C1酯酶抑制剂融合蛋白及其用途的制作方法

相关申请的交叉引用本申请要求2014年10月31日提交的美国临时专利申请序列号62/073657的优先权，所述美国临时专利申请的公开内容据此以引用的方式整体并入本文。背景c1-抑制剂(c1-inh)，也称为c1酯酶抑制剂，是丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin)蛋白质超家族的最大成员。它是一种被大量糖基化的丝氨酸蛋白酶抑制剂，具有抑制补体系统的自发性活化的主要功能。c1-inh调控补体级联系统，在调控接触(激肽释放酶(kallikrein)-激肽(kinin))放大级联方面起关键作用，并且参与调控凝血和纤维蛋白溶解系统。karnaukhova,e.,c1-esteraseinhibitor:biologicalactivitiesandtherapeuticapplications.jhematolthrombdis,1:113(2013)。受试者中c1-inh功能异常和/或缺陷已与归因于c1-inh未能抑制补体系统的活化的多种自体免疫疾病相关联。此类疾病的一实例是遗传性血管性水肿(hae)，这是一种特征在于炎症不可预测且反复发作的罕见但潜在危急生命的病症。hae发作的症状包括自发出现或由轻微创伤触发的面部、口腔和/或气道肿胀。此类肿胀也可出现在身体任何部分中。在一些情况下，hae与低血浆水平的c1抑制剂相关，而在其它情况下，该蛋白质以正常量或升高量进行循环，但它是功能异常的。除炎症发作之外，这也可导致更严重或危急生命的适应症，诸如自体免疫疾病或红斑狼疮。作为一种人血浆源性c1酯酶抑制剂，已被核准供防治性使用和治疗急性hae发作。(也是一种血浆源性人c1-inh，cslbehring)被指示用于治疗急性hae发作。人血浆源性c1酯酶抑制剂的供应依赖于血液和血浆捐献品的可用性。(阿法可奈司他(conestatalfa),pharmingn.v.)作为一种在工程改造的兔中表达的重组c1-inh被指示用于静脉内(iv)施用来治疗急性hae发作。然而，因为在兔中制备，所以它的糖基化特征不同于人血浆源性c1-inh的糖基化特征。结果是ruconest具有约2.4-2.7小时的极其短暂半衰期。参见fda标签和处方信息。因此，本领域中仍然需要用于治疗各种c1酯酶介导的适应症的改进的c1酯酶抑制剂。发明概述本发明尤其提供可用于有效治疗各种补体介导的病症，并且可以有成本效益的方式(cost-effectivematter)制造的改进的长效重组c1酯酶抑制剂。具体而言，本发明提供相比于展现更长半衰期的c1酯酶抑制剂融合蛋白。在一些实施方案中，相比于血浆源性c1-inh，本发明的c1抑制剂融合蛋白展现类似或更长的半衰期。举例来说，本发明者已证明根据本发明的某些示例性c1抑制剂融合蛋白具有至少4天的延长的血清半衰期。预期重组c1抑制剂的长久血清半衰期导致优越的体内功效，并且允许达成更好的给药方案和施用途径。在某些实施方案中，相比于核准的c1抑制剂，本发明的c1抑制剂融合蛋白可以较小频率皮下施用，同时仍然实现所需功效(例如防治)。此外，本发明的c1抑制剂融合蛋白可在宿主细胞中重组产生以使公开的c1抑制剂融合蛋白不依赖于血液供应，不引起传播传染剂的风险，并且对于制造来说花费较少。因为它们在宿主细胞中重组产生，所以相比于从人血液、人血液组分(例如血浆)或动物乳汁纯化的那些产品，它们在产生和最终产品方面提供更大一致性。此外，本文提供的c1抑制剂融合蛋白不依赖于畜牧业考虑事项，包括动物年龄和/或成熟期、产奶量、动物疾病等，其全部可影响兔表达的c1-inh的数量与质量(例如糖基化特征、表达的蛋白质的异质性等)两者。因此，本发明提供对重组c1酯酶抑制剂的有成本效益且可靠的制造，以及对hae和其它补体介导的病症的更安全、更有效的治疗。本发明的其它特征、目标和优势在随后详细描述中是显而易知的。然而，应了解尽管指示本发明的实施方案，但详细描述仅通过说明而非限制方式给出。在本发明的范围内的各种变化和修改将根据详细描述而变得为本领域技术人员显而易知。在一个方面，本发明提供一种包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白。在一些实施方案中，人c1-抑制剂多肽包含与具有seqidno:1的全长人c1-抑制剂具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:1，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:2具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:2，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域连接于所述人c1-抑制剂多肽的n末端。在一些实施方案中，fc结构域是人igg1fc结构域。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域连接于所述人c1-抑制剂多肽的n末端。在一些实施方案中，fc结构域源于人igg1fc结构域。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含与seqidno:3具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg1fc结构域seqidno:3具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg1fc结构域seqidno:3具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg1fc结构域seqidno:3具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg1fc结构域seqidno:3具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg1fc结构域seqidno:3同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:3，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含l234a突变。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含l235a突变。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含l234a突变和l235a突变。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含l234a突变或l235a突变。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含氨基酸序列seqidno:4。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含一个或多个延长包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的半衰期的突变。在一些实施方案中，fc结构域的突变包括一个或多个突变，所述突变选自一个或多个对应于人igg1的thr250、met252、ser254、thr256、thr307、glu380、met428、his433和/或asn434的位置。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含h433k突变。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含n434f突变。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含h433k突变和n434f突变。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含h433k突变或n434f突变。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:5具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:5，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:6具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:6具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:6具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:6具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:6具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:6同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:6，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:7具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:7具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:7具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:7具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:7具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:7同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:7，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:8具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:8具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:8具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:8具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:8具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:8同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:8，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7或seqidno:8中的任一个具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7或seqidno:8中的任一个具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7或seqidno:8中的任一个具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7或seqidno:8中的任一个具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7或seqidno:8中的任一个具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7或seqidno:8中的任一个同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:5、seqidno:6、seqidno:7或seqidno:8，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域连接于所述人c1-抑制剂多肽的n末端。在一些实施方案中，fc结构域是人igg4fc结构域。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域连接于所述人c1-抑制剂多肽的n末端。在一些实施方案中，fc结构域源于人igg4fc结构域。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含与seqidno:9具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg4fc结构域seqidno:9具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg4fc结构域seqidno:9具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg4fc结构域seqidno:9具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg4fc结构域seqidno:9具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与人igg4fc结构域seqidno:9同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:9，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包含s241p突变。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:10具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:10具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:10具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:10具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:10具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:10同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:10，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:11具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:11具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:11具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:11具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:11具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:11同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:11，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:12具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:12具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:12具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:12具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:12具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:12同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:12，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:13具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:13具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:13具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:13具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:13具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:13同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:13，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:14具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:14具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:14具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:14具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:14具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:14同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:14，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:15具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:15具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:15具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:15具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:15具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:15同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:15，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含与seqidno:16具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:16具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:16具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:16具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:16具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包括与seqidno:16同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:16，包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白包含在所述人c1-抑制剂多肽与所述fc结构域之间的接头。