作为同一药物制剂的一部分或作为分别的制剂给予。因此，本发明的化合物(或其盐)可与抗糖尿病药剂联合使用，所述抗糖尿病药剂包括但不限于二甲双胍、磺酰脲、格列奈类(glinide)、DPP-IV抑制剂、格列酮类 (glitazone)或胰岛素。在一个优选的实施方案中，所述化合物或其盐与胰岛素、DPP-IV 抑制剂、磺酰脲或二甲双胍(尤其是磺酰脲或二甲双胍)联合使用，以实现充分的血糖控制。在一个甚至更优选的实施方案中，所述化合物或其盐与二甲双胍、磺酰脲、胰岛素或胰岛素类似物联合使用，以实现充分的血糖控制。胰岛素类似物的实例包括但不限于Lantus、 Novorapid、Humalog、Novomix、Actraphane HM、Levemir 禾口 Apidra0所述化合物或其盐还可与抗肥胖症药剂联合使用，所述抗肥胖症药剂包括但不限于胰高血糖素样肽受体1激动剂、肽YY或其类似物、大麻素受体1拮抗剂、酯酶抑制剂、 黑素皮质素(melanocortin)受体4激动剂或黑色素浓集激素(melanin concentrating hormone)受体1拮抗剂。所述化合物或其盐还可用于与抗高血压药剂联合使用，所述抗高血压药剂包括但不限于血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素II受体阻断剂、利尿剂、β -阻断剂或钙通道阻断剂。 所述化合物或其盐可与抗血脂异常药剂联合使用，所述抗血脂异常药剂包括但不限于他汀类、贝特类(fibrate)、烟酸类(niacin)或胆固醇吸收抑制剂。
图1.以lOOnmol/kg的剂量对小鼠皮下(s. c.)施用化合物13之后的药代动力学特征。图2.在长期高脂饲喂的C57BL/6J小鼠中，s. c.施用化合物11 (10nmol/kg) 21天对口服葡萄糖耐量的作用。数据显示为平均值士标准误。图3.用载剂或化合物7 (12. 7nmol/kg)处理糖尿病(db/db)小鼠4周，测定从被处理小鼠中收集的全血样品ΟΟμΙ)中的HbAlc (Cobas application note :A1C_2)。通过用每只小鼠第4周的HbAlc (%)减去开始处理时的HbAlc (%)来计算其AHbAlc(%)。 以载剂处理 4 周的 db/db 小鼠的 HbAlc ) =100%。* (P = 0. 03，Mudents t 检验)。图4.在长期高脂饲喂的C57BL/6J小鼠中，S. c.施用化合物1121天对体重的作用。数据显示为平均值+标准误。图5.以载剂或化合物7(12. 7nmol/kg)处理饮食诱导肥胖症(Diet Induced Obese,DI0)小鼠4周，从所收集的血液样品中制备血浆。测定每个血浆样品中的总胆固醇 (Cobas ; application note :CH0L2)。*** (P < 0. 0001,Students t 检验)。数据显示为平均值+标准误。图6.以载剂或化合物7(12.7nm0l/kg)处理饮食诱导肥胖症(DIO)小鼠，从所收集的血液样品中制备血浆。测定每个血浆样品中LDL和HDL胆固醇(Cobas ; application note :HDLC3 和 LDL_C)。*** (P < 0. 0001，Students t 检验)。数据显示为平均值+标准误。图7.在高脂饲喂的C57BL/6J小鼠中，s. c.施用GluGLP-I激动剂对体重的作用。 数据为平均值士标准误。黑线载剂(PBS)；灰线低剂量(0. 5nmol/kg)；虚线高剂量 (5nmol/kg)。图8.在高脂饲喂的C57BL/6J小鼠中，急性s. c.施用化合物7后的2、4、6、8、10 和12小时其对口服葡萄糖耐量的作用。数据表示为平均值+标准误。图9.在年轻清瘦C57BL/6J小鼠中，s. c.施用化合物7和毒蜥外泌肽-4(exendin-4)对食物摄取/体重的作用。数据为平均值+标准误。*=p<0.05，相对于年轻清瘦载剂。数据表示为平均值+标准误。图10.在老年肥胖C57BL/6J小鼠中，s. c.施用化合物7和毒蜥外泌肽_4对累积的食物摄取/体重的作用。数据为平均值+标准误。P <0.05，相对于老年肥胖载剂。 数据表示为平均值+标准误。图11.在老年肥胖C57BL/6J小鼠中，s. c.施用载剂、毒蜥外泌肽-4(10nmOl/kg) 和化合物Il(IOnmoVkg)对血浆脂质浓度的作用。数据为平均值+标准误。图12.每天两次以化合物1和化合物11 (以两个剂量0. 5和5nmol/kg)或载剂 s. c.处理小鼠2周。处死小鼠的当天，暴露肝并称重。高剂量的化合物1显著增加“肝重/ 体重比值”。在所述两个剂量(0.5和5nmol/kg)，化合物11不影响“肝重/体重比值”。化合物1是非酰化的双效GluGLP-I激动剂，而化合物11是长效酰化的双效GluGLP-I激动剂 (图⑵。图13.以载剂或化合物11(12. 7nmol/kg)处理糖尿病(db/db)小鼠4周，测定从被处理小鼠中收集的全血样品ΟΟμΙ)中的HbAlc (CobaS application note A1C-2)。通过用每只小鼠第4周时的HbAlc(% )减去处理开始时的HbAlc )来计算其Δ HbAlc (% ) ο 以载剂处理 db/db 小鼠 4 周的 AHbAlc(%) =100%。(P = 0. 03，Students t检验)。发明详述在整篇本说明书中，使用天然氨基酸常规单字母和3字母代码，并且对其他氨基酸使用通常接受的3字母代码，所述其他氨基酸包括Aib ( α -氨基异丁酸)、0rn (鸟氨酸)、 Dbu (2,4 二氨基丁酸)和Dpr (2，3- 二氨基丙酸)。术语“天然胰高血糖素”是指具有以下序列的天然人胰高血糖素=H-His-Ser-Gln -Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-Leu-Met-Asn-Thr-OHo本发明的化合物的肽序列至少在18、20、对、27、观和四位不同于天然胰高血糖素的肽序列。此外，其可在12、16和17位中的一处或更多处不同于天然胰高血糖素的肽序列。天然胰高血糖素的18位为Arg。本发明化合物的18位具有小疏水残基Ala，认为其增加胰高血糖素和GLP-I受体(但尤其是GLP-I受体)两者的效力。天然胰高血糖素中27J8和四位的残基似乎为胰高血糖素受体提供显著的选择性。对应于天然胰高血糖素序列的这些位置的替换(尤其是四位的Ala)可增加对GLP-I 受体的效力和/或选择性，潜在地不显著降低对胰高血糖素受体的效力。可包括在本发明化合物中的其他实例包括27位的Leu和28位的Arg。