本发明涉及mps-1激酶抑制剂的前体药物衍生物，以及它们用于治疗和/或预防疾病的用途。发明背景mps-1(单极纺缍体1)激酶(亦称酪氨酸苏氨酸激酶，ttk)是双重特异性ser/thr激酶，它在有丝分裂检查点(亦称纺缍体检查点，纺缍体组装检查点)的活化过程中起到关键作用，由此确保染色体在有丝分裂期间合适分离[abrieua等人，cell,2001,106,83-93]。每个分裂的细胞必须确保复制染色体等分到两个子细胞中。一旦进入到有丝分裂期间，染色体在它们的着丝点与纺锤体的微管相连接。有丝分裂检查点是监测机构，只要存在未连接的着丝点，它就具有活性，并防止有丝分裂细胞进入分裂后期，并由此完成具有未连接的染色体的细胞分裂[suijkerbuijksjandkopsgj,biochemicaetbiophysicaacta,2008,1786,24-31;musacchioaandsalmoned,natrevmolcellbiol.,2007,8,379-93]。一旦所有的着丝点以正确的两极(amphitelic)(即，双极)方式与有丝分裂纺锤体相连接，则符合检查点要求，且细胞进入有丝分裂后期，并且通过有丝分裂。有丝分裂检查点由许多基本蛋白的复合网络组成，包括mad(有丝分裂阻滞缺陷，mad1-3)和bub(不受苯并咪唑抑制的芽殖，bub1-3)家族的成员，发动蛋白cenp-e、mps-1激酶以及其它组分，这些蛋白中的许多蛋白在增殖细胞(例如，癌细胞)和组织中过度表达[yuanb等人，clinicalcancerresearch,2006,12,405-10]。shrna-沉默、化学遗传以及mps-1激酶的化学抑制剂已经说明了mps-1激酶活性在有丝分裂检查点信号传递中的关键作用[jelluman等人，plosone,2008,3,e2415;jonesmh等人，currentbiology,2005,15,160-65;dorerrk等人，currentbiology,2005,15,1070-76;schmidtm等人，emboreports,2005,6,866-72]。有充分证据表明，降低但不完全的有丝分裂检查点功能与非整倍性和肿瘤生成有关[weaverbaandclevelanddw,cancerresearch,2007,67,10103-5;kingrw,biochimicaetbiophysicaacta,2008,1786,4-14]。与此相反，已经公认的是，有丝分裂检查点的完全抑制，能够导致严重的染色体错误分离，以及在肿瘤细胞中诱导细胞程序死亡[kopsgj等人，naturereviewscancer,2005,5,773-85;schmidtmandmedemarh,cellcycle,2006,5,159-63;schmidtmandbastiansh,drugresistanceupdates,2007,10,162-81]。因此，通过mps-1激酶或有丝分裂检查点的其它组分的药理学抑制来废除有丝分裂检查点，代表了治疗增殖病症的新方法，包括实体瘤，例如，癌和肉瘤和白血病和淋巴恶性肿瘤，或与无控的细胞增殖相关的其它病症。现有技术已经公开了对于mps-1激酶具有抑制作用的不同的化合物：wo2009/024824a1公开了2-苯胺基嘌呤-8-酮，作为mps-1的抑制剂，用于治疗增殖病症。wo2010/124826a1公开了取代的咪唑并喹喔啉化合物，作为mps-1激酶的抑制剂。wo2011/026579a1公开了取代的氨基喹喔啉，作为mps-1抑制剂。wo2011/064328a1、wo2011/063907a1、wo2011/063908a1和wo2012/143329a1涉及[1,2,4]-三唑并-[1,5-a]-吡啶与它们它们用于抑制mps-1激酶的用途。与[1,2,4]-三唑并-[1,5-a]-吡啶有关的上述专利申请主要集中于化合物抑制mps-1激酶的效果，这种效果通过化合物的半数最大抑制浓度(ic50)来表示。另外，正如本领域普通技术人员所了解的那样，很多因素决定化合物的类药性。临床前研发的目的是在人类临床试验之前评价例如安全性、毒性、药物动力学和代谢参数。评价化合物的类药性的一个重要因素是代谢稳定性。可以例如通过用肝微体(从例如大鼠、狗和/或人中获得)的悬浮液培养化合物来测定化合物的代谢稳定性(详细内容参见实验部分)。评价治疗癌症的化合物的类药性的另一个重要因素是抑制细胞增殖，例如，可以在hela细胞增殖试验中测定(详细内容参见实验部分)。给患者成功递送药物在治疗病症中也是极其重要的。使用具有已知生物活性的性质的许多临床药物受到药物的极低水溶性的限制，这使得例如难以静脉内给予活性成分。静脉内(i.v)给药是指将药物直接给予到患者静脉中的方法。i.v.给予药物的方法可以包括：通过使用注射器快速注射(推进)到静脉中来给予药物，使用i.v.支线在指定量的时间内间歇地给予药物，或给予持续地混合在主要的i.v.溶液中的药物。i.v.给予药物的主要意图是引发对于药物的快速全身性响应。它是递送药物的最快速的途径之一。身体可以立即利用药物。通过使用i.v.方法，更容易控制递送至身体的药物的实际量，并且也更容易保持药物在血液中的治疗响应水平。由于水溶性低的结果，通常将许多药物配制在共溶剂药物媒介物中，或作为前体药物。前体药物是化学转变为衍生物的活性药物，借助于化学或酶的攻击，在到达作用位点之前或之后，这种衍生物在身体内转变为母体药物。活性药物转变为非活性形式的过程被称作药物潜伏。前体药物可以是载体连接的前体药物和生物前体物。载体连接的前体药物由活性分子与转运基团的暂时连接而产生。与母体活性药物相比，这种前体药物活性更小，或没有活性。由于其无毒性并且能够确保释放具有有效动力学的活性组分而选择转运基团。而生物前体物由有效组分本身的分子改造（通过形成能够成为释放有效组分(作为代谢物)的代谢酶的底物的新分子）产生。为了改变药物动力学、提高稳定性和溶解度、降低毒性、提高特异性和/或提高药物的药理学效果的持续时间而制备前体药物。通过改变药物动力学，药物的生物利用度通过提高药物的吸收、分配、生物转化和/或排泄而得到提高。在设计前体药物的过程中，重要的是考虑下列因素∶a)载体和药物之间的连接基通常是共价键，b)与有效组分相比，前体药物是非活性的，或活性更小，c)前体药物合成不应该很昂贵，d)前体药物必须是所述药物的可逆性的或生物可逆性的衍生物，和e)载体基团必须是无毒的，并且释放时是非活性的。前体药物通常如下制备∶a)形成活性药物的酯、半酯、碳酸酯、硝酸酯、酰胺、异羟肟酸、氨基甲酸酯、亚胺、曼尼希碱和烯胺，b)用偶氮、糖苷、肽和醚官能团将药物功能化，c)使用药物的聚合物、盐、络合物、磷酰胺、缩醛、半缩醛和缩酮形式(例如，参见andrejuskorolkovas's,“essentialsofmedicinalchemistry”,pp.97-118)。因此，本发明的目的是，鉴定mps-1激酶抑制化合物或其前体药物衍生物，其特征在于：具有高度类药性，并且可以静脉内给予。本发明概述本发明涉及通式(i)的化合物∶其中∶ra代表-c(=o)-o-c(r4)(r5)-o-c(=o)-c(r3)(nh2)-r6；r1代表选自甲氧基-和2,2,2-三氟乙氧基-的基团；r2代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与r2连接的苯基环的连接点；r3代表氢原子或甲基-；r4和r5彼此独立地代表氢原子或c1-c3-烷基-；r6代表氢原子或c1-c6-烷基-；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。本发明的详细说明在本文中提到的术语具有下列含义∶术语“卤素原子”或“卤素-”是指氟、氯、溴或碘原子。术语“c1-c6-烷基-”是指具有1、2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链饱和烃基团，例如，甲基-、乙基-、丙基-、丁基-、戊基-、己基-、异丙基-、异丁基-、仲丁基-、叔丁基-、异戊基-、2-甲基丁基-、1-甲基丁基-、1-乙基丙基-、1,2-二甲丙基-、新戊基-、1,1-二甲基丙基-、4-甲基戊基-、3-甲基戊基-、2-甲基戊基-、1-甲基戊基-、2-乙基丁基-、1-乙基丁基-、3,3-二甲基丁基-、2,2-二甲基丁基-、1,1-二甲基丁基-、2,3-二甲基丁基-、1,3-二甲基丁基-或1,2-二甲基丁基-，或其异构体。尤其是，所述基团具有1、2、3或4个碳原子(“c1-c4-烷基-”)，例如，甲基-、乙基-、丙基-、丁基-、异丙基-、异丁基-、仲丁基-、叔丁基-，更尤其是1、2或3个碳原子(“c1-c3-烷基-”)，例如，甲基-、乙基-、正丙基-或异丙基-。本文使用的术语“离去基团”是指在化学反应中被替换为稳定种类(成键电子与它结合)的原子或原子团。优选，离去基团选自∶卤素，尤其是氯、溴或碘，甲磺酰氧基-、对甲苯磺酰氧基-、三氟甲磺酰基氧基-、九氟丁磺酰氧基-、(4-溴-苯)磺酰氧基-、(4-硝基-苯)磺酰氧基-、(2-硝基-苯)-磺酰氧基-、(4-异丙基-苯)磺酰氧基-、(2,4,6-三异丙基-苯)-磺酰氧基-、(2,4,6-三甲基苯)磺酰氧基-、(4-叔丁基-苯)磺酰氧基-、苯磺酰氧基-和(4-甲氧基-苯)磺酰氧基-。本文使用的术语“pg1”是指羟基的保护基，例如，t.w.greene和p.g.m.wuts在protectivegroupsinorganicsynthesis(第三版，wiley1999)中所描述的tms基团或tbdps基团(tms=三甲基甲硅烷基，tbdps=叔丁基二苯基甲硅烷基)。本文使用的术语“pg2”是指氨基的保护基，例如，t.w.greene和p.g.m.wuts在protectivegroupsinorganicsynthesis(第三版，wiley1999)中所描述的boc基团(boc=叔丁氧羰基)。本发明涉及通式(i)的化合物∶其中∶ra代表-c(=o)-o-c(r4)(r5)-o-c(=o)-c(r3)(nh2)-r6；r1代表选自甲氧基-和2,2,2-三氟乙氧基-的基团；r2代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与r2连接的苯基环的连接点；r3代表氢原子或甲基-；r4和r5彼此独立地代表氢原子或c1-c3-烷基-，r6代表氢原子或c1-c6-烷基-；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。