螺缩酮衍生物及其制备方法和应用与流程
本发明涉及一种抑制与肠或肾脏的葡萄糖再吸收有关的钠依赖性葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT-2)活性的螺缩酮衍生物及其制备方法、含所述衍生物的药物组合物以及它们在治疗糖尿病、高血糖症、及由它们引起的糖尿病并发症或肥胖症方面的应用。
背景技术：
糖尿病(Diabetes)发病率逐年升高，严重危害人类健康。在糖尿病患者中，包括了I和II(即非胰岛素依赖型)型糖尿病患者，绝大多数为II型，其特征在于胰岛素抵抗。高血糖为II型糖尿病的标志，并被认为是形成糖尿病并发症的主要危险因素。目前，作为糖尿病的治疗药，使用二甲双胍药物、磺酰脲药物、糖苷酶抑制剂、胰岛素敏感增强剂、噻唑烷二酮类药物等。但是，二甲双胍药物有乳酸酸中毒的副作用，磺酰脲药物有低血糖的副作用，糖苷酶抑制剂有腹泻的副作用，胰岛素敏感增强剂观察到有浮肿、肥胖等副作用，噻唑烷二酮类药物长期使用存在安全性问题。因此，为了解决这些问题，需要开发新型作用机制的抗糖尿病药物。
钠依赖性葡萄糖协同转运蛋白(Sodium-dependent glucose cotransporters，SGLT)是近年来发现的治疗糖尿病的新靶点，分为SGLT-1和SGLT-2两个亚型。SGLT-2主要表达于肾近端小管前S1节段中；SGLT-1分布在小肠、心脏和肾。SGLT-2吸收原尿中90％的葡萄糖，只有10％的葡萄糖是通过SGLT-1吸收回体内。SGLT-2的选择性抑制有望通过增加葡萄糖在尿中的排泄，使血糖葡萄糖正常化，由此增加胰岛素的敏感性，并延迟糖尿病并发症的发展。由于SGLT-2抑制剂不介入葡萄糖代谢，它可以作为血糖控制主流方法的补充手段。因此，期望快速开发对人SGLT-2有强力抑制活性且为新作用机制的抗糖尿病药。据认为这种药物在促进由尿排泄过量葡萄糖并因此减少体内所聚集的葡萄糖的同时，也可以对肥胖有预防或减轻作用。
从天然物质中分离得到的葡萄糖衍生物根皮苷(phlorizin，结构式如下式所示)可阻碍过剩的葡萄糖在肾脏的再吸收，促进葡萄糖的排泄，具有降糖的作用(rossetti，L.，et al.J.Clin.Invest.，第80卷，1037页，1987年；第79卷，1510页，1987年)。后续，结构经改造开发了类似物如O-碳环基糖苷衍生物、O-杂环基糖苷衍生物、C-碳环基糖苷衍生物、C-杂环基糖苷衍生物、N-糖苷衍生物等。但是对于根皮苷类似物O-碳环基糖苷衍生物、O-杂环基糖苷衍 生物来说，如进行口服，则容易因肠中存在的糖苷酶而发生水解，未变化体的吸收率低，药理作用很快消失(Ehrenkranz，J.R.，Lewis，N.G.Kahn，C.R.&Roth，J.Phlorizin：a review.Diabetes metab.Res.Revs.21，31-38(2005))。
百时美施贵宝公司的国际专利申请WO01/27128公开了下列结构的SGLT-2转运蛋白抑制剂化合物，代表了治疗糖尿病及其并发症的一种方式。
后续，百时美施贵宝公司的国际专利申请WO2003/099836进一步公开了一种抑制SGLT-2的化合物dapagliflozin，结构如下所示：
Dapagliflozin是一种选择性较好的SGLT-2抑制剂，其对人SGLT-2的IC50为1.12nM，对人SGLT-1的IC50为1391nM(Diabetes 57：1723-1729，2008)，于2014年在美国上市。具有调控糖尿、控制血糖和减轻体重的作用，副作用主要为低血糖和尿路感染。
田边三菱制药株式会社的国际专利申请WO2005/012326中公开了一种抑制SGLT-2的化合物canagliflozin，结构如下所示：
Canagliflozin对人SGLT-2的IC50为2.2nM，对人SGLT-1的IC50为910nM(J.Med.Chem.，2010，53，6355-6360)，通过抑制SGLT-2可使尿液中的葡萄糖含量增加，从而达到治疗作用，于2013年在美国上市。
中外制药株式会社的国际专利申请WO2006/080421中公开了一种抑制SGLT-2的化合物tofogliflozin，结构如下所示：
Tofogliflozin的选择性好，对人SGLT-2的IC50为2.9nM，对人SGLT-1的IC50为8444nM(J.Med.Chem.，2012，55，7828-7840)，2015年在日本上市。
国际专利申请WO2008/083200公开了如下式化合物，具有能够抑制SGLT的作用。
综上所述，寻求高效的特异性SGLT-2抑制剂是当前抗糖尿病研究的一大热点。
技术实现要素：
本发明提供如下通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物：
式中：
X为-(CR5R6)n-、O、S或N；
R1、R2各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C3-C6环烷基、-O-C3-C6环烷基、-C1-C6卤代烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-NO2、-CN、-SO-C1-C6烷基、-SO-C3-C6环烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-C3-C6环烷基、-SO2-芳基、-SO2-卤代芳基、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基或-CONH2；
R3、R4各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-OH、-SH、-NH2、卤素或R3、R4与所相连的碳原子一起环合形成环烷基或杂环烷基；
R5、R6各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-C3-C6环烷基、-O-C3-C6环烷基、-C1-C6卤代烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH或R5、R6与所相连的碳原子一起形成
A环为被R9取代的芳基、杂芳基或杂环烷基；
R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-O-C3-C6环烷基、-O-5～7元杂环烷基、-C1-C6卤代烷基、-O-C1-C6卤代烷基、-C3-C6环烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-(CR7R8)n-CO-NR7R8、-O-(CR7R8)n-O-C1-C6烷基、-O-(CR7R8)n-O-C3-C6环烷基、-NO2、-CN、-SO-C1-C6烷基、-SO-C3-C6环烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-C3-C6环烷基、-SO2-芳基、-SO2-卤代芳基、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基、-CONH2、芳基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-NHCO-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基或被氢、卤素、-OH、-NH2、-CN、-COH、-COOH、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基取代的苯基；
R7、R8各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基或卤素；
n为1、2或3。
本发明还提供药物组合物，它含有上述本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物，以及药学上可接受载体。
本发明还提供药物组合物，它含有上述本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物，以及药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂。
本发明还提供通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物在制 备抑制与肠或肾脏的葡萄糖再吸收有关的钠依赖性葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT-2)活性的药物方面的应用。
本发明还提供通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物在制备治疗糖尿病、高血糖症、及由它们引起的糖尿病并发症或肥胖症的药物中的应用。
本发明还提供预防或治疗糖尿病、高血糖症、及由它们引起的糖尿病并发症或肥胖症的方法，包括对患者给予有效治疗量的通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物。
本发明所述的糖尿病包括胰岛素依赖性糖尿病(I型糖尿病)或非胰岛素依赖性糖尿病(II型糖尿病)。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个优选实施方案中，所述式(I)化合物具有通式(II)的结构：
式中，X为-(CR5R6)n-、O、S或N；
