专利名称：可断裂peg脂质衍生物在制剂中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体地说是涉及可断裂PEG脂质衍生物在制剂中的用 途。
背景技术：
在临床使用中，为达到疗效，PEG化液体微粒制剂往往需要进行重复注射，但是， 目前关于体内重复注射PEG化制剂的药动学研究资料较为匮乏。有研究者发现，当向同一 动物体内重复注射(间隔几天)PEG化脂质体时，会引起二次注射PEG化脂质体的药动学行 为和肝脾组织分布发生异常变化，这一现象被称之为加速血液清除(Accelerated Blood Clearance,简称 ABC)(参见Dams ETM, Laverman P, Oyen WJG, et al. Accelerated Blood Clearance and Altered Biodistribution of Repeated Injections of Sterically Stabilized Liposomes [J], J Pharmacol Exp Ther, 2000, 292: 1071-1079 ； Laverman P, Carstens MG, Boerman 0C, et al. Factors affecting the accelerated blood clearance of polyethylene glycol-liposomes upon repeated injection [J]· J Pharmacol Exp Ther, 2001， 298: 607-612 ； Ishida Τ, Atobe K, Wang XY, et al. Accelerated blood clearance of PEGylated liposomes upon repeated injections: Effect of doxorubicin-encapsulation and high-dose first injection [J]. J Control Release, 2006, 115: 251-258.)。也有研究表明重复注射阳离子牛血清白 蛋白修饰的PEG与PLA交联形成的纳米粒(CBSA-NP)也产生了 ABC现象，并且与前人对 PEG化脂质体诱导ABC现象的研究结论基本一致(参见Lu W, Wan J, She ZJ, et al. Brain delivery property and accelerated blood clearance of cationic albumin conjugated pegylated nanoparticle [J]· J Control Release, 2007, 118:38-53·)。 因此，PEG化液体微粒制剂都具有产生加速血液清除即ABC现象的可能。可诱导免疫反应的不依赖胸腺的二级抗原(TI-2)是由细菌的细胞壁和荚膜 多糖组成的，其具有高度重复结构(参见Ishida T, Masuda K, Ichikawa T, et al. Accelerated clearance of a second injection of PEGylated liposomes in mice [J]· Int J Pharm, 2003, 255: 167-174.)。该抗原有可能通过与B细胞表面的免疫球蛋白广泛 交联，而导致B细胞分泌IgM和IgG。当TI-2激活B细胞时，抗原决定簇的密度是非常关键 的密度过低对于激活细胞是不够的；密度过高则细胞反应性反而降低。PEG聚合物也具有 高度重复结构，低剂量的PEG化制剂即能够诱导产生ABC现象，表明在此条件下抗原决定簇 (PEG)的密度足以激活B细胞。一旦PEG化制剂到达脾脏，就会与被PEG (或PEG化制剂)激 活的B细胞表面的抗原结合、交联，导致抗PEG IgM的产生(参见Ishida T, Atobe K, Wang XY, et al. Accelerated blood clearance of PEGylated liposomes upon repeated injections: Effect of doxorubicin-encapsulation and high-dose first injection [J], J Control Release, 2006， 115: 251-258.)。众所周知，脾在免疫反应中扮演着重要角色。首次注射PEG化脂质体之前将脾切
4除，则二次注射PEG化脂质体的ABC现象完全消失；未切除脾的对照组中大鼠血清与脂质体 结合的IgM量比脾切除组高8倍，这表明PEG化脂质体与IgM的结合是诱导ABC现象的关键 因素(参见 Ishida T, Ichihara M, Wang XY, et al. Spleen plays an important role in the induction of accelerated blood clearance of PEGylated liposomes [J]. J Control Release, 2006，115: 243-250.)。PEG化脂质体充当了脾脏中B细胞的活化剂。综合目前的研究结果，认为ABC现象是通过以下假设机理产生的PEG化制剂的 首剂量在脾脏产生抗PEG IgM，该血清因子选择性结合到几天后注射的PEG化制剂表面的 PEG上，并随后激活补体系统。而这会依次导致补体C3片段对制剂的调理作用，结果增强 了肝脏枯否(Kupffer)细胞对制剂的摄取，于是产生了 ABC现象(参见Ishida T, Masuda K, Ichikawa T, et al. Accelerated clearance of a second injection of PEGylated liposomes in mice [J]· Int J Pharm, 2003, 255: 167-174 ； Ishida Τ, Harada Μ, Wang XY, et al. Accelerated blood clearance of PEGylated liposomes following preceding liposome injection: Effects of lipid dose and PEG surface-density and chain length of the first-dose liposomes [J]· J Control Release, 2005, 105: 305-317 ； Ishida Τ, Ichihara Μ, Wang XY, et al. Spleen plays an important role in the induction of accelerated blood clearance of PEGylated liposomes [J]. J Control Release, 2006，115: 243-250.)