ra代表r6-c(r3)(nh2)-c(=o)-o-c(r4)(r5)-o-c(=o)-。在一个优选实施方案中，ra代表选自下列的基团∶r6-c(r3)(nh2)-c(=o)-o-ch2-o-c(=o)-，r6-c(r3)(nh2)-c(=o)-o-c(h)(ch3)-o-c(=o)-和r6-c(r3)(nh2)-c(=o)-o-c(h)(c(h)(ch3)2)-o-c(=o)-。在另一个优选实施方案中，ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点。在另一个优选实施方案中，ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点。在另一个优选实施方案中，ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点。r1代表选自甲氧基-和2,2,2-三氟乙氧基-的基团。在一个优选实施方案中，r1代表2,2,2-三氟乙氧基-。在另一个优选实施方案中，r1代表甲氧基-。r2代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与r2连接的苯基环的连接点。在一个优选实施方案中，r2代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与r2连接的苯基环的连接点。在另一个优选实施方案中，r2代表其中，“*”表示与r2连接的苯基环的连接点。在另一个优选实施方案中，r2代表其中，“*”表示与r2连接的苯基环的连接点。在另一个优选实施方案中，r2代表-s(=o)2ch3基团。r3代表氢原子或甲基-。在一个优选实施方案中，r3代表氢原子。在另一个优选实施方案中，r3代表甲基-。r4和r5彼此独立地代表氢原子或c1-c3-烷基-。在一个优选实施方案中，r4和r5彼此独立地代表氢原子或甲基-或异丙基-。在另一个优选实施方案中，r4代表氢原子或c1-c3-烷基-，且r5代表氢原子。在另一个优选实施方案中，r4代表氢原子或甲基-或异丙基-，且r5代表氢原子。在另一个优选实施方案中，r4和r5各自代表氢原子。在另一个优选实施方案中，r4代表甲基-，且r5代表氢原子。在另一个优选实施方案中，r4代表异丙基-，且r5代表氢原子。在另一个优选实施方案中，r4代表氢原子或c1-c3-烷基-。在另一个优选实施方案中，r4代表氢原子或甲基-。在另一个优选实施方案中，r4代表氢原子。在另一个优选实施方案中，r4代表甲基-。在另一个优选实施方案中，r5代表氢原子。r6代表氢原子或c1-c6-烷基-。在一个优选实施方案中，r6代表c1-c6-烷基-。在另一个优选实施方案中，r6代表氢原子或c1-c4-烷基-。在另一个优选实施方案中，r6代表c1-c4-烷基-。在另一个优选实施方案中，r6代表选自下列的基团∶异丙基、叔丁基和h3c-ch2-c(h)(ch3)-。在上述方面的进一步实施方案中，本发明涉及呈其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物形式的按照任一个上述实施方案的式(i)的化合物。应该理解，本发明还涉及上述优选实施方案的任何组合。在下文中，给出一些组合的例子。然而，本发明不局限于这些组合。在一个优选实施方案中，本发明涉及上述式(i)的化合物，其中∶ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点；r1代表选自甲氧基-和2,2,2-三氟乙氧基-的基团；和r2代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与r2连接的苯基环的连接点；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。在另一个优选实施方案中，本发明涉及式(ia)、(ib)、(ic)、(id)、(ie)或(if)的化合物∶其中∶ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。在另一个优选实施方案中，本发明涉及式(ia)的化合物∶其中∶ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。在另一个优选实施方案中，本发明涉及式(ib)的化合物∶其中∶ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。在另一个优选实施方案中，本发明涉及式(ic)的化合物∶其中∶ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。在另一个优选实施方案中，本发明涉及式(id)的化合物∶其中∶ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。在另一个优选实施方案中，本发明涉及式(ie)的化合物∶其中∶ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。在另一个优选实施方案中，本发明涉及式(if)的化合物∶其中∶ra代表选自下列的基团∶其中，“*”表示与ra连接的氮原子的连接点；或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，或它们的混合物。应该理解，本发明涉及上述通式(i)的化合物的本发明的任何实施方案或方面范围内的任何子组合。更尤其是，本发明覆盖公开在下文的实施例部分中的通式(i)的化合物。本发明还包括本发明化合物的所有合适的同位素变体。本发明化合物的同位素变体定义为：至少一个原子被原子序数相同但原子量不同于自然界中通常或主要发现的原子量的原子替代的本发明的化合物。可以掺入进本发明的化合物中的同位素的例子分别包括下列的同位素：氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘，例如2h(氘)、3h(氚)、11c、13c、14c、15n、17o、18o、32p、33p、33s、34s、35s、36s、18f、36cl、82br、123i、124i、129i和131i。本发明化合物的某些同位素变体，例如，掺入一个或多个放射性同位素(例如，3h或14c)的那些变体，可用于药物和/或底物组织分配研究。尤其优选氚化的和碳14(即，14c)同位素，这是由于它们容易制备和具有可检测性。进一步的，用同位素(例如，氘)取代，由于代谢稳定性更大，例如，体内半衰期增加，或剂量要求降低，所以，可以提供某些治疗优势，并由此在一些情况下可以是优选的。通常可以利用本领域技术人员已知的常规方法来制备本发明化合物的同位素变体，例如，利用下文实施例所描述的说明性方法或制备例，使用合适试剂的合适的同位素变体。进一步的，本发明的化合物可以以n-氧化物形态存在，其定义为：本发明化合物的至少一个氮被氧化。本发明包括所有这种可能的n-氧化物。本发明还涉及本文公开的化合物的有用形式，例如，水合物、溶剂化物、盐，尤其是可药用盐，以及共沉淀。本发明的化合物可以以水合物或溶剂化物形态存在，其中，本发明的化合物含有极性溶剂，尤其是水、甲醇或乙醇，例如，作为化合物的晶格的结构要素。极性溶剂（尤其是水）的量可以以化学计量或非化学计量的比例存在。在化学计量的溶剂化物的情况下，例如，水合物，可以分别是半(部分)、一、一倍半、二、三、四、五溶剂化物或水合物，等等。本发明包括所有这种水合物或溶剂化物。进一步的，本发明的化合物可以游离形式存在，例如，作为游离碱或游离酸或两性离子，或可以以盐形式存在。所述盐可以是药学通常使用的任何盐，为有机或无机加成盐，尤其是任何可药用有机或无机加成盐。术语“可药用盐”是指本发明化合物的相对无毒的无机或有机酸加成盐。例如，参见s.m.berge等人，“pharmaceuticalsalts,”j.pharm.sci.1977,66,1-19。本发明化合物的合适的可药用盐可以是，例如，链或环中携带氮原子的本发明化合物，例如，足够碱性的本发明化合物的酸加成盐，例如，与无机酸形成的酸加成盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、bisulfuricacid、磷酸或硝酸，或与有机酸形成的酸加成盐，所述有机酸例如甲酸、乙酸、乙酰乙酸、丙酮酸、三氟乙酸、丙酸、丁酸、己酸、庚酸、十一烷酸、月桂酸、苯甲酸、水杨酸、2-(4-羟基苯甲酰基)-苯甲酸、樟脑酸、肉桂酸、环戊丙酸、二葡糖酸、3-羟基-2-萘酸、烟酸、双羟萘酸、果胶酯酸、过硫酸、3-苯基丙酸、苦味酸、新戊酸、2-羟基乙磺酸、衣康酸、氨基磺酸、三氟甲磺酸、十二烷基硫酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、甲磺酸、2-萘磺酸、萘二磺酸、樟脑磺酸、柠檬酸、酒石酸、硬脂酸、乳酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、苹果酸、己二酸、藻朊酸、马来酸、富马酸、d-葡糖酸、扁桃酸、抗坏血酸、葡庚酸、甘油磷酸、天冬氨酸、磺基水杨酸、半硫酸或硫氰酸。进一步的，足够酸性的本发明化合物的其它合适的药用盐是碱金属盐，例如，钠或钾盐，碱土金属盐，例如，钙或镁盐，铵盐，或与提供生理学可接受的阳离子的有机碱形成的盐，例如，与下列有机碱形成的盐：n-甲基-葡糖胺、二甲基-葡糖胺、乙基-葡糖胺、赖氨酸、二环己基胺、1,6-己二胺、乙醇胺、氨基葡糖、肌氨酸、丝氨醇、三羟基-甲基-氨基甲烷、氨基丙二醇、sovak碱、1-氨基-2,3,4-丁三醇。另外，按照本发明的化合物可以与季铵离子形成盐，季铵离子可例如用下列试剂将含有碱性氮的基团季铵化获得：低级烷基卤化物，例如，甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物；硫酸二烷基酯，例如，硫酸二甲基、二乙基、二丁基和二戊基酯；长链卤化物，例如，癸基、月桂基、十四烷基和硬脂酰氯化物、溴化物和碘化物；芳烷基卤化物，例如，苄基和苯乙基溴化物，等等。合适的季铵离子的实例是四甲铵、四乙铵、四(正丙基)铵、四(正丁基)铵或n-苄基-n,n,n-三甲基铵。本领域技术人员将会进一步认识到，请求保护的化合物的酸加成盐，可以通过许多已知的方法中的任何方法，通过所述化合物与合适的无机或有机酸的反应来制备。