R1、R2各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C3-C6环烷基、-O-C3-C6环烷基、-C1-C6卤代烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-NO2、-CN、-SO-C1-C6烷基、-SO-C3-C6环烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-C3-C6环烷基、-SO2-芳基、-SO2-卤代芳基、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基或-CONH2；
R3、R4各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-OH、-SH、-NH2、卤素或R3、R4与所相连的碳原子一起环合形成环烷基或杂环烷基；
R5、R6各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-C3-C6环烷基、-O-C3-C6环烷基、-C1-C6卤代烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH或R5、R6与所相连的碳原子一起形成
A环为被R9取代的芳基、杂芳基或杂环烷基；
R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-O-C3-C6环烷基、-O-5～7元杂环烷基、-C1-C6卤代烷基、-O-C1-C6卤代烷基、-C3-C6环烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-(CR7R8)n-CO-NR7R8、-O-(CR7R8)n-O-C1-C6烷基、-O-(CR7R8)n-O-C3-C6环烷基、-NO2、-CN、-SO-C1-C6烷基、-SO-C3-C6环烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-C3-C6环烷基、-SO2-芳基、-SO2-卤代芳基、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基、-CONH2、 芳基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-NHCO-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基或被氢、卤素、-OH、-NH2、-CN、-COH、-COOH、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基取代的苯基；
R7、R8各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基或卤素；
n为1、2或3。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个优选实施方案中，X为-(CR5R6)n-，其中R5、R6各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-OH、-SH或R5、R6与所相连的碳原子一起形成n为1、2或3。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个更优选实施方案中，X为-(CH2)n-，其结构如下式(III)表示：
其中，n为1、2或3；
R1、R2各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-C3-C6环烷基、-O-C3-C6环烷基、-C1-C6卤代烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-NO2、-CN、-SO-C1-C6烷基、-SO-C3-C6环烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-C3-C6环烷基、-SO2-芳基、-SO2-卤代芳基、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基或-CONH2；
R3、R4各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、-OH、-SH、-NH2、卤素或R3、R4与所相连的碳原子一起环合形成环烷基或杂环烷基；
A环为被R9取代的芳基、杂芳基或杂环烷基；
R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-O-C3-C6环烷基、-O-5～7元杂环烷基、-C1-C6卤代烷基、-O-C1-C6卤代烷基、-C3-C6环烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-(CR7R8)n-CO-NR7R8、-O-(CR7R8)n-O-C1-C6烷基、-O-(CR7R8)n-O-C3-C6环烷基、-NO2、-CN、-SO-C1-C6烷基、-SO-C3-C6环烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-C3-C6环烷基、-SO2-芳基、-SO2-卤代芳基、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基、-CONH2、芳基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-NHCO-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基或被氢、卤素、-OH、-NH2、-CN、-COH、-COOH、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基取代的苯基；
R7、R8各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基或卤素。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个优 选实施方案中，R1、R2各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基或-C3-C6环烷基。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个更优选实施方案中，R1、R2各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基或卤素。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个优选实施方案中，R3、R4各自独立地选自H或-C1-C6烷基。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个优选实施方案中，R3、R4与所相连的碳原子一起环合形成环烷基或杂环烷基。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个优选实施方案中，A环为被R9取代的芳基，R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-O-C3-C6环烷基、-O-5～7元杂环烷基、-C1-C6卤代烷基、-O-C1-C6卤代烷基、-C3-C6环烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-(CR7R8)n-CO-NR7R8、-O-(CR7R8)n-O-C1-C6烷基、-O-(CR7R8)n-O-C3-C6环烷基、-NO2、-CN、-SO-C1-C6烷基、-SO-C3-C6环烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-C3-C6环烷基、-SO2-芳基、-SO2-卤代芳基、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基、-CONH2、芳基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-NHCO-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基或被氢、卤素、-OH、-NH2、-CN、-COH、-COOH、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基取代的苯基，R7、R8各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基或卤素，n为1、2或3。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个更优选实施方案中，A环为被R9取代的苯基，R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-O-C3-C6环烷基、-O-5～7元杂环烷基、-C1-C6卤代烷基、-O-C1-C6卤代烷基、-C3-C6环烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-(CR7R8)n-CO-NR7R8、-O-(CR7R8)n-O-C1-C6烷基、-O-(CR7R8)n-O-C3-C6环烷基、-NO2、-CN、-SO-C1-C6烷基、-SO-C3-C6环烷基、-SO-芳基、-SO-杂芳基、-SO2-C1-C6烷基、-SO2-C3-C6环烷基、-SO2-芳基、-SO2-卤代芳基、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基、-CONH2、芳基、-C2-C6烯基、-C2-C6炔基、-NHCO-C1-C6烷基、-NHSO2-C1-C6烷基或被氢、卤素、-OH、-NH2、-CN、-COH、-COOH、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基取代的苯基，R7、R8各自独立地选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基或卤素，n为1、2或3。