在一些实施方案中，接头是包含3-100个氨基酸的肽。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白结合fcrn。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白抑制c1酯酶活性。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含降低或消除adcc活性的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含一个或多个降低或消除adcc活性的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含降低或消除cdc活性的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含一个或多个降低或消除cdc活性的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含降低或消除fcγr结合的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含一个或多个降低或消除fcγr结合的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含降低或消除fcγr效应功能的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含一个或多个降低或消除fcγr效应功能的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含降低或消除c1q结合的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述fc结构域包含一个或多个降低或消除c1q结合的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，降低或消除c1q结合的突变在所述fc结构域中。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白抑制c1r和/或c1s蛋白酶活性和/或使c1r和/或c1s蛋白酶活性失活。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白抑制体外红血细胞的溶解。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，相比于血浆源性人c1-抑制剂，所述融合蛋白具有更长的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有至少4天的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有至少5天的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有至少6天的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有至少7天的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有是或大于约12小时、18小时、24小时、36小时、2天、2.5天、3天、3.5天、4天、4.5天、5天、5.5天、6天、6.5天、7天、7.5天、8天、8.5天、9天、9.5天或10天的体内半衰期。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白具有介于0.5与10天之间、介于1天与10天之间、介于1天与9天之间、介于1天与8天之间、介于1天与7天之间、介于1天与6天之间、介于1天与5天之间、介于1天与4天之间、介于1天与3天之间、介于2天与10天之间、介于2天与9天之间、介于2天与8天之间、介于2天与7天之间、介于2天与6天之间、介于2天与5天之间、介于2天与4天之间、介于2天与3天之间、介于2.5天与10天之间、介于2.5天与9天之间、介于2.5天与8天之间、介于2.5天与7天之间、介于2.5天与6天之间、介于2.5天与5天之间、介于2.5天与4天之间、介于3天与10天之间、介于3天与9天之间、介于3天与8天之间、介于3天与7天之间、介于3天与6天之间、介于3天与5天之间、介于3天与4天之间、介于3.5天与10天之间、介于3.5天与9天之间、介于3.5天与8天之间、介于3.5天与7天之间、介于3.5天与6天之间、介于3.5天与5天之间、介于3.5天与4天之间、介于4天与10天之间、介于4天与9天之间、介于4天与8天之间、介于4天与7天之间、介于4天与6天之间、介于4天与5天之间、介于4.5天与10天之间、介于4.5天与9天之间、介于4.5天与8天之间、介于4.5天与7天之间、介于4.5天与6天之间、介于4.5天与5天之间、介于5天与10天之间、介于5天与9天之间、介于5天与8天之间、介于5天与7天之间、介于5天与6天之间、介于5.5天与10天之间、介于5.5天与9天之间、介于5.5天与8天之间、介于5.5天与7天之间、介于5.5天与6天之间、介于6天与10天之间、介于7天与10天之间、介于8天与10天之间、介于9天与10天之间的体内半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白是单价的。在包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白是二聚的。在一个方面，本发明提供一种包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白。在一些实施方案中，人c1-抑制剂多肽包含与具有seqidno:1的全长人c1-抑制剂具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:1同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:1，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含与seqidno:2具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与全长人c1-抑制剂蛋白seqidno:2同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:2，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述白蛋白连接于所述人c1-抑制剂多肽的n末端。。在一些实施方案中，白蛋白多肽包含人血清白蛋白的一个或多个结构域。在一些实施方案中，白蛋白多肽包含人血清白蛋白的d3结构域。在一些实施方案中，白蛋白多肽源于人血清白蛋白。。在一些实施方案中，白蛋白多肽是人血清白蛋白。在一些实施方案中，适于本发明的白蛋白多肽包含与seqidno:20具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:20具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:20具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:20具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:20具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:20同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:20，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，适于本发明的白蛋白多肽包含与seqidno:17具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:17具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:17具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:17具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:17具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与人白蛋白多肽seqidno:17同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:17，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白包含与seqidno:18具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:18具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:18具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:18具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:18具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:18同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:18，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白包含与seqidno:19具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:19具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:19具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:19具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:19具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:19同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:19，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白包含与seqidno:21具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:21具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:21具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:21具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:21具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:21同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:21，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白包含与seqidno:22具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:22具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:22具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:22具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:22至少95％同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:22同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:22，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含与seqidno:17、seqidno:18、seqidno:19、seqidno:21或seqidno:22中的任一个具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:17、seqidno:18、seqidno:19、seqidno:21或seqidno:22中的任一个具有至少70％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:17、seqidno:18、seqidno:19、seqidno:21或seqidno:22中的任一个具有至少80％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:17、seqidno:18、seqidno:19、seqidno:21或seqidno:22中的任一个具有至少90％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:17、seqidno:18、seqidno:19、seqidno:21或seqidno:22中的任一个具有至少95％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包括与seqidno:17、seqidno:18、seqidno:19、seqidno:21或seqidno:22中的任一个同一的氨基酸序列。在一些实施方案中，相较于seqidno:17、seqidno:18、seqidno:19、seqidno:21或seqidno:22，包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白包含一个或多个截短、缺失、突变或插入。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白结合fcrn。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白抑制c1酯酶活性。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白抑制c1r和/或c1s蛋白酶活性和/或使c1r和/或c1s蛋白酶活性失活。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白抑制体外红血细胞的溶解。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白包含在所述人c1-抑制剂多肽与所述白蛋白多肽之间的接头。在一些实施方案中，接头是包含3-100个氨基酸的肽。在一些实施方案中，接头包含序列ggg。在一些实施方案中，接头包含序列seqidno:27。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述白蛋白多肽不包含一个或多个选自由464his、510his、535his和/或其组合组成的组的突变。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，相比于血浆源性人c1-抑制剂，所述融合蛋白具有更长的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有至少4天的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有至少5天的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有至少6天的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有至少7天的半衰期。在包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白的一些实施方案中，所述融合蛋白具有是或大于约12小时、18小时、24小时、36小时、2天、2.5天、3天、3.5天、4天、4.5天、5天、5.5天、6天、6.5天、7天、7.5天、8天、8.5天、9天、9.5天或10天的体内半衰期。