或者，通过各种已知的方法，通过本发明的化合物与合适的碱的反应，制备酸性的本发明化合物的碱金属和碱土金属盐。本发明包括所有可能的本发明化合物的盐，可以是单一盐，或所述盐的任何比例的任何混合物。此外，本发明包括本发明化合物的所有可能的结晶形式，或多晶型物，可以是单一多晶型物，或任何比例的多于一种的多晶型物的混合物。按照另一个方面，本发明覆盖制备本发明的化合物的方法，所述方法包括本文实验部分中描述的步骤。本发明还涉及含有一或多种本发明化合物的药物组合物。可以使用这些组合物，通过给予需要其的患者，获得目标药理学效果。对本发明来说，患者是需要治疗具体病症或疾病的哺乳动物，包括人。因此，本发明包括由可药用载体和药学有效量的本发明化合物或其盐组成的药物组合物。优选，可药用载体是在符合活性组分的有效活性的浓度下对患者相对无毒和无害的载体，使得载体所产生的任何副作用不会损害活性组分的有利效果。优选，化合物的药学有效量是对所治疗的具体病症产生效果或产生影响的量。还可以胃肠外给予本发明的化合物，即，皮下、静脉内、眼内、滑膜内、肌肉内或腹膜间给药，所述化合物的可注射剂量在优选的生理学可接受的稀释剂与药物载体中，它们可以是无菌的液体或液体的混合物，例如，水、盐水、葡萄糖水溶液和相关的糖溶液、醇，例如乙醇、异丙醇或十六醇，二醇，例如丙二醇或聚乙二醇，甘油缩酮，例如2,2-二甲基-1,1-二氧戊环-4-甲醇，醚，例如聚(乙二醇)400，油、脂肪酸、脂肪酸酯或脂肪酸甘油酯，或乙酰化的脂肪酸甘油酯，加入或不加入药用表面活性剂，例如，皂或洗涤剂，悬浮剂，例如果胶、卡波姆、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素或羧甲纤维素，或乳化剂及其它药物佐剂。本发明的肠胃外组合物在溶液中典型地含有大约0.5%至大约25%重量的活性组分。还可以有利地使用防腐剂和缓冲剂。为了最小化或消除在注射位点的刺激性，这种组合物可以含有亲水亲油平衡值(hlb)优选为大约12至大约17的非离子型表面活性剂。优选，在这种制剂中，表面活性剂的量在大约5重量%至大约15重量%的范围。表面活性剂可以是具有上述hlb的单一组分，或可以是两种或更多种具有目标hlb的组分的混合物。在肠胃外制剂中使用的表面活性剂的例子是聚乙烯脱水山梨糖醇脂肪酸酯类型，例如，脱水山梨糖醇单油酸酯，以及氧化乙烯与疏水性基质(由氧化丙烯与丙二醇缩合形成)的高分子量加合物。药物组合物可以是无菌的可注射水悬剂形式。可以按照已知的方法配制这种混悬剂，使用合适的分散剂或润湿剂和悬浮剂，例如，羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟基丙基甲基-纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶和阿拉伯胶；分散剂或润湿剂，其可以是天然存在的磷脂，例如，卵磷脂，氧化烯与脂肪酸的缩合产物，例如，聚氧乙烯硬脂酸脂，氧化乙烯与长链脂族醇的缩合产物，例如，十七碳-乙烯氧基鲸蜡醇，氧化乙烯与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，例如，聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯，或氧化乙烯与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如，聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。无菌可注射制剂还可以是在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液剂或混悬剂。可以使用的稀释剂和溶剂是，例如，水、林格溶液、等渗氯化钠溶液和等渗葡萄糖溶液。按照本发明的药物组合物可以举例说明如下∶无菌i.v.溶液剂∶可以使用无菌的注射用水来制备本发明目标化合物的5mg/ml溶液，如有必要，调节ph值。用无菌5%葡萄糖稀释该溶液，达到给药浓度1-2mg/ml，并用大约60分钟进行i.v.输液给药。正如上文所叙述的那样，已经发现，化合物a有效地抑制mps-1，并因此可以用于治疗或预防无控的细胞生长、增殖和/或存活、不合适的细胞免疫响应或不合适的细胞炎症性响应的疾病，或伴有无控的细胞生长、增殖和/或存活、不合适的细胞免疫响应或不合适的细胞炎症性响应的疾病，尤其是mps-1介导的无控的细胞生长、增殖和/或存活、不合适的细胞免疫响应或不合适的细胞炎症性响应的疾病，例如，血液肿瘤、实体瘤和/或其转移灶，例如，白血病和骨髓增生异常综合征、恶性淋巴瘤、头和颈肿瘤，包括脑瘤和脑转移灶，胸部肿瘤，包括非小细胞和小细胞肺肿瘤，胃肠肿瘤、内分泌肿瘤、乳腺及其它妇科肿瘤、泌尿科肿瘤，包括肾、膀胱和前列腺肿瘤，皮肤肿瘤和肉瘤和/或其转移灶。因此，按照另一个方面，本发明覆盖本文所描述和所定义的通式(i)的化合物或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，尤其是其可药用盐，或它们的混合物，其用于治疗或预防上文提到的疾病。因此，本发明的另一个具体方面是上文所描述的通式(i)的化合物，或其n-氧化物、水合物、溶剂化物或盐，尤其是其可药用盐，或它们的混合物用于预防或治疗疾病的用途。因此，本发明的另一个具体方面是上文所描述的通式(i)的化合物用于制备药物组合物的用途，所述药物组合物用于治疗或预防疾病。在本发明的背景内，尤其是在本文使用的“不合适的细胞免疫响应或不合适的细胞炎性响应”的背景内，优选，术语“不合适的”被理解为优选是指小于或大于正常响应的响应，并且与所述疾病的病理学有关、对所述疾病的病理学有责任或导致所述疾病的病理学。本发明涉及使用本发明化合物和其组合物来治疗哺乳动物的过度增殖病症的方法。可以使用化合物，使细胞增殖和/或细胞分裂得到抑制、阻断、减少、降低等等，和/或使细胞程序死亡。该方法包括：给予需要这种方法的哺乳动物(包括人)有效治疗病症的量的本发明的化合物，或其可药用盐、异构体、多晶型物、代谢物、水合物、溶剂化物或酯，等等。过度增殖病症包括但不局限于，例如，牛皮癣、瘢痕疙瘩及影响皮肤的其它增生，良性前列腺增生(bph)，实体瘤，例如，乳房、呼吸道、脑、生殖器官、消化道、泌尿道、眼睛、肝、皮肤、头和颈、甲状腺、甲状旁腺的癌症，以及它们的远端转移灶。那些病症还包括淋巴瘤、肉瘤和白血病。乳腺癌的例子包括但不局限于：侵入性导管癌，侵入性小叶癌，导管原位癌和小叶原位癌。呼吸道癌症的例子包括但不局限于：小细胞和非小细胞肺癌，以及支气管腺瘤和胸膜肺的胚细胞瘤。脑癌的例子包括但不局限于：脑干和下丘脑胶质瘤、小脑和大脑星形细胞瘤、髓母细胞瘤、室管膜瘤，以及神经外胚层和松果体瘤。男性生殖器官肿瘤包括但不局限于前列腺和睾丸癌症。女性生殖器官的肿瘤包括但不局限于：子宫内膜、子宫颈、卵巢、阴道和外阴癌，以及子宫的肉瘤。消化道肿瘤包括但不局限于：肛门、结肠、结肠直肠、食道、胆囊、胃、胰腺、直肠、小肠和唾腺癌。泌尿道的肿瘤包括但不局限于：膀胱、阴茎、肾脏、肾盂、输尿管、尿道和人类乳头状的肾癌。眼癌包括但不局限于眼内黑素瘤和视网膜母细胞瘤。肝癌的例子包括但不局限于：肝细胞癌(有或者没有纤维板层变体的肝细胞癌)、胆管细胞癌(肝内胆管癌)和混合的肝细胞胆管细胞癌。皮肤癌包括但不局限于：鳞状细胞癌、卡波济氏肉瘤、恶性黑色素瘤、merkel细胞皮肤癌和非黑素瘤皮肤癌。头和颈癌包括但不局限于：喉、下咽、鼻咽、口咽癌、唇和口腔和鳞状细胞癌。淋巴瘤包括但不局限于：aids相关的淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、皮肤t细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、霍奇金氏病和中枢神经系统的淋巴瘤。肉瘤包括但不局限于：软组织的肉瘤、骨肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、淋巴肉瘤和横纹肌肉瘤。白血病包括但不局限于：急性骨髓性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病和毛细胞白血病。这些病症已经在人类中进行了很好的表征，但在其它哺乳动物中也存在类似的病因，并且可以通过给予本发明的药物组合物来治疗它们。整个文档所陈述的术语“治疗”是通常使用的术语，例如，为了抵御、减轻、降低、解除、改善疾病或病症，例如，癌的状况等，对对象进行管理或护理。本发明还提供了治疗与异常丝裂原胞外激酶活性相关的病症的方法，所述病症包括但不限于：中风、心力衰竭、肝肿大、心肥大、糖尿病、阿尔茨海默氏病、囊性纤维化、异种移植物排斥症状、脓毒性休克或哮喘。有效量的本发明化合物可用于治疗这种病症，包括上面背景部分中提到的那些疾病(例如，癌症)。尽管如此，这种癌症及其它疾病可以用本发明的化合物治疗，与激酶和病症之间的作用机理和/或关系无关。短语“异常激酶活性”或“异常丝氨酸-苏氨酸激酶活性”包括编码激酶的基因或它编码的多肽的任何异常表达或活性。这种异常活性的例子包括但不局限于：基因或多肽的过度表达；基因扩增；引起组成性活性或活动亢进的激酶活性的突变；基因突变、缺失、替换、添加，等等。本发明还提供了抑制激酶活性，尤其是丝裂原胞外激酶的活性的方法，所述方法包括：给予有效量的本发明的化合物，包括其盐、多晶型物、代谢物、水合物、溶剂化物、前体药物(例如，酯)，以及其非对映异构体形式。可以在细胞中(例如，体外)或在哺乳动物对象（尤其是需要治疗的人类患者）的细胞中抑制激酶活性。式(i)的前体药物化合物的通用合成下列段落概述了适合于制备式(i)化合物的合成途径，如下列反应路线所示。除了如下所述的途径之外，按照有机合成领域技术人员的普通常识，还有其它的途径可以用于合成目标化合物。因此，下列反应路线列举的转化顺序不是限制性的，可以将各个反应路线的合适的合成步骤组合，形成其它的合成顺序。另外，可以在示范性转化之前和/或之后，使任何所示的取代基相互转化。这些改变可以是，例如，官能团的还原或氧化、卤化、金属化、金属催化的偶联反应、取代或本领域技术人员已知的其它反应。这些转化包括引入能够使取代基进一步相互转化的官能团的那些转化。尤其是，下面的合成路线包括保护基的引入和断裂。