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个更优选实施方案中，A环为被R9取代的苯基，R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-O-C3-C6环烷基、-O-5～7元杂环烷基、-C1-C6卤代烷基、-O-C1-C6卤代烷基、-C3-C6环烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-O-(CR7R8)n-O-C1-C6烷基、-O-(CR7R8)n-O-C3-C6环烷基、-NO2、-CN、-C2-C6烯基或-C2-C6炔基，R7、R8各自独立地选自H、-C1-C6烷基或卤素，n为1或2。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个更优选实施方案中，A环为被R9取代的苯基，R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-O-C3-C6环烷基、-O-5～7元杂环烷基、-C1-C6卤代烷基、-O-C1-C6卤代烷基或-C3-C6环烷基。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个优选实施方案中，A环为被R9取代的杂芳基，R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素、-O-C3-C6环烷基、-O-5～7元杂环烷基、-C1-C6卤代烷基、-O-C1-C6卤代烷基、-C3-C6环烷基、-S-C1-C6烷基、-OH、-SH、-NO2、-CN、-COH、-COOH、-CO-C1-C6烷基、-CO2-C1-C6烷基、-CONH2或被氢、卤素、-OH、-NH2、-CN、-COH、-COOH、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基取代的苯基。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个更优选实施方案中，A环为被R9取代的噻吩基或苯并呋喃基，R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基、卤素或被氢、卤素、-OH、-NH2、-CN、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基取代的苯基。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个更优选实施方案中，A环为被R9取代的噻吩基，R9选自H、-C1-C6烷基、卤素或被氢、卤素、-OH、-NH2、-CN、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基取代的苯基。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个优选实施方案中，A环为被R9取代的杂环烷基，R9选自H、-C1-C6烷基、-O-C1-C6烷基或卤素。
在本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的一个更优选实施方案中，A环为被R9取代的2，3-二氢苯并呋喃基、2，3-二氢-1，4-苯并二恶烷基、1，3-苯并二氧五环或1，4-苯并二恶烷基，其中R9选自H、-C1-C6烷基或卤素。
在本发明中，具体优选的通式(I)化合物或其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物，包括如下：
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-甲基-6-[(5-(4-氟苯)噻吩-2-基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(2，3-二氢苯并呋喃-5-基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-苄基-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-甲基-6-[(4-异丙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-乙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二 恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-异丙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-氟-苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-异丙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-甲基-6-[(4-乙氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-乙氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-甲基-6-[(4-(S)-四氢呋喃-3-氧基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-乙氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-乙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-氟-苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-氯-苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-环戊氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇；
(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-三氟乙氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇。
本发明还提供式(II)化合物的制备方法，它包括以下的步骤：
式中，R1、R2、R3、R4、X、A环与上述通式(II)中定义相同；P为三苯甲基、叔丁基二甲基甲硅烷基或四氢吡喃基。
在碱性亲核试剂或路易斯酸存在下，对式(IV)进行脱甲基反应得到化合物(V)；对化合物(V)进行羟基保护得到化合物(VI)；用适当的烷基锂处理化合物(VI)，并与化合物(VII)反应，从而得到化合物(VIII)；接着在适当酸的存在下，使其与化合物(IX)反应，从而得到化合物(X)；通过钯催化剂存在下的接触氢化反应或在路易斯酸存在下将化合物(X)脱苄基得到本发明式(II)化合物。另外，化合物(IV)可通过例如文献(J.Med.Chem.，第53号，第3249页，2010年)中记载的方法合成，化合物(VII)可通过例如文献(Carbohydrate.Res.，第260号，第243页，1994年)中记载的方法合成。
在上述制备方法中，碱性亲核试剂包括但不限于乙硫醇钠、苯硫酚钠；路易斯酸包括但不限于三溴化硼、三氯化硼、三氯化硼-二甲基硫醚络合物、三氟化硼-二乙基硫醚络合物/乙硫醇、三氟化硼-二乙基醚络合物/二甲基硫醚；烷基锂包括但不限于正丁基锂、仲丁基锂；由化合物(IX)制备得到化合物(X)的步骤中使用的适当的酸包括但不限于硫酸、三氟乙酸；钯催化剂包括但不限于氢氧化钯、钯碳。
本发明还提供式(III)化合物的制备方法，它包括以下的步骤：
式中，R1、R2、R3、R4、A环与上述通式(III)中定义相同，n为1、2或3；P为三苯甲基、叔丁基二甲基甲硅烷基或四氢吡喃基；P1为乙酰基或叔丁基二甲基甲硅烷基；
化合物(XI)经重氮化反应，水解得到化合物(XII)；对化合物(XII)羟基进行保护得到化合物(XIII)；用适当的烷基锂处理化合物(XIII)，并与化合物(VII)反应，得到化合物(XIV)；在适当酸的存在下，化合物(XIV)与化合物(IX)反应，从而得到化合物(XV)；通过钯催化剂存在下的接触氢化反应或在路易斯酸存在下将化合物(XV)脱苄基得到化合物(XVI)；对化合物(XVI)进行羟基保护得到化合物(XVII)；再用适当的溴化剂溴化化合 物(XVII)得到化合物(XVIII)；当化合物(XX)为时，在适当的钯催化剂存在下与化合物(XVIII)进行耦合反应或当化合物(XX)为时，在氯化铜的存在下或不存在下与化合物(XVIII)进行耦合反应得到化合物(XVIII)；脱羟基保护得到本发明式(III)化合物。
在上述制备方法中，烷基锂包括但不限于正丁基锂、仲丁基锂；由化合物(XIV)制备得到化合物(XV)的步骤中使用的适当的酸包括但不限于硫酸、三氟乙酸；氢化反应中钯催化剂包括但不限于氢氧化钯、钯碳；路易斯酸包括但不限于三溴化硼、三氯化硼、三氯化硼-二甲基硫醚络合物、三氟化硼-二乙基硫醚络合物/乙硫醇、三氟化硼-二乙基醚络合物/二甲基硫醚；溴化剂包括但不限于溴、N-溴琥珀酰亚胺；耦合反应中钯催化剂包括但不限于醋酸钯、二氯化钯。
