专利名称：一种提取纯化榆绿木脂素a的方法
技术领域：
本发明属于中药提取技术领域，涉及一种提取纯化榆绿木脂素A的方法。
背景技术：
榆绿木脂素A (Anolignan A),分子式为C19H18O4,分子量为310. 35,为类白色无定形粉末，是从使君子科(Combretaceae)披针形偷绿木变种Jflogei1S1SW1S acuminata (Roxb. exDC. )Guill. &Pers. var. Ianceolata Wall, ex C. B. Clarke 的莖分离出的一种木脂素类化合物。药理研究表明，榆绿木脂素A具有抑制HIV-I逆转录酶活性，IC50为60. 4μ g/ml。目前尚未检索到榆绿木脂素A的制备方法报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种提取纯化榆绿木脂素A的方法。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种提取纯化榆绿木脂素A的方法，其特征在于包括以下步骤以披针形榆绿木变种的茎为原料，粉碎，用60-95%乙醇浸泡2-8h，然后超声提取，将提取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂，经制备型液相色谱分离，即可获得榆绿木脂素A。所述硅藻土与活性炭的混合物中硅藻土与活性炭的质量比为1:1。所述氧化镁目数为100-200目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5_7bar，柱径高比为1:6-10。所述石油醚-丙酮体积比为17-2: I。所述制备液相色谱分离，以甲醇-水为流动相，甲醇体积百分比为68-75%，流速为15-100ml/mino本发明采用超声提取、柱层析及制备液相色谱分离纯化，具有生产过程简单，易于实现工业化等优点。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施例方式实施例I :
以披针形榆绿木变种的茎为原料，称取2kg，粉碎，用4倍量95%乙醇浸泡8h，然后超声提取I. 5h，超声功率为55KHz，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:1的混合物，加入量为提取液的3% (w/v)，充分搅拌后过滤，滤液浓缩至浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱(柱压为6bar，柱径高比为1:6)，用石油醚-丙酮按体积比17-2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以72%甲醇水溶液为流动相，控制流速为15ml/min，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到榆绿木脂素A产品，含量为96. 6%。实施例2:
以披针形榆绿木变种的茎为原料，称取2kg，粉碎，用60%乙醇浸泡2h，然后超声提取2h，超声功率为50KHz，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:1的混合物，加入量为提取液的3% (w/v)，充分搅拌后过滤，滤液浓缩至浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱(柱压为5bar，柱径高比为1:10)，用石油醚-丙酮按体积比17-2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以75%甲醇水溶液为流动相，控制流速为100ml/min，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到榆绿木脂素A产品，含量为97. 6%。实施例3
以披针形榆绿木变种的茎为原料，称取5kg，粉碎，用75%乙醇浸泡5h，然后超声提取2h，超声功率为40KHz，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:1的混合物，加入量为提取液的3% (w/v)，充分搅拌后过滤，滤液浓缩至浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱(柱压为6bar，柱径高比为1:7)，用石油醚-丙酮按体积比17-2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以68%甲醇水溶液为流动相，控制流速为45ml/min，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到榆绿木脂素A产品，含量为98. 2%。实施例4:
以披针形榆绿木变种的茎为原料，称取5kg，粉碎，用80%乙醇浸泡5h，然后超声提取lh，超声功率为60KHz，将提取液加入硅藻土与活性炭按质量比1:1的混合物，加入量为提取液的3% (w/v)，充分搅拌后过滤，滤液浓缩至浸膏，将浸膏用少量中性氧化镁混合拌样，低温烘干，上样至100-200目的中性氧化镁低压柱(柱压为7bar，柱径高比为1:8)，用石油醚-丙酮按体积比17-2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；将粗品用甲醇配制成20mg/ml的溶液，用制备型高效液相色谱分离，制备柱以C18为柱填料，以70%甲醇水溶液为流动相，控制流速为55ml/min，紫外在线检测，检测波长为226nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到榆绿木脂素A产品，含量为98. 9%。权利要求
1.一种提取纯化榆绿木脂素A的方法，其特征在于包括以下步骤以披针形榆绿木变种的茎为原料，粉碎，用60-95%こ醇浸泡2-8h，然后超声提取，将提取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂，经制备型液相色谱分离，即可获得榆绿木脂素A。
2.如权利要求I所述的ー种提取纯化榆绿木脂素A的方法，其特征在于所述硅藻土与活性炭的混合物中硅藻土与活性炭的质量比为1:1。
3.如权利要求I所述的ー种提取纯化榆绿木脂素A的方法，其特征在于所述氧化镁目数为100-200目，氧化镁柱为中低压柱，柱压为5-7bar，柱径高比为1:6-10。
4.如权利要求I所述的ー种提取纯化榆绿木脂素A的方法，其特征在于所述石油醚-丙酮体积比为17-2:1。
5.如权利要求I所述的ー种提取纯化榆绿木脂素A的方法，其特征在于所述制备液相色谱分离，以甲醇-水为流动相，甲醇体积百分比为68-75%，流速为15-100ml/min。
全文摘要
本发明公开了一种提取纯化榆绿木脂素A的方法，该方法是将原料粉碎，用60-95%乙醇浸泡2-8h，然后超声提取，将提取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用中性氧化镁拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂，经制备型液相色谱分离，即可获得榆绿木脂素A。本发明操作简单、制备量大、得率高、产品纯度高，适合工业化生产。
文档编号C07D317/54GK102659750SQ20121012281
公开日2012年9月12日 申请日期2012年4月25日 优先权日2012年4月25日
发明者万冬梅, 刘东锋 申请人:南京泽朗医药科技有限公司