合适的保护基和它们的引入和断裂为本领域技术人员所熟知(参见，例如，t.w.greene和p.g.m.wuts，protectivegroupsinorganicsynthesis，第四版，wiley2006)；更具体地说，例如，保护基包括诸如pg1(如上所定义的羟基的保护基)和pg2(如上所定义的氨基的保护基)的基团。后面的段落中描述了具体实例。进一步的，可以进行两个或更多个连续的步骤，不用在所述步骤之间进行后处理，例如，“一锅”反应，这对本领域技术人员来说是众所周知的。反应路线1概述了由式(v)的中间体来合成通式(i)的化合物，其中，r1和r2如通式(i)的化合物所定义。如实验部分所述，可以制备中间体(v)。在合适的溶剂中，例如，醚，例如，四氢呋喃，利用合适的碱，例如，氢化钠，将中间体(v)去质子化，并随后与式(vi)的氯甲酸酯反应，其中，r4和r5如通式(i)的化合物所定义，且lg代表如上所定义的离去基团，优选，氯，得到氨基甲酸酯(vii)。式(vi)的氯甲酸酯为本领域技术人员所熟知，并且在一些情况下可以商购。在合适的溶剂中，例如，n,n-二甲基甲酰胺，使所述氨基甲酸酯(vii)与式(viii)的羧酸盐反应，其中，pg2代表如上所定义的氨基的保护基，例如，叔丁氧羰基(boc)、苄氧羰基(z)或对甲氧苯甲基(pmb)，其中，m+代表一价阳离子，例如，碱金属阳离子或铵盐，优选，铯，得到式(ix)的中间体。这种取代还可以在催化量的碘化物盐(例如，碘化钠或碘化钾)的存在下进行，由此离去基团lg原位转化为碘化物。或者，在取代反应之前，离去基团lg可以转化为碘化物。然后，使中间体(ix)与硼酸衍生物(x)进行suzuki偶联，其中，re代表氢或彼此独立地代表c1-c6-烷基-，或一起形成-c2-c6-亚烷基-，例如，-c(ch3)2-c(ch3)2-。suzuki偶联为本领域技术人员所熟知；优选，使用二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦和乙酸钯或pd2dba3作为配体/催化剂，磷酸钾一水合物或磷酸钾作为碱，以及甲苯或n-甲基吡咯烷或甲苯和n-甲基吡咯烷的混合物作为溶剂，进行这种偶联。随后，将偶联产物(xi)脱保护(如果需要的话)，例如，用盐酸处理，除去boc基团，得到通式(i)的化合物。通常将通式(i)的化合物分离为盐，优选，分离为hcl盐或tfa盐。反应路线1∶由中间体(v)合成式(i)的前体药物化合物实验部分下列表格列出了该段落和实施例部分中使用的缩写。nmr峰形与它们在光谱中出现的峰形一样，没有考虑可能的更高级别的效果。缩写含义ac乙酰基binap2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘boc叔丁氧羰基br宽峰brett-phos2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2'-4'-6'-三异丙基-1,1'-联苯c-环-1-氯乙基氯甲酸酯氯甲酸1-氯乙酯氯甲基氯甲酸酯氯甲酸氯甲基酯d双峰dd双二重峰dcm二氯甲烷dme1,2-二甲氧基乙烷dipe二异丙基醚dipean,n-二异丙基乙胺dmfn,n-二甲基甲酰胺dmso二甲亚砜dppf1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁eq当量esi电喷雾电离hatun-[(二甲基氨基)(3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基氧基)亚甲基]-n-甲基甲铵六氟磷酸盐hünig碱n,n-二异丙基乙胺m多重峰m.p.熔点：℃ms质谱mw分子量naotbu叔丁醇钠；2-甲基丙-2-醇化钠nmpn-甲基吡咯烷酮nmr核磁共振光谱∶化学位移(δ)以ppm给出。pdcl2(pph3)2二氯双(三苯基膦)钯(ii)pd(dba)2双(二亚苄基丙酮)钯(0)络合物pd2(dba)3三-(二亚苄基丙酮)二钯(0)氯仿络合物pd(dppf)cl2二氯[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(ii)pd(dppf)cl2.ch2cl2二氯[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(ii)二氯甲烷加合物pd-brett-phos-pre-cat氯代[2-(二环己基膦基)-3,6-二甲氧基-2'-4'-6'-三-异丙基-1,1'-联苯][2-(2-氨乙基)苯基]钯(ii)pd-tbu-x-phos-pre-cat氯代(2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2-氨乙基)苯基]钯(ii)pd-x-phos-pre-cat氯代(2-二环己基膦基-2',4',6'-三-异丙基-1,1'-联苯)[2-(2-氨乙基)苯基]钯(ii)甲基叔丁基醚加合物pph3三苯基膦p(otol)3三邻甲苯基膦q四重峰quin五重峰rac外消旋的rt室温r.t.室温rt保留时间，分钟s单峰s-phos二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦t三重峰tbaf四丁基氟化铵tbu-x-phos2-二叔丁基膦基-2',4',6'-三-异丙基-1,1'-联苯tbdps叔丁基二苯基甲硅烷基tbtun-[(1h-苯并三唑-1-基氧基)(二甲基氨基)亚甲基]-n-甲基甲铵四氟硼酸盐tea三乙胺tfa三氟乙酸thf四氢呋喃tms三甲基甲硅烷基ts对甲苯磺酰基；(甲苯磺酰基)uplc超高效液相色谱x-phos2-二环己基膦基-2',4',6'-三异丙基联苯按照本发明的方法制备的化合物和中间体可能需要纯化。有机化合物的纯化为本领域技术人员所熟知，并且可以有若干途径来纯化同一化合物。在某些情况下，不需要纯化。在某些情况下，可以通过结晶来纯化化合物。在某些情况下，可以使用合适的溶剂来搅拌出杂质。在某些情况下，可以通过色谱纯化化合物，尤其是快速色谱，例如，使用预先填充的硅胶柱，例如，从separtis获得的柱，例如，与合适的色谱系统(例如，flashmasterii(separtis)或isolera系统(biotage))结合的isolute®快速硅胶(硅胶色谱)或isolute®快速nh2硅胶(氨基相-硅胶色谱)，并且洗脱液为，例如，己烷/乙酸乙酯或dcm/甲醇的梯度。在某些情况下，可以用制备型hplc纯化所述化合物，例如，使用waters自动纯化器，其配备有二极管阵列检测器和/或在线电喷雾电离质谱仪，与合适的预先填充的反相柱结合，并且洗脱液为，例如，水和乙腈的梯度，其可以包含添加剂，例如，三氟乙酸、甲酸或氨水。按照常规方法，例如，使用旋光性的酸或碱，形成非对映异构体的盐，或形成共价非对映体，将外消旋混合物拆分，可以获得旋光异构体。合适的酸的例子是酒石酸、二乙酰基酒石酸、二甲苯酰酒石酸和樟脑磺酸。利用本领域已知的方法，例如，色谱或分步结晶，基于它们的物理和/或化学差异，可以将非对映异构体的混合物分离为它们的单一非对映异构体。然后，从分离的非对映体的盐中释放出旋光性的碱或酸。分离旋光异构体的不同方法包括：在进行或不进行常规衍生化的条件下，使用最佳地选择以最大化分离对映异构体的手性色谱(例如，手性hplc柱)。diacel生产合适的手性hplc柱，例如，chiracelod和chiraceloj，还有许多其它的手性hplc柱，都是通常可选择的柱。在进行或不进行衍生化的条件下的酶分离也是有用的。使用旋光性的起始原料，通过手性合成，也可以获得本发明的旋光性的化合物。在本文中，尤其是在实验部分中，对于本发明的中间体和实施例的合成，当化合物是与相应的碱或酸形成的盐时，通过相应的制备和/或提纯方法获得的所述盐形式的确切化学计量组成在大多数情况下是未知的。除非具体说明，否则，化学名称或结构式的后缀，例如，“盐酸盐”、“三氟乙酸盐”、“钠盐”或“xhcl”、“xcf3cooh”、“xna+”，应理解为不是化学计量的详述，而仅仅是作为盐形式。这类似地应用于已经通过所描述的制备和/或纯化方法获得溶剂化物形式（例如，化学计量组成未知的水合物(如果定义的话)）的合成中间体或实施例化合物或其盐的情况。使用acdlabs的程序´acd/namebatchversion12.01´，产生实施例和中间体的iupac命名，并且如果需要的话进行了修改。如下进行分析型uplc-ms∶lc-ms方法∶方法1∶仪器∶watersacquityuplcmszq4000；柱∶acquityuplcbehc181.7µm，50x2.1mm；洗脱液a∶水+0.05vol%甲酸，洗脱液b∶乙腈+0.05vol%甲酸，梯度∶0-1.6分钟，1-99%b；1.6-2.0分钟，99%b；流速∶0.8ml/min；温度∶60℃；注射∶2µl；dad扫描∶210-400nm；elsd。方法2∶仪器∶watersacquityuplc-mssqd3001；柱∶acquityuplcbehc181.7µm，50x2.1mm；洗脱液a∶水+0.1vol%甲酸(95%)，洗脱液b∶乙腈，梯度∶0-1.6分钟，1-99%b；1.6-2.0分钟，99%b；流速∶0.8ml/min；温度∶60℃；注射∶2µl；dad扫描∶210-400nm；elsd。方法3∶仪器∶watersacquityuplcmssqd；柱∶acquityuplcbehc181.7µm，50x2.1mm；洗脱液a∶水+0.05vol%甲酸(95%)，洗脱液b∶乙腈+0.05vol%甲酸(95%)，梯度∶0-1.6分钟，1-99%b；1.6-2.0分钟，99%b；流速∶0.8ml/min；温度∶60℃；注射∶2µl；dad扫描∶210-400nm；elsd。方法4∶仪器∶watersacquityuplc-mssqd；柱∶acquityuplcbehc181.750x2.1mm；洗脱液a∶水+0.1vol%甲酸(95%)，洗脱液b∶乙腈；梯度∶0-1.6分钟，1-99%b；1.6-2.0分钟，99%b；流速∶0.8ml/min；温度∶60℃；注射∶2µl；dad扫描∶210-400nm；elsd。方法5∶仪器∶watersacquityuplcmssqd3001；柱∶acquityuplcbehc181.7µm，50x2.1mm；洗脱液a∶水+0.2vol%氨(32%)，洗脱液b∶乙腈，梯度∶0-1.6分钟，1-99%b；1.6-2.0分钟，99%b；流速∶0.8ml/min；温度∶60℃；注射∶2µl；dad扫描∶210-400nm；elsd。