在本发明中，术语“卤素”是指氟、氯、溴、碘等，优选氟、氯、溴，更优选氯。
在本发明中，术语“C1-C6烷基”是指具有1至6个碳原子的烷基，包括，但不限于，甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、正己基、3-甲基丁基、2-甲基丁基、1-乙基丙基、4-甲基戊基、3-甲基戊基、2-甲基戊基等；优选甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基；术语“C1-C4烷基”是指具有1至4个碳原子的烷基，包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基，优选甲基、乙基、丙基或异丙基。
在本发明中，术语“-O-C1-C6烷基”是指具有1至6个碳原子的烷氧基，包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基、正己氧基、3-甲基丁氧基、2-甲基丁氧基、1-乙基丙氧基、4-甲基戊氧基、3-甲基戊氧基、2-甲基戊氧基、2-乙基丁氧基等。“-O-C1-C4烷基”包括，但不限于，甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。
在本发明中，术语“C1-C6卤代烷基”是指被一个或多个卤素，优选一至五个卤原子取代的如本文定义的C1-C6烷基，包括但不限于三氟甲基、三氟乙基、二氟甲基、1-氯-2氟乙基等。C1-C4卤代烷基包括但不限于三氟甲基、三氟乙基、二氟甲基、1-氯-2氟乙基等。
在本发明中，术语“-O-C1-C6卤代烷基”中C1-C6卤代烷基如上述描述，-O-C1-C6卤代烷基包括但不限于三氟甲基氧基、三氟乙基氧基、二氟甲基氧基、1-氯-2氟乙基氧基等。-O-C1-C4 卤代烷基包括但不限于三氟甲基氧基、三氟乙基氧基、二氟甲基氧基、1-氯-2氟乙基氧基等。
在本发明中，术语“-S-C1-C6烷基”中C1-C6烷基如上述描述，-S-C1-C6烷基包括但不限于甲硫基、乙硫基、正丙硫基、异丙硫基、正丁硫基、异丁硫基、仲硫丁基、叔丁硫基、正戊硫基、3-甲基丁硫基、2-甲基丁硫基、1-乙基丙硫基、正己硫基、4-甲基戊硫基、3-甲基戊硫基、2-甲基戊硫基、2-乙基丁硫基等。
在本发明中，术语“-CO-C1-C6烷基”中C1-C6烷基如上述描述，-CO-C1-C6烷基包括但不限于乙酰基、正丙酰基、异丙酰基、正丁酰基、异丁酰基、仲丁酰基、叔丁酰基、正戊酰基、3-甲基戊酰基、2-甲基戊酰基、2-乙基丁酰基、正己酰基、5-甲基己酰基、4-甲基己酰基、3-甲基己酰基等。
在本发明中，术语“-CO2-C1-C6烷基”中C1-C6烷基如上述描述，-CO2-C1-C6烷基包括但不限于甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、异丙氧基羰基、正丁氧基羰基、异丁氧基羰基、仲丁氧基羰基、叔丁氧基羰基、正戊氧基羰基、正己氧基羰基、3-甲基丁氧基羰基、2-甲基丁氧基羰基、1-乙基丙氧基羰基、4-甲基戊氧基羰基、3-甲基戊氧基羰基、2-甲基戊氧基羰基、2-乙基丁氧基羰基等。
在本发明中，术语“-SO-C1-C6烷基”中C1-C6烷基如上述描述，-SO-C1-C6烷基包括但不限于甲基亚硫酰基、乙基亚硫酰基、正丙基亚硫酰基、异丙基亚硫酰基、正丁基亚硫酰基、异丁基亚硫酰基、仲丁基亚硫酰基、叔丁基亚硫酰基、正戊基亚硫酰基、3-甲基丁基亚硫酰基、2-甲基丁基亚硫酰基、1-乙基丙基亚硫酰基、正己基亚硫酰基、4-甲基戊基亚硫酰基、3-甲基戊基亚硫酰基、2-甲基戊基亚硫酰基、2-乙基丁基亚硫酰基等。
在本发明中，术语“-SO2-C1-C6烷基”中C1-C6烷基如上述描述，-SO2-C1-C6烷基包括但不限于甲磺酰基、乙磺酰基、正丙基磺酰基、异丙基磺酰基、正丁基磺酰基、异丁基磺酰基、仲丁基磺酰基、叔丁基磺酰基、正戊基磺酰基、3-甲基丁基磺酰基、2-甲基丁基磺酰基、1-乙基丙基磺酰基、正己基磺酰基、4-甲基戊基磺酰基、3-甲基戊基磺酰基、2-甲基戊基磺酰基、2-乙基丁基磺酰基等。
在本发明中，术语“-O-(CR7R8)n-O-C1-C6烷基”、“-NHCO-C1-C6烷基”和“-NHSO2-C1-C6烷基”中的C1-C6烷基如上述描述。
在本发明中，烯基是指烃基团衍生出的单价基，术语“C2-C6烯基”是指含有2至6个碳原子且至少含有一个碳-碳双键的烯基，包括但不限于，乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基-2-丁烯、2-甲基-2-戊烯及类似基团。
在本发明中，炔基是指烃基团衍生出的单价基，术语“C2-C6炔基”是指含有2至6个碳原子且至少含有一个碳-碳三键的炔基，包括但不限于，乙炔基、丙炔基、1-丁炔基、2-丁炔 基及类似基团。
在本发明中，术语“环烷基”是指由单环或多环的饱和或部分未饱和的脂肪族碳环环状化合物衍生的单价基，例如C3～C8环烷基包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环辛烯基、环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基，以及C9～C12环烷基包括但不限于双环[2.2.1]庚基及双环[2.2.1]辛基等。术语“C3-C6环烷基”包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基等，优选环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
在本发明中，术语“-O-C3-C6环烷基”中C3-C6环烷基如上述描述，-O-C3-C6环烷基包括但不限于环丙基氧基、环丁基氧基、环戊基氧基、环己基氧基、环丙烯基氧基、环丁烯基氧基、环戊烯基氧基、环己烯基氧基等，优选环丙基氧基、环丁基氧基、环戊基氧基或环己基氧基。
在本发明中，术语“-SO-C3-C6环烷基”中C3-C6环烷基如上述描述，-SO-C3-C6环烷基包括但不限于环丙基亚硫酰基、环丁基亚硫酰基、环戊基亚硫酰基、环己基亚硫酰基、环丙烯基亚硫酰基、环丁烯基亚硫酰基、环戊烯基亚硫酰基、环己烯基亚硫酰基等。
在本发明中，术语“-SO2-C3-C6环烷基”中C3-C6环烷基如上述描述，-SO2-C3-C6环烷基包括但不限于环丙基磺酰基、环丁基磺酰基、环戊基磺酰基、环己基磺酰基、环丙烯基磺酰基、环丁烯基磺酰基、环戊烯基磺酰基、环己烯基磺酰基等。
在本发明中，术语“-O-(CR7R8)n-O-C3-C6环烷基”中C3-C6环烷基如上述描述。
在本发明中，术语“杂环烷基”是指饱和或部分不饱和的但非芳族的三至八个环原子的一价单环基团，优选4～7元环，其中1至4个环杂原子独立地选自O、S、N，其余环原子为碳，包括但不限于吖丁啶基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、四氢吡喃基、吡唑烷基、吡唑啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、[1，3]二氧戊环(dioxolane)、二氢吡啶基、四氢吡啶基、六氢吡啶基、噁唑啉基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑啉基、噻唑烷基、四氢噻唑基或四氢呋喃基等，术语“5～7元杂环烷基”包括但不限于吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、哌嗪基、四氢吡喃基、吡唑烷基、吡唑啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、[1，3]二氧戊环(dioxolane)、二氢吡啶基、四氢吡啶基、六氢吡啶基、噁唑啉基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑啉基、噻唑烷基、四氢噻唑基或四氢呋喃基等；或“杂环烷基”是指饱和或部分不饱和的但非芳族的五至十二个环原子的一价稠合二环基团，优选7～10元环，其中1至4个环杂原子独立地选自O、S、N，其余环原子为碳，包括但不限于2，3-二氢苯并呋喃基、2，3-二氢-1，4-苯并二恶烷基、1，3-苯并二氧五环、1，4-苯并二恶烷基、苯并噻二唑基、1，2，3，4-四氢异喹啉基等，优选2，3-二氢苯并呋喃基、2，3-二氢-1，4-苯并二恶烷基、1，3-苯并二氧五环或1，4-苯并二恶烷基。
在本发明中，术语“-O-5～7元杂环烷基”中5～7元杂环烷基如上述所述，-O-5～7元杂环 烷基包括但不限于等。
在本发明中，术语“芳基”是指芳香族环烃基，具有一或多个芳香环，稠环或非稠环的碳环系统，包括，但不限于苯基、萘基、四氢萘基、二氢茚基(indanyl)、茚基(indenyl)及类似基团，优选碳原子数为6至14个，更优选为6至10个的芳基，如苯基和萘基，更优选苯基。
在本发明中，术语“-SO-芳基”中芳基如上述描述，-SO-芳基包括但不限于苯基亚硫酰基、萘基亚硫酰基等，优选苯基亚硫酰基。
在本发明中，术语“卤代芳基”是指被一个或多个卤素，优选一至三个卤原子取代的如本文定义的芳基，包括但不限于氟代苯基、氯代苯基、溴代苯基、二氟苯基、二氯苯基、1-氟-3-氯苯基或1-氟-4-氯苯基等。
在本发明中，术语“-SO2-卤代芳基”中卤代芳基如上述描述，-SO2-卤代芳基包括但不限于等。
在本发明中，术语“-SO2-芳基”中芳基如上述描述，-SO2-芳基包括但不限于等；