。药物或药用辅料具有免疫原性是一个非常严重的问题，因为抗体的产生会严重降 低药物的安全性和效力，这已经阻碍了一些药物的发展，包括以蛋白质为基础的疗法，如单 克隆抗体和带有致免疫成分的病毒载体。随着基因药物治疗的发展，脂质体作为基因药物 载体得到了广泛而深入的研究，甚至在美国已经进入I期临床试验。ABC现象表明非病毒载 体致免疫的潜在危险，特别是当这些载体携带免疫刺激因子一如质粒DNA (pDNA)时，可以 充当强的免疫佐剂(参见Judge A, McClintock K, Phelps JR, et al. Hypersensitivity and loss of disease site targeting caused by antibody responses to PEGylated liposomes [J], Mol Ther, 2006，13:3^-337. )。kmple 等的研究表明，重复注射包封 寡核苷酸(0DN)、pDNA或RNA核酶的PEG化脂质体会诱导强烈的免疫应答，导致制剂血液 循环时间缩短和小鼠死亡率显著增加(参见kmple SC, Harasym TO, Clow ΚΑ, et al. Immunogenicity and rapid blood clearance of liposomes containing polyethylene glycol-lipid conjugates and nucleic acid [J]. J Pharmacol Exp Ther, 2005, 312: 1020-1026.)。另外，如果PEG化制剂携载的药物毒性较强，ABC现象会引起对非治疗器官(如肝 脏)的毒性。尽管从动物实验得出的结论不可能与临床表现完全一致，但是对于液体微粒制 剂来说，当需要多次注射或组合给药时，深入研究其体内分布和药代动力学是必要的。对于 “细胞穿透肽”、“siRNA”等PEG化载体制剂，ABC现象会极大地降低其临床应用前景与价值。有人研究通过调整药物制剂表面PEG脂质衍生物的性质来避免ABC现象。研究 人员采用较小的C14脂质锚定物增加PEG从粒子表面的解离，结果发现这会使ABC现象减 弱(参见 Judge ADj McClintock K, Shaw JRj et al. Hypersensitivity and loss of disease site targeting caused by antibody responses to pegylated liposomes [J]. Mol. Ther. 2006，13: 3^-337.)。因此，应用可交换的PEG脂质替换牢固结合于
综上所述，本发明的目的是利用可断裂PEG脂质衍生物修饰液体微粒制剂来达到 减轻或避免PEG化药物制剂产生ABC。此种技术还未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供可断裂PEG脂质衍生物在制备减轻或避免加速血液清除(以 下简称ABC) PEG化制剂中的应用。在同一动物体内重复注射不可断裂PEG脂质衍生物修饰微粒制剂会产生加速血 液清除(即ABC)，这对疾病的治疗显然是不利的。本发明人通过大量试验研究发现，利用可 断裂PEG脂质衍生物修饰液体微粒制剂(包括脂质体、囊泡、乳剂、微乳、胶束和纳米粒等制 剂)，重复注射此类PEG化制剂后能够达到减轻或避免ABC产生的目的。本发明提供的可断裂PEG脂质衍生物中PEG与脂质链段之间是通过酯键相连的， 优选的方案是，所述可断裂PEG脂质衍生物中PEG与脂质链段之间是通过羧酸酯键、碳酸酯 键或磷酸酯键相连的。优选的方案是，本发明的可断裂PEG脂质衍生物具有下列通式所示的结构
权利要求
1.可断裂PEG脂质衍生物在制备减轻或避免加速血液清除PEG化制剂中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物中PEG与脂质 链段之间是通过酯键相连的。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物中PEG与脂质 链段之间是通过羧酸酯键、碳酸酯键或磷酸酯键相连的。
4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物具有下列 通式所示的结构
5.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物具有下列 通式所示的结构
6.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物具有下列 通式所示的结构
7.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物具有下列 通式所示的结构
8.如权利要求1或2所述的衍生物，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物具有下 列通式所示的结构
9.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物具有下列通式所示的结构
10.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述可断裂PEG脂质衍生物具有下列 通式所示的结构
11.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述PEG化制剂为液体微粒制剂，包括脂 质体、囊泡、乳剂、微乳、胶束和纳米粒制剂。
12.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述PEG化制剂中可断裂PEG脂质衍生物 在脂质材料中的质量浓度> H
全文摘要
本发明属于医药技术领域，提供可断裂聚乙二醇脂质衍生物在制备减轻或避免加速血液清除PEG化制剂中的应用。本发明是利用可断裂聚乙二醇脂质衍生物如PEG-胆固醇半琥珀酸酯、PEG-胆固醇碳酸甲酯或PEG-α生育酚半琥珀酸酯等修饰脂质体、囊泡、乳剂、微乳、胶束和纳米粒等液体微粒制剂，通过测定重复注射可断裂PEG脂质衍生物修饰药物制剂后动物血浆中以及肝脾等组织中制剂消除的变化，证明重复注射可断裂PEG脂质衍生物修饰的微粒制剂仅引起轻微的或不能引起加速血液清除，即可以减轻或避免加速血液清除产生。本发明开拓了可断裂PEG脂质衍生物的新用途。
文档编号C07D311/72GK102068701SQ20111002003
公开日2011年5月25日 申请日期2011年1月18日 优先权日2011年1月18日
发明者宋阳, 张玲, 徐缓, 洪维维, 王龙, 邓意辉, 邹佳 申请人:沈阳药科大学