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白具有介于0.5与10天之间、介于1天与10天之间、介于1天与9天之间、介于1天与8天之间、介于1天与7天之间、介于1天与6天之间、介于1天与5天之间、介于1天与4天之间、介于1天与3天之间、介于2天与10天之间、介于2天与9天之间、介于2天与8天之间、介于2天与7天之间、介于2天与6天之间、介于2天与5天之间、介于2天与4天之间、介于2天与3天之间、介于2.5天与10天之间、介于2.5天与9天之间、介于2.5天与8天之间、介于2.5天与7天之间、介于2.5天与6天之间、介于2.5天与5天之间、介于2.5天与4天之间、介于3天与10天之间、介于3天与9天之间、介于3天与8天之间、介于3天与7天之间、介于3天与6天之间、介于3天与5天之间、介于3天与4天之间、介于3.5天与10天之间、介于3.5天与9天之间、介于3.5天与8天之间、介于3.5天与7天之间、介于3.5天与6天之间、介于3.5天与5天之间、介于3.5天与4天之间、介于4天与10天之间、介于4天与9天之间、介于4天与8天之间、介于4天与7天之间、介于4天与6天之间、介于4天与5天之间、介于4.5天与10天之间、介于4.5天与9天之间、介于4.5天与8天之间、介于4.5天与7天之间、介于4.5天与6天之间、介于4.5天与5天之间、介于5天与10天之间、介于5天与9天之间、介于5天与8天之间、介于5天与7天之间、介于5天与6天之间、介于5.5天与10天之间、介于5.5天与9天之间、介于5.5天与8天之间、介于5.5天与7天之间、介于5.5天与6天之间、介于6天与10天之间、介于7天与10天之间、介于8天与10天之间、介于9天与10天之间的体内半衰期。在一个方面，本发明提供一种编码融合蛋白的核酸，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白中的任一种。在另一方面，本发明提供一种编码融合蛋白的核酸，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白中的任一种。在一个方面，本发明提供一种包含编码融合蛋白的核酸的细胞，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白中的任一种。在另一方面，本发明提供一种包含编码融合蛋白的核酸的细胞，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白中的任一种。在一些实施方案中，细胞是哺乳动物细胞。在一些实施方案中，哺乳动物细胞是人细胞。在一些实施方案中，哺乳动物细胞是中国仓鼠卵巢(cho)细胞。在一些实施方案中，细胞被工程改造以修饰由细胞表达的蛋白质的糖基化。在一些实施方案中，细胞被工程改造以相较于尚未被工程改造的相同细胞，修饰由细胞表达的蛋白质的糖基化。在一些实施方案中，细胞被工程改造以使由细胞表达的蛋白质的糖基化增强、改进、增加和/或人源化。在一些实施方案中，细胞被工程改造以相较于尚未被工程改造的相同细胞，使由细胞表达的蛋白质的糖基化增强、改进、增加和/或人源化。在一些实施方案中，细胞被工程改造以修饰由细胞表达的蛋白质的唾液酸化。在一些实施方案中，细胞被工程改造以相较于尚未被工程改造的相同细胞，修饰由细胞表达的蛋白质的唾液酸化。在一些实施方案中，细胞被工程改造以使由细胞表达的蛋白质的唾液酸化增强、改进、增加和/或人源化。在一些实施方案中，细胞被工程改造以相较于尚未被工程改造的相同细胞，使由细胞表达的蛋白质的唾液酸化增强、改进、增加和/或人源化。在一个方面，本发明提供一种产生融合蛋白的方法，其包括培养或培育包含编码融合蛋白的核酸的细胞的步骤，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白中的任一种。在一个方面，本发明提供一种产生融合蛋白的方法，其包括培养或培育包含编码融合蛋白的核酸的细胞的步骤，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白中的任一种。在另一方面，本发明提供一种包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域，并且由被工程改造以使糖基化修饰、增强、改进、增加和/或人源化的细胞表达或产生的融合蛋白。在另一方面，本发明提供一种包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域，并且由被工程改造以使唾液酸化修饰、增强、改进、增加和/或人源化的细胞表达或产生的融合蛋白。在另一方面，本发明提供一种包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽，并且由被工程改造以使糖基化修饰、增强、改进、增加和/或人源化的细胞表达或产生的融合蛋白。在另一方面，本发明提供一种包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽，并且由被工程改造以使唾液酸化修饰、增强、改进、增加和/或人源化的细胞表达或产生的融合蛋白。在另一方面，本发明提供一种包含融合蛋白和药学上可接受的载体的药物组合物，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白中的任一种。在另一方面，本发明提供一种包含融合蛋白和药学上可接受的载体的药物组合物，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白中的任一种。在一个方面，本发明提供一种治疗补体介导的病症的方法，其包括向需要治疗的受试者施用包含融合蛋白和药学上可接受的载体的药物组合物，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和fc结构域的融合蛋白中的任一种。在一个方面，本发明提供一种治疗补体介导的病症的方法，其包括向需要治疗的受试者施用包含融合蛋白和药学上可接受的载体的药物组合物，所述融合蛋白是本文公开的包含人c1-抑制剂多肽和白蛋白多肽的融合蛋白中的任一种。在一些实施方案中，需要治疗的受试者患有补体介导的病症。在一些实施方案中，补体介导的病症选自遗传性血管性水肿、抗体介导的排斥、视神经脊髓炎谱系病症、创伤性脑损伤、脊髓损伤、缺血性脑损伤、灼烧损伤、中毒性表皮坏死溶解、多发性硬化症、肌萎缩性脊髓侧索硬化(als)、帕金森氏病(parkinson’sdisease)、中风、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病变(cidp)、重症肌无力、多灶性运动神经病变。附图简述附图仅出于说明目的而非出于限制目的。图1a是c1-inh的图示。从右至左，三个结构域是信号肽、也被称为n末端结构域的n-末端、和丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域。n连接的聚糖显示为具有菱形头部的长垂直线，并且o连接的聚糖显示为短垂直线。图1b是示例性二聚c1-inhfc融合蛋白的图示。c1-inh多肽部分由矩形指示，并且fc部分由椭圆形区段指示。图1c是示例性单体c1-inhfc融合蛋白的图示。图2a-2d是示例性c1-inh融合蛋白的图示。图2a是具有lala突变的igg1fc融合于全长c1-inh多肽(显示为阴影矩形)的表示。图2b是具有lala突变的igg1fc融合于截短的c1-inh多肽(显示为阴影矩形)的表示。图2c是具有s241p突变的igg4fc融合于全长c1-inh多肽(显示为阴影矩形)的表示。图2d是具有s241p突变的igg4fc融合于截短的c1-inh多肽(显示为阴影矩形)的表示。图3显示对全长c1-inh人fc(hfc)igg1lala融合蛋白的示例性蛋白质a纯化的结果。该图显示在纯化过程期间，在融合蛋白的捕获和洗脱期间，uv280nm、uv260nm、浓度和ph随时间的结果。图4是在以下四种示例性fc融合构建体的纯化期间收集的浓度和总蛋白量的图：全长(fl)c1-inhhfcigg1lala融合蛋白；截短的(tr)c1-inhhfcigg1lala融合蛋白；全长(fl)c1-inhhfcigg4m(igg4s241p)融合蛋白；截短的(tr)c1-inhhfcigg4m(igg4s241p)融合蛋白。图5是描绘在全长(fl)c1-inhhfcigg1lala融合蛋白；截短的(tr)c1-inhhfcigg1lala融合蛋白；全长(fl)c1-inhhfcigg4m(igg4s241p)融合蛋白；截短的(tr)c1-inhhfcigg4m(igg4s241p)融合蛋白的纯化样品中检测的内毒素的量的图。图6显示hfcigg1-c1-inh、hfclalaigg1-c1-inh和hfcigg4m-c1-inh融合物、重组人c1-inh(rhc1-inh)(在1080细胞中表达)、以及作为阳性对照的igg1fc-人卵泡抑素(hfcigg1-hfst-xten)融合物和作为阴性对照的人卵泡抑素-xten(hfst-xten)融合物的示例性c1q结合elisa的结果。图7是用于测量示例性融合构建体与fcγr1的细胞外结构域的结合的表面等离子体共振(spr)biacore捕获方法的示意图。图8显示以下示例性效应物失效fc融合构建体(effectordeadfcfusionconstruct)的spr分析结果：全长(fl)c1-inhhfcigg1lala融合蛋白；截短的(tr)c1-inhhfcigg1lala融合蛋白；全长(fl)c1-inhhfcigg4m(igg4s241p)融合蛋白；截短的(tr)c1-inhhfcigg4m(igg4s241p)融合蛋白。包括血浆源性c1-inh作为阳性对照。图9a和9b呈现用以测量效应物失效构建体抑制c1s裂解比色肽的能力的测定的结果。图9a显示使用测试的各示例性效应物失效构建体的质谱测定法计算的分子量获得的各构建体的滴定曲线。图9b显示使用测试的各示例性效应物失效构建体的凝胶估计的分子量获得的的各构建体的滴定曲线。图10a描绘用以测量替代性补体途径(apc)的活化的溶血测定的示意性概要。图10b描绘用以测量经典补体途径的活化的溶血测定的示意性概要。图11a、11b和11c显示用以测量替代性补体途径的活化的溶血测定的结果。图11a显示比较截短的(tr)c1-inhhfcigg1lala融合蛋白、全长(fl)c1-inhhfcigg1lala融合蛋白、血浆源性c1-inh制剂和calbiochem可商购获得的血浆源性c1-inh的结果。根据测试蛋白质的浓度将吸光度读数绘制为对照的百分比。图11b显示对于各样品收集的原始数据的图。图11c显示在测定中操作的对照的图。图12显示效应物失效融合构建体相较于血浆源性c1-抑制剂和ht1080表达的重组c1-inh两种制剂的兔pk研究的示例性结果。静脉内施用血浆源性c1-inh展现单相血清浓度-时间曲线。图13a-13f是产生的示例性白蛋白融合构建体的图示。图13a是人血清白蛋白(hsa)融合于c1-inh的图示。图13b是hsa通过ggg接头来接合于c1-inh的图示。图13c是hsa通过(ggggs)2接头来接合于c1-inh的图示。图13d是hsa的d3结构域融合于c1-inh的图示。图13e是hsa的d3结构域通过ggg接头来接合于c1-inh的图示。图13f是hsa的d3结构域通过(ggggs)2接头来接合于c1-inh的图示。图14呈现用以测量一些示例性白蛋白c1-inh融合构建体抑制c1s裂解比色肽的能力的测定的结果，包括血浆源性c1-inh和ht1080表达的重组c1-inh以进行比较。定义为使本发明更易于理解，以下首先定义某些术语。以下术语和其它术语的额外定义在整篇说明书中加以阐述。动物：如本文所用，术语“动物”是指动物界的任何成员。在一些实施方案中，“动物”是指处于任何发育阶段的人。在一些实施方案中，“动物”是指处于任何发育阶段的非人动物。在某些实施方案中，非人动物是哺乳动物(例如啮齿动物、小鼠、大鼠、兔、猴、狗、猫、绵羊、牛、灵长类动物和/或猪)。在一些实施方案中，动物包括但不限于哺乳动物、鸟、爬行动物、两栖动物、鱼、昆虫和/或蠕虫。在一些实施方案中，动物可为转基因动物、遗传工程改造动物和/或克隆。近似或约：如本申请中所用，术语“约”和“近似”用作等效语。与或不与约/近似一起用于本申请中的任何数字都意图涵盖由相关领域普通技术人员所了解的任何正常波动。如本文所用，如应用于一个或多个目标值的术语“近似”或“约”是指数值类似于所述参照值。在某些实施方案中，除非另外陈述或另外根据上下文是明显的，否则术语“近似”或“约”是指一定范围的数值落在所述参照值在任一方向(大于或小于)上的25％、20％、19％、18％、17％、16％、15％、14％、13％、12％、11％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1％或更小内(例外之处是当此类数值将超过可能值的100％时)。生物利用度：如本文所用，术语“生物利用度”通常是指到达受试者的血流的施用剂量的百分比。生物活性：如本文所用，短语“生物活性”是指任何药剂在生物系统中，并且特别是在生物体中具有活性的特征。举例来说，当向生物体施用时，对该生物体具有生物作用的药剂被视为具有生物活性。在特定实施方案中，当肽具有生物活性时，该肽的分担所述肽的至少一种生物活性的部分通常被称为“生物活性”部分。载体或稀释剂：如本文所用，术语“载体”和“稀释剂”是指适用于制备药物制剂的药学上可接受的(例如对于向人施用是安全的和无毒的)载体或稀释物质。示例性稀释剂包括无菌水、抑菌性注射用水(bwfi)、ph缓冲溶液(例如磷酸盐缓冲盐水)、无菌盐水溶液、林格氏溶液(ringer'ssolution)或右旋糖溶液。c1-抑制剂或c1酯酶抑制剂或c1-inh：如本文所用，术语“c1-抑制剂”或“c1酯酶抑制剂”或“c1-inh”全都可互换使用，并且除非另外规定，否则是指保留基本上c1-inh生物活性的任何野生型或经修饰的c1-inh多肽(例如具有氨基酸突变、缺失、插入的c1-inh蛋白和/或融合蛋白)。c1-inh可在细胞中重组表达。在某些实施方案中，c1-inh在哺乳动物细胞，优选是cho细胞或人细胞中表达。功能性等效物或衍生物：如本文所用，在氨基酸序列的功能性衍生物的情形下，术语“功能性等效物”或“功能性衍生物”表示保留基本上类似于原始序列的生物活性的生物活性(功能或结构)的分子。功能性衍生物或等效物可为天然衍生物，或以合成方式制备。示例性功能性衍生物包括具有一个或多个氨基酸的取代、缺失或添加的氨基酸序列，前提是蛋白质的生物活性得以保持。取代性氨基酸合乎需要地具有与被取代的氨基酸的化学物理性质类似的化学物理性质。所需类似化学物理性质包括在电荷、体积大小、疏水性、亲水性等方面的类似性。融合蛋白：如本文所用，术语“融合蛋白”或“嵌合蛋白”是指通过接合两个或更多个最初分开的蛋白质或其部分产生的蛋白质。在一些实施方案中，接头或间隔体将存在于各蛋白质之间。半衰期：如本文所用，术语“半衰期”是为数量诸如蛋白质浓度或活性降至它的如在某一时期开始时测量的值的一半所需的时间。遗传性血管性水肿或hae：如本文所用，术语“遗传性血管性水肿”或“hae”是指一种特征在于炎症不可预测且反复发作的血液病症。hae通常伴有c1-inh缺乏，其可为c1-inh的水平较低或c1-inh的活性受损或降低的结果。症状包括但不限于可出现在身体的任何部分诸如面部、四肢、生殖器、胃肠道和上气道中的肿胀。改进、增加或降低：如本文所用，术语“改进”、“增加”或“降低”或语法等效形式指示数值相对于基线测量结果，所述基线测量结果诸如同一个体中在启始本文所述的治疗之前的测量结果，或对照受试者(或多个对照受试者)中在不存在本文所述的治疗下的测量结果。“对照受试者”是与所治疗的受试者受相同形式的疾病折磨，与所治疗的受试者具有大约相同的年龄的受试者。体外：如本文所用，术语“体外”是指事件发生在人工环境中，例如试管或反应容器中，细胞培养中等，而非在多细胞生物体内。体内：如本文所用，术语“体内”是指事件发生在多细胞生物体诸如人和非人动物内。在基于细胞的系统的情形下，所述术语可用于指代事件发生在活细胞内(与例如体外系统相对比)。接头：如本文所用，术语“接头”是指在融合蛋白中，除出现在天然蛋白质中的特定位置处的氨基酸序列以外的氨基酸序列，并且通常被设计以具有可挠性或插入两个蛋白质部分之间的结构诸如α-螺旋。接头也被称为间隔体。接头或间隔体通常自身不具有生物功能。多肽：如本文所用的术语“多肽”是指通过肽键连接在一起的氨基酸的连续链。所述术语用于指代具有任何长度的氨基酸链，但本领域普通技术人员将了解，所述术语不限于长链，并且可指包含通过肽键连接在一起的两个氨基酸的最小链。如为本领域技术人员所知，多肽可被加工和/或修饰。如本文所用，术语“多肽”和“肽”可互换使用。预防：如本文所用，术语“预防(prevent/prevention)”在与疾病、病症和/或病状的发生关联使用时是指降低发展所述疾病、病症和/或病状的风险。参见对“风险”的定义。蛋白质：如本文所用的术语“蛋白质”是指一个或多个充当离散单元的多肽。如果单一多肽是离散的功能性单元，并且不需要与其它多肽永久或暂时物理缔合以形成离散的功能性单元，那么术语“多肽”和“蛋白质”可互换使用。如果离散的功能性单元包含一个以上彼此物理缔合的多肽，那么术语“蛋白质”是指物理偶联，并且一起充当离散单元的多个多肽。风险：如将根据上下文所了解，疾病、病症和/或病状的“风险”包括特定个体将发展疾病、病症和/或病状(例如肌营养不良)的可能性。在一些实施方案中，将风险表示为百分比。在一些实施方案中，风险是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、20、30、40、50、60、70、80、90直至100％。在一些实施方案中，将风险表示为相对于与某一参照样本或一组参照样本相关的风险的风险。在一些实施方案中，某一参照样本或一组参照样本具有疾病、病症、病状和/或事件(例如肌营养不良)的已知风险。在一些实施方案中，某一参照样本或一组参照样本来自与特定个体类似的个体。在一些实施方案中，相对风险是0、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更大。受试者：如本文所用，术语“受试者”是指人或任何非人动物(例如小鼠、大鼠、兔、狗、猫、牛、猪、绵羊、马或灵长类动物)。人包括出生前和出生后形式。在许多实施方案中，受试者是人类。受试者可为患者，其是指向医疗提供者呈递以供诊断或治疗疾病的人。术语“受试者”在本文中可与“个体”或“患者”互换使用。