专利名称：一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法
技术领域：
本发明涉及细胞壁中木质素成分的提取纯化方法，具体涉及一种从梨中提取纯化木质素的方法。
背景技术：
梨树是一种世界性的落叶果树，梨也是人们喜爱的果品之一。由于近年来栽培管理粗放或者是品种自然退化等原因，导致梨果肉变粗，口感多渣，严重影响了其风味和品质。影响果肉粗细的是梨果实中特有的一种细胞-石细胞。而木质素的合成、沉积和转运与石细胞发育有密切关系。目前对木质素的研究主要集中在木材上，对梨果实中木质素的研究还很少。此外，相较于木材，梨木质素碳氢化合物的质子，即侧链上甲基、亚甲基的质子含量较木材木质素多，果实的木质素单体聚合程度不高，侧链较多，导致梨石细胞的硬度较木材低，也给梨中木质素的研究带来了一定难度。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法，填补了木质素研究主要集中在木材上，而在水果中鲜少的不足，为梨中木质素的研究提供一个实验平台。为了达到本发明的目的，同时兼顾提取物得得率和纯度，采用如下方案一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法，以梨果肉为原料，包括以下步骤(1)将梨果肉勻浆后烘干再粉碎；(2)将步骤(1)中粉碎的梨果肉采用8 12重量倍的苯-乙醇混合溶液或10 15重量倍的丙酮溶液进行回流抽提，抽提后弃提取液，将滤渣自然晾干，研磨过150-200目筛，所得粉末待用；所述苯-乙醇混合溶液中苯和乙醇的体积比为2 1，回流提取时间为 2_4h，提取温度为50 70°C ；采用所述丙酮溶液，回流抽提时间为3 他，提取温度为60 80 0C ；(3)再将步骤O)中所得粉末在温度15 30°C下用9 12重量倍的体积浓度为 80%的二氧六环水溶液回流抽提25 35h，抽提物在35 45°C真空旋转蒸干，即获得粗制木质素。(4)将步骤( 获得的粗木质素采用二氯甲烷萃取法进行纯化精制。本发明提取纯化木质素的方法，所述梨果肉在18000 20000r/min下勻浆，过滤， 取滤渣，在40 60°C下烘干40目筛，使粉碎后的物质保持在均一的40目筛以下的状态。 所述步骤的二氯甲烷萃取法步骤包括取Ig粗制木质素，用10 15ml的吡啶-冰醋酸-水溶解，所述吡啶、冰醋酸、水体积百分比为9 1 4，加入40ml的二氯甲烷进行萃取，反复进行2 4次，合并有机相，真空旋转蒸发，使萃取液浓缩至4 5ml，加入40 50ml的乙醚进行木质素沉淀，5000r/min离心，分离，沉淀物再经乙醚洗涤2 5次，直至没有吡啶气味，即获得纯化的木质素产品。与已有技术相比，本发明的有益效果体现在
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本发明梨果肉采用勻浆烘干再研磨过筛，以勻浆取代了直接烘干粉碎，弥补了由于梨含水量大，烘干所需时间较久的不足；预处理的作用苯醇抽提是植物原料分析的一般方法，这是用来提取的油脂(粗脂肪)的溶剂，在本发明中起到去除细胞破碎物中脂肪的作用，有助于木质素的提纯及结构检测；此外，苯醇处理后，能较大程度的抑制木质素的光变色。本发明的预处理也采用丙酮抽提，由于丙酮极易挥发，采用自然晾干的方式，避免了温度对木质素结构的影响，保持了木质素结构的稳定性。处理后的产物，烘干研磨先后分别过40目筛和200目筛，使既起到了了一定的除杂作用，也使粉末得到细化，以便其在最佳状态下提取，提取液在适当的温度下进行真空旋转蒸发，得到粗制木质素，保证了木质素结构不受改变，粗制木质素采用二氯甲烷反复萃取纯化木质素，有机相进行浓缩至原体积的 1/10，最后经乙醚沉淀洗涤，兼顾了得率和纯度。因此该方法简单、易行，每步操作尽量避免木质素的损失，这样不仅最终使、木质素有较高的得率，也保证了一定的纯度，且操作过程若以丙酮取代苯醇预处理，毒害作用也有所减弱。本发明将梨果肉勻浆，烘干，粉碎后过筛，在最佳状态下提取，经预处理初步除杂及提取在纯化，方法简便易行，木质素损失较少，产品得率和纯度都很高，并且保持了木质素的化学性质的稳定性。
图1是本发明从梨果肉中提取纯化木质素的工艺流程图。下面在本发明的具体实施方案中将对附图加以说明。以下结合附图通过实施例对本发明做进一步说明。