此外，因为可增加对GLP-I受体的效力的作用，当M位为Glu时，观位尤其优选可与其形成分子内桥的Arg。替换27位的天然Met残基(例如用Leu、Lys或Glu)也降低氧化的可能性，因而增加化合物的化学稳定性。替换28位的天然Asn残基(例如用Arg或Ser)也降低在酸性溶液中脱酰胺基的可能性，因而增加化合物的化学稳定性。通过在肽的C端部分引入可能稳定α螺旋结构的残基，也可增加对GLP-I受体的效力和/或选择性，潜在地不显著损失对胰高血糖素受体的效力。期望但不认为是必需的是，分子的该螺旋部分具有两亲特征。在12位引入残基如Leu和/或在M位引入残基如 Ala可有帮助。此外或作为替代地，可在16、20、对和观位中一处或更多处引入带电荷残基。因此，M和观位的残基可以都带电荷，20、对和观位的残基可以都带电荷，或者16、 20、对和观位的残基可以都带电荷。例如，20位的残基可以是His或Arg，尤其是His。24 位的残基可以是GliuLys或Arg，尤其是Glu。观位的残基可以是Arg。如上文所述，在分子的该部分中引入分子内桥(例如，在M和观位之间)也可有助于稳定螺旋特征。替换20和M位的一个或两个天然Gln残基也降低在酸性溶液中脱酰胺基的可能性，因而增加化合物的化学稳定性。对应于天然胰高血糖素序列12位(S卩，Arg或Leu)的替换可增加在对两种受体的效力和/或对GLP-I受体的选择性。肽的C端截短不降低对两种受体的效力和/或对GLP-I受体的选择性。尤其地， 29位的截短或观和四两个位置的截短不降低对这两种受体的任一种的受体效力。一个或多个命名为X的残基(16、17、20、24、27和观位，和/或(如存在的话)30 位)的侧链与亲脂取代基缀合。应理解，亲脂取代基与特定侧链的缀合可影响(例如，降低)未缀合的侧链在该位置可提供的某些优势。本发明人已发现本发明化合物提供了酰化优势和相对于天然胰高血糖素序列之特定替换的优势之间的平衡。本发明的组合物还可以与药物载体、药物递送系统和高级药物递送系统化合或连接(例如，通过共价、疏水和静电相互作用)，以进一步增强化合物的稳定性、增加生物利用度、增加溶解性、降低副作用、实现本领域技术人员公知的生物时钟疗法(chronotherapy) 和增加患者的顺应性或其任何组合。载体、药物递送系统和高级药物递送系统的实例包括但不限于聚合物，例如纤维素和衍生物；多糖(例如，葡聚糖和衍生物、淀粉和衍生物)；聚 (乙烯醇)；丙烯酸和甲基丙烯酸酯聚合物；聚乳酸和聚乙醇酸及其嵌段共聚物；聚乙二醇； 载体蛋白质(例如，白蛋白)；凝胶，例如，热凝胶系统(例如，本领域技术人员公知的嵌段共聚物系统)；胶束；脂质体；微球；纳米颗粒；液晶及其分散体；脂-水系统中相行为领域的技术人员公知的L2相及其分散体；聚合物胶束；复合乳剂，自乳化，自微乳化；环糊精及其衍生物和树形分子(dendrimer)。其他小组已尝试通过用PEG衍生化来延长GluGLP-I双效激动剂化合物的半衰期 (W02008/101017)。然而，该衍生化似乎在应用于分子的C端(而非肽骨架中心)时最为有效，而且与相应的未修饰肽相比，这些化合物的效力仍有降低。与之不同，本发明的化合物对胰高血糖素受体和GLP-I受体均保持高效力，同时与相应的未修饰肽相比，其具有显著延长的药代动力学特性。天然胰高血糖素的16位为kr。已证明以Ala、Gly或Thr替换显著降低对胰高血糖素受体的腺苷酸环化酶激活(Unson等，Proc. Natl. Acad. Sci. 1994，91，454-458)。因此，预计用亲脂取代基对16位衍生化不会产生对胰高血糖素受体保持效力的化合物(如本说明书所述化合物出人意料地显示的那样)。在W02008/101017中，期望在16位是带负电荷的残基以将效力的损失最小化。通常认为在17和18位存在碱性氨基酸对于完全的胰高血糖素受体激活是必需的 (Unson等.J. Biol. Chem. 1998，273，10308-10312)。本发明人发现，当18位是丙氨酸时，在 17位用疏水氨基酸替换仍可产生高效力化合物。即便其中17位的氨基酸用亲脂取代基衍生化的化合物也对胰高血糖素和GLP-I两种受体均保持完全的效力，并显示显著延长的药代动力学特性。即使当17位的赖氨酸被衍生化而将碱性胺侧链转化为中性酰胺基团时也是如此。本发明人还发现在20位酰化的化合物仍是有高度活性的双效激动剂，尽管其他研究表明20位的替换应为具有4 6个原子长度的侧链的碱性氨基酸，以增强对GLP-I受体的活性(与胰高血糖素相比)(W02008/101017)。当以赖氨酸替换并酰化20位时，本文所述化合物保持对GLP-I和胰高血糖素两种受体的活性。肽合成本发明化合物的肽组分可通过标准合成方法、重组表达系统或任何其他合适的方法制备。因此，所述肽可以多种方式合成，包括例如这样的方法，其包括(a)采用固相法或液相法分步地或通过片段组装来合成肽，分离并纯化最终肽产物；(b)在宿主细胞中表达编码肽的核酸构建体，从宿主细胞培养物中回收表达产物； 或(c)无细胞体外表达编码肽的核酸构建体，回收表达产物；
或将方法(a)、(b)和(C)任意组合以获得肽片段，随后连接所述片段以获得肽，并且回收所述肽。优选地，可以通过固相或液相肽合成来合成本发明的类似物。在这种情况下，参考 TO 98/11125 以及，Fields，GB 等，2002，“Principles and practice of solid-phase peptide synthesis". In =Synthetic P 印 tides (第二版)及本文的实施例等。亲脂取代基本发明化合物中的一个或更多个氨基酸侧链与亲脂取代基Z1缀合。不希望受理论约束，认为亲脂取代基结合血流中的白蛋白，从而保护本发明化合物免受酶降解，这可增强化合物的半衰期。它还可调节化合物的效力，例如对于胰高血糖素受体和/或GLP-I受体的效力。在某些实施方案中，仅一个氨基酸侧链与亲脂取代基缀合。在另一些实施方案中， 两个氨基酸侧链各自与亲脂取代基缀合。在另一些实施方案中，三个或甚至更多个氨基酸侧链各自与亲脂取代基缀合。当化合物含有两个或更多个亲脂取代基时，它们可以相同或不同。亲脂取代基Z1可以与氨基酸侧链中的原子共价键合，或作为替代地，可通过间隔物Z2与氨基酸侧链缀合。本文所用术语“缀合”描述一个可鉴定的化学部分与另一化学部分的物理连接以及这些部分之间的结构关系。不应将其理解为暗示任何特定的合成方法。间隔物Z2 (当存在时)用于在化合物和亲脂部分之间提供间隔。亲脂取代基可通过酯、磺酰酯、硫代酯、酰胺或磺酰胺与氨基酸侧链或间隔物连接。因此应理解，优选的亲脂取代基包括酰基，磺酰基，形成酯、磺酰酯、硫代酯、酰胺或磺酰胺之一部分的N原子、0原子或S原子。