受试者可受疾病或病症折磨或易患疾病或病症，但可能显示或可能不显示所述疾病或病症的症状。基本上：如本文所用，术语“基本上”是指展现总体或接近总体范围或程度的目标特征或性质的定性情况。生物领域普通技术人员将了解生物和化学现象很少(如果曾发生的话)达到完全和/或进行至完全或实现或避免绝对结果。因此，术语“基本上”在本文中用于体现许多生物和化学现象中固有的潜在完全性缺乏。基本上同源性：短语“基本上同源性”在本文中用于指代氨基酸或核酸序列之间的比较。如将由本领域普通技术人员所了解，如果两个序列在相应位置中含有同源性残基，那么它们通常被视为“基本上同源”。同源性残基可为同一残基。或者，同源性残基可为将具有适当类似结构和/或功能特征的非同一残基。举例来说，如本领域普通技术人员所熟知，某些氨基酸通常被分类为“疏水性”或“亲水性”氨基酸，和/或具有“极性”或“非极性”侧链。将一个氨基酸取代成相同类型的另一个氨基酸可常被视为“同源性”取代。如本领域中所熟知，可使用多种算法中的任一种来比较氨基酸或核酸序列，所述算法包括商业计算机程序中可用的那些，诸如针对核苷酸序列的blastn以及针对氨基酸序列的blastp、空位blast和psi-blast。示例性此类程序描述于altschul等,basiclocalalignmentsearchtool,j.mol.biol.,215(3):403-410,1990；altschul等,methodsinenzymology；altschul等,“gappedblastandpsi-blast:anewgenerationofproteindatabasesearchprograms”,nucleicacidsres.25:3389-3402,1997；baxevanis等,bioinformatics:apracticalguidetotheanalysisofgenesandproteins,wiley,1998；以及misener等(编),bioinformaticsmethodsandprotocols(methodsinmolecularbiology,第132卷),humanapress,1999中。除鉴定同源性序列之外，以上提及的程序也通常提供对同源性程度的指示。在一些实施方案中，如果在一段相关残基上，两个序列的相应残基中有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多是同源的，那么它们被视为基本上同源。在一些实施方案中，相关链段是完整序列。在一些实施方案中，相关链段是至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、125、150、175、200、225、250、275、300、325、350、375、400、425、450、475、500或更多个残基。基本上同一性：短语“基本上同一性”在本文中用于指代氨基酸或核酸序列之间的比较。如将由本领域普通技术人员所了解，如果两个序列在相应位置中含有同一残基，那么它们通常被视为“基本上同一”。如本领域中所熟知，可使用多种算法中的任一种来比较氨基酸或核酸序列，所述算法包括商业计算机程序中可用的那些，诸如针对核苷酸序列的blastn以及针对氨基酸序列的blastp、空位blast和psi-blast。示例性此类程序描述于altschul等,basiclocalalignmentsearchtool,j.mol.biol.,215(3):403-410,1990；altschul等,methodsinenzymology；altschul编,nucleicacidsres.25:3389-3402,1997；baxevanis等,bioinformatics:apracticalguidetotheanalysisofgenesandproteins,wiley,1998；以及misener等(编),bioinformaticsmethodsandprotocols(methodsinmolecularbiology,第132卷),humanapress,1999中。除鉴定同一序列之外，以上提及的程序也通常提供对同一性程度的指示。在一些实施方案中，如果在一段相关残基上，两个序列的相应残基中有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多是同一的，那么它们被视为基本上同一。在一些实施方案中，相关链段是完整序列。在一些实施方案中，相关链段是至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、100、125、150、175、200、225、250、275、300、325、350、375、400、425、450、475、500或更多个残基。罹患：正“罹患”疾病、病症和/或病状的个体已被诊断有或显示所述疾病、病症和/或病状的一种或多种症状。易患：“易患”疾病、病症和/或病状的个体尚未被诊断有所述疾病、病症和/或病状。在一些实施方案中，易患疾病、病症和/或病状的个体可不展现所述疾病、病症和/或病状的症状。在一些实施方案中，易患疾病、病症、病状或事件(例如dmd)的个体可具有一个或多个以下特征：(1)与发展所述疾病、病症和/或病状相关的遗传突变；(2)与发展所述疾病、病症和/或病状相关的遗传多态性；(3)与所述疾病、病症和/或病状相关的蛋白质的表达和/或活性增加和/或降低；(4)与发展所述疾病、病症、病状和/或事件相关的习惯和/或生活方式；(5)已经受、计划经受或需要移植。在一些实施方案中，易患疾病、病症和/或病状的个体将发展所述疾病、病症和/或病状。在一些实施方案中，易患疾病、病症和/或病状的个体将不发展所述疾病、病症和/或病状。治疗有效量：如本文所用，术语治疗剂的“治疗有效量”意指当向罹患或易患疾病、病症和/或病状的受试者施用时，足以治疗、诊断、预防所述疾病、病症和/或病状的症状和/或延迟其发作的量。本领域普通技术人员应了解，治疗有效量通常通过包含至少一个单位剂量的给药方案施用。治疗：如本文所用，术语“治疗(treat/treatment/treating)”是指用于部分或完全减轻、改善、缓和、抑制、预防特定疾病、病症和/或病状的一种或多种症状或特征、延迟其发作、减轻其严重性、和/或降低其发生率的任何方法。治疗可向不展现疾病的征象和/或仅展现所述疾病的早期征象的受试者施用以达成降低发展与所述疾病相关的病理学的风险的目的。某些实施方案的详细描述本发明尤其提供基于c1-inh作为蛋白质治疗剂，用于治疗包括遗传性血管性水肿(hae)的补体介导的病症的方法和组合物。融合的目的在于延长半衰期。结果是给药频率降低，防治性功效增加。本发明的各个方面详细描述于以下章节中。章节的使用不意图限制本发明。各章节可适用于本发明的任何方面。在本申请中，除非另外陈述，否则“或”的使用意指“和/或”。本文引用的所有技术的公开内容都以引用的方式整体并入本文。c1-inh人c1-inh是一种具有广泛范围的抑制和非抑制生物活性的重要抗炎性血浆蛋白质。就序列同源性、它的c末端结构域的结构和蛋白酶抑制机理来说，它属于丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族(即最大类别的血浆蛋白酶抑制剂)，其也包括抗凝血酶、α1-蛋白酶抑制剂、纤维蛋白溶酶原活化因子抑制剂和调控不同生理系统的许多其它结构类似蛋白质。c1-inh是补体系统、激肽产生接触系统和内在凝血途径中的蛋白酶的抑制剂。cai,s.和davis,a.e.,complementregulatoryproteinc1inhibitorbindstoselectinsandinterfereswithendothelial-leukocyteadhesion,jimmunol,171:4786-4791(2003)。具体来说，已显示c1-inh会抑制补体系统的c1r和c1s。c1-inh也是凝血因子xi和xii以及激肽释放酶和凝血和纤维蛋白溶解系统的其它丝氨酸蛋白酶(包括组织型纤维蛋白溶酶原活化因子和纤维蛋白溶酶)的主要调控剂。c1-inh的血浆含量较低或它的功能异常导致活化补体级联与接触血浆级联两者，并且也可影响其它系统。已显示c1-inh血浆含量降低至低于55μg/ml(约为正常值的25％)的水平会诱导c1自发性活化。描绘c1-inh的结构的示意图提供于图1a中。显示信号肽、n末端结构域和丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域。22个氨基酸的信号肽为分泌所需，并且从c1-inh蛋白的其余部分裂解。c1-inh具有两个结构域：具有365个氨基酸，是典型丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域的c末端结构域，和具有113个氨基酸的n末端结构域。蛋白质通过连接各结构域的两个二硫桥来稳定。这些二硫桥由n末端结构域的cys101与c末端(丝氨酸蛋白酶抑制剂)结构域的cys406形成二硫键，以及n末端结构域的cys108与c末端结构域的cys183形成二硫键来形成。丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域负责c1-inh的蛋白酶活性。p1-p1’表示arg444-thr445易切断键。糖基化蛋白质的超过26％的重量是碳水化合物。聚糖不均匀分布在人c1-inh中。n末端被大量糖基化，具有三个n连接的(显示为具有菱形头部的长垂直线)和至少七个o连接的(显示为短垂直线)碳水化合物基团。三个n连接的聚糖连接于丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域中的天冬酰胺残基asn216、asn231和asn330(显示为具有菱形头部的长垂直线)。尽管格外长的且被大量糖基化的n末端结构域的功能性作用仍不明确，但它可能为蛋白质的构象稳定性、识别、对内毒素和选择素的亲和力、以及清除所必需。碳水化合物部分的内在异质性极大促成整个c1-inh的异质性，这是为何难以产生模拟血浆源性c1-inh的性质的重组c1-inh的一个原因。如本文所用，适于本发明的c1-inh融合蛋白包含保留基本上c1-inh生物活性的任何野生型和经修饰的c1-inh多肽(例如具有氨基酸突变、缺失、截短和/或插入的c1-inh蛋白)。通常，使用重组技术产生c1-inh融合蛋白。通常，合适的重组c1-inh融合蛋白具有是或大于约12小时、18小时、24小时、36小时、2天、2.5天、3天、3.5天、4天、4.5天、5天、5.5天、6天、6.5天、7天、7.5天、8天、8.5天、9天、9.5天或10天的体内半衰期。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白具有介于0.5与10天之间、介于1天与10天之间、介于1天与9天之间、介于1天与8天之间、介于1天与7天之间、介于1天与6天之间、介于1天与5天之间、介于1天与4天之间、介于1天与3天之间、介于2天与10天之间、介于2天与9天之间、介于2天与8天之间、介于2天与7天之间、介于2天与6天之间、介于2天与5天之间、介于2天与4天之间、介于2天与3天之间、介于2.5天与10天之间、介于2.5天与9天之间、介于2.5天与8天之间、介于2.5天与7天之间、介于2.5天与6天之间、介于2.5天与5天之间、介于2.5天与4天之间、介于3天与10天之间、介于3天与9天之间、介于3天与8天之间、介于3天与7天之间、介于3天与6天之间、介于3天与5天之间、介于3天与4天之间、介于3.5天与10天之间、介于3.5天与9天之间、介于3.5天与8天之间、介于3.5天与7天之间、介于3.5天与6天之间、介于3.5天与5天之间、介于3.5天与4天之间、介于4天与10天之间、介于4天与9天之间、介于4天与8天之间、介于4天与7天之间、介于4天与6天之间、介于4天与5天之间、介于4.5天与10天之间、介于4.5天与9天之间、介于4.5天与8天之间、介于4.5天与7天之间、介于4.5天与6天之间、介于4.5天与5天之间、介于5天与10天之间、介于5天与9天之间、介于5天与8天之间、介于5天与7天之间、介于5天与6天之间、介于5.5天与10天之间、介于5.5天与9天之间、介于5.5天与8天之间、介于5.5天与7天之间、介于5.5天与6天之间、介于6天与10天之间、介于7天与10天之间、介于8天与10天之间、介于9天与10天之间的体内半衰期。通常，合适的重组c1-inh融合蛋白具有是或大于约4天、4.5天、5天、5.5天、6天、6.5天、7天、7.5天、8天、8.5天、9天、9.5天或10天的体内半衰期。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白具有介于4天与9天之间、介于4天与8天之间、介于4天与7天之间、介于4天与6天之间、介于4天与5天之间、介于4.5天与10天之间、介于4.5天与9天之间、介于4.5天与8天之间、介于4.5天与7天之间、介于4.5天与6天之间、介于4.5天与5天之间、介于5天与10天之间、介于5天与9天之间、介于5天与8天之间、介于5天与7天之间、介于5天与6天之间、介于5.5天与10天之间、介于5.5天与9天之间、介于5.5天与8天之间、介于5.5天与7天之间、介于5.5天与6天之间、介于6天与10天之间、介于7天与10天之间、介于8天与10天之间、介于9天与10天之间的体内半衰期。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽包括与以下野生型人c1-inh蛋白(氨基酸1-478)(氨基酸1-97加下划线)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：npnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：1).在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽包括与以下野生型人c1-inh蛋白(氨基酸98-478)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：gsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：2).如本文所公开，seqidno：1代表人c1-inh蛋白的典型氨基酸序列。在一些实施方案中，c1-inh多肽可为截短的c1-inh，诸如seqidno：2。在一些实施方案中，合适的重组c1-inh多肽可为野生型或天然存在的蛋白质的同源物或类似物。举例来说，人野生型或天然存在的c1-inh多肽的同源物或类似物相较于野生型或天然存在的c1-inh蛋白(例如seqidno：1)可含有一个或多个氨基酸或结构域取代、缺失和/或插入，同时保留基本上c1-inh蛋白活性。因此，在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽与人c1-inh蛋白(seqidno：1)基本上同源。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽具有与seqidno：1至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多同源的氨基酸序列。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽与人c1-inh蛋白(seqidno：1)基本上同一。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽具有与seqidno：1至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多同一的氨基酸序列。人c1-inh蛋白的同源物或类似物可根据为本领域普通技术人员所知的用于改变多肽序列的方法制备，所述方法诸如见于汇编此类方法的参考文献中的方法。如将由本领域普通技术人员所了解，如果两个序列在相应位置中含有同源性残基，那么它们通常被视为“基本上同源”。同源性残基可为同一的残基。或者，同源性残基可为将具有适当类似结构和/或功能特征的非同一残基。举例来说，如本领域普通技术人员所熟知，某些氨基酸通常被分类为“疏水性”或“亲水性”氨基酸，和/或具有“极性”或“非极性”侧链。将一个氨基酸取代成相同类型的另一个氨基酸可常被视为“同源性”取代。在一些实施方案中，保守性氨基酸取代包括在以下组内的氨基酸之间进行的取代：(a)m、i、l、v；(b)f、y、w；(c)k、r、h；(d)a、g；(e)s、t；(f)q、n；和(g)e、d。在一些实施方案中，“保守性氨基酸取代”是指不改变其中进行氨基酸取代的蛋白质的相对电荷或尺寸特征的氨基酸取代。如本领域中所熟知，可使用多种算法中的任一种来比较氨基酸或核酸序列，所述算法包括商业计算机程序中可用的那些，诸如针对核苷酸序列的blastn以及针对氨基酸序列的blastp、空位blast和psi-blast。示例性所述程序描述于altschul等,basiclocalalignmentsearchtool,j.mol.biol.,215(3):403-410,1990；altschul等,methodsinenzymology；altschul等,“gappedblastandpsi-blast:anewgenerationofproteindatabasesearchprograms”,nucleicacidsres.25:3389-3402,1997；baxevanis等,bioinformatics:apracticalguidetotheanalysisofgenesandproteins,wiley,1998；以及misener等(编),bioinformaticsmethodsandprotocols(methodsinmolecularbiology,第132卷),humanapress,1999中。除鉴定同源性序列之外，以上提及的程序也通常提供对同源性程度的指示。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽相较于野生型人c1-inh蛋白含有一个或多个氨基酸缺失、插入或替换。举例来说，合适的重组c1-inh多肽可为截短多肽，诸如具有seqidno:2的多肽。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽包括与以下截短的野生型人c1-inh蛋白(氨基酸98-478)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：gsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：2).