方法6仪器∶watersacquityuplc-mssqd；柱∶acquityuplcbehc181.7，50x2.1mm；洗脱液a∶水+0.2%vol氨(32%)，洗脱液b∶乙腈；梯度∶0-1.6分钟，1-99%b；1.6-2.0分钟，99%b；流速∶0.8ml/min；温度∶60℃；注射∶2µl；dad扫描∶210-400nm；elsd。方法7仪器∶watersacquityuplc-mszq；柱∶acquityuplcbehc181.7，50x2.1mm；洗脱液a∶水+0.1%vol甲酸(99%)，洗脱液b∶乙腈；梯度∶0-1.6分钟，1-99%b；1.6-2.0分钟，99%b；流速∶0.8ml/min；温度∶60℃；注射∶2µl；dad扫描∶210-400nm；elsd。方法8∶仪器∶watersacquityuplcmssqd；柱∶acquityuplcbehc181.7µm，50x2.1mm；洗脱液a∶水+0.2%vol氨(32%)，洗脱液b∶乙腈，梯度∶0-1.6分钟，1-99%b；1.6-2.0分钟，99%b；流速∶0.8ml/min；温度∶60℃；注射∶2µl；dad扫描∶210-400nm；elsd。中间体实施例01.01.[(4-氯代吡啶-2-基)硫代氨基甲酰基]氨基甲酸乙酯将乙氧羰基异硫氰酸酯(11.1g)加入到2-氨基-4-氯吡啶(10.1g)的二噁烷(100ml)搅拌溶液中。将该混合物在室温下搅拌2小时。沉淀出白色固体。加入己烷(25ml)，过滤收集白色固体，得到8.0g标题化合物。真空浓缩该溶液，并将残余物用乙酸乙酯重结晶，进一步得到8.5g标题化合物。中间体实施例01.02.7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺将羟基氯化铵(13.9g)悬浮在甲醇(70ml)中，并在室温下加入乙醇(65ml)和hünig碱(21.1ml)。将该混合物加热至60℃，分批加入[(4-氯代吡啶-2-基)硫代氨基甲酰基]氨基甲酸乙酯(9.0g)，并将该混合物在60℃下搅拌2小时。真空除去溶剂，并加入水(150ml)。过滤收集固体，用乙醇洗涤，并真空干燥。硅胶色谱，得到4.2g标题化合物。1h-nmr(300mhz,dmso-d6),δ[ppm]=6.14(2h),6.92(1h),7.50(1h),8.55(1h)。中间体实施例01.03.{4-[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)氨基]-3-甲氧基苯基}(3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮向7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(190mg)的甲苯(7ml)和nmp(0.7ml)的搅拌悬浮液中加入(4-溴-3-甲氧基苯基)(3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(373mg)、氯代(2-二环己基膦基-2',4',6'-三-异丙基-1,1'-联苯)[2-(2-氨乙基)苯基]钯(ii)甲基叔丁基醚加合物(28mg)、x-phos(16mg)和粉末状的磷酸钾一水合物(0.60g)，并将烧瓶脱气两次，并用氩气反填充。将该混合物加热至回流，保持16小时。加入半饱和的碳酸钾溶液，并将该混合物用二氯甲烷和甲醇的混合物萃取。干燥(硫酸钠)有机相，并真空除去溶剂。过滤该混合物，并真空浓缩。硅胶色谱，得到120mg标题化合物。1h-nmr(300mhz,dmso-d6),δ[ppm]=3.91(3h),3.94-4.80(4h),5.26-5.59(1h),7.15(1h),7.23-7.33(2h),7.82(1h),8.21-8.36(1h),8.46(1h),8.85(1h)。中间体实施例01.04.7-氯-n-[2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基][1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺类似于制备中间体实施例01.03的方法，从7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(300mg)和1-溴-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯(543mg)起始，制备中间体实施例01.04。产率∶236mg标题化合物。1h-nmr(300mhz,dmso-d6),δ[ppm]=3.18(3h),3.97(3h),7.17(1h),7.44(1h),7.53(1h),7.86(1h),8.43(1h),8.75(1h),8.87(1h)。中间体实施例01.05.7-氯-n-[4-(甲磺酰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基][1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺类似于制备中间体实施例01.03的方法，从7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(100mg)和1-溴-4-(甲磺酰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯(227mg)起始，制备中间体实施例01.05。产率∶50mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=3.19(3h),5.00(2h),7.18(1h),7.58-7.71(2h),7.86(1h),8.44(1h),8.70(1h),8.81-8.92(1h)。中间体实施例01.06.{4-[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)氨基]-3-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}(3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮类似于制备中间体实施例01.03的方法，从7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(250mg)和[4-溴-3-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基](3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(607mg)起始，制备中间体实施例01.06。产率∶198mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=3.93-4.72(4h),4.93(2h),5.32-5.55(1h),7.16(1h),7.36-7.43(2h),7.83(1h),8.27-8.33(1h),8.41(1h),8.81-8.90(1h)。中间体实施例01.07.氮杂环丁烷-1-基{4-[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)氨基]-3-甲氧基苯基}甲酮类似于制备中间体实施例01.03的方法，从7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(190mg)和氮杂环丁烷-1-基(4-溴-3-甲氧基苯基)甲酮(350mg)起始，制备中间体实施例01.07。产率∶130mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=2.27(2h),3.88-3.94(3h),3.97-4.47(4h),7.15(1h),7.23-7.31(2h),7.83(1h),8.28(1h),8.42(1h),8.79-8.93(1h)。中间体实施例02.01.rac-2-(4-氟苯基)丙酸甲酯在-78℃，向二异丙胺(13.0g)的四氢呋喃(160ml)搅拌溶液中加入正丁基锂的己烷溶液(51.4ml；c=2.5m)。将该溶液在0℃下搅拌15分钟。将该溶液冷却至-78℃，并加入溶于四氢呋喃(40ml)中的(4-氟苯基)乙酸甲酯(18.0g)溶液。将该溶液在-78℃下搅拌30分钟。在-78℃，加入甲基碘(10.0ml)，并将该溶液在1小时内升温至0℃。加入水，并将该反应混合物用乙酸乙酯提取。干燥(硫酸钠)有机相，并真空除去溶剂。硅胶色谱，得到18.9g标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]=1.34(d,3h),3.55(s,3h),3.79(q,1h),7.08-7.15(m,2h),7.25-7.32(m,2h)。中间体实施例02.02.rac-2-(4-氟苯基)丙酸向中间体实施例02.01.(18.9g)的乙醇(200ml)搅拌溶液中加入溶于水(200ml)中的氢氧化钾(35g)溶液。将该混合物在0℃下搅拌4小时。加入盐酸(c=4.0m)，直到达到ph5为止，并将该反应混合物用乙酸乙酯萃取。分离有机相，并真空除去溶剂，得到15.64g标题产物。粗品不进一步纯化，直接使用。1h-nmr(300mhz,dmso-d6):δ[ppm]=1.31(d,3h),3.66(q,1h),7.05-7.15(m,2h),7.24-7.33(m,2h),12.30(s,1h)。中间体实施例02.03.(2r)-2-(4-氟苯基)丙酸向中间体实施例02.02.(23.6g)的回流的乙酸乙酯(250ml)搅拌溶液中加入(1s)-1-苯基乙胺(17.35g)的乙酸乙酯溶液。将该混合物在1小时内冷却至室温。过滤收集白色固体，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥，得到27.5g固体。将固体用400ml回流的乙酸乙酯重结晶。将该混合物冷却至室温。过滤收集白色固体，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥，得到18.3g固体。