优选地，亲脂取代基中的酰基与氨基酸侧链或间隔物形成酰胺或酯的一部分。亲脂取代基可包含具有10至M个C原子(例如，10至22个C原子，例如，10至 20个C原子)的烃链。优选地，它具有至少11个C原子，优选地它具有18个或更少的C 原子。例如，所述烃链可含有12、13、14、15、16、17或18个碳原子。所述烃链可以是线性的或分支的，而且可以是饱和的或不饱和的。通过上述讨论应理解，烃链优选地被这样的部分所取代，所述部分形成与氨基酸侧链或间隔物的连接的一部分，例如酰基、磺酰基、N原子、 0原子或S原子。最优选地，所述烃链被酰基取代，因而烃链可以是烷酰基(例如十二烷酰基、2- 丁基辛酰基、十四烷酰基、十六烷酰基、十七烷酰基、十八烷酰基或二十烷酰基)的一部分。如上所述，亲脂取代基Z1可通过间隔物Z2与氨基酸侧链缀合。当存在时，间隔物与亲脂取代基和氨基酸侧链连接。间隔物可独立地通过酯、磺酰酯、硫代酯、酰胺或磺酰胺与亲脂取代基和氨基酸侧链连接。因此，它可包含独立地选自酰基、磺酰基、N原子、0原子或S原子的两个部分。所述间隔物可由线性C1,烃链或更优选线性Cp5烃链组成。此外， 所述间隔物可被一个或更多个选自以下的取代基取代=Ch6烷基、CV6烷基胺、C1^6烷基羟基和Cp6烷基羧基。所述间隔物可以是，例如任何天然或非天然氨基酸的残基。例如，所述间隔物可以是以下的残基Gly、Pro、Ala、Val> Leu> lie、Met、Cys> Phe> Tyr> Trp> His、Lys> Arg、Gin、
32Asn、α —Glu、 γ—Glu、 ε _Lys、Asp、Ser、Thr、Gaba、Aib、β -Ala(艮口，3—氛基丙酉先基)、4_氛基丁酰基、5-氨基戊酰基、6-氨基己酰基、7-氨基庚酰基、8-氨基辛酰基、9-氨基壬酰基、 10-氨基癸酰基或8-氨基-3，6- 二氧杂辛酰基。在某些实施方案中，所述间隔物是Glu、 Y -Glu、ε -Lys, β -Ala (即3_氨基丙酰基)、4_氨基丁酰基、8_氨基辛酰基或8_氨基_3， 6-二氧杂辛酰基。在本发明中，Y-Glu与异Glu可互换使用。缀合亲脂取代基的氨基酸侧链是Glu、LyS、kr、CyS、Dbu、Dpr或Orn残基的侧链。 例如，它可以是Lys、Glu或Cys残基的侧链。其中两个或更多个侧链带有亲脂取代基，它们可独立地选自这些残基。因此，所述氨基酸侧链包括羧基、羟基、巯基、酰胺或胺基团，以与间隔物或亲脂取代基形成酯、磺酰酯、硫代酯、酰胺或磺酰胺。下式中显示包含亲脂部分Z1和间隔物Z2的亲脂取代基的实例。
权利要求
1.化合物，其具有式 R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基； R2 是 OH 或 Ml2 ； 以及Z是具有式I的肽His-X2-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-Ala-Al a-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-X27-X28-Ala-X30 ； (I) 其中X2选自Aib和kr ； X12 选自 Lys、Arg 或 Leu ； X16选自Arg禾口 X ； X17选自Arg和X ； X20 选自 Arg、His 禾口 X ； X21 选自 Asp 禾口 Glu ； X24选自Ala和X ； X27选自Leu和X ； X28选自Arg禾口 X ； X30是X或不存在；其中 X16、X17、X20、X24、X27、X28 和 X30 中的至少一个是 X ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys、Ser, Cys, Dbu, Dpr和Orn ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是直接与所述X的侧链缀合的亲脂部分；或者(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合；前提是 Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-y -Glu) -AAHDFVEffLLRA0
2.权利要求1的化合物，其中一个或更多个所述残基X独立地选自Lys、Glu和Cys。
3.权利要求1或权利要求2的化合物，其中 X16 选自 Glu、Lys 和 kr ；X17 选自 Lys 和 Cys ； X20 选自 His、Lys、Arg 和 Cys ； X24 选自 Lys、Glu 和 Ala ； X27选自Leu和Lys ；和/或 X28 选自 kr、Arg 和 Lys。
4.权利要求1至3中任一项的化合物，其中所述式I的肽包含一种或更多种以下残基组合X2是Aib以及X17是Lys ； X2是Aib以及X17是Cys ； X2是Aib以及X20是Cys ； X2是Aib以及似8是1^8 ；X12是Arg以及X17是LysX12是Leu以及X17是LysX12是Lys以及X20是LysX12是Lys以及X17是LysX16是Lys以及X17是LysX16是Ser以及X17是LysX17是Lys以及X20是LysX17是Lys以及X21是AspX17是Lys以及XM是GluX17是Lys以及X27是LeuX17是Lys以及X27是LysX17是Lys以及以8是SerX17是Lys以及以8是ArgX20是Lys以及X27是LeuX21是Asp以及X27是LeuX2 是 Aib，X12 是 Lys 以及 X16 是 kr ；X12 是 Lys, X17 是 Lys 以及 X16 是 Ser ；X12 是 Arg, X17 是 Lys 以及 X16 是 Glu ；X16 是 Glu，X17 是 Lys 以及 X20 是 Lys ；X16 是 kr，X21 是 Asp 以及 X24 是 Glu ；X17 是 Lys，X24 是 Glu 以及 Y2& 是 Arg ；X17 是 Lys，X24 是 Glu 以及 Y2& 是 Lys ；X17 是 Lys, X27 是 Leu 以及 X28 是 Ser ；X17 是 Lys，X27 是 Leu 以及 Y2& 是 Arg ；X20 是 Lys, X24 是 Glu 以及 X27 是 Leu ；X20 是 Lys, X27 是 Leu 以及 X28 是 Ser ；X20 是 Lys，X27 是 Leu 以及 Y2& 是 Arg ；X16 是 kr，X20 是 His，X24 是 Glu 以及 X27 是 Leu ；X17 是 Lys，X20 是 His，X24 是 Glu 以及 Y2& 是 kr ；X17 是 Lys, X20 是 Lys, X24 是 Glu 以及 X27 是 Leu ；或X17 是 Cys, X20 是 Lys, X24 是 Glu 以及 X27 是 Leu。