在一些实施方案中，c1-inh多肽可为截短的c1-inh，同时保留基本上c1-inh蛋白活性，诸如seqidno：2。因此，在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽与人c1-inh蛋白(seqidno：2)基本上同源。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽具有与seqidno：2至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多同源的氨基酸序列。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽与人c1-inh蛋白(seqidn0：2)基本上同一。在一些实施方案中，适于本发明的重组c1-inh多肽具有与seqidno：2具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多同一性的氨基酸序列。适于本发明的重组c1-inh融合蛋白可为c1-inh结构域与通常可通过例如增强或增加c1-inh蛋白的半衰期、稳定性、效能和/或递送，或降低或消除免疫原性、清除率或毒性来促进c1-inh的治疗作用的另一结构域或部分之间的融合蛋白。c1-inh融合蛋白的此类合适的结构域或部分包括但不限于fc结构域和白蛋白结构域。fc结构域在一些实施方案中，合适的c1-inh融合蛋白含有fc结构域或其结合fcrn受体的部分。作为一非限制性实例，合适的fc结构域可源于诸如igg的免疫球蛋白子类。在一些实施方案中，合适的fc结构域源于igg1、igg2、igg3或igg4。在一些实施方案中，合适的fc结构域源于igm、iga、igd或ige。特别合适的fc结构域包括源于人抗体或人源化抗体的那些。在一些实施方案中，合适的fc结构域是经修饰的fc部分，诸如经修饰的人fc部分。a.igg1c1-抑制剂fc融合蛋白可以二聚体形式存在，如图1a中所示。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包括与以下野生型人igg1fc结构域具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：dkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk(seqidno：3).i.lala野生型igg1具有低水平的补体级联活化，任何所述活化都可能不合乎罹患补体介导的病症的患者的需要。降低或消除补体活化和抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(adcc)活性的效应物失效构建体的igg选择可为重要的。合适的fc结构域包括具有突变l234a和l235a(lala)的igg1。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包括与以下具有lala突变的人igg1fc结构域(突变残基加下划线)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：dkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk(seqidno：4).ii.nhance预期fc结构域与fcrn受体之间的结合改进会导致血清半衰期延长。因此，在一些实施方案中，合适的fc结构域包含一个或多个导致与fcrn的结合改进的氨基酸突变。fc结构域内实现与fcrn的结合改进的各种突变在本领域中是已知的，并且可适合于实施本发明。在一些实施方案中，合适的fc结构域包含一个或多个在一个或多个对应于人igg1的thr250、met252、ser254、thr256、thr307、glu380、met428、his433和/或asn434的位置处的突变。举例来说，合适的fc结构域可含有突变h433k(his433lys)和/或n434f(asn434phe)。作为一非限制性实例，合适的fc结构域可含有突变h433k(his433lys)和n434f(asn434phe)(nhance)。可包括在fc结构域中的额外氨基酸取代包括例如美国专利号6,277,375；8,012,476；和8,163,881中所述的那些，所述专利以引用的方式并入本文。在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包括与以下具有nhance突变的人igg1fc结构域(突变残基加下划线)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：dkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealkfhytqkslslspgk(seqidno：5).在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包括与以下具有lala突变与nhance突变两者的人igg1fc结构域(突变残基加下划线)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：dkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealkfhytqkslslspgk(seqidno：6).在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包括与以下具有信号肽，并且具有nhance突变的人igg1fc结构域(信号肽和突变残基加下划线)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：metpaqllfllllwlpdttgdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealkfhytqkslslspgk(seqidno：7).在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包括与以下具有信号肽，并且具有lala突变与nhance突变两者的人igg1fc结构域(突变残基加下划线)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：metpaqllfllllwlpdttgdkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealkfhytqkslslspgk(seqidno：8).在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包括与以下野生型人igg4fc结构域具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：eskygppcpscpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk(seqidno：9).在一些实施方案中，适于本发明的fc结构域包括与以下具有s241p突变的人igg4fc结构域(突变残基加下划线)具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：eskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk(seqidno：10).在一些实施方案中，合适的fc结构域包含与seqidno：3、seqidno：4、或seqidno：5、seqidno：6、seqidno：7、seqidno：8、seqidno：9、或seqidno：10具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多同源或同一性的氨基酸序列。b.igg4在一些实施方案中，在hae的情况下，“效应物失效”fc融合蛋白的igg4igg选择是重要的(消除补体活化和adcc)。具体来说，据报道igg4相比于野生型igg1具有较低补体活化。表达天然igg4会产生混合种类的构建体尺寸分级。因此，基于先前技术，由于由igg4s241p突变体所展现的稳定性增加和二聚结构维持，所以选择igg4s241p用于这个程序。根据本发明的人igg4核心铰链区序列优选包含根据如按照kabat的eu索引的s228p取代。根据kabat等(1987sequencesofproteinsofimmunologicalinterest.unitedstatesdepartmentofhealthandhumanservices，washingtondc.)，这个取代也已被称为s241p。该取代具有使得铰链区的核心的序列与野生型igg1或igg2同种型抗体的铰链区核心序列相同的作用。关于igg4同种型抗体，它导致产生igg4抗体的同源形式，并且因此消除常常导致产生异二聚igg4抗体的重链解离和重新缔合。在一些实施方案中，igg4对于在高浓度下的稳定性是优选的。c.示例性c1-inh融合蛋白在特定实施方案中，合适的重组c1-inh融合蛋白包括c1-inh多肽、fc结构域，其中所述c1-inh多肽包含与野生型人c1-inh多肽(seqidno:1)或截短的c1-inh多肽(seqidno:2)具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％同一性的氨基酸序列。在一些实施方案中，存在使c1-inh多肽与fc结构域缔合的接头。在一些实施方案中，合适的重组c1-inh融合蛋白具有在约0.5-10天(例如约0.5-5.5天、约0.5-5天、约1-5天、约1.5-5天、约1.5-4.5天、约1.5-4.0天、约1.5-3.5天、约1.5-3天、约1.5-2.5天、约2-6天、约2-5.5天、约2-5天、约2-4.5天、约2-4天、约2-3.5天、约2-3天)的范围内的体内半衰期。在一些实施方案中，合适的重组c1-inh融合蛋白具有在约2-10天的范围内(例如在约2.5-10天、约3-10天、约3.5-10天、约4-10天、约4.5-10天、约5-10天、约3-8天、约3.5-8天、约4-8天、约4.5-8天、约5-8天、约3-6天、约3.5-6天、约4-6天、约4.5-6天、约5-6天的范围内)的体内半衰期。通常，合适的重组c1-inh融合蛋白具有是或大于约12小时、18小时、24小时、36小时、2天、2.5天、3天、3.5天、4天、4.5天、5天、5.5天、6天、6.5天、7天、7.5天、8天、8.5天、9天、9.5天或10天的体内半衰期。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白具有介于0.5与10天之间、介于1天与10天之间、介于1天与9天之间、介于1天与8天之间、介于1天与7天之间、介于1天与6天之间、介于1天与5天之间、介于1天与4天之间、介于1天与3天之间、介于2天与10天之间、介于2天与9天之间、介于2天与8天之间、2天与7天之间、2天与6天之间、2天与5天之间、2天与4天之间、介于2天与3天之间、介于2.5天与10天之间、介于2.5天与9天之间、介于2.5天与8天之间、介于2.5天与7天之间、介于2.5天与6天之间、介于2.5天与5天之间、介于2.5天与4天之间、介于3天与10天之间、介于3天与9天之间、介于3天与8天之间、介于3天与7天之间、介于3天与6天之间、介于3天与5天之间、介于3天与4天之间、介于3.5天与10天之间、介于3.5天与9天之间、介于3.5天与8天之间、介于3.5天与7天之间、介于3.5天与6天之间、介于3.5天与5天之间、介于3.5天与4天之间、介于4天与10天之间、介于4天与9天之间、介于4天与8天之间、介于4天与7天之间、介于4天与6天之间、介于4天与5天之间、介于4.5天与10天之间、介于4.5天与9天之间、介于4.5天与8天之间、介于4.5天与7天之间、介于4.5天与6天之间、介于4.5天与5天之间、介于5天与10天之间、介于5天与9天之间、介于5天与8天之间、介于5天与7天之间、介于5天与6天之间、介于5.5天与10天之间、介于5.5天与9天之间、介于5.5天与8天之间、介于5.5天与7天之间、介于5.5天与6天之间、介于6天与10天之间、介于7天与10天之间、介于8天与10天之间、介于9天与10天之间的体内半衰期。在某些实施方案中，如图2a和图2b中所示，fc部分可直接融合于全长(1-478个氨基酸)以及截短(98-478)的c1-抑制剂的n末端区域。作为非限制性实例，合适的c1-inhfc融合蛋白可具有以下显示的氨基酸序列：dkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgknpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：11)或dkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgkgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：12)或dkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgknpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：13)或dkthtcppcpapeaaggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgkgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：14)或eskygppcpscpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgknpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：32)或eskygppcpscpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgkgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：33)或eskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgknpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：15)或eskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgkgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：16).在一些实施方案中，合适的重组c1-inhfc融合蛋白具有与seqidno：11、seqidno：12、seqidno：13、seqidno：14、seqidno：15、seqidno：16、seqidno：32或seqidno：33具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多同源性或同一性的氨基酸序列。预期c1-inh-fc融合蛋白可以各种构型提供，包括同二聚构型或单体构型。举例来说，合适的同二聚构型可被设计以使融合配偶体(例如c1-inh多肽加接头)的c末端连接于两个fc多肽链的n末端。合适的单体构型可被设计以使融合配偶体(例如c1-inh多肽加接头)的c末端融合于一个fc二聚体。对于某些应用和施用途径例如皮下施用，单体(在本文中也称为单价)形式可为优选的。单体构型可降低空间位阻，增加半衰期，和/或可增加生物利用度。对于c1-inhfc融合构建体，单价形式也可为优选的，因为c1-inh是自杀性抑制剂。因为它是自杀性抑制剂，所以二聚体fc融合物的一个c1-inh“臂”的结合将导致结合的c1-inh融合蛋白的清除率增加，即使在第二臂仍然未结合的情况下。单体fc融合蛋白与二聚fc融合蛋白两者的优势是发现相比于单独c1-inh的表达，在fc情况下的表达在较高水平下发生。已显示比较二聚c1-inhfc构建体与重组c1-inh的活性测定具有类似c1q结合活性。也测试包括接头，并且发现不影响fc-c1-inh融合蛋白结合它的靶标的能力。制备单体抗体融合蛋白的方法包括例如pct公布号wo2011/063348；wo2012/020096；wo2013/138643；wo2014087299；dumont,j.等,monomericfcfusions:impactonpharmacokineticandbiologicalactivityofproteintherapeutics,biodrugs,20(3):151-160(2006)；ishino,t.等,proteinstructureandfolding:half-lifeextensionofbiotherapeuticsmodalitybyn-glycosylationfortheengineeringamonomericfcdomain,j.biol.chem.,288:16529-16537(2013)中所述的那些，所述专利和参考文献的公开内容以引用的方式并入本文。可通过使用与表达单独fc的质粒共同转染的含有fc-c1的质粒来制备单价c1-抑制剂。此外，它可通过使用双启动子质粒来制备，其中一个启动子产生fc-c1，而另一启动子产生单独fc。也可使用双特异性技术制备单价fc，其中使fc的铰链区中的特定氨基酸突变以赋予fc区的稳定性(例如钮和孔(knobandhole)技术或驱使形成单价c1的其它稳定化突变)。如本文所用，关于本文标识的参照蛋白质序列(例如参照c1-inh蛋白质序列)的“氨基酸序列同一性百分比(％)”定义为在比对序列，以及必要时引入空位以实现最大序列同一性百分比，并且不将任何保守性取代考虑为序列同一性的一部分之后，候选序列中与参照序列中的氨基酸残基同一的氨基酸残基的百分比。出于确定氨基酸序列同一性百分比的目的的比对可以本领域技能内的各种方式实现，例如使用可公开获得的计算机软件诸如blast、align或megalign(dnastar)软件。本领域技术人员可确定用于测量比对的适当参数，包括为在所比较序列的全长上实现最大对准所需的任何算法。优选地，wu-blast-2软件用于确定氨基酸序列同一性(altschul等,methodsinenzymology266,460-480(1996)；http://blast.wustl/edu/blast/readme.html)。wu-blast-2使用若干搜索参数，其中大多数被设置成缺省值。