专利名称：一种栎瘿酸单体的分离纯化方法
技术领域：
本发明涉及ー种植物化合物単体的制备方法，具体涉及从秦艽中提取分离栎瘿酸単体的方法，属于中药活性成分的分离纯化技术领域。 秦艽是龙胆科多年生草本植物，是治风湿关节痛、结核病潮热、黄疸等症的主药之一。在青海尤以黄南产的秦艽质量最佳，是中国重要的传统中药之一，始载于《神农本草经》，列为中品，“秦艽主寒热邪气，寒湿风痹，肢节痛、下水、利小便。”
栎瘿酸是秦艽中特征性化学成分之一，英文名称Roburic acid; 3，4-Secoursa-4 (23 ),12-dien-3-oic acid。化’"^名称为I-Cnrysenepropanoic acidl, 2, 3, 4, 4a, 4d, 5, 6, 6a ,7, 8, 9, 10, 10a, 12, 12a-hexadecahyaro-l, 4a, 4b, 6a, 9, 10-hexamethyl-2- (1-metnylethe nyl)-, (IS, 2S, 4aR, 4bS, 6aR, 9R, 10S, IOaR, 12aR)，分子量为 440. 70，其结构式为
由于栎瘿酸是秦艽的特征性化学成分之一，因此以栎瘿酸作为该药材及其相关制剂的质量评价指标，既能较真实地反映其质量又具有专属性，可对秦艽药材及其制剂的质量控制起到重要作用。但是，通过检索大量文献发现，目前只有关于秦艽中苦苷类的提取分离纯化报道， 未见与栎瘿酸单体分离エ艺的相关专利报道。究其原因，与栎瘿酸的性质和其它含量较高的苦苷和糖类成分干扰有关，本发明优化了针对栎瘿酸成分提取分离后的一系列方法，从中得到含量较高的単体栎瘿酸成分。
发明内容
本发明的目的在于提供一种栎瘿酸単体的分离纯化方法。该方法操作简便，分离效率高，エ艺稳定，成本低廉，可实现栎瘿酸单体的高纯度分离制备，得到的栎瘿酸单体纯度高，可作为鉴别对照品使用。为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下
权利要求
1.一种栎瘿酸的分离纯化方法，其特征在于以秦艽为原料通过提取、萃取、柱分离和结晶得到栎瘿酸単体，具体包括下述主要步骤A、提取将干燥的秦艽粉碎成粗粉，加入质量百分比浓度为95%的乙醇溶液，其加入量按照药材重量乙醇溶液体积=IKg: (8 10) L计算，加热回流提取3次，毎次2 3小时，提取液过滤，合并过滤液，浓缩回收乙醇，得浓浸膏待进行下一步萃取处理；B、萃取将步骤A所得的浓浸膏加入1倍量80°C的水稀释，稀释后的浸膏水溶液再加入1倍量的乙酸乙酯萃取3次，合并萃取后的乙酸乙酯层，用旋转蒸发器55°C浓缩至流浸膏，加入流浸膏5倍重量的60 80目硅胶55°C干燥拌样，干燥后的拌样硅胶备硅胶柱分离；C、硅胶柱分离根据步骤B所得拌样硅胶重量，称取10倍量的柱硅胶用ニ氯甲烷拌勻装入备好的玻璃层析柱中，用ニ氯甲烷作为洗脱剂洗脱沉降，直至流速恒定；将步骤B中干燥好的拌样硅胶，按照柱硅胶拌样硅胶10:1装入层析柱中，用ニ氯甲烷洗脱，根据TLC检测收集栎瘿酸产品段，回收ニ氯甲烷，得白色固体，待下一步结晶；D、按照步骤C所得的白色固体氯仿=lg:20mL计算，将步骤C得到的白色固体用氯仿溶解，溶解完全后用纳米有机膜过滤，得到氯仿滤液体积，然后加入2倍体积的甲醇冷藏结晶，根据晶体具体纯度，重复结晶2 3次，直至纯度> 98. 5%，即可得到栎瘿酸单体产品。
2.如权利要求1所述栎瘿酸的分离纯化方法，其特征在于步骤B所述柱硅胶为200 300 目。
全文摘要
本发明涉及一种栎瘿酸的分离纯化方法，属于中药活性成分的分离纯化技术领域。该方法是以秦艽为原料通过采用95%的乙醇溶液提取，乙酸乙酯萃取，以二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱分离，氯仿溶解、过滤、冷却结晶得到栎瘿酸单体。本发明操作简便，生产周期短，工艺稳定，分离效果高，可实现栎瘿酸的高纯度分离，可作为秦艽药材鉴别对照品使用。
文档编号C07C51/42GK102531881SQ20111042010
公开日2012年7月4日 申请日期2011年12月15日 优先权日2011年12月15日
发明者刘丁, 夏柯, 文焕松, 白兰辉, 郭建华 申请人:成都普思生物科技有限公司