5.前述权利要求中任一项的化合物，其中所述式I的肽仅含有一个与所述亲脂取代基缀合的类型的氨基酸。
6.权利要求5的化合物，其中所述肽含有仅一个Lys残基、仅一个Cys残基或仅一个 Glu残基，以及其中所述亲脂取代基与该残基缀合。
7.前述权利要求中任一项的化合物，其中所述式I的肽序列包含一个或更多个分子内桥。
8.权利要求7的化合物，其中所述分子内桥在两个氨基酸残基的侧链之间形成，所述两个氨基酸残基被式I的线性氨基酸序列中的3个氨基酸分隔开。
9.权利要求8的化合物，其中所述分子内桥在残基对16和20、17和21、20和M或者 24和观的侧链之间形成。
10.权利要求7至9中任一项的化合物，其中所述分子内桥是盐桥或内酰胺环。
11.权利要求7至10中任--项的化合物，其中所述分子内桥涉及残基对，其中X16是Glu以及X20是LysX16是Glu以及X20是ArgX16是Lys以及X20是Glu或X16是Arg以及X20是GluX17是Arg以及X21是GluX17是Lys以及X21是GluX17是Arg以及X21是Asp或X17是Lys以及X21是AspX20是Glu以及XM是LysX20是Glu以及XM是ArgX20是Lys以及XM是Glu或X20是Arg以及XM是GluX24是Glu以及以8是LysX24是Glu以及以8是ArgX24是Lys以及以8是Glu或X24是Arg以及以8是 Glu。
12.前述权利要求中任一项的化合物，其中X16、X17、X20和X^中的至少一个与亲月取代基缀合。
13.权利要求1至10中任一项的化合物，其中X30不存在。
14.权利要求1至10中任一项的化合物，其中X30存在而且与亲脂取代基缀合。
15.前述权利要求中任一项的化合物，其中所述化合物仅有一个亲脂取代基，其在16、 17、20、24、27、28或30位，优选在16、17或20位，尤其是在17位。
16.权利要求1至14中任一项的化合物，其中所述化合物精确地具有两个亲脂取代基， 每个取代基在16、17、20、对、27、观或30位中的一个位置。
17.权利要求16的化合物，其中所述化合物在以下位置具有亲脂取代基16和17、16 和 20、16 和 24、16 和 27、16 和 28 或者 16 和 30 ；17 和 20、17 和 24、17 和 27、17 和 28 或者 17 和 30 ；20 和 24,20 和 27,20 和 28 或者 20 和 30 ；24 和 27,24 和 28 或者 24 和 30 ；27 和 28或者27和30 ；或者28和30。
18.权利要求1的化合物，其具有式R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 Ml2 ；以及Z是具有式IIa的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-Ala-A la-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IIa) 其中X12 选自 Lys、Arg 和 Leu ；X16选自Ser和X ；X17 是X ；X20选自His禾口 X ；X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 Ser, Lys 禾口 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys和Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合；
19.权利要求1的化合物，其具有式 R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 Ml2 ；以及Z是具有式IIb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-X16-X17-Ala-A la-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (lib) 其中X12 选自 Lys、Arg 和 Leu ；X16选自Ser和X ；X17 是X ；X20选自His禾口 X ；X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X^ 选自 Ser, Lys 禾口 Arg ；以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys和Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合；前提是 Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-y -Glu) -AAHDFVEffLLRA0
20.权利要求18的化合物，其具有式 R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 Ml2 ；以及Z是具有式IIIa的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-Ala-A la-X20-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IIIa) 其中X12 选自 Lys 和 Arg ；X17 是X ；X20选自His禾口 X ；X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 Ser、Lys 禾口 Arg;以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys和Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。