在本发明中，术语“杂芳基”是指含有1至4个选自N、S或O的杂原子的5至6元单环杂芳基或其与苯环、吡啶环或吡咯环稠而成的双环式杂芳基。所述杂芳基包括但不限于呋喃基、噻吩基、吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、四唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻二唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑 啉基、吡咯[2，3-c]骈吡啶基、吡咯[3，2-c]骈吡啶基、吡咯[2，3-b]骈吡啶基、吡咯[3，2-b]骈吡啶基、吡咯[2，3-b]骈吡嗪基、吲哚啉-2-酮基，优选噻吩基、苯并呋喃基。
在本发明中，术语“-SO-杂芳基”中杂芳基如上述描述，-SO-单环杂芳基包括但不限于等。
本发明还包含通式(I)化合物在药学上可接受的盐。术语“药学上可接受的盐”是指相对无毒的本发明化合物的酸加成盐或碱加成盐。所述酸加成盐为本发明通式(I)化合物与合适的无机酸或者有机酸形成的盐，这些盐可在化合物最后的分离和提纯过程中制备，或者是使纯化的通式(I)化合物以其游离碱形式与适宜的有机酸或无机酸进行反应来制备。代表性酸加成盐包括，但不限于，氢溴酸盐、盐酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、亚硫酸盐、乙酸盐、草酸盐、戊酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、硬脂酸盐、月硅酸盐、硼酸盐、苯甲酸盐、乳酸盐、磷酸盐、磷酸氢盐、碳酸盐、碳酸氢盐、甲苯甲酸盐、柠檬酸盐、马来酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、苯甲酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、葡萄糖酸盐、乳糖酸盐和月桂基磺酸盐等。所述碱加成盐为通式(I)化合物与合适的无机碱或者有机碱形成的盐，包括例如与碱金属、碱土金属、季铵阳离子形成的盐，例如钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐、四甲基季铵盐、四乙基季铵盐等；胺盐，包括与氨(NH3)、伯胺、仲胺或叔胺形成的盐，如甲胺盐、二甲胺盐、三甲胺盐、三乙胺盐、乙胺盐等。
本发明的通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物可给药于哺乳动物包括人，可以采用口服、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)给药、局部给药(粉剂、软膏剂或滴剂等剂型)等方式。
本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物可以配制为用于口服给药的固体剂型，包括，但不限于胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂等。在这些固体剂型中，本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物作为活性成分与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，例如与柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(1)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸等；(2)粘合剂，例如羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶等；(3)保湿剂，例如，甘油等；(4)崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐和碳酸钠等；(5)缓溶剂，例如石蜡等；(6)吸收加速剂，例如，季铵 化合物等；(7)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯等；(8)吸附剂，例如，高岭土等；和(9)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物等。胶囊剂、片剂和丸剂中也可包含缓冲剂。
所述固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材料，例如肠溶衣和其他本领域公知的材料进行包衣或微囊化。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性成分的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，本发明化合物或其药学上可接受的盐也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。
本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物可以配制为用于口服给药的液体剂型，包括，但不限于药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酊剂等。除了作为活性成分的通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水和其他溶剂，增溶剂和乳化剂，例如，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油类，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油等或这些物质的混合物等。除了这些惰性稀释剂外，本发明液体剂型也可包含常规助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料等。
除了本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂等或这些物质的混合物等。
本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物可以配制为用于肠胃外注射的剂型，包括，但不限于生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液，以及用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物也可以配制为用于局部给药的剂型，包括如软膏剂、散剂、栓剂、滴剂、喷射剂和吸入剂等。作为活性成分的本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物在无菌条件下和生理上可接受的载体及任选的防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。
本发明还提供药物组合物，它含有本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物作为活性成分，以及药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂。在制备药物组合物时，通常是将本发明通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物与药学上可接受载体、赋形剂或稀释剂混合。
本发明还提供了一种预防或治疗糖尿病、高血糖症、及由它们引起的糖尿病并发症或肥胖症的方法，所述糖尿病包括I性和II型糖尿病，特别是II型糖尿病，它包括给需要治疗的患者使用0.01-50mg/kg体重/天的通式(I)表示的化合物、其药学上可接受的盐或其水合物或溶剂化物的步骤。
本发明化合物或其药学上可接受的盐可以单独给药，或者与其他药学上可接受的治疗剂联合给药，特别是与其他抗糖尿病药物组合。所述治疗剂包括但不限于：双胍类药物，如二甲双胍；噻唑烷二酮类药物，如曲格列酮，罗格列酮，吡格列酮；α-葡萄糖苷酶抑制剂，如阿卡波糖，付格列波糖，米格列醇；磺酰脲类胰岛素促分泌剂，如格列本脲，格列吡嗪，格列波脲，格列齐特，格列美脲；餐后血糖调节剂瑞格列奈等；PPARα/γ双激动剂；DPP-IV抑制剂；PTP1B抑制剂等。待组合的各成分可同时或顺序的给予，以单一制剂形式或以分开的制剂的形式给予。所述组合不仅包括本发明化合物和一种其他活性剂的组合，而且也包括本发明化合物和两种或更多种其他活性剂的组合。
试验证明，本发明化合物对人SGLT-2具有很好的抑制作用。且本发明化合物能够有效促进尿糖排泄，可用于制备治疗糖尿病的药物。
促进尿糖排泄的药效可用常规方法测定，一种优选的评价方法为检测本发明化合物对ICR小鼠尿糖排泄的影响。试验方法如下：ICR小鼠，雄性，60只，30-40g(12周龄)，按体重随机分为6组，每组10只。本发明受试化合物，纯度99.00％，用0.5％MC(甲基纤维素)配制；阳性对照物托格列净(Tofogliflozin)，纯度98.7％，用0.5％MC配制。按低、中、高三个剂量口服给药。空白对照组口服给药0.5％MC溶液。给药后放置于小鼠代谢笼内，记录给药时间，收集给药后24小时尿液。计算尿液容量并检测尿糖浓度。
数据以均值±标准差表示，采用Student-t test对数据进行统计学分析，p＜0.05即为具有统计学差异。
附图说明
附图1是ICR小鼠口服给药实施例9化合物和阳性对照药托格列净(Tofogliflozin)后24小时尿量排泄值。
附图2是ICR小鼠口服给药实施例9化合物和阳性对照药托格列净(Tofogliflozin)后24小时尿糖量排泄值。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于举例说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件， 或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则份数和百分比分别为重量份和重量百分比。