可调整参数设为以下值：重叠间距＝1，重叠分数＝0.125，字阈值(worldthreshold)(t)＝11。hsp评分(s)和hsps2参数是动态值，并且由程序自身视特定序列的组成来确定，然而，最小值可被调整，并且如上所指示加以设置。白蛋白结构域白蛋白是一种占血清蛋白质的约一半的可溶性单体蛋白质。白蛋白主要充当类固醇、脂肪酸和甲状腺激素的载体蛋白，并且在使细胞外液体积稳定方面起作用。白蛋白表现为分子量是66,500的球状未糖基化的血清蛋白质。白蛋白在肝中以具有n末端肽的前白蛋白原(preproalbumin)形式合成，所述n末端肽在初生蛋白质从糙面内质网释放之前被移除。产物白蛋白原转而在高尔基小泡(golgivesicle)中被裂解以产生分泌白蛋白。白蛋白由三个同源性结构域(i-iii)组成，并且这些结构域各自包含两个子结构域(a和b)。人血清白蛋白的主要配体结合区域位于子结构域iia和iiia中的空腔中，所述空腔主要由疏水性和带正电荷残基形成，并且展现类似化学性质。人血清白蛋白具有585个氨基酸和66,500da的分子质量。氨基酸包括35个半胱氨酸，其中除一个之外全都涉及于17个稳定化二硫键的形成中。白蛋白具有19天的延长血清半衰期。fcrn控制白蛋白的长久血清半衰期。fcrn是一种双重结合受体，其除白蛋白之外也结合igg，并且保护两种蛋白质免遭细胞内降解。已显示白蛋白分子的c末端结构域对于与fcrn的结合至关重要。缺乏结构域iiib或突变464his、510his和535his几乎完全消除fcrn结合。本发明的白蛋白融合蛋白是单体。在一些实施方案中，由于以上关于单体fc融合物实施方案所述的原因，所以这个特征可为与二聚fc融合物实施方案相比的优势。在一些实施方案中，适于本发明的白蛋白多肽包括与以下野生型人血清白蛋白具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：mkwvtfisllflfssaysrgvfrrdahksevahrfkdlgeenfkalvliafaqylqqcpfedhvklvnevtefaktcvadesaencdkslhtlfgdklctvatlretygemadccakqepernecflqhkddnpnlprlvrpevdvmctafhdneetflkkylyeiarrhpyfyapellffakrykaafteccqaadkaacllpkldelrdegkassakqrlkcaslqkfgerafkawavarlsqrfpkaefaevsklvtdltkvhtecchgdllecaddradlakyicenqdsissklkeccekpllekshciaevendempadlpslaadfveskdvcknyaeakdvflgmflyeyarrhpdysvvlllrlaktykttlekccaaadphecyakvfdefkplveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalgl(seqidno：17).在一些实施方案中，适于本发明的白蛋白多肽包括与以下野生型人血清白蛋白的d3结构域具有至少50％(例如至少55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)同一性的氨基酸序列：metpaqllfllllwlpdttgveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalgl(seqidno：20).接头或间隔体c1-inh结构域可直接或间接连接于fc结构域或白蛋白结构域。在一些实施方案中，合适的重组c1-inh融合蛋白含有接合c1-inh多肽和fc结构域的接头或间隔体。在一些实施方案中，合适的重组c1-inh融合蛋白含有接合c1-inh多肽和白蛋白多肽的接头或间隔体。氨基酸接头或间隔体通常被设计以具有可挠性或插入两个蛋白质部分之间的结构诸如α-螺旋。接头或间隔体可相对较短，或可较长。通常，在长度方面，接头或间隔体含有例如3-100(例如5-100、10-100、20-10030-100、40-100、50-100、60-100、70-100、80-100、90-100、5-55、10-50、10-45、10-40、10-35、10-30、10-25、10-20)个氨基酸。在一些实施方案中，在长度方面，接头或间隔体等于或长于2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100个氨基酸。通常，较长接头可降低空间位阻。在一些实施方案中，接头将包含甘氨酸和丝氨酸残基的混合物。在一些实施方案中，接头可另外包含苏氨酸、脯氨酸和/或丙氨酸残基。因此，在一些实施方案中，接头包含10-100、10-90、10-80、10-70、10-60、10-50、10-40、10-30、10-20、10-15个之间的氨基酸。在一些实施方案中，接头包含至少10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90或95个氨基酸。在一些实施方案中，接头不是由alevlfqgp组成的接头。作为非限制性实例，适于本发明的接头或间隔体包括但不限于ggg接头和ggggsggggs((ggggs)2接头seqidno:27)。在一些实施方案中，接头包含序列ggg和/或序列seqidno:27。其它合适的接头包括gapgggggaaaaaggggggap(gag接头，seqidno:34)；gapgggggaaaaaggggggapgggggaaaaaggggggap(gag2接头，seqidno:35)；和gapgggggaaaaaggggggapgggggaaaaaggggggapgggggaaaaaggggggap(gag3接头，seqidno:36)。合适的接头或间隔体也包括具有与以上示例性接头例如ggg接头、ggggsggggs((ggggs)2接头seqidno:27)、gag接头(seqidno:34)、gag2接头(seqidno:35)或gag3接头(seqidno:36)具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多同源性或同一性的氨基酸序列的那些。适于与一些实施方案一起使用的额外接头可见于2012年3月2日提交的us2012/0232021中，所述专利的公开内容据此以引用的方式整体并入本文。在一些实施方案中，提供使c1-inh多肽与白蛋白结构域缔合，而不实质上影响c1-inh多肽结合它的任何同源配体(例如c1s等)的能力的接头。在一些实施方案中，提供接头以使相较于单独c1-inh多肽，c1-inh肽与它的一种或多种同源配体的结合不改变。在一些实施方案中，提供接头以使相较于单独c1-inh多肽，c1-inh肽与它的一种或多种同源配体的结合不降低或减小。产生重组c1-inh融合蛋白适于本发明的重组c1-inh融合蛋白可通过任何可用手段来产生。举例来说，可通过利用被工程改造以表达重组c1-inh融合蛋白编码核酸的宿主细胞系统来重组产生重组c1-inh融合蛋白。或者或另外，可通过使内源性基因活化来产生重组c1-inh融合蛋白。或者或另外，重组c1-inh融合蛋白可部分或完全通过化学合成来制备。当重组产生蛋白质时，可使用任何表达系统。仅举几例来说，已知表达系统包括例如大肠杆菌(e.coli)、卵、杆状病毒、植物、酵母或哺乳动物细胞。在一些实施方案中，在哺乳动物细胞中产生适于本发明的重组c1-inh融合蛋白。可根据本发明使用的哺乳动物细胞的非限制性实例包括balb/c小鼠骨髓瘤株系(nso/l，ecacc编号：85110503)；人视网膜母细胞(per.c6，crucell,leiden,thenetherlands)；由sv40转化的猴肾cv1株系(cos-7，atcccrl1651)；人胚肾株系(被亚克隆以悬浮培养生长的hek293或293细胞，graham等,j.genvirol.,36:59,1977)；人纤维肉瘤细胞系(例如ht1080)；幼小仓鼠肾细胞(bhk21，atccccl10)；中国仓鼠卵巢细胞+/-dhfr(cho，urlaub和chasin,proc.natl.acad.sci.usa,77:4216,1980)；小鼠塞尔托利细胞(sertolicell)(tm4，mather,biol.reprod.,23:243-251,1980)；猴肾细胞(cv1atccccl70)；非洲绿猴肾细胞(vero-76，atcccrl-1587)；人宫颈癌细胞(hela，atccccl2)；犬肾细胞(mdck，atccccl34)；水牛大鼠肝细胞(brl3a，atcccrl1442)；人肺细胞(w138，atccccl75)；人肝细胞(hepg2，hb8065)；小鼠乳腺肿瘤(mmt060562，atccccl51)；tri细胞(mather等,annalsn.y.acad.sci.,383:44-68,1982)；mrc5细胞；fs4细胞；和人肝细胞瘤株系(hepg2)。在一些实施方案中，本发明提供由人细胞产生的重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，本发明提供由cho细胞或ht1080细胞产生的重组c1-inh融合蛋白。通常，被工程改造以表达重组c1-inh融合蛋白的细胞可包含编码本文所述的重组c1-inh融合蛋白的转基因。应了解编码重组c1-inh融合蛋白的核酸可含有调控序列、基因控制序列、启动子、非编码序列和/或用于表达重组c1-inh融合蛋白的其它适当序列。通常，使编码区可操作地与这些核酸组分中的一个或多个连接。转基因的编码区可包括一个或多个沉默突变以针对特定细胞类型优化密码子使用。举例来说，可针对在脊椎动物细胞中表达来优化c1-inh融合物转基因的密码子。在一些实施方案中，可针对在哺乳动物细胞中表达来优化c1-inh融合物转基因的密码子。在一些实施方案中，可针对在人细胞中表达来优化c1-inh融合物转基因的密码子。在一些实施方案中，可针对在cho细胞中表达来优化c1-inh融合物转基因的密码子。编码c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的核酸在一些实施方案中，提供包含编码重组目标基因(在本文中被称为转基因)诸如本文各种实施方案中所述的c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的核酸序列的核酸分子。在一些实施方案中，编码转基因的核酸可被修饰以提供所编码c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的表达增加，此也被称为密码子优化。举例来说，可通过改变编码序列的开放阅读框来修饰编码转基因的核酸。如本文所用，术语“开放阅读框”与“orf”同义，并且意指潜在能够编码蛋白质或蛋白质的一部分的任何核苷酸序列。开放阅读框通常以起始密码子(在标准密码的情况下表示为例如rna分子的aug和dna分子的atg)开始，并且以密码子三联体进行读取直至具有终止密码子(在标准密码的情况下表示为例如rna分子的uaa、uga或uag和dna分子的taa、tga或tag)的框架末端。如本文所用，术语“密码子”意指核酸分子中的三核苷酸序列，其在蛋白质合成期间指定特定氨基酸；也称为三联体或密码子三联体。举例来说，在标准遗传密码的情况下的64个可能密码子之中，两个密码子gaa和gag编码氨基酸谷氨酰胺，而密码子aaa和aag指定氨基酸赖氨酸。在标准遗传密码的情况下，三个密码子是终止密码子，其不指定氨基酸。如本文所用，术语“同义密码子”意指编码单一氨基酸的任何和所有密码子。除甲硫氨酸和色氨酸之外，氨基酸由两至六个同义密码子编码。举例来说，在标准遗传密码的情况下，编码氨基酸丙氨酸的四个同义密码子是gca、gcc、gcg和gcu，指定谷氨酰胺的两个同义密码子是gaa和gag，并且编码赖氨酸的两个同义密码子是aaa和aag。在一些实施方案中，可使用标准密码子优化方法修饰编码c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的开放阅读框的核酸。用于密码子优化的各种商业算法是可用的，并且可用于实施本发明。通常，密码子优化不改变编码的氨基酸序列。在一些实施方案中，密码子优化可导致氨基酸改变诸如取代、缺失或插入。通常，此类氨基酸改变不实质上改变蛋白质活性。示例性核酸序列编码具有与seqidno:11、seqidno:12、seqidno:13、seqidno:14、seqidno:15、seqidno:16、seqidno:18、seqidno:19、seqidno:21、seqidno:22、seqidno:23、seqidno:24、seqidno:25、seqidno:26、seqidno:28、seqidno:29、seqidno:30、seqidno:31、seqidno:32或seqidno:33具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更多同一性或同源性的氨基酸序列的c1-抑制剂fc融合蛋白和c1-抑制剂白蛋白融合蛋白。在一些实施方案中，核苷酸变化可改变开放阅读框内的同义密码子以与见于被选择来表达c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的特定异源性细胞中的内源性密码子使用一致。或者或另外，核苷酸变化可改变开放阅读框内的g+c含量以更好匹配见于异源性宿主细胞中存在的内源性核酸序列中的开放阅读框的平均g+c含量。核苷酸变化也可改变见于c1-抑制剂fc融合蛋白或c1-抑制剂白蛋白融合物序列内的多聚单核苷酸区域或内部调控或结构位点。因此，设想多种经修饰或经优化的核苷酸序列，包括不限于提供c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白在原核细胞；酵母细胞；昆虫细胞中；以及在哺乳动物细胞中的表达增加的核酸序列。通常，经修饰的核酸编码具有或不具有氨基酸序列改变的c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白。在存在氨基酸改变的情况下，此类改变通常不实质上降低c1-抑制剂fc融合蛋白或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白活性。在一些实施方案中，此类改变增加和/或增强c1-抑制剂fc融合蛋白或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白活性。活性可指以下非限制性参数清单：半衰期增加、由宿主细胞达成的蛋白质表达增加/升高、所表达蛋白质的稳定性增加、所表达蛋白质的溶解性增加、所表达蛋白质的聚集降低、所表达蛋白质的配制更简单、所表达蛋白质的纯化更简单、所表达蛋白质对ph变化的耐受性增加、蛋白质耐受高ph和低ph条件的能力增加、所表达蛋白质适于在高浓度下配制。表达载体可将编码如本申请中所述的c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的核酸序列分子克隆(插入)至适合载体中以在宿主细胞中增殖或表达。广泛多种表达载体可用于实施本发明，包括不限于原核表达载体；酵母表达载体；昆虫表达载体和哺乳动物表达载体。适于本发明的示例性载体包括但不限于基于病毒的载体(例如基于aav的载体、基于逆转录病毒的载体、基于质粒的载体)。在一些实施方案中，可将编码c1-抑制剂fc融合蛋白的核酸序列插入合适的载体中。在一些实施方案中，可将编码c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的核酸序列插入合适的载体中。通常，使编码c1-抑制剂fc融合蛋白或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的核酸可操作地连接于各种调控序列或元件。调控序列或元件可将各种调控序列或元件并入适于本发明的表达载体中。示例性调控序列或元件包括但不限于启动子、增强子、阻遏子或抑制子、5’未翻译(或非编码)序列、内含子、3’未翻译(或非编码)序列。如本文所用，“启动子”或“启动子序列”是能够结合(例如直接或通过其它启动子结合的蛋白质或物质)细胞中的rna聚合酶，并且启动编码序列的转录的dna调控区。一般来说，启动子序列在它的3’末端由转录起始位点结合，并且在上游(5’方向)延伸以包括为在任何水平上启动转录所必需的最小数目的碱基或元件。可使启动子可操作地与以下各物缔合或可操作地连接于以下各物：表达控制序列(包括增强子和阻遏子序列)或待表达的核酸。在一些实施方案中，启动子可为诱导型启动子。在一些实施方案中，诱导型启动子可为单向或双向(bio-directional)启动子。在一些实施方案中，启动子可为组成型启动子。在一些实施方案中，启动子可为杂合启动子，其中含有转录调控区的序列从一个来源获得，并且含有转录起始区的序列从第二来源获得。用于使控制元件连接于转基因内的编码序列的系统在本领域中是熟知的(一般性分子生物和重组dna技术描述于sambrook,fritsch和maniatis,molecularcloning:alaboratorymanual,第2版,coldspringharborlaboratorypress,coldspringharbor,ny,1989中，所述书籍以引用的方式并入本文)。适于插入转基因以在各种宿主细胞中在多种生长和诱导条件下表达的商业载体在本领域中也是熟知的。在一些实施方案中，特异性启动子可用于控制转基因在哺乳动物宿主细胞中的表达，诸如但不限于srα启动子(takebe等,molec.andcell.bio.8:466-472(1988))、人cmv立即早期启动子(boshart等,cell41:521-530(1985)；foecking等,gene45:101-105(1986))、人cmv启动子、人cmv5启动子、鼠类cmv立即早期启动子、ef1-α-启动子、用于肝特异性表达的杂合cmv启动子(例如通过使cmv立即早期启动子与人α-1-抗胰蛋白酶(hat)或白蛋白(hal)启动子的转录启动子元件缀合来制备)、或用于肝细胞瘤特异性表达的启动子(例如其中使人白蛋白的转录启动子元件(hal；约1000bp)或人α-1-抗胰蛋白酶的转录启动子元件(hat，约2000bp)与人α-1-微球蛋白和尿抑胰酶素(bikunin)前体基因(ambp)的145长度的增强子元件组合；hal-ambp和hat-ambp)；sv40早期启动子区域(benoist等,nature290:304-310(1981))、黄杉毒蛾(orgyiapseudotsugata)立即早期启动子、疱疹胸苷激酶启动子(wagner等,proc.natl.acad.sci.usa78:1441-1445(1981))；或金属硫蛋白基因的调控序列(brinster等,nature296:39-42(1982))。