将固体用回流的乙酸乙酯(350ml；300ml)重结晶两次。过滤收集白色固体，用乙酸乙酯洗涤，真空干燥，得到10.51g固体。将固体溶于水中，加入盐酸(c=2.0m)，直到达到ph5为止，并将该反应混合物用二氯甲烷萃取。干燥(硫酸钠)有机相，并真空除去溶剂，得到5.6g标题产物。粗品不进一步纯化，直接使用。1h-nmr(300mhz,dmso-d6):δ[ppm]=1.31(d,3h),3.66(q,1h),7.05-7.16(m,2h),7.24-7.33(m,2h),12.28(br.s.,1h)。[α]d20：-79.3°(在dmso中)用分析型手性hplc测定对映体的纯度∶柱∶chiralceloj-h150x4.6；流速∶1.00ml/min；溶剂∶a∶己烷，b∶2-丙醇，含有0.1%甲酸；溶剂混合物∶80%a+20%b。运行时间∶30分钟。保留时间∶3.41分钟；uv254nm；对映体的比例∶99.8%∶0.2%。中间体实施例02.04.(2r)-2-(4-氟苯基)-n-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]丙酰胺向4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(1.0g)的dmf(45ml)和二氯甲烷(90ml)搅拌溶液中加入碳酸氢钠(766mg)、(2r)-2-(4-氟苯基)丙酸(844mg)和hatu(2.6g)。将该混合物在室温下搅拌4小时。加入水，并将该混合物搅拌30分钟。加入半饱和的碳酸氢钠溶液，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。用饱和氯化钠溶液洗涤有机相，干燥(硫酸钠)，并真空除去溶剂。硅胶色谱，得到1.53g标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=1.23(12h),1.37(3h),3.74-3.87(1h),7.06-7.16(2h),7.31-7.42(2h),7.51-7.61(4h),10.12(1h)。中间体实施例02.05.(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)硼酸向(4-氨基苯基)硼酸盐酸盐(2.00g)的dmf(42ml)搅拌溶液中加入碳酸氢钠(2.9g)、(2r)-2-(4-氟苯基)丙酸(2.04g)和hatu(6.58g)。将该混合物在室温下搅拌72小时。加入水(140ml)，并将混合物搅拌2小时。过滤收集白色沉淀，用水洗涤，真空干燥，得到2.86g标题化合物。1h-nmr(300mhz,dmso-d6),δ[ppm]=1.39(3h),3.84(1h),7.08-7.21(2h),7.35-7.44(2h),7.52(2h),7.69(2h),7.88(2h),10.07(1h)。中间体实施例02.06.(2r)-n-[4-(2-氨基[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基)苯基]-2-(4-氟苯基)丙酰胺向7-溴[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(100mg；cas-rn[882521-63-3]；可从allichemllc，usa；baltimore，md商购；制备描述在wo2010/020363a1中)的1-丙醇(3ml)搅拌溶液中加入碳酸钾溶液(0.7ml，c=2m)、(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)硼酸(202mg)、三苯基膦(12mg)和pdcl2(pph3)2(33mg)。将该混合物加热至回流，保持16小时。进一步加入三苯基膦(12mg)和pdcl2(pph3)2(33mg)，并将该混合物加热至回流，保持另外4小时。通过氨基相-硅胶柱过滤该反应混合物，并真空除去溶剂。硅胶色谱，得到150mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=1.42(3h),3.86(1h),5.97(2h),7.08-7.25(3h),7.35-7.49(2h),7.58(1h),7.63-7.83(4h),8.53(1h),10.21(1h)。参比实施例01.01.(2r)-2-(4-氟苯基)-n-[4-(2-{[2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基)苯基]丙酰胺向(2r)-n-[4-(2-氨基[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基)苯基]-2-(4-氟苯基)丙酰胺(100mg)的甲苯(4ml)和nmp(0.2ml)搅拌悬浮液中加入1-溴-2-甲氧基-4-(甲磺酰基)苯(106mg)、氯代(2-二环己基膦基-2',4',6'-三-异丙基-1,1'-联苯)[2-(2-氨乙基)苯基]钯(ii)甲基-叔丁基醚加合物(22mg)、x-phos(13mg)和粉末状的磷酸钾一水合物(283mg)，并将烧瓶脱气两次，并用氩气反填充。将该混合物加热至回流，保持16小时。过滤该混合物，并真空浓缩。硅胶色谱，而后制备型反相hplc，得到10mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=1.44(3h),3.20(3h),3.88(1h),4.00(3h),7.12-7.24(2h),7.40-7.50(4h),7.56(1h),7.75(2h),7.86(2h),7.92(1h),8.52(1h),8.63(1h),8.86(1h),10.28(1h)。参比实施例01.02.(2r)-n-{4-[2-({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-甲氧基苯基}氨基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基]苯基}-2-(4-氟苯基)丙酰胺向{4-[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)氨基]-3-甲氧基苯基}(3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(110mg)的甲苯(4.0ml)和nmp(0.4ml)搅拌悬浮液中加入(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)硼酸(126mg)、粉末状的磷酸钾一水合物(248mg)、二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(24mg)和pd(oac)2(6.6mg)，并将烧瓶脱气两次，并用氩气反填充。将该混合物加热至回流，保持2小时。过滤该反应混合物，并真空除去溶剂。氨基相硅胶色谱，得到固体，将固体与乙醚一起研磨，得到150mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=1.44(3h),3.82-3.98(4h),3.98-4.77(4h),5.31-5.59(1h),7.18(2h),7.24-7.35(2h),7.37-7.50(3h),7.75(2h),7.80-7.95(3h),8.29-8.48(2h),8.83(1h),10.27(1h)。参比实施例01.03.(2r)-n-{4-[2-({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基]苯基}-2-(4-氟苯基)丙酰胺类似于制备参比实施例01.02的方法，从{4-[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)氨基]-3-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}(3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(70mg)和(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)硼酸(61mg)起始，制备参比实施例01.03。产率∶73mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=1.44(3h),3.89(1h),3.96-4.76(4h),4.96(2h),5.34-5.59(1h),7.13-7.22(2h),7.39-7.48(5h),7.75(2h),7.81-7.87(2h),7.89(1h),8.28(1h),8.38-8.44(1h),8.84(1h),10.28(1h)。参比实施例01.04.(2r)-2-(4-氟苯基)-n-(4-{2-[(6-甲氧基-1,1-二氧代-2,3-二氢-1-苯并噻吩-5-基)氨基][1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基}苯基)丙酰胺类似于本文所描述的方法，可以制备参比实施例01.04的化合物。参比实施例01.05.(2r)-2-(4-氟苯基)-n-[4-(2-{[4-(甲磺酰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基)苯基]丙酰胺类似于制备参比实施例01.02的方法，从7-氯-n-[4-(甲磺酰基)-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基][1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(50mg)和(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)硼酸(51mg)起始，制备参比实施例01.05。