21.权利要求19的化合物，其具有式 R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 Ml2 ；以及Z是具有式Inb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-Ala-A la-X20-X2-l-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IIIb) 其中X12 选自 Lys 和 Arg ；X17 是X ；X20选自His禾口 X ；X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 Ser、Lys 禾口 Arg;以及其中每个残基X独立地选自Glu、Lys和Cys ；其中至少一个残基X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合；前提是 Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-y -Glu) -AAHDFVEffLLRA0
22.权利要求20的化合物，其具有式 R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 Ml2 ；以及Z是具有式IVa的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-Ala-A la-His-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IVa) 其中X12 选自 Lys 和 Arg ； X17 是X ；X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 Ser、Lys 禾口 Arg;其中X选自Glu、Lys和Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。
23.权利要求21的化合物，其具有式 R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 Ml2 ；以及Z是具有式IVb的肽His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-X12-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-Ala-A la-His-X2I-Phe-Val-X24-Trp-Leu-Leu-X28-Ala ； (IVb) 其中X12 选自 Lys 或 Arg; X17 是X ；X21 选自 Asp 禾口 Glu ；X24 选自 Ala 和 Glu ；X28 选自 Ser, Lys 禾口 Arg ；其中X选自Glu、Lys和Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合；前提是 Z 不是 HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-y -Glu) -AHDFVEffLLRA0
24.前述权利要求中任一项的化合物，其中所述式I的肽具有序列 HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDKKAAHDFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAKDFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLKRA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLKA ； HSQGTFTSDYSRYLDSKAAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSLYLDSKAAHDFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRAK ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSAK HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLKSA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVKffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDSCAAHDFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDSCAAHDFVEWLLSA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAACDFVEWLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDKSAAHDFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSAK ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAARDFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAKDFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLKA H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAKDFVAffLLSA H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVAffLLKA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDKKAAHDFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSRYLDSKAAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVKffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSLYLDSKAAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSCAAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAACDFVEWLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDK()KAAE()DFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVE()WLLK()A H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAK()DFVE()WLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK () AAHE () FVEffLLKA ；或 H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK()AAKE()FVEffLLRAο