在一些实施方案中，哺乳动物启动子是组成型启动子，诸如但不限于次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶(hptr)启动子、腺苷脱氨酶启动子、丙酮酸激酶启动子、β-肌动蛋白启动子以及为本领域普通技术人员所知的其它组成型启动子。在一些实施方案中，特异性启动子可用于控制转基因在原核宿主细胞中的表达，诸如但不限于β-内酰胺酶启动子(villa-komaroff等,proc.natl.acad.sci.usa75:3727-3731(1978))；tac启动子(deboer等,proc.natl.acad.sci.usa80:21-25(1983))；t7启动子、t3启动子、m13启动子或m16启动子；控制转基因在酵母宿主细胞中的表达，诸如但不限于gal1、gal4或gal10启动子、adh(醇脱氢酶)启动子、pgk(磷酸甘油激酶)启动子、碱性磷酸酶启动子、甘油醛-3-磷酸脱氢酶iii(tdh3)启动子、甘油醛-3-磷酸脱氢酶ii(tdh2)启动子、甘油醛-3-磷酸脱氢酶i(tdh1)启动子、丙酮酸激酶(pyk)启动子、烯醇酶(eno)启动子或磷酸丙糖异构酶(tpi)启动子。在一些实施方案中，启动子可为病毒启动子，其中许多能够调控转基因在包括哺乳动物细胞的若干宿主细胞类型中的表达。已显示会驱动编码序列在真核细胞中组成型表达的病毒启动子包括例如猿猴病毒启动子、单纯疱疹病毒启动子、乳头状瘤病毒启动子、腺病毒启动子、人免疫缺陷病毒(hiv)启动子、劳斯肉瘤病毒(roussarcomavirus)启动子、巨细胞病毒(cmv)启动子、莫洛尼(moloney)鼠类白血病病毒和其它逆转录病毒的长末端重复序列(ltr)、单纯疱疹病毒的胸苷激酶启动子以及为本领域普通技术人员所知的其它病毒启动子。在一些实施方案中，表达载体的基因控制元件也可包括分别涉及启动转录和翻译的5’非转录序列和5’非翻译序列，诸如tata框、加帽序列、caat序列、kozak序列等。增强子元件可任选用于增加待表达的多肽或蛋白质的表达水平。已显示会在哺乳动物细胞中起作用的增强子元件的实例包括如dijkema等,emboj.(1985)4:761中所述的sv40早期基因增强子以及源于劳斯肉瘤病毒(rsv)的长末端重复序列(ltr)(如gorman等,proc.natl.acad.sci.usa(1982b)79:6777中所述)和人巨细胞病毒(如boshart等,cell(1985)41:521中所述)的增强子/启动子。表达载体的遗传控制元件也将包括涉及终止转录和翻译的3’非转录序列和3’非翻译序列。分别来说，诸如用于稳定化和加工从启动子转录的mrna的3’末端的多聚腺苷酸化(polya)信号。polya信号包括例如兔β球蛋白polya信号、牛生长激素polya信号、鸡β球蛋白终止子/polya信号或sv40晚期polya区域。可选择标记表达载体将优选但任选包括至少一种可选择标记。在一些实施方案中，可选择标记是编码可操作地连接于一种或多种遗传调控元件，以给予宿主细胞在细胞毒性化学物质和/或药物存在下生长时维持活力的能力的抗性基因的核酸序列。在一些实施方案中，可选择剂可用于维持表达载体保留在宿主细胞内。在一些实施方案中，可选择剂可用于防止表达载体内的转基因序列的修饰(即甲基化)和/或沉默。在一些实施方案中，可选择剂用于维持载体在宿主细胞内游离型表达。在一些实施方案中，可选择剂用于促进转基因序列稳定整合至宿主细胞基因组中。在一些实施方案中，试剂和/或抗性基因可包括但不限于用于真核宿主细胞的甲氨蝶呤(mtx)、二氢叶酸还原酶(dhfr，美国专利号4,399,216；4,634,665；4,656,134；4,956,288；5,149,636；5,179,017)、氨苄青霉素、新霉素(g418)、博莱霉素(zeomycin)、霉酚酸或谷氨酰胺合成酶(gs，美国专利号5,122,464；5,770,359；5,827,739)；用于原核宿主细胞的四环素、氨苄青霉素、卡那霉素或氯霉素；和用于酵母宿主细胞的ura3、leu2、his3、lys2、his4、ade8、cup1或trp1。可将表达载体转染、转化或转导至宿主细胞中。如本文所用，术语“转染”、“转化”和“转导”全都是指将外源性核酸序列引入宿主细胞中。在一些实施方案中，将含有编码c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的核酸序列的表达载体同时转染、转化或转导至宿主细胞中。在一些实施方案中，将含有编码c1-抑制剂fc融合蛋白和/或c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的核酸序列的表达载体依序转染、转化或转导至宿主细胞中。举例来说，可首先将编码c1-抑制剂融合蛋白的载体转染、转化或转导至宿主细胞中，随后转染、转化或转导编码一种或多种优选通过增加唾液酸化来增强所表达c1-抑制剂融合蛋白的糖基化的蛋白质的载体，并且反之亦然。本领域中熟知的转化、转染和转导方法的实例包括脂质体递送即hawley-nelson,focus15:73(1193)的lipofectaminetm(gibcobrl)方法、电穿孔、graham和vandererb,virology,52:456-457(1978)的capo4递送方法、deae-右旋糖苷介导的递送、显微注射、基因枪粒子递送、聚凝胺介导的递送、阳离子介导的脂质递送、转导和病毒性感染，诸如像逆转录病毒、慢病毒、腺病毒腺相关病毒和杆状病毒(昆虫细胞)。细胞宿主转化的一般性方面已在本领域中加以描述，诸如由axel在美国专利号4,399,216中描述；sambrook(上文),第1-4和16-18章；ausubel(上文),第1、9、13、15和16章。对于用于转化哺乳动物细胞的各种技术，参见keown等,methodsinenzymology(1989)，keown等,methodsinenzymology,185:527-537(1990)，以及mansour等,nature,336:348-352(1988)。一旦引入细胞内部，表达载体即可稳定整合在基因组中，或以染色体外构建体形式存在。载体也可被扩增，并且多个拷贝可存在或整合于基因组中。在一些实施方案中，本发明的细胞可含有编码c1-抑制剂融合蛋白的核酸的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20个或更多个拷贝。在一些实施方案中，本发明的细胞可含有编码c1-抑制剂融合蛋白的核酸的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20个或更多个拷贝。在一些实施方案中，本发明的细胞可含有编码c1-抑制剂fc融合蛋白与一种或多种优选通过增加唾液酸化来增强所表达c1-抑制剂融合蛋白的糖基化的蛋白质两者的核酸的多个拷贝(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20个或更多个)。也可通过本文所述的各种方法来操纵唾液酸化。在不希望受任何理论束缚下，发现唾液酸化降低与所公开构建体的肝素结合增加，由此阻止c1-inh结合位点结合靶标相关联。肝素结合也增加内化至溶酶体中，由此使清除率增加的可能性。宿主细胞如本文所用，术语“宿主细胞”是指可用于产生重组c1-抑制剂融合蛋白的细胞。具体而言，宿主细胞适于在大规模上产生重组c1-抑制剂融合蛋白。合适的宿主细胞可源于多种生物体，包括但不限于哺乳动物、植物、鸟(例如禽类系统)、昆虫、酵母和细菌。在一些实施方案中，宿主细胞是哺乳动物细胞。在一些实施方案中，合适的宿主细胞被工程改造以改进所表达重组c1-抑制剂融合蛋白的糖基化特征。在本发明的一些实施方案中，c1-inh多肽与天然血浆源性c1-inh的类似部分具有相同或类似糖基化特征。在一些实施方案中，c1-inh多肽与天然血浆源性c1-inh具有至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％等同聚糖。在一些实施方案中，c1-inh融合蛋白的糖基化特征具有人源化糖基化特征。在一些实施方案中，相较于天然血浆源性c1-inh，c1-inh融合蛋白具有增加的唾液酸化。改进糖基化特征可指使唾液酸化增加和/或使糖基化特征人源化，例如在经工程改造细胞中表达包含c1-inh多肽的重组c1-抑制剂融合蛋白，由此产生相比于在非工程改造细胞中表达的c1-inh多肽，更类似于天然人c1-inh的糖基化特征。改进也可指相较于ruconest，使c1-inh融合物的糖基化特征增加、增强和/或优化。改变、控制、操纵、改进、增强和/或优化蛋白质的糖基化特征的各种方法在本领域中是已知的。可被优化的糖基化特征表征包括聚糖残基的数目、聚糖残基连接位置、聚糖连接方式(例如键的类型)、聚糖连接过程、和连接于蛋白质或多肽的聚糖残基的身份。本发明的融合蛋白的任何部分的糖基化特征都被预期作为适于糖基化优化的目标。本发明的融合蛋白的可针对糖基化加以优化的部分包括但不限于本文公开的c1-inh多肽、fc结构域、白蛋白多肽和/或接头。涵盖控制糖基化特征的这些方法，以及熟练人士将鉴于本公开而理解为在优化本发明的融合蛋白的糖基化方面具有效用的尚有待于发现的其它方法。改变、控制、操纵、改进、增强和/或优化本发明的c1-inh蛋白和多肽的糖基化特征的方法包括体外、原位和体内方法。在一些实施方案中，通过翻译后和/或化学修饰所表达蛋白质或多肽来改变所表达蛋白质或多肽的糖基化特征。在一些实施方案中，相较于尚未经受翻译后和/或化学修饰，具有相同序列的c1-inh融合蛋白，已经受所述翻译后和/或化学修饰的c1-inh融合蛋白具有改变、改进、增强、人源化和/或优化的糖基化特征。在一些实施方案中，相较于尚未经受翻译后和/或化学修饰，具有相同序列的c1-inh融合蛋白，已经受所述翻译后和/或化学修饰的c1-inh融合蛋白具有改变、改进、增强、人源化和/或优化的唾液酸化特征。在一些实施方案中，相较于由尚未被工程改造以增强糖基化的相同细胞系表达，具有相同序列的c1-inh融合蛋白，由被工程改造以增强糖基化的细胞系表达的c1-inh融合蛋白具有改变、改进、增强、人源化和/或优化的糖基化特征。在一些实施方案中，相较于由尚未被工程改造以增强唾液酸化的相同细胞系表达，具有相同序列的c1-inh融合蛋白，由被工程改造以增强唾液酸化的细胞系表达的c1-inh融合蛋白具有改变、改进、增强、人源化和/或优化的唾液酸化特征。在一些实施方案中，相较于由在各种条件下培养以增强糖基化的细胞系表达，具有相同序列的c1-inh融合蛋白，由在各种条件下培养以增强糖基化的细胞系表达的c1-inh融合蛋白具有改变、改进、增强、人源化和/或优化的糖基化特征。在一些实施方案中，相较于由在各种条件下培养以增强唾液酸化的细胞系表达，具有相同序列的c1-inh融合蛋白，由在各种条件下培养以增强唾液酸化的细胞系表达的c1-inh融合蛋白具有改变、改进、增强、人源化和/或优化的唾液酸化特征。在一些实施方案中，相较于ruconest，c1-inh融合蛋白具有改变、改进、增强、人源化和/或优化的糖基化特征。在一些实施方案中，相较于人血浆源性c1-inh，c1-inh融合蛋白具有改变、改进、增强、人源化和/或优化的糖基化特征。在一些实施方案中，操纵细胞培养条件以实现表达具有所需糖基化特征的蛋白质。这些细胞培养条件包括控制产生和培养过程(包括培养时长)，向培养基中添加添加剂，共同表达用以通过增加糖基化来增强糖基化的基因，和/或工程改造细胞以剔除与聚糖降解相关的酶(例如唾液酸酶)，阻止其表达，使其失活或对其进行破坏。适于操纵糖基化的方法包括但不限于例如美国专利号5,047,335；5,096,816；5,705,364；7,645,609；8,273,723；8,524,477；8,617,878；8,871,723；pct公布号wo2006/106348；wo2007/095506；wo2008/025856；wo2010/007214；wo2010/099394；和wo2013/093760中所述的那些，所述专利的公开内容以引用的方式并入本文。对宿主细胞和经转染宿主细胞的特定克隆进行选择也可用于增强糖基化。增强糖基化的其它方法包括开发用以富集具有所需糖基化特征的蛋白质或多肽的纯化方法。操纵蛋白质的唾液酸化特征的各种方法在本领域中是已知的。本发明涵盖这些方法以及尚有待于发现的其它方法。操纵本发明的c1-inh蛋白和多肽的唾液酸化特征的方法包括体外、原位和体内方法。在一些实施方案中，通过表达后化学修饰所表达蛋白质或多肽来改变所表达蛋白质或多肽的唾液酸化特征。在一些实施方案中，操纵细胞培养条件以实现表达具有所需唾液酸化特征的蛋白质。这些细胞培养条件包括控制产生和培养过程(包括培养时长)，向培养基中添加添加剂，和/或共同表达用以增强唾液酸化的基因。对宿主细胞和经转染宿主细胞的特定克隆进行选择也可用于增强唾液酸化。增强唾液酸化的其它方法包括开发用以富集具有所需唾液酸化特征的蛋白质或多肽的纯化方法。也可通过本文所述的各种方法来操纵唾液酸化。在不希望受任何理论束缚下，发现唾液酸化降低与所公开构建体的肝素结合增加，由此阻止c1-inh结合位点结合靶标相关联。肝素结合也增加内化至溶酶体中，由此使清除率增加的可能性。哺乳动物细胞系易经受细胞培养以及多肽表达的任何哺乳动物细胞或细胞类型都可根据本发明用作宿主细胞。可根据本发明使用的哺乳动物细胞的非限制性实例包括人胚肾293细胞(hek293)、hela细胞；balb/c小鼠骨髓瘤株系(nso/l，ecacc编号：85110503)；人视网膜母细胞(per.c6(crucell,leiden,thenetherlands))；由sv40转化的猴肾cv1株系(cos-7，atcccrl1651)；人胚肾株系(被亚克隆以悬浮培养生长的293或293细胞，graham等,j.genvirol.,36:59(1977))；幼小仓鼠肾细胞(bhk，atccccl10)；中国仓鼠卵巢细胞+/-dhfr(cho，urlaub和chasin,proc.natl.acad.sci.usa,77:4216(1980))；小鼠塞尔托利细胞(tm4，mather,biol.reprod.,23:243-251(1980))；猴肾细胞(cv1atccccl70)；非洲绿猴肾细胞(vero-76，atcccrl-1587)；人宫颈癌细胞(hela，atccccl2)；犬肾细胞(mdck，atccccl34)；水牛大鼠肝细胞(brl3a，atcccrl1442)；人肺细胞(w138，atccccl75)；人肝细胞(hepg2，hb8065)；小鼠乳腺肿瘤(mmt060562，atccccl51)；tri细胞(mather等,annalsn.y.acad.sci.,383:44-68(1982))；mrc5细胞；fs4细胞；和人肝细胞瘤株系(hepg2)。在一些实施方案中，合适的哺乳动物细胞不是内体酸化缺陷细胞。另外，表达多肽或蛋白质的许多可商购和非可商购获得的杂交瘤细胞系可根据本发明加以利用。本领域技术人员将了解杂交瘤细胞系可能具有不同营养要求和/或可能要求不同培养条件以达成最优生长和多肽或蛋白质表达，并且将能够根据需要修改条件。非哺乳动物细胞系易经受细胞培养以及多肽表达的任何非哺乳动物源性细胞或细胞类型都可根据本发明用作宿主细胞。可根据本发明使用的非哺乳动物宿主细胞和细胞系的非限制性实例包括源于以下的细胞和细胞系：对于酵母来说的巴斯德毕赤酵母(pichiapastoris)、甲醇毕赤酵母(pichiamethanolica)、安格斯毕赤酵母(pichiaangusta)、粟酒裂殖酵母(schizosacccharomycespombe)、酿酒酵母(saccharomycescerevisiae)和解脂耶罗威亚酵母(yarrowialipolytica)；对于昆虫来说的草地贪夜蛾(sodopterafrugiperda)、粉纹夜蛾(trichoplusisni)、黑腹果蝇(drosophilamelangoster)和烟草天蛾(manducasexta)；以及对于细菌来说的大肠杆菌(escherichiacoli)、鼠伤寒沙门氏菌(salmonellatyphimurium)、枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)、地衣芽孢杆菌(bacilluslichenifonnis)、脆弱拟杆菌(bacteroidesfragilis)、产气荚膜梭菌(clostridiaperfringens)、艰难梭菌(clostridiadifficile)；和来自两栖动物的爪蟾(xenopuslaevis)。适合于贴壁生长相对于悬浮生长在某些实施方案中，基于在选择用于培养细胞的特定条件下的某些优选属性或生长来选择用于产生细胞系的宿主细胞。本领域技术人员应了解，所述属性可基于确定株系(即可商购获得的经表征细胞系)的已知特征和/或性状或通过经验评估来确定。在一些实施方案中，细胞系可由于它能够在细胞滋养层上生长而被选择。在一些实施方案中，细胞系可由于它能够悬浮生长而被选择。在一些实施方案中，细胞系可由于它能够以贴壁细胞单层形式生长而被选择。在一些实施方案中，此类细胞可与任何组织培养容器或用合适的贴壁基质处理的任何容器一起使用。在一些实施方案中，合适的贴壁基质选自由以下组成的组：胶原蛋白(例如胶原蛋白i、ii、ii或iv)、明胶、纤连蛋白、层粘连蛋白、玻连蛋白(vitronectin)、纤维蛋白原、bdmatrigeltm、基底膜基质、硫酸皮肤素蛋白聚糖、聚d-赖氨酸和/或其组合。在一些实施方案中，可选择贴壁宿主细胞，并且在特定生长条件下加以改进以进行悬浮生长。改进贴壁细胞以进行悬浮生长的此类方法在本领域中是已知的。举例来说，可通过随时间从生长培养基逐渐移除动物血清来使细胞适应于悬浮培养生长。细胞系选择和评估根据本发明，被工程改造以表达重组c1-inh融合蛋白的细胞由于它能够在商业可行规模上产生重组c1-inh融合蛋白而被选择。具体而言，根据本发明的经工程改造细胞能够在高水平下和/或以高度酶活性产生重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，一旦在细胞培养条件(例如标准大规模悬浮或贴壁培养条件)下培育，所需细胞即可以是或大于约5皮克/细胞/天(例如大于约10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95或100皮克/细胞/天)的量产生c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，一旦在细胞培养条件(例如标准大规模悬浮或贴壁培养条件)下培育，所需细胞即能够以在约5-100皮克/细胞/天(例如约5-90皮克/细胞/天、约5-80皮克/细胞/天、约5-70皮克/细胞/天、约5-60皮克/细胞/天、约5-50皮克/细胞/天、约5-40皮克/细胞/天、约5-30皮克/细胞/天、约10-90皮克/细胞/天、约10-80皮克/细胞/天、约10-70皮克/细胞/天、约10-60皮克/细胞/天、约10-50皮克/细胞/天、约10-40皮克/细胞/天、约10-30皮克/细胞/天、约20-90皮克/细胞/天、约20-80皮克/细胞/天、约20-70皮克/细胞/天、约20-60皮克/细胞/天、约20-50皮克/细胞/天、约20-40皮克/细胞/天、约20-30皮克/细胞/天)的范围内的量产生c1-inh融合蛋白。