产率∶20mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=1.42(3h),3.19(3h),3.87(1h),5.02(2h),7.12-7.20(2h),7.39-7.46(3h),7.62-7.67(2h),7.74(2h),7.81-7.88(2h),7.91(1h),8.53(1h),8.60(1h),8.85(1h),10.27(1h)。参比实施例01.06.(2r)-n-[4-(2-{[4-(氮杂环丁烷-1-基羰基)-2-甲氧基苯基]氨基}[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-7-基)苯基]-2-(4-氟苯基)丙酰胺类似于制备参比实施例01.02的方法，从氮杂环丁烷-1-基{4-[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)氨基]-3-甲氧基苯基}甲酮(120mg)和(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)硼酸(144mg)起始，制备参比实施例01.06。产率∶30mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6),δ[ppm]=1.42(3h),2.25(2h),3.82-3.94(4h),4.03(2h),4.36(2h),7.12-7.20(2h),7.22-7.29(2h),7.35-7.46(3h),7.73(2h),7.80-7.89(3h),8.29(1h),8.33(1h),8.81(1h),10.26(1h)。中间体实施例intp01.01(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基){4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基甲酸氯甲酯在室温下，向{4-[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基)氨基]-3-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}(3-氟氮杂环丁烷-1-基)甲酮(120mg)的thf(6ml)和nmp(2.8ml)搅拌溶液中加入氢化钠(55%w/w，在油中；59mg)，并将该混合物搅拌15分钟。在0℃，加入氯甲酸氯甲酯(61µl)，并将该混合物在室温下搅拌1小时。加入半饱和的氯化铵溶液，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。干燥(硫酸钠)有机相，并真空除去溶剂。硅胶色谱，得到75mg标题化合物。中间体实施例intp01.02(2s)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3,3-二甲基丁酸铯向n-(叔丁氧羰基)-3-甲基-l-缬氨酸(4.08g)的甲醇(36ml)搅拌溶液中加入碳酸铯水溶液，直到达到ph7为止(大约2.85g碳酸铯，在36ml水中)，并将该溶液搅拌30分钟。真空除去溶剂，加入甲苯，并再次真空除去溶剂，得到6.34g标题化合物。中间体实施例intp01.03n-(叔丁氧羰基)-3-甲基-l-缬氨酸{[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基){4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基甲酰基]氧基}甲酯向(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基){4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基甲酸氯甲酯(70mg)的dmf(3.0ml)搅拌溶液中加入(2s)-2-[(叔丁氧羰基)氨基]-3,3-二甲基丁酸铯(109mg)，并将该混合物在室温下搅拌72小时。加入半饱和的氯化铵溶液，并将该混合物用乙酸乙酯萃取。用饱和氯化钠溶液洗涤有机相，干燥(硫酸钠)，并真空除去溶剂。硅胶色谱，得到68mg标题化合物。中间体实施例intp01.04n-(叔丁氧羰基)-3-甲基-l-缬氨酸[({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}[7-(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基]氨基甲酰基)氧基]甲酯向n-(叔丁氧羰基)-3-甲基-l-缬氨酸{[(7-氯代[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基){4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}氨基甲酰基]氧基}甲酯(65mg)的甲苯(1.6ml)和nmp(0.16ml)搅拌溶液中加入(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)硼酸(34.5mg)、粉末状的磷酸钾一水合物(68mg)、二环己基(2',6'-二甲氧基联苯-2-基)膦(6.6mg)和乙酸钯(3.6mg)，并将烧瓶脱气两次并用氩气反填充。将该混合物加热至100℃，保持20分钟。通过硅胶柱过滤该反应混合物并真空除去溶剂，得到固体，将固体与己烷和二氯甲烷的混合物一起研磨，得到47mg标题化合物。本发明的化合物实施例1.1.3-甲基-l-缬氨酸[({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}[7-(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基]氨基甲酰基)氧基]甲酯盐酸盐向n-(叔丁氧羰基)-3-甲基-l-缬氨酸[({4-[(3-氟氮杂环丁烷-1-基)羰基]-2-(2,2,2-三氟乙氧基)苯基}[7-(4-{[(2r)-2-(4-氟苯基)丙酰基]氨基}苯基)[1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶-2-基]氨基甲酰基)氧基]甲酯(44mg)的二氯甲烷(1ml)和甲醇(0.3ml)搅拌溶液中加入盐酸的二噁烷溶液(0.24ml；c=4.0m)。将该混合物在室温下搅拌2小时。真空除去溶剂。将固体残余物与二氯甲烷和己烷的混合物一起研磨三次，每次除去溶剂，并将固体真空干燥，得到32mg标题化合物。1h-nmr(400mhz,dmso-d6):δ[ppm]=0.94-1.01(m,9h),1.41(d,3h),3.82-3.96(m,2h),3.99-4.19(m,1h),4.31-4.69(m,3h),4.83(q,2h),5.33-5.56(m,1h),5.85(d,1h),5.95(d,1h),7.11-7.19(m,2h),7.33-7.47(m,5h),7.52(dd,1h),7.71-7.85(m,4h),7.97(d,1h),8.44(d,3h),8.86(d,1h),10.38(s,1h)。lc-ms(方法2)：rt=1.15min；ms(esipos)m/z=838[m+h]+。生物试验∶增殖试验在96孔微滴定板中，将培养的肿瘤细胞(mcf7，激素依赖性人乳腺癌细胞，atcchtb22；nci-h460，人非小细胞肺癌细胞，atcchtb-177；du145，激素非依赖性人前列腺癌细胞，atcchtb-81；hela-matu，人宫颈癌细胞，epo-gmbh，berlin；hela-matu-adr，多药耐受性人宫颈癌细胞，epo-gmbh，berlin；hela人宫颈肿瘤细胞，atccccl-2；b16f10小鼠黑素瘤细胞，atcccrl-6475)铺板在200μl它们各自的生长培养基(补充了10%胎牛血清)中，密度为5000个细胞/孔(mcf7，du145，hela-matu-adr)、3000个细胞/孔(nci-h460，hela-matu，hela)或1000个细胞/孔(b16f10)。24小时之后，将一个板(零点板)的细胞用结晶紫染色(参见下文)，同时，用新的培养基(200μl)替代其它板的培养基，向其中加入各个浓度的试验物质(0μm，并且在0.01-30μm范围内；溶剂二甲亚砜的最后浓度是0.5%)。在试验物质的存在下，将细胞培养4天。通过用结晶紫将细胞染色，测定细胞增殖∶在室温下，每个测点加入20μl的11%戊二醛(glutaricaldehyde)溶液，使细胞固定15分钟。将固定的细胞用水洗涤三个循环之后，将板在室温下干燥。通过每个测点加入100μl的0.1%结晶紫溶液(ph3.0)，将细胞染色。将染色的细胞用水洗涤三个循环之后，将板在室温下干燥。通过每个测点加入100μl的10%乙酸溶液，使染料溶解。利用光度法(波长595nm)，测定吸光度（extinction）。相对于零点板的消光值(=0%)和未经处理的(0μm)细胞的消光值(=100%)，将测定值归一化，由此计算细胞数量变化的百分比。通过4参数拟合法，测定ic50值。上述参比实施例的特征在于下列在hela细胞增殖试验(如上所述)中测定的ic50值∶参比实施例细胞增殖的抑制，细胞系∶helaic5001.01.≤200nm01.02.≤100nm01.03.≤100nm01.05.≤100nm01.06.≤100nmmps-1激酶试验人类激酶mps-1磷酸化生物素化的底物肽。利用从作为供体的铕标记的抗磷酸丝氨酸/苏氨酸抗体至作为受体的交联别藻蓝蛋白(sa-xlent)标记的抗生蛋白链菌素的时间分辨荧光共振能量转移(tr-fret)，检测磷酸化的产物。检验化合物对于激酶活性的抑制作用。使用n-末端gst标记的人类全长重组mps-1激酶(购买于invitrogen，karslruhe，germany，cat.nopv4071)。作为激酶反应的底物，使用氨基酸序列pwdpddaditeilg(c-末端呈酰胺形式，购买于biosynthangmbh，berlin)的生物素化的肽。对于该试验，将50nl试验化合物在dmso中的100倍浓缩溶液吸到黑色低容量384孔微孔板(greinerbio-one，frickenhausen，germany)中，加入2μlmps-1的试验缓冲剂溶液[0.1mm原钒酸钠，10mmmgcl2，2mmdtt，25mmhepes（ph7.7），0.05%bsa，0.001%pluronicf-127]，并将该混合物在22℃下培养15分钟，使试验化合物在开始激酶反应之前与mps-1预先结合。