在实施例中，缩写具有其本领域公知的含义，例如n-BuLi代表正丁基锂；TrO-代表三苯基甲氧基；BnO-代表苄氧基；NBS代表N-溴琥珀酰亚胺；NEt3代表三乙胺；NaSEt代表乙硫醇钠；Ph3CCl代表三苯基氯甲烷。
具体实施方式
I.本发明化合物制备实施例
实施例1：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-甲基-6-[(5-(4-氟苯)噻吩-2-基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
通过以下几个步骤制备标题化合物
1)化合物1(b)的合成：
将1(a)(4g，10.2mmol)溶解于30ml二氯甲烷中，降温至-78度，缓慢加入三溴化硼(3.07g，12.3mmol)，控温反应1小时，自然升至室温，加入饱和碳酸氢钠终止反应，乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得1(b)粗品黄色油状物(3.8g)。
MS(ESI)：375.0[M-H]+
2)化合物1(c)的合成：
将1(b)(3.8g，10mmol)溶解于50ml二氯甲烷中，依次加入三苯基氯甲烷(2.79g，10mmol)，三乙胺(1.06g，10.5mmol)，室温反应30min，加水终止反应，饱和食盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，乙酸乙酯重结晶，得1(c)白色粉末状固体(5.0g，80.76％)。
2)化合物1(d)的合成：
在氮气流保护下，将1(c)(5.0g，8.07mmol)溶解于50ml四氢呋喃溶液中，降温至-78度，控温缓慢滴加正丁基锂的正己烷溶液(3.55ml，2.5M)。继续反应1小时后，控温缓慢滴加2，3，4，6-四苄基-D-吡喃葡萄糖酸-1，5-内酯(4.14g，8.87mmol)的四氢呋喃溶液(15ml)。控温反应1小时后，加水淬灭反应，将反应液自然升至室温。用乙酸乙酯萃取，合并有机相，经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，过滤，浓缩，得淡黄色油状物1(d)粗品(8.2g)，无需纯化可直接用于下一步反应。MS(ESI)：1102[M+Na]+
3)化合物1(e)的合成：
将1(d)(8.2g)溶解于25ml冰乙酸中，加热至80度，依次加入多聚甲醛(0.93g，31.44mmol)，浓硫酸(0.48g，5mmol)，持续反应1小时后，加入乙酸钠(0.80g，10mmol)终止反应。减压浓缩溶剂，乙酸乙酯稀释，依次用饱和碳酸氢钠，水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤， 浓缩，经柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得白色油状物1(e)(2.33g，两步收率34％)。
MS(ESI)：871.4[M+Na]+
4)化合物1的合成：
在氮气流保护下，将1(d)(2.33g，2.74mmol)，五甲基苯(6.93g，41.16mmol)溶解于50ml二氯甲烷中，降温至-78度，控温缓慢滴加三氯化硼的二氯甲烷溶液(13.7ml，1M)。继续反应4小时后，加入甲醇淬灭反应，将反应液自然升至室温，减压浓缩溶剂，乙酸乙酯稀释，依次用饱和碳酸氢钠，水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝12∶1)，得化合物1(557mg，41.2％)。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.53(dd，J＝8.7，5.3Hz，2H)，7.24(s，1H)，7.10(d，J＝3.5Hz，1H)，7.06(t，J＝8.7Hz，2H)，6.74(s，1H)，6.68(d，J＝3.5Hz，1H)，5.25(q，J＝5.5Hz，2H)，4.11(d，J＝7.7Hz，2H)，3.85(dd，J＝11.7，1.6Hz，1H)，3.78-3.68(m，4H)，3.45(t，J＝9.3Hz，1H)，2.26(s，3H).
MS(ESI)：489.2[M+1]+
实施例2：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(2，3-二氢苯并呋喃-5-基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
通过以下几个步骤制备标题化合物
1)化合物2(b)的合成：
将2(a)(2.5g，7.5mmol)溶解于10ml甲酰胺中，加入乙硫醇钠(3eq，22.5mmol)的DMF溶液 (10ml)，升温至90度，反应3小时，降至室温，加入稀盐酸终止反应，乙酸乙酯稀释，依次用饱和碳酸氢钠、水、饱和食盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得2(b)粗品黄色油状物(2g)。
MS(ESI)：317.1[M-H]+
2)化合物2(c)的合成：
将2(b)(2g，5.9mmol)溶解于50ml二氯甲烷中，依次加入三苯基氯甲烷(1.64g，5.9mmol)，三乙胺(0.63g，6.2mmol)，室温反应30min，加水终止反应，饱和食盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，乙酸乙酯重结晶，得2(c)白色粉末状固体(3.0g，87.54％)。
3)化合物2(d)的合成：
在氮气流保护下，将2(c)(3.0g，5.15mmol)溶解于30ml四氢呋喃溶液中，降温至-78度，控温缓慢滴加正丁基锂的正己烷溶液(2.27ml，2.5M)。继续反应1小时后，控温缓慢滴加2，3，4，6-四苄基-D-吡喃葡萄糖酸-1，5-内酯(3.05g，6.53mmol)的四氢呋喃溶液(15ml)。控温反应1小时后，加水淬灭反应，将反应液自然升至室温。用乙酸乙酯萃取，合并有机相，经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，过滤，浓缩，得淡黄色油状物2(d)粗品(5.5g)，无需纯化可直接用于下一步反应。MS(ESI)：1063[M+Na]+
4)化合物2(e)的合成：
将2(d)(5.5g)溶解于25ml冰乙酸中，加热至80度，依次加入多聚甲醛(0.56g，18.83mmol)，浓硫酸(0.29g，3mmol)，持续反应1小时后，加入乙酸钠(0.48g，6mmol)终止反应。减压浓缩溶剂，乙酸乙酯稀释，依次用饱和碳酸氢钠，水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤， 浓缩，经柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得白色油状物2(e)(1.37g，两步收率33％)。
MS(ESI)：871.4[M+Na]+
5)化合物2的合成：
将2(e)(1.37g，1.69mmol)溶于乙酸乙酯(6ml)和甲醇(4ml)的混合溶液中，加入催化量的氢氧化钯(59.3mg，0.84mmol)和盐酸(2d，2M)，氢气球还原反应12小时。浓缩反应液，乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝12∶1)，得化合物2。
MS(ESI)：923.2[2M+Na]+
实施例3：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-苄基-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
通过以下几个步骤制备标题化合物
1)化合物3(b)的合成：
将3(a)(10g，45.7mmol)溶于120ml乙酸溶液中，控温20度，缓慢加入到亚硝酸钠(3.7g，53.6mmol)的浓硫酸溶液(24ml)中，继续搅拌反应1小时，将反应液加入到沸腾的80％的硫酸水溶液(25ml)中，继续煮沸反应4小时。加冰淬灭反应，乙酸乙酯萃取，水洗有机相，浓缩，减压精馏得无色油状物3(b)(5.5g，54.7％)。
2)化合物3(c)的合成：
将3(b)(5.5g，29.4mmol)溶解于50ml二氯甲烷中，依次加入三苯基氯甲烷(8.2g，29.4mmol)，三乙胺(3.12g，30.88mmol)，室温反应30min，加水终止反应，饱和食盐水洗涤后，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，乙酸乙酯重结晶，得3(c)白色粉末状固体(10.2g，80.8％)。
3)化合物3(d)的合成：
在氮气流保护下，将3(c)(10.2g，23.8mmol)溶解于100ml四氢呋喃溶液中，降温至-78度，控温缓慢滴加正丁基锂的正己烷溶液(10ml，2.5M)。继续反应1小时后，控温缓慢滴加2，3，4，6-四苄基-D-吡喃葡萄糖酸-1，5-内酯(15.4g，28.5mmol)的四氢呋喃溶液(50ml)。控温反应1小时后，加水淬灭反应，将反应液自然升至室温。用乙酸乙酯萃取，合并有机相，经饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后，过滤，浓缩，得淡黄色油状物3(d)粗品(25g)，无需纯化可直接用于下一步反应。
MS(ESI)：911.4[M+Na]+
4)化合物3(e)的合成：