25.前述权利要求中任一项的化合物，其包含具有以下序列的式I的肽HSQGTFTSDYSKYLDS-K* -AAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLD-K* -KAAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAA-K* -DFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffL-K * -RA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLL-K * -A ；HSQGTFTSDYSRYLDS-K* -AAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSLYLDS-K* -AAHDFVEffLLRA ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLRA-K * ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSA-K * ；HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffL-K * -SA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFV-K* -WLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDS-C* -AAHDFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDS-C* -AAHDFVEffLLSA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAA-C* -DFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLD-K* -SAAHDFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K * -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLLSA-K * ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K * -AARDFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-K * -DFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLL-K * -A ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K * -AAHDFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K * -AAHDFVEffLLKA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-K * -DFVAffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAH DFVAffLL-K * -A ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLD-K * -KAAHDFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSRYLDS-K * -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFV-K * -WLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSLYLDS-K * -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-C * -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-C * -DFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLD-S * -KAAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDK ()K* AAE () DFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYS KYLDSK * AAH DFVE()WLLK ()A H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK * AAK()DFVE()WLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK()AAHE()FVEffLLK * A ；或 H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSK () AAK *E() FVEWLLRA。 其中“ * ”表示亲脂取代基的位置。
26.前述权利要求中任一项的化合物，其中Z1包含具有10至M个C原子、10至22个 C原子或10至20个C原子的烃链。
27.权利要求沈的化合物，其中Z1是十二烷酰基、2-丁基辛酰基、十四烷酰基、十六烷酰基、十七烷酰基、十八烷酰基或二十烷酰基部分。
28.前述权利要求中任一项的化合物，其中Z2是或包含一个或更多个氨基酸残基。