然后，通过加入3μl16.7腺苷-三磷酸(atp，16.7μm=>在5μl试验体积中的最终浓度是10μm)和肽底物(1.67μm=>在5μl试验体积中的最终浓度是1μm)的试验缓冲剂溶液使激酶反应开始，并将得到的混合物在22℃下培养60分钟的反应时间。针对酶批次的活性，调节mps-1在该试验中的浓度，并进行合适地选择，使试验在线性范围内进行，典型的酶浓度在大约1nm(在5μl试验体积中的最终浓度)范围之内。通过加入3µl的htrf检测试剂溶液(100mmhepes（ph7.4），0.1%bsa，40mmedta，140nm抗生蛋白链菌素-xlent[#61gstxlb，fa.cisbiointernational，marcoule，france]，1.5nm抗磷酸(ser/thr)-铕-抗体[#ad0180，perkinelmerlas，rodgau-jügesheim，germany]使反应停止。将得到的混合物在22℃下培养1小时，使磷酸化的肽与抗磷酸(ser/thr)-铕-抗体结合。随后，通过测定从铕标记的抗磷酸(ser/thr)抗体至抗生蛋白链菌素-xlent的共振能量转移，评估磷酸化底物的量。因此，在viewluxtr-fret读数器(perkinelmerlas，rodgau-jügesheim，germany)中测定在350nm激发之后在620nm和665nm的荧光发射。“空白校正的归一化比值”(viewlux具体读数，与665nm和622nm发射的常规比例相似，其中，在计算比例之前，从665nm信号中减去空白和eu-供体串扰)作为磷酸化底物的量的量度。将数据归一化(没有抑制剂的酶反应=0%抑制，所有其它试验组分但没有酶=100%抑制)。在相同微孔板上，在20μm至1nm范围内的10个不同浓度下(20μm、6.7μm、2.2μm、0.74μm、0.25μm、82nm、27nm、9.2nm、3.1nm和1nm，在试验之前，以100倍浓度的储备溶液水平通过连续的1:3稀释制备的稀释系列)，对试验化合物进行检验，每个浓度的数值一式两份，并通过4参数拟合，计算ic50值。上述参比实施例的特征在于下列在mps-1激酶试验(如上所述)中测定的下述ic50值∶参比实施例mps-1抑制，ic50(用10µmatp的试验)01.01.≤1nm01.02.≤1nm01.03.≤1nm01.05.≤1nm01.06.≤1nm纺缍体组装检查点试验纺缍体组装检查点保证染色体在有丝分裂期间的合适分离。一旦进入到有丝分裂期间，染色体开始缩合，同时伴随有丝氨酸10上的组蛋白h3的磷酸化。丝氨酸10上的组蛋白h3的去磷酸化在分裂后期开始，并在分裂末期的初期结束。相应地，可以使用丝氨酸10上的组蛋白h3的磷酸化，作为细胞在有丝分裂中的标志。诺考达唑是使微管不稳定的物质。由此，诺考达唑妨碍微管动力学，并且将纺缍体组装检查点调动起来。细胞停滞在有丝分裂的g2/m过渡阶段，并在丝氨酸10上出现磷酸化的组蛋白h3。mps-1抑制剂对纺缍体组装检查点的抑制会忽略在诺考达唑的存在下的有丝分裂阻滞，并且细胞过早地完成有丝分裂。这种变化通过具有在丝氨酸10上的组蛋白h3的磷酸化的细胞的减少而检测。这种减少用作测定本发明化合物诱导有丝分裂突破的能力的标志。在384孔微孔板中，将培养的人类宫颈肿瘤细胞系hela(atccccl-2)的细胞铺板在20μl补充有1%(v/v)谷氨酰胺、1%(v/v)青霉素、1%(v/v)链霉素和10%(v/v)胎牛血清的dulbeco's培养基(w/o酚红，w/o丙酮酸钠，w1000mg/ml葡萄糖，w吡哆辛)中，密度为2500个细胞/孔。在37℃下培养过夜之后，将10µl/孔诺考达唑加入到细胞中，最后浓度为0.1µg/ml。培养24小时之后，在细胞周期进展的g2/m期使细胞停滞。加入各种浓度(0μm，以及在0.005μm-10μm范围内；溶剂dmso的最后浓度是0.5%(v/v))的溶解在二甲亚砜(dmso)中的试验化合物。在试验化合物的存在下，将细胞在37℃下培养4小时。而后，在4℃，将细胞固定在4%(v/v)于磷酸盐缓冲盐水(pbs)中的多聚甲醛中过夜，然后，在室温下，在0.1%(v/v)于pbs中的tritonxtm100中进行可渗透化处理20分钟，并在在室温下，在0.5%(v/v)于pbs中的牛血清白蛋白(bsa)中封闭15分钟。用pbs洗涤之后，将20µl/孔的抗体溶液(抗磷酸组蛋白h3克隆3h10，fitc；upstate，cat#16-222；1:200稀释物)加入到细胞中，并在室温下培养2小时。然后，用pbs洗涤细胞，将20µ/孔的hoechst33342染料溶液(5µg/ml)加入到细胞中，并将细胞在室温下、在暗处培养12分钟。用pbs洗涤细胞两次，然后用pbs覆盖，并在4℃下保存，直到分析为止。用perkinelmeroperatm高含量分析读数器获得图像。使用细胞周期应用模块，用moleculardevices的图像分析软件metaxpresstm分析图像。在该试验中，测定标记hoechst33342和丝氨酸10上的磷酸化的组蛋白h3二者。hoechst33342标记dna，并且用于计数细胞数。丝氨酸10上的磷酸化组蛋白h3的染色用于测定有丝分裂细胞的数目。mps-1的抑制降低在诺考达唑的存在下的有丝分裂细胞的数目，这表示不合适的有丝分裂进展。利用四参数逻辑回归分析，进一步分析原始试验数据，测定每个试验化合物的ic50值。在ph7.4的缓冲剂中的稳定性将0.3mg试验化合物溶解在0.1ml二甲亚砜和0.4ml乙腈中。为了完全溶解，将含有样品溶液的hplc管瓶超声处理大约20秒钟。然后，加入1.0ml缓冲溶液，并将样品在超声波浴中再次处理。制备缓冲溶液∶用millipore水将90g氯化钠、13.61g磷酸二氢钾和83.35g的1m氢氧化钠溶液补充至1升，而后1:10稀释。在37℃，在24小时期间内，用hplc分析10µl的样品溶液部分，测定试验化合物的量。峰面积(百分数)用于定量。hplc方法∶agilent1100，带有dad(g1315b)、二元泵(g1312a)、自动进样器(g1329a)、柱加热炉(g1316a)、恒温器(g1330b)；柱∶kromasil100c18，250mmx4mm，5µm；柱温∶37℃；洗脱液a∶水+5ml高氯酸/升，洗脱液b∶乙腈。梯度∶0min98%a,2%b→0-3.0min85%a,15%b→3.0-8.0min50%a,50%b→8.0-16.0min50%a,50%b→16.0-20.0min10%a,90%b→20.0-21.010%a,90%b→21.0-24.0min98%a,2%b→24.0-25.0min98%a,2%b；流速∶1.5ml/min；uv检测∶210nm。对于代表性的实施例，不同时点的峰面积(f)相对于开始点的峰面积的比例示于表1中∶表1∶在ph7.4的缓冲剂中的稳定性实施例编号24小时之后的试验化合物%[f(t=24h)x100/f(t=0h)]1.1.0.0在大鼠和人血浆中的体外稳定性(hplc检测)将1mg试验化合物溶于1.25ml二甲亚砜中。然后，加入1.25ml水。将0.5ml该样品溶液与0.5ml肝素化的和37℃的温热血浆(wistar大鼠血浆或人血浆)混合。立即获取第一个样品(10µl)，进行hplc分析。在开始培养之后的至多4小时的时间内，在30、60、90、120和240分钟之后，进一步获取10µl等分试样，测定试验化合物的量。hplc方法∶agilent1100，带有dad(g1315a)、二元泵(g1312a)、自动进样器(g1329a)、柱加热炉(g1316a)、恒温器(g1330b)；柱∶kromasil100c18，250mmx4mm，5µm；柱温∶45℃；洗脱液a∶水+5ml高氯酸/升，洗脱液b∶乙腈。梯度∶0min98%a,2%b→0-3.0min85%a,15%b→3.0-8.0min55%a,45%b→8.0-16.0min55%a,45%b→16.0-20.0min10%a,90%b→20.0-21.010%a,90%b→21.0-24.0min98%a,2%b→24.0-25.0min98%a,2%b；流速∶1.5ml/min；uv检测∶222nm。各个时间点的峰面积(f)相对于起始时间的峰面积的比例表示残余的母体化合物，由此表示在所描述的实验条件下的稳定性。表2∶在大鼠血浆中的体外稳定性实施例编号4小时之后的试验化合物%[f(t=24h)x100/f(t=0h)]1.1.0.0表3∶在人血浆中的体外稳定性实施例编号4小时之后的试验化合物%[f(t=24h)x100/f(t=0h)]1.1.0.0测定体外代谢稳定性(包括肝脏体内血液清除率(cl)和最大口服生物利用度(fmax)的计算)在0.5mg/ml的蛋白浓度下和在37℃，将1µm的试验化合物用肝微体在100mm磷酸盐缓冲剂(ph7.4，nah2po4xh2o+na2hpo4x2h2o)中的悬浮液培养，由此测定试验化合物的体外代谢稳定性。通过加入含有1.2mgnadp、3iu葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、14.6mg葡萄糖-6-磷酸和4.9mgmgcl2的辅因子混合物(在磷酸盐缓冲剂中，ph7.4)使反应活化。在培养过程中，有机溶剂限于<0.2%的二甲亚砜(dmso)和<1%的甲醇。在培养期间，连续地摇动微粒体的悬浮液，并在2、8、16、30、45和60分钟获取等分样品，向其中立即加入相同体积的冷甲醇。将样品在-20℃下冷冻过夜，随后在3000rpm下离心15分钟，并利用agilent1200hplc系统(带有lcms/ms检测)分析上清液。利用浓度-时间曲线，测定试验化合物的半衰期。利用半衰期，计算内在清除率。对于不同的物种，结合附加参数(肝血流量、具体肝重和微粒体的蛋白含量)，计算肝脏的体内血液清除率(cl)和最大口服生物利用度(fmax)。使用下列参数值∶肝血流量：1.3l/h/kg(人)、2.1l/h/kg(狗)、4.2l/h/kg(大鼠)；具体肝重：21g/kg(人)、39g/kg(狗)、32g/kg(大鼠)；微粒体的蛋白含量：40mg/g。所描述的试验只反映了微粒体的i相代谢，例如，通常为细胞色素p450酶和黄素单加氧酶(fmo)的氧化还原反应以及酯酶的水解反应(酯和酰胺)。当前第1页12