专利名称：一种闹羊花毒素Ⅲ单体的分离纯化方法
技术领域：
本发明涉及一种植物化合物单体的制备方法，具体涉及从羊踯躅中提取分离闹羊花毒素III单体的方法，属于中药活性成分的分离纯化技术领域。
背景技术：
闹羊花毒素III又叫闹羊花素III，Rhodojaponin 一III，分子式为C2tlH32O6,分子量为368，结构式如下
权利要求
1.一种闹羊花毒素III单体的分离纯化方法，其特征在于以杜鹃花科植物羊踯躅药材为原料，通过提取、萃取、制备液相系统分离及干燥得闹羊花毒素III单体，具体包括如下工艺步骤 A提取 将干燥的羊踯躅药材粉碎成I 4_的粗粉，加入醇溶液，于60 100°C提取3 5次，每次I 3小时，提取液过滤，合并过滤液，60 90°C浓缩回收乙醇，得相对密度1. O 1.1的浓浸膏； B萃取总毒素 将步骤A所得的浓浸膏加水稀释至60°C时相对密度为O. 7 O. 9g/mL，然后加入等体积的乙酸乙酯萃取3 5次，分取上层溶液，45 60°C减压浓缩至干，所得固体物用质量/体积=10 15的甲醇超声溶解，并用O. 45ΜΠ1有机膜过滤，得澄清溶液； C通过制备型高效液相色谱分离闹羊花毒素III单体 取步骤B所得的滤液进样，进行闹羊花毒素III单体的制备分离，紫外检测器在线监测针对性收集闹羊花毒素III的制备馏分溶液，得闹羊花毒素III单体溶液； D干燥制备闹羊花毒素III单体产品 取步骤D所得闹羊花毒素III单体溶液，于45°C 75°C减压浓缩至干，再将固体物于45 85°C与另器盛放的五氧化二磷共存，真空干燥至恒重，收集干品，即得闹羊花毒素III单体产品。
2.如权利要求1所述闹羊花毒素III单体的分离纯化方法，其特征在于步骤A所述醇溶液为甲醇或乙醇溶液，它们的浓度均为G/G=70 90%。
3.如权利要求1或2所述闹羊花毒素III单体的分离纯化方法，其特征在于步骤A所述醇溶液的加入量为药材重量醇溶液体积=IKg: (6 10)L。
4.如权利要求1所述闹羊花毒素III单体的分离纯化方法，其特征在于步骤C所述制备型高效液相色谱采用填料为C18的色谱柱、流动相组成为体积分数65 85%的甲醇水溶液。
5.如权利要求1所述闹羊花毒素III单体的分离纯化方法，其特征在于步骤C所述紫外检测器检测波长为210nm。
6.如权利要求1所述闹羊花毒素III单体的分离纯化方法，其特征在于步骤C所述制备型高效液相色谱分离前，通过液-质联用方法或气-质联用、核磁共振碳谱、氢谱方法确定高效液相色谱中闹羊花毒素III单体的峰形。
7.如权利要求1或6所述闹羊花毒素III单体的分离纯化方法，其特征在于所述液-质联用方法，采用填料为C18的色谱柱，流动相组成为体积分数65 85%的甲醇水溶液，柱温为室温，检测波长为210nm，根据质谱正离子检测结果，确定闹羊花毒素III单体在液相色谱中所对应的峰形及归属。
全文摘要
本发明提供了一种闹羊花毒素Ⅲ单体的分离纯化方法，属于中药活性成分的分离纯化技术领域。本发明是以杜鹃花科植物羊踯躅为原料，通过醇提取、采用乙酸乙酯萃取及通过制备型高效液相色谱分离、浓缩干燥后得闹羊花毒素Ⅲ单体。本发明通过最适宜的工艺及参数条件，使产品中闹羊花毒素Ⅲ的含量达到98%以上；整个工艺过程操作简便、工艺稳定、成本低，适合大量生产，且分离效率高、产品纯度高，即可实现大量闹羊花毒素Ⅲ单体的高纯度分离制备。
文档编号C07D301/32GK103012326SQ201210577690
公开日2013年4月3日 申请日期2012年12月27日 优先权日2012年12月27日
发明者文焕松, 夏柯, 姚志容, 李启发, 郭建华, 刘丁 申请人:成都普思生物科技有限公司