具体实施例方式实施例1 取梨果肉0. 5 2. 0kg, 18000-20000r r/min勻浆，过滤，烘干，研磨过 40目筛，用30ml苯-乙醇(v/v，2 1)回流抽提lh，过滤，滤渣于40°C烘箱烘干，研磨过 150目筛，所得物收集待用。过筛后的粉末在15 30°C下用9 12倍的80%的二氧六环水溶液回流抽提25 35h，抽提物在35 45°C真空旋转蒸干，获得粗制木质素。用10 15倍量的吡啶-冰醋酸-水(体积百分比为9 1 4)溶解粗制木质素，加入5倍吡啶体积的二氯甲烷萃取2 4次，合并二氯甲烷相，在35 40°C度下旋转蒸发浓缩至原体积的1/8 1/12，在浓缩液中加入10 15倍量的乙醚，经4000 6000r/min离心，获得沉淀再用乙醚洗涤3 6次，直到没有吡啶气味，沉淀物在有五氧化二磷的存在下真空干燥。木质素最终得率分别为15. 85%。实施例2 取梨果肉0. 5 2. 0kg，18000r/min勻浆，过滤，烘干，过40目筛，用45ml 丙酮溶液，回流抽提4h，过滤，自然晾干，研磨过150-200目筛，所得粉末装瓶待用。过筛后的粉末在15 30°C下用9 12倍的80%的二氧六环水溶液回流抽提25 35h，抽提物在 35 45°C真空旋转蒸干，获得粗制木质素。用10 15倍量的吡啶-冰醋酸-水(体积百分比为9 1 4)溶解粗制木质素，加入5倍吡啶体积的二氯甲烷萃取2 4次，合并二氯甲烷相，在35 40°C度下旋转蒸发浓缩至原体积的1/8 1/12，在浓缩液中加入10 15倍量的乙醚，经4000 6000r/min离心，获得沉淀再用乙醚洗涤3 6次，直到没有吡啶气味，沉淀物在有五氧化二磷的存在下真空干燥。木质素最终得率分别为13.58%。
权利要求
1.一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法，其特征在于，以梨果肉为原料包括以下步骤(1)将梨果肉勻浆后烘干再粉碎；(2)将步骤(1)中粉碎的梨果肉采用8 12重量倍的苯-乙醇混合溶液或10 15 重量倍的丙酮溶液进行回流抽提，抽提后弃提取液，将滤渣自然晾干，研磨过150-200目筛，所得粉末待用；所述苯-乙醇混合溶液中苯和乙醇的体积比为2 1，回流提取时间为 2_4h，提取温度为50 70°C;采用所述丙酮溶液，回流抽提时间为3 他，提取温度为60 80 0C ；(3)再将步骤(2)中所得粉末在温度15 30°C下用9 12重量倍的体积浓度为80% 的二氧六环水溶液回流抽提25 35h，抽提物在35 45°C真空旋转蒸干，即获得粗制木质ο(4)将步骤( 获得的粗木质素采用二氯甲烷萃取法进行纯化精制。
2.根据权利要求1所述的一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法，其特征在于，所述步骤(4)的二氯甲烷萃取法步骤包括取粗制木质素，用10-15重量倍的吡啶-冰醋酸-水进行溶解，所述吡啶冰醋酸水体积百分比为9 1 4，加入40ml的二氯甲烷进行萃取，反复进行2 4次，合并有机相，真空旋转蒸发，使萃取液浓缩至4 5ml，加入40 50ml的乙醚进行木质素沉淀，5000r/min离心，分离，沉淀物再经乙醚洗涤2 5次，直至没有吡啶气味，即获得纯化的木质素产品。
3.根据权利要求1所述的一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法，其特征在于，所述梨果肉取自近果皮，距果核2 3mm处，在18000 20000r/min下勻浆，过滤取滤渣，40 60°C下烘干，粉碎后过40目筛。
全文摘要
本发明公开了一种从梨果肉中提取纯化木质素的方法，通过果肉组织切块、烘干、粉碎后，经苯-乙醇或丙酮预处理，用二氧六环-水进行回流提取，浓缩提取物再经吡啶-冰醋酸-水的混合液溶解，二氯甲烷萃取后乙醚沉淀获得精制纯化的木质素。本发明一方面解决梨果肉木质素提取得率和纯度低的问题，弥补了木质素研究主要集中在木材上，而对梨果实中木质素研究的空白；另一方面为梨果实中木质素的结构检测做了良好的准备，也为梨果实石细胞虽然有木质素的沉积，但木质素强度低、仍能食用的原因和特点的进一步研究提供了一个实验平台。
文档编号C08H7/00GK102219909SQ20111010445
公开日2011年10月19日 申请日期2011年4月25日 优先权日2011年4月25日
发明者李国庆, 林毅, 蔡永萍, 邱景香, 金青 申请人:安徽农业大学