抗基质金属蛋白酶9抗体的制作方法
【专利摘要】本发明提供涉及结合到基质金属蛋白酶-9 MMP9蛋白(MMP9又称为明胶酶-B)的结合蛋白(例如抗体和其抗原结合片段)的组合物及使用方法，例如其中所述结合蛋白包含免疫球蛋白Ig重链(或其功能片段)和Ig轻链(或其功能片段)。
【专利说明】抗基质金属蛋白酶9抗体
[0001] 有关绕由EFS-W邸据帘的序列表的参考
[0002] 如MPEP § 1730II. B. 2 (a) (C)中所批准并陈述的，W下经由USPT0 EFS-W邸服务器 提交的电子版序列表的完整内容W全文引用的方式并入本文中用于所有目的。所述序列表 在电子提交的文本文档上标识如下：
[0003]
【权利要求】
1. 一种分离的抗体或其片段，其包含：具有重链互补决定区⑶R的重链可变VH区，所 述〇?具有选自由3￡0 10勵：13、5￡0 10勵：14及5￡0 10勵：15组成的群组的氨基酸序 列。
2. 根据权利要求1所述的抗体或片段，其中所述VH区具有氨基酸序列为SEQ ID N0:13 的重链⑶R1、氨基酸序列为SEQ ID NO: 14的重链⑶R2及氨基酸序列为SEQ ID NO: 15的重 链 CDR3。
3. -种分离的抗体或其片段，其包含：具有轻链互补决定区CDR的轻链可变VL区，所 述CDR具有选自由SEQ ID NO: 16、SEQ ID NO: 17及SEQ ID NO: 18组成的群组的氨基酸序 列。
4. 根据权利要求3所述的抗体或片段，其中所述VL区具有氨基酸序列为SEQ ID N0:16 的轻链CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO: 17的轻链CDR2及氨基酸序列为SEQ ID NO: 18的轻 链 CDR3。
5. 根据权利要求3或4所述的抗体或片段，其中所述抗体另外包含具有氨基酸序列为 SEQ ID NO: 13的重链CDR1、氨基酸序列为SEQ ID NO: 14的重链CDR2及氨基酸序列为SEQ ID NO: 15的重链CDR3的VH区。
6. 根据权利要求1、2及5中任一权利要求所述的抗体或片段，其中所述VH区具有SEQ ID N0:1、SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:5、SEQ ID N0:6、SEQ ID N0:7 或 SEQ ID N0:8 中所陈述 的氨基酸序列。
7. 根据权利要求6所述的抗体或片段，其中所述VH区具有SEQ ID N0:3、SEQ ID N0:5、 SEQ ID NO:6、SEQ ID NO: 7或SEQ ID NO:8中所陈述的氨基酸序列。
8. 根据权利要求3到7中任一权利要求所述的抗体或片段，其中所述VL区具有SEQ ID N0:2、SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:9、SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11 或 SEQ ID NO: 12 中所 陈述的氨基酸序列。
9. 根据权利要求8所述的抗体或片段，其中所述VL区具有SEQ ID N0:4、SEQ ID N0:9、 SEQ ID NO: 10、SEQ ID NO: 11或SEQ ID NO: 12中所陈述的氨基酸序列。
10. 根据权利要求5所述的抗体或片段，其中所述VH区具有SEQ ID NO: 7中所陈述的 氨基酸序列并且所述VL区具有SEQ ID NO: 12中所陈述的氨基酸序列。
11. 一种分离的抗体或其片段，其与具有含SEQ ID N0:7中所陈述的氨基酸序列的VH 区和含SEQ ID NO: 12中所陈述的氨基酸序列的VL区的抗体竞争结合到MMP9。
12. -种特异性结合到MMP9的表位的分离的抗体或其片段，其中所述表位包含在MMP9 的区域内的氨基酸残基，所述区域由SEQ ID N0:27的残基104-119、残基159-166或残基 191-202 组成。
13. 根据权利要求12所述的抗体或片段，其中所述表位包含在由SEQ ID N0:27的残 基104-119组成的MMP9的区域内的氨基酸残基、在由SEQ ID NO:27的残基159-166组成 的MMP9的区域内的氨基酸残基及在由SEQ ID NO: 27的残基191-202组成的MMP9的区域 内的氣基酸残基。