29.权利要求28的化合物，其中Z2是γ-Glu, Glu、β -Ala或ε -Lys残基，或者3_氨基丙酰基、4-氨基丁酰基、8-氨基辛酰基或8-氨基-3，6- 二氧杂辛酰基部分。
30.权利要求四的化合物，其中所述亲脂取代基选自十二烷酰基-Y-Glu、十六烷酰基-Y -Glu、十六烷酰基-Glu、十六烷酰基-[3-氨基丙酰基]、十六烷酰基-[8-氨基辛酰基]、十六烷酰基-ε -Lys,2- 丁基辛酰基-Y _Glu、十八烷酰基-、-Glu和十六烷酰基-[4-氨基丁酰基]。
31.权利要求30的化合物，其中Z具有式 HSQGTFTSDYSKYLD-K (十六烧酰基-Y-Glu) -KAAHDFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffL-K (十六烧酰基-Y-Glu) -RA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAA-K (十六烧酰基-Y-Glu) -DFVEffLLRA ； HSQGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLL-K (十六烧酰基-Y-Glu) -A ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-Y-Glu) -AARDFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFVEffLL-K (十六烧酰基-Y-Glu) -A ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLKA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAAHDFVE () WLLK () A ； HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-K (十六烷酰基-Y-Glu) -DFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十二烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-[3-氨基丙酰基])-AAHDFVE^WLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-[8-氨基辛酰基])-AAHDFVE^WLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-ε -Lys) -AAHDFVEffLLSA ； HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基)-AAHDFVEffLLSA ； HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十八烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ； HSQGTFTSDYSKYLDS-K ([2- 丁基辛酰基]-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ； HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-[4-氨基丁酰基])-AAHDFVEffLLSA ； HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十八烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ； HSQGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-E) -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基)-AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十八烧酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K ([2- 丁基辛酰基]-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基- -氨基丁酰基])-AAHDFVE^WLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十八烷酰基-Y-Glu) -AAHDFVEffLLSA ；or H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-E) -AAHDFVEffLLSA ；其中标记“ 0 ”的残基参与分子内键。
32.权利要求30的化合物，其中Z具有式 H-Aib-QGTFTSDYS-K (十六烷酰基-异 Glu) -YLDSKAAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLD-K (十六烧酰基-异 Glu) -KAAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAA-K (十六烷酰基-异 Glu) -DFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDSKAAHDFV-K (十六烷酰基-异 Glu) -WLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-异 Lys) -AARDFVAffLLRA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-异 Glu) -AAKDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDE-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-异 Glu) -AAHEFVEffLLSA ；H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-异 Glu) -AAEDFVEffLLSA ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHDFVEWLLEA.