将3(d)(25g)溶解于100ml冰乙酸中，加热至80度，依次加入多聚甲醛(4.73g，157mmol)，浓硫酸(2.32g，23.6mmol)，持续反应1小时后，加入乙酸钠(1.94g，23.6mmol)终止反应。减压浓缩溶剂，乙酸乙酯稀释，依次用饱和碳酸氢钠，水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(石油醚∶乙酸乙酯＝10∶1)，得白色油状物3(e)(5.6g，两步收率37.8％)。MS(ESI)：681.4[M+Na]+
5)化合物3(f)的合成：
将3(e)(5.6g，8.5mmol)溶于乙酸乙酯(30ml)和甲醇(20ml)的混合溶液中，加入催化量的氢氧化钯(298.44mg，0.42mmol)和盐酸(1ml，2M)，氢气球还原反应12小时。浓缩反应液，乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝12∶1)，得化合物3(f)。
MS(ESI)：321.2[2M+Na]+
6)化合物3(g)的合成：
将3(f)(3g，10mmol)溶于10ml吡啶中，加入乙酸酐5ml，搅拌反应12小时。浓缩反应液，乙酸乙酯稀释，依次用稀盐酸，水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，乙醇重结晶，得白色粉末固体3(g)(3.2g，68％)。
MS(ESI)：389.2[M+Na]+
7)化合物3(h)的合成：
将3(g)(3.2g，6.4mmol)溶于10ml乙酸乙酯中，加入NBS(N-溴琥珀酰亚胺)(2g，12.78mmol)，偶氮二异丁腈(0.3g，1.92mmol)，加热至回流反应1小时。依次用水，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，乙醇重结晶，得白色粉末固体3(h)(2.7g，72％)。
MS(ESI)：603[M+Na]+
8)化合物3(j)的合成：
将3(h)(2.7g，4.95mmol)溶于25ml甲苯中，依次加入三苯基膦(65mg，0.25mmol)，醋酸钯(33mg，0.15mmol)，苯基硼酸3(i)(0.91g，7.4mmol)及磷酸钾(2.1g，9.9mmol)，加热至80度，搅拌10小时。在反应液中加水，乙酸乙酯稀释，饱和食盐水洗涤。无水硫酸钠干燥有机相，过滤， 浓缩，得白色油状物3(j)(1.8g)。
MS(ESI)：565.2[M+Na]+
9)化合物3的合成：
将3(j)(1.8g，3.3mmol)溶于10ml甲醇中，加入碳酸钾(0.36g，2.3mmol)，在室温下搅拌1小时。乙酸乙酯稀释，用水洗，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩，经柱层析(二氯甲烷∶甲醇＝12∶1)，得化合物3(0.56g，45％)。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.79(d，J＝2.0Hz，1H)，7.23(d，J＝8.4Hz，2H)，7.17(d，J＝8.4Hz，2H)，7.06(dd，J＝8.4，2.1Hz，1H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1H)，5.18(d，J＝5.4Hz，1H)，5.08(d，J＝5.4Hz，1H)，3.96(dd，J＝8.8，3.3Hz，1H)，3.90-3.79(m，3H)，3.79-3.68(m，3H)，3.64(d，J＝3.3Hz，1H).
MS(ESI)：397[M+Na]+
实施例4：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-甲基-6-[(4-异丙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例1中化合物1(a)合成化合物1的操作方法，以化合物4(a)为起始原料，合成并获得化合物4。
1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.18(s，1H)，7.12(d，J＝8.1Hz，2H)，7.04(d，J＝8.2Hz，2H)，6.73(s，1H)，5.27(d，J＝0.9Hz，2H)，3.93(s，2H)，3.87(dd，J＝11.5，1.7Hz，1H)，3.82-3.67(m，4H)，3.50-3.41(m，1H)，2.90-2.81(m，1H)，2.15(s，3H)，1.24(s，3H)，1.22(s，3H).
MS(ESI)：453.2[M+Na]+
实施例5：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-乙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例1中化合物1(a)合成化合物1的操作方法，以化合物5(a)为起始原料，合成并获得化合物5。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.32(s，1H)，7.14-7.07(m，4H)，6.99(s，1H)，5.28(dd，J＝15.2，5.5Hz，2H)，4.03(q，J＝15.3Hz，2H)，3.85(dd，J＝11.8，1.9Hz，1H)，3.81-3.65(m，4H)，3.49-3.41(m，1H)，3.36-3.30(m，1H)，2.61(q，J＝7.6Hz，2H)，1.22(t，J＝7.6Hz，3H).
MS(ESI)：459.1[M+Na]+
实施例6：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-异丙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例1中化合物1(a)合成化合物1的操作方法，以化合物6(a)为起始原料，合成并获得化合物6。
1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.33(s，1H)，7.19-7.06(m，4H)，6.99(s，1H)，5.28(dd，J＝11.7，5.5Hz，2H)，4.03(q，J＝15.2Hz，2H)，3.86(dd，J＝11.5，1.6Hz，1H)，3.80-3.66(m，4H)，，3.50-3.40(m，1H)，2.91-2.82(m，1H)，1.24(d，J＝6.9Hz，6H).
MS(ESI)：473.2[M+Na]+
实施例7：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-氟-苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例1中化合物1(a)合成化合物2的操作方法，以化合物7(a)为起始原料，合成并获得化合物7。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.31(s，1H)，7.17(dd，J＝8.4，5.5Hz，2H)，7.03-6.93(m，3H)， 5.26(dd，J＝17.3，5.5Hz，2H)，4.07-3.99(m，2H)，3.83(dd，J＝11.6，1.5Hz，1H)，3.80-3.64(m，4H)，3.44(t，J＝9.4Hz，1H).
MS(ESI)：449.1[M+Na]+
实施例8：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-异丙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例1中化合物1(a)合成化合物1的操作方法，以化合物8(a)为起始原料，合成并获得化合物8。
MS(ESI)：439[M+Na]+
实施例9：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-甲基-6-[(4-乙氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例2中化合物2(a)合成化合物2的操作方法，以化合物9(a)为起始原料，合成并获得化合物9。
1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.15(s，1H)，7.02(d，J＝8.7Hz，2H)，6.80(d，J＝8.7Hz，2H)，6.72(s，1H)，5.26(d，J＝0.8Hz，2H)，4.00(q，J＝7.0Hz，2H)，3.89(s，2H)，3.87(dd，J＝11.5，1.7Hz，1H)，3.81-3.67(m，4H)，3.50-3.40(m，1H)，2.15(s，3H)，1.37(t，J＝7.0Hz，3H).
MS(ESI)：433.2[M+Na]+
实施例10：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-乙氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例2中化合物2(a)合成化合物2的操作方法，以化合物10(a)为起始原料，合成并获 得化合物10。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.29(s，1H)，7.09(d，J＝8.5Hz，2H)，6.98(s，1H)，6.82(d，J＝8.6Hz，2H)，5.28(dd，J＝15.0，5.5Hz，2H)，4.05-3.94(m，4H)，3.85(dd，J＝11.7，1.6Hz，1H)，3.81-3.64(m，4H)，3.45(t，J＝9.4Hz，1H)，1.38(t，J＝7.0Hz，3H).