14. 根据权利要求12或13所述的抗体或片段，其中所述表位包含SEQ ID NO:27的 E111、D113、R162 或 1198。
15. 根据权利要求14所述的抗体或片段，其中所述表位包含SEQ ID NO:27的R162。
16. 根据权利要求14所述的抗体或片段，其中所述表位包含SEQ ID N0:27的Elll、 D113、R162 及 1198。
17. 根据权利要求1到16中任一权利要求所述的抗体或片段，其中所述抗体或片段抑 制MMP9的酶活性。
18. 根据权利要求17所述的抗体或片段，其中所述酶活性的所述抑制是非竞争性的。
19. 根据权利要求1到18中任一权利要求所述的抗体或片段，其为人类或人类化的。
20. 根据权利要求1到19中任一权利要求所述的抗体或片段，其用于抑制个体中的 MMP9活性的方法中，所述方法包含向所述个体投予有效抑制所述个体中的MMP9活性的量 的所述抗体或片段。
21. -种抑制个体中的MMP9活性的方法，所述方法包含向所述个体投予有效抑制所述 个体中的MMP9活性的量的根据权利要求1到19中任一权利要求所述的抗体或片段。
22. 根据权利要求21所述的方法，其中所述抗体或其片段是以约lmg/kg到约14mg/kg 的剂量静脉内投予。
23. 根据权利要求21所述的方法，其中所述抗体或片段是以约4mg/kg到约28mg/kg的 剂量皮下投予。
24. 根据权利要求21到23中任一权利要求所述的方法，其中所述抗体或片段是每7到 28天一次投予。
25. -种分离的核酸，其包含：编码包含具有SEQ ID NO: 13-15中所陈述的氨基酸序列 的⑶R的重链多肽或包含具有SEQ ID NO: 16-18中所陈述的氨基酸序列的⑶R的轻链多肽 的核苷酸序列。
26. 根据权利要求25所述的分离的核酸，其中所述核苷酸序列编码所述重链多肽，所 述重链多肽具有选自由SEQ ID NO: 1、3及5-8组成的群组的氨基酸序列。
27. 根据权利要求25或26所述的分离的核酸，其中所述核苷酸序列编码所述轻链多 肽，所述轻链多肽具有选自由SEQ ID NO:2、4及9-12组成的群组的氨基酸序列。
28. 根据权利要求25到27中任一权利要求所述的分离的核酸，其中所述核苷酸序列包 含选自由SEQ ID NO: 19-26组成的群组的序列。
29. 根据权利要求25到28中任一权利要求所述的分离的核酸，其中所述核苷酸序列包 含 SEQ ID N0:21 和 SEQ ID N0:26。
30. -种载体，其包含根据权利要求25到29中任一权利要求所述的分离的核酸。
31. -种细胞，其包含根据权利要求30所述的载体。
32. -种医药组合物，其包含根据权利要求1到19中任一权利要求所述的抗体或其片 段。
33. -种医药组合物，其包含根据权利要求30所述的载体。
34. -种医药组合物，其包含根据权利要求31所述的细胞。
35. 根据权利要求32到34中任一权利要求所述的医药组合物，其用于抑制个体中的 MMP9活性的方法中，所述方法包含向所述个体投予有效抑制所述个体中的MMP9活性的量 的所述医药组合物。
36. -种抑制个体中的MMP9活性的方法，其包含向所述个体投予有效抑制所述个体中 的MMP9活性的量的根据权利要求32到34中任一权利要求所述的医药组合物。
37. -种检测来自个体的测试样品中的MMP9表达的方法，所述方法包含： (a) 使所述测试样品与根据权利要求1到19中任一权利要求所述的抗体或片段接触； 及 (b) 检测所述抗体或片段与所述样品中蛋白质的结合，由此检测MMP9的存在。
38. 根据权利要求37所述的方法，其另外包含将在所述测试样品中检测到的结合的量 与所述抗体或片段结合到对照样品的量相比较。
39. -种分离的多肽，其具有基本上由SEQ ID N0:27的残基111-198组成的氨基酸序 列。
40. -种分离的突变体MMP9多肽，其包含含有SEQ ID NO: 27的残基111-198并且在残 基111、113、162或198处具有氨基酸取代的氨基酸序列。
41. 根据权利要求40所述的分离的突变体MMP9多肽，其中所述氨基酸序列在SEQ ID NO:27的残基111、113、162及198处含有氨基酸取代。
【文档编号】C07K16/40GK104395345SQ201280072749
【公开日】2015年3月4日 申请日期:2012年2月29日 优先权日:2012年2月29日
【发明者】维多莉亚·史密斯, 斯科特·麦考利 申请人:吉联亚生物科技有限公司