33.化合物，其具有式 R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基； R2 是 OH 或 Ml2 ； 以及Z是具有式V的肽His-Aib-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-Lys-Ala-A Ia-His-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Leu-X28 ； (V)其中X17 是 XX28是Ser或不存在；其中X选自Glu、Lys和Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。
34.权利要求33的化合物，其中Z具有式 H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHDFVEffLLS ； H-Aib-QGTFTSDYSKYLDS-K (十六烧酰基-异 Glu) -AAHDFVEffLL ；
35.化合物，其具有式 R1-Z-R2其中R1是H、CV4烷基、乙酰基、甲酰基、苯甲酰基或三氟乙酰基；R2 是 OH 或 Ml2 ；以及Z是具有式VI的肽His-Aib-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-Tyr-Leu-Asp-Ser-X17-Ala-A Ia-His-Asp-Phe-Val-Glu-Trp-Leu-Leu-Ser-Ala ； (VI) 其中X17 是X ；其中X选自Glu、Lys和Cys ；以及其中X的侧链与具有下式的亲脂取代基缀合(i)Z1，其中Z1是与所述X的侧链直接缀合的亲脂部分；或(U)Z1Z2,其中Z1是亲脂部分，Z2是间隔物，以及Z1通过Z2与所述X的侧链缀合。
36.权利要求35的化合物，其中Z具有式 H-Aib-EGTFTSDYSKYLDS-K (十六烷酰基-异 Glu) -AAHDFVEffLLSA0
37.组合物，其包含与载体混合的权利要求1至36中任一项的化合物或者其盐或衍生物。
38.权利要求37的组合物，其中所述组合物是可药用组合物，以及所述载体是可药用载体。
39.权利要求1至36中任一项的化合物，其用于医学治疗方法中。
40.权利要求1至36中任一项的化合物，其用于防止体重增加或促进体重减轻。
41.权利要求1至36中任一项的化合物，其用于以下的方法中提高循环葡萄糖水平、 葡萄糖耐受和/或循环胆固醇水平，降低循环LDL水平，和/或增加HDL/LDL比值。
42.权利要求1至36中任一项的化合物，其用于治疗超重导致或以其为特征的病症的方法中，例如治疗和/或预防肥胖症、病态肥胖症、肥胖症相关炎症、肥胖症相关胆囊病、肥胖症引发的睡眠窒息、代谢综合征、糖尿病前期、胰岛素抵抗、葡萄糖不耐受、2型糖尿病、I 型糖尿病、高血压、致动脉粥样硬化性血脂异常、动脉粥样硬化、动脉硬化、冠心病、外周动脉疾病、中风或微血管疾病。
43.权利要求1至36中任一项的化合物在有此需要的个体中防止体重增加或促进体重减轻的用途。
44.权利要求1至36中任一项的化合物在以下方法中的用途在有此需要的个体中提高循环葡萄糖水平、葡萄糖耐受和/或循环胆固醇水平，降低循环LDL水平，和/或增加 HDL/LDL 比值。
45.权利要求1至37中任一项的化合物在以下方法中的用途在有此需要的个体中治疗超重导致或以其为特征的病症，例如治疗和/或预防肥胖症、病态肥胖症、肥胖症相关炎症、肥胖症相关胆囊病、肥胖症引发的睡眠窒息、糖尿病前期、胰岛素抵抗、葡萄糖不耐受、2 型糖尿病、I型糖尿病、高血压、致动脉粥样硬化性血脂异常、动脉粥样硬化、动脉硬化、冠心病、外周动脉疾病、中风或微血管疾病。
46.权利要求39至45中任一项的化合物、用途或方法，其中所述化合物作为联合治疗的一部分与用于治疗糖尿病、肥胖症、血脂异常或高血压的药剂一起施用。
47.权利要求46的化合物、用途或方法，其中所述用于治疗糖尿病的药剂是二甲双胍、 磺酰脲、格列奈类、DPP-IV抑制剂、格列酮类、胰岛素或胰岛素类似物。
48.权利要求46的化合物、用途或方法，其中所述用于治疗肥胖症的药剂是胰高血糖素样肽受体1激动剂、肽YY或其类似物、大麻素受体1拮抗剂、酯酶抑制剂、黑素皮质素受体4激动剂或黑色素浓集激素受体1拮抗剂。
49.权利要求46的化合物、用途或方法，其中所述用于治疗高血压的药剂是血管紧张素转化酶抑制剂、血管紧张素II受体阻断剂、利尿剂、β -阻断剂或钙通道阻断剂。
50.权利要求46的化合物、用途或方法，其中所述用于治疗血脂异常的药剂是他汀类、 贝特类、烟酸类和/或胆固醇吸收抑制剂。
全文摘要
本发明提供了用于促进体重减轻或防止体重增加以及用于治疗糖尿病及相关代谢疾病的材料和方法。特别地，本发明提供了在这些方法中有效的新型酰化胰高血糖素类似物肽。所述肽可通过具有比人胰高血糖素更高的针对GLP-1受体的选择性来介导其作用。
文档编号C07K14/605GK102574903SQ201080038110
公开日2012年7月11日 申请日期2010年6月24日 优先权日2009年7月13日
发明者卡米拉·埃特贝里·贝克, 吉塔·坎彭, 埃迪·迈尔, 延斯·罗森格伦·道高, 迪特·里贝尔, 雅各布·林德·托尔伯格, 马里耶·斯科夫高 申请人:西兰制药公司