MS(ESI)：475.1[M+Na]+
实施例11：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-甲基-6-[(4-(S)-四氢呋喃-3-氧基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例2中化合物2(a)合成化合物2的操作方法，以化合物11(a)为起始原料，合成并获得化合物11。
MS(ESI)：497.2[M+Na]+
实施例12：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-乙氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例2中化合物2(a)合成化合物2的操作方法，以化合物12(a)为起始原料，合成并获得化合物12。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.24(d，J＝1.6Hz，1H)，7.09(s，4H)，7.06(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1H)，5.23(dd，J＝12.6，5.4Hz，2H)，3.87(s，2H)，3.84(dd，J＝11.8，1.7Hz，1H)，3.79-3.69(m，4H)，3.47(t，J＝9.4Hz，1H)，2.59(q，J＝7.6Hz，2H)，1.20(t，J＝7.6Hz，3H).MS(ESI)：441[M+Na]+
实施例13：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-乙基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例3中化合物3(a)、3(i)合成化合物3的操作方法，以化合物3(a)、13(i)为起始原料，合成并获得化合物13。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.24(d，J＝1.6Hz，1H)，7.09(s，4H)，7.06(dd，J＝8.4，1.8Hz，1H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1H)，5.23(dd，J＝12.6，5.4Hz，2H)，3.87(s，2H)，3.84(dd，J＝11.8，1.7Hz，1H)，3.79-3.69(m，4H)，3.47(t，J＝9.4Hz，1H)，2.59(q，J＝7.6Hz，2H)，1.20(t，J＝7.6Hz，3H).MS(ESI)：425[M+Na]+
实施例14：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-氟-苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例3中化合物3(a)、3(i)合成化合物3的操作方法，以化合物3(a)、14(i)为起始原料，合成并获得化合物14。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.23(d，J＝1.8Hz，1H)，7.19(dd，J＝8.4，5.5Hz，2H)，7.07(dd，J＝8.4，2.0Hz，1H)，6.97(t，J＝8.8Hz，2H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，5.23(dd，J＝14.5，5.4Hz，2H)，3.90(s，2H)，3.83(dd，J＝11.7，1.8Hz，1H)，3.80-3.66(m，4H)，3.45(t，J＝9.4Hz，1H).
MS(ESI)：414.9[M+Na]+
实施例15：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-6-[(4-氯-苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例3中化合物3(a)、3(i)合成化合物3的操作方法，以化合物3(a)、15(i)为起始原料， 合成并获得化合物15。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.24(dd，J＝9.3，5.8Hz，2H)，7.21-7.11(m，3H)，7.07(dd，J＝8.4，1.7Hz，1H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1H)，5.23(dd，J＝12.1，5.4Hz，2H)，3.91(s，2H)，3.89-3.82(m，1H)，3.82-3.64(m，4H)，3.45(t，J＝9.4Hz，1H)，.
MS(ESI)：430.9[M+Na]+
实施例16：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-环戊氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例3中化合物3(a)、3(i)合成化合物3的操作方法，以化合物16(a)、16(i)为起始原料，合成并获得化合物16。
1H NMR(600MHz，MeOD)δ7.30(s，1H)，7.08(d，J＝8.0Hz，2H)，6.98(s，1H)，6.79(d，J＝8.1Hz，2H)，5.27(dd，J＝16.1，5.1Hz，2H)，3.99(q，J＝15.3Hz，2H)，3.85(d，J＝11.5Hz，1H)，3.80-3.65(m，4H)，3.46(t，J＝9.3Hz，1H)，1.90(s，2H)，1.80(d，J＝10.7Hz，4H)，1.64(s，2H).
MS(ESI)：515.1[M+Na]+
实施例17：(2′R，3′R，4′S，5′S，6′R)-7-氯-6-[(4-三氟乙氧基苯基)甲基]-3′，4′，5′，6′-四氢-6′-(羟甲基)-螺[(1，3)苯并二恶烷-4(2H)，2′(2H)-吡喃]-3′，4′，5′-三醇
参照实施例3中化合物3(a)、3(i)合成化合物3的操作方法，以化合物16(a)、17(i)为起始原料，合成并获得化合物17。
MS(ESI)：529.1[M+Na]+
II.本发明化合物活性测试实施例
测试实施例1：本发明化合物对human SGLT-2的抑制作用
本发明实施例化合物和阳性对照物托格列净(Tofogliflozin)用DMSO稀释成20mM的母液，测试终浓度为100nM和10nM。阳性对照物托格列净参照国际专利申请WO2006/080421实施例1制备得到，纯度98.7％。
96孔板加入50μl/well 0.2％的明胶，37℃备用。将NIH3T3-hSGLT2细胞接入96孔板，40000/well，每孔100μl培养基。第二天换液一次，同时培养基中加入丁酸钠，丁酸钠终浓度为2mM。KRH-Na+溶液100μl洗细胞3次，然后50μl孵育细胞30分钟。之后去掉孵育buffer，加入50μl含受试化合物的KRH-Na+溶液和10μl uptake buffer(KRH-Na+加甲基-a-D-[U-14C]吡喃葡萄糖以及1.67mM甲基-a-D-吡喃葡萄糖苷)37℃孵育1h；非特异性吸收用KRH-乙酰胆碱溶液代替KRH-Na+。100μl PBS洗3次，烘干；50μl裂解液和150μl闪烁液，盖上膜，压平，在震荡仪上振荡混匀，4℃，1200r离心5min。取出，Perkin Elmer 1450-023读数。结果分析。计算得到实施例化合物对转运活性的抑制率。结果如下表1：
表1：各化合物分别在10nM和100nM浓度下对hSGLT2的抑制率
结果：本发明实施例化合物对hSGLT2有较好的抑制作用，同浓度下的抑制率优于阳性对照托格列净。
测试实施例2：本发明化合物对正常ICR小鼠尿糖排出的影响
实验方法：ICR小鼠，雄性，60只，30-40g(12周龄)，按体重随机分为6组，每组10只。本发明化合化合物为实施例9化合物，纯度99.00％，用0.5％MC(甲基纤维素)配制，口服给药1mg/kg、3mg/kg和10mg/kg；阳性对照物托格列净(Tofogliflozin，参照国际专利申请WO2006/080421实施例1制备得到)，纯度98.7％，用0.5％MC(甲基纤维素)配制，口服给药1mg/kg和3mg/kg。空白对照组口服给药0.5％MC溶液，给药后放置于小鼠代谢笼内，记录给药时间，收集给药后24小时的尿液。计算尿液容量并检测尿糖浓度。
数据以均值±标准差表示，采用Student-t test对数据进行统计学分析，p＜0.05即为具有统计学差异。
实施例9单次给药1mg/kg、3mg/kg和10mg/kg，可明显剂量依赖的提升24h内ICR小鼠的尿糖浓度、尿液体积和尿糖含量。各组尿量及尿糖排泄值见附图1和附图2。
结果：本发明实施例化合物能够促进尿糖排泄，且其促尿糖排出效果强于同等剂量处理的阳性对照托格列净。
在本文中提及的所有文献均通过引用被并入本申请中。此外还应指明的是，在阅读了本申请的上述公开内容之后，本领域技术人员可以无需背离本发明的精神和范围，对本发明作出各种修饰、改动或修改，但这些变化形式同样都应落于本申请所附权利要求书所记载的范围。
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