c1-inh的半衰期可受糖基化特征影响。如上所讨论，本发明的细胞可被工程改造以改进所表达c1-inh融合蛋白的糖基化特征。举例来说，已显示(pharmingn.v.)作为一种唾液酸化程度较小和/或与血浆源性人c1-inh具有不同唾液酸化分布的重组c1-inh多肽，相比于血浆源性人c1-inh，具有较短半衰期。davis,b.和bernstein,j.a.,conestatalfaforthetreatmentofangioedemaattacks,therclinriskmanag.7:265–273(2011)；koles,k.等,influenceoflactationparametersonthen-glycosylationofrecombinanthumanc1inhibitorisolatedfromthemilkoftransgenicrabbits,glycobiology,14(11):979-986(2004)；koles,k.等,n-ando-glycansofrecombinanthumanc1inhibitorexpressedinthemilkoftransgenicrabbits,glycobiology,14(1):51-64(2004)。细胞培养基和培养条件各种细胞培养基和培养条件可用于使用根据本发明的经工程改造细胞产生重组c1-inh融合蛋白。举例来说，可在含血清或无血清培养基中产生重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，在无血清培养基中产生重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，在无动物物质培养基即缺乏动物源性组分的培养基中产生重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，在化学成分确定的培养基中产生重组c1-inh融合蛋白。如本文所用，术语“化学成分确定的营养培养基”是指其中基本上所有化学组分都是已知的培养基。在一些实施方案中，化学成分确定的营养培养基不含动物源性组分诸如血清、血清源性蛋白质(例如白蛋白或胎球蛋白)和其它组分。在一些情况下，化学成分确定的培养基包含一种或多种蛋白质(例如蛋白质生长因子或细胞因子。)在一些情况下，化学成分确定的营养培养基包含一种或多种蛋白质水解物。在其它情况下，化学成分确定的营养培养基是无蛋白质培养基，即不含有蛋白质、水解物或组成未知的组分的无血清培养基。在一些实施方案中，化学成分确定的培养基可补充以一种或多种动物源性组分。此类动物源性组分包括但不限于胎牛血清、马血清、山羊血清、驴血清、人血清和血清源性蛋白质诸如白蛋白(例如牛血清白蛋白或人血清白蛋白)。各种细胞培养条件可用于在大规模上产生重组c1-inh融合蛋白，包括但不限于滚瓶培养、生物反应器分批培养、灌注培养和生物反应器补料-分批培养。在一些实施方案中，由悬浮培养的细胞产生重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，由贴壁细胞产生重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，灌注培养用于控制所表达蛋白质的糖基化。示例性灌注培养方法包括但不限于例如美国专利号6,528,286和pct公布号wo1996/039488a1中所述的那些，所述专利的公开内容以引用的方式并入本文。示例性细胞培养基和培养条件描述于实施例章节中。所述实施例不意图具有限制性。纯化所表达的c1-inh融合蛋白各种方法可用于纯化或分离根据本文所述的各种方法产生的c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，所表达c1-inh融合蛋白被分泌至培养基中，并且因此可如例如通过离心或过滤来移除细胞和其它固体，作为纯化过程中的第一步。或者或另外，所表达的c1-inh融合蛋白结合于宿主细胞的表面。在这个实施方案中，使表达多肽或蛋白质的宿主细胞溶解以进行纯化。溶解哺乳动物宿主细胞可通过为本领域普通技术人员所熟知的许多手段来实现，包括用玻璃珠物理破坏和暴露于高ph条件。c1-inh融合蛋白可通过标准方法来分离和纯化，所述方法包括但不限于色谱法(例如离子交换、亲和、尺寸排阻和羟磷灰石色谱法)、凝胶过滤、离心、或溶解性差异、乙醇沉淀或通过用于纯化蛋白质的任何其它可用技术(参见例如scopes,proteinpurificationprinciplesandpractice第2版,springer-verlag,newyork,1987；higgins,s.j.和hames,b.d.(编),proteinexpression:apracticalapproach,oxfordunivpress,1999；以及deutscher,m.p.,simon,m.i.,abelson,j.n.(编),guidetoproteinpurification:methodsinenzymology(methodsinenzymologyseries,第182卷),academicpress,1997，全都以引用的方式并入本文)。特别是对于免疫亲和色谱法，可通过使蛋白质结合亲和柱来对它进行分离，所述亲和柱包含针对该蛋白质所产生，并且固定于固定载体的抗体。或者，可通过标准重组技术来使亲和标签诸如流感衣壳序列、多聚组氨酸或谷胱甘肽-s-转移酶连接于蛋白质以允许通过穿过适当亲和柱来达成简易纯化。可在任何或所有阶段添加蛋白酶抑制剂诸如苯基甲基磺酰基氟(pmsf)、亮肽素、抑肽素或抑肽酶以降低或消除在纯化过程期间多肽或蛋白质的降解。当必须使细胞溶解以分离和纯化所表达多肽或蛋白质时，特别需要蛋白酶抑制剂。igg1lalafc全长c1-抑制剂的蛋白质ahp纯化显示于图3中。蛋白质a捕获融合蛋白在小规模上是成功的，但当按比例扩大时观察到聚集。在不希望受任何理论束缚下，为洗脱所必需的低ph似乎导致聚集以及使c1-inh失活。在一些实施方案中，纯化不涉及低ph步骤。在一些实施方案中，使融合蛋白突变以使蛋白质在低ph下稳定。在其它实施方案中，添加剂用于保护c1-inh融合蛋白免遭在低ph洗脱步骤期间聚集。在其它实施方案中，非蛋白质a树脂用于纯化蛋白质。避免与蛋白质a纯化c1-inhfc融合蛋白相关的问题的示例性纯化方法描述于以下实施例章节中。适于纯化的树脂包括但不限于阴离子交换树脂、白蛋白亲和树脂、c1抑制剂亲和树脂和蛋白质a树脂。在一些实施方案中，不要求ph下降的纯化方法是优选的。在一些实施方案中，不要求酸性ph用于洗脱的纯化方法是优选的。在其它实施方案中，利用防止聚集的稳定剂。在一些实施方案中，防止聚集的稳定剂用于要求ph下降的方法中。合适的稳定剂的非限制性实例包括edta。适于纯化本发明的c1-inh融合蛋白的方法包括但不限于例如美国专利号5,276,141；us7384754；8,802,816；pct公布号wo2012107572；和wo2013009526中所述的那些，所述专利的公开内容以引用的方式并入本文。药物组合物本发明进一步提供一种含有本文所述的重组c1-inh融合蛋白和生理上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。载体和重组c1-inh融合蛋白可为无菌的。制剂应适合施用模式。合适的药学上可接受的载体包括但不限于水、盐溶液(例如nacl)、盐水、缓冲盐水、醇、甘油、乙醇、阿拉伯胶(gumarabic)、植物油、苯甲醇、聚乙二醇、明胶、碳水化合物(诸如乳糖、直链淀粉或淀粉)、糖(诸如甘露糖醇、蔗糖或其它糖)、右旋糖、硬脂酸镁、滑石、硅酸、粘稠石蜡、芳香油、脂肪酸酯、羟甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮等以及其组合。必要时，可使药物制剂与不有害地与活性化合物反应或干扰它们的活性的助剂(例如润滑剂、防腐剂、稳定剂、湿润剂、乳化剂、用于影响渗透压的盐、缓冲剂、着色剂、调味剂和/或芳族物质等)混合。在一优选实施方案中，使用适于静脉内施用的水溶性载体。必要时，合适的药物组合物或药剂也可含有少量湿润剂或乳化剂或ph缓冲剂。组合物可为液体溶液、混悬液、乳液、片剂、丸剂、胶囊、持续释放制剂或粉剂。组合物也可用传统粘合剂和载体诸如甘油三酯配制成栓剂。口服制剂可包括标准载体，诸如药用级的甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。可根据常规程序将药物组合物或药剂配制成适合于向人类施用的药物组合物。举例来说，在一些实施方案中，用于静脉内施用的组合物通常是于无菌等张水性缓冲液中的溶液。必要时，组合物也可包括增溶剂和局部麻醉剂以减轻注射部位处的疼痛。通常，单独或以单位剂型混合在一起来将成分供应于诸如安瓿或药囊的指示活性剂的量的气密容器中，所述单位剂型例如呈干燥冻干粉末或无水浓缩物形式。当组合物待通过输注施用时，它可用含有无菌药用级水、盐水或右旋糖/水的输注瓶分配。当组合物通过注射施用时，可提供含无菌注射用水或盐水的安瓿以使成分可在施用之前加以混合。可将本文所述的重组c1-inh融合蛋白配制成中性形式或盐形式。药学上可接受的盐包括以游离氨基形成的盐，诸如由盐酸、磷酸、乙酸、草酸、酒石酸等获得的那些；以及以游离羧基形成的盐，诸如由钠、钾、铵、钙、氢氧化铁、异丙胺、三乙胺、2-乙基氨基乙醇、组氨酸、普鲁卡因(procaine)等获得的那些。一优选制剂包含50mmnapo4(ph7.2)、50mm山梨糖醇和150mm甘氨酸。制剂可为液体，或可被冻干并且在施用之前复原。施用途径本文所述的重组c1-inh融合蛋白(或含有本文所述的重组c1-inh融合蛋白的组合物或药剂)通过任何适当途径来施用。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物被全身性施用。全身性施用可为静脉内、皮内、颅内、鞘内、吸入、经皮(局部)、眼内、肌肉内、皮下、肌肉内、口服和/或经粘膜施用。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物被皮下施用。如本文所用，术语“皮下组织”定义为紧靠在皮肤下的一层松散、不规则结缔组织。举例来说，皮下施用可通过向包括但不限于大腿区域、腹部区域、臀区域或肩胛区域的区域中注射组合物来进行。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物被静脉内施用。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物被口服施用。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物被颅内施用。在一些实施方案中，重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物被鞘内施用。必要时，可并行使用一种以上途径。在一些实施方案中，通过鞘内施用来向受试者施用重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物。如本文所用，术语“鞘内施用”或“鞘内注射”是指向脊髓管(脊髓周围的鞘内间隙)中注射。可使用各种技术，包括不限于通过钻孔或脑池或腰椎穿刺等进行侧向脑室注射。在一些实施方案中，根据本发明的“鞘内施用”或“鞘内递送”是指通过腰部区或区域进行鞘内施用或递送，即腰部鞘内施用或递送。如本文所用，术语“腰部区域”或“腰部区”是指第三与第四腰部(下背部)脊椎之间的区域，并且更具包容性地来说，是指脊柱的l2-s1区域。在一些实施方案中，通过皮下(即在皮肤下)施用来向受试者施用重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物。出于所述目的，可使用注射器注射制剂。然而，用于施用制剂的其它装置是可用的，诸如注射装置(例如inject-easetm和genjecttm装置)；注射笔(诸如genpentm)；无针装置(例如medijectortm和biojectortm)；和皮下贴片递送系统。在一些实施方案中，鞘内施用可与其它施用途径(例如静脉内、皮下、肌肉内、胃肠外、经皮或经粘膜(例如口服或经鼻))联合使用。本发明涵盖单次以及多次施用治疗有效量的本文所述的重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物。可视受试者的病状(例如溶酶体贮积病)的性质、严重性和程度而定，以定期间隔施用重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物。在一些实施方案中，可以定期间隔(例如每年一次、每六个月一次、每五个月一次、每三个月一次、每两月(每两个月一次)、每月(每个月一次)、每两周(每两周一次)、每周、每日或连续)定期施用治疗有效量的重组c1-inh融合蛋白或含有其的药物组合物。在一些实施方案中，施用仅在个体中产生局部作用，而在其它实施方案中，施用遍及个体的多个部分产生作用，例如全身性作用。通常，施用导致向一个或多个靶标组织递送重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，向一个或多个靶标组织递送重组c1-inh融合蛋白，所述组织包括但不限于心脏、脑、皮肤、血液、脊髓、横纹肌(例如骨骼肌)、平滑肌、肾、肝、肺和/或脾。在一些实施方案中，向心脏递送重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，向中枢神经系统，特别是脑和/或脊髓递送重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，向三头肌、胫骨前肌、比目鱼肌、腓肠肌、二头肌、斜方肌、三角肌、四头肌和/或横隔膜递送重组c1-inh融合蛋白。剂型和给药方案在一些实施方案中，以治疗有效量和/或根据与特定所需结果相关联(例如与防治补体介导的慢性疾病诸如hae相关联)的给药方案施用组合物。待根据本发明施用的特定剂量或量可例如视以下而变化：所需结果的性质和/或程度、施用途径和/或时机选择的细节、和/或一种或多种特征(例如重量、年龄、个人史、遗传特征、生活方式参数、心脏缺陷的严重性和/或心脏缺陷的风险水平等或其组合)。所述剂量或量可由普通技术人员确定。在一些实施方案中，根据标准临床技术确定适当剂量或量。或者或另外，在一些实施方案中，通过使用一种或多种体外或体内测定以帮助确定待施用的合乎需要或最优剂量范围或量来确定适当剂量或量。在各种实施方案中，以治疗有效量施用重组c1-inh融合蛋白。通常，治疗有效量足以实现对受试者有意义的益处(例如防治、治疗、调节、治愈、预防和/或改善潜伏疾病或病状)。通常，向有此需要的受试者施用的治疗剂(例如重组c1-inh融合蛋白)的量将取决于所述受试者的特征。所述特征包括受试者的病状、疾病严重性、总体健康状况、年龄、性别和体重。本领域普通技术人员将易于能够确定视这些和其它相关因素而定的适当剂量。此外，客观测定与主观测定两者均可任选用于确定最优剂量范围。在一些特定实施方案中，待施用的适当剂量或量可根据由体外或动物模型测试系统获得的剂量-响应曲线外推。在一些实施方案中，提供呈药物制剂形式的组合物。在一些实施方案中，药物制剂是或包含单位剂量以根据与实现hae发作的发生率或风险降低相关联的给药方案来施用。在一些实施方案中，以单次剂量形式施用包含本文所述的重组c1-inh融合蛋白的制剂。在一些实施方案中，以定期间隔施用包含本文所述的重组c1-inh融合蛋白的制剂。如本文所用，以某一“间隔”施用指示定期施用治疗有效量(不同于一次性给药)。可通过标准临床技术确定间隔。在一些实施方案中，每两月、每月、每月两次、每三周、每两周、每周、每周两次、每周三次、每日、每日两次或每六小时施用包含本文所述的重组c1-inh融合蛋白的制剂。视个体的需要而定，用于单一个体的施用间隔无需是固定间隔，而是可随时间改变。通常以可包含多个单位剂量的给药方案施用治疗有效量。对于任何特定治疗性蛋白质，治疗有效量(和/或有效给药方案内的适当单位剂量)可例如视施用途径、与其它药物制剂的组合而变化。此外，用于任何特定患者的具体治疗有效量(和/或单位剂量)可取决于多种因素，包括所治疗病症和病症的严重性；所用具体药物制剂的活性；所用具体组合物；患者的年龄、体重、总体健康状况、性别和膳食；施用时间、施用途径和/或所用具体融合蛋白的排泄或代谢速率；治疗的持续时间；以及如医学领域中所熟知的类似因素。如本文所用，术语“每两月”意指每两个月施用一次(即每两个月一次)；术语“每月”意指每个月施用一次；术语“每三周”意指每三周施用一次(即每三周一次)；术语“每两周”意指每两周施用一次(即每两周一次)；术语“每周”意指每周施用一次；并且术语“每天”意指每天施用一次。在一些实施方案中，以定期间隔无限期地施用包含本文所述的重组c1-inh融合蛋白的制剂。在一些实施方案中，以定期间隔持续确定时期施用包含本文所述的重组c1-inh融合蛋白的制剂。应进一步了解对于任何特定受试者，应根据个体需要和施用酶补充疗法或监督酶补充疗法的施用的人士的专业判断随时间调整具体剂量方案，并且本文阐述的剂量范围仅具有示例性而不意图限制要求保护的发明的范围或实施。组合疗法在一些实施方案中，与一种或多种当前用于治疗补体介导的疾病的已知治疗剂(例如皮质类固醇)组合施用重组c1-inh融合蛋白。在一些实施方案中，根据它的标准或核准给药方案和/或时程施用已知治疗剂。在一些实施方案中，根据相较于它的标准或核准给药方案和/或时程被改变的方案施用已知治疗剂。在一些实施方案中，这种改变的方案在以下方面不同于标准或核准给药方案：一个或多个单位剂量的量被改变(例如降低或增加)，和/或给药的频率被改变(例如一个或多个在单位剂量之间的间隔被扩大，从而导致频率较低，或所述间隔被降低，从而导致频率较高)。a.病症优选实施方案是治疗慢性病症。在一些实施方案中，由本发明提供的融合蛋白适于与补体介导的病症相关的急性发作，例如nmosdamr和hae事件。这些发作可为长期的或短期的。在一些实施方案中，疾病或病症是慢性的。在一些实施方案中，以防治性方式使用本发明的组合物和方法。可使用本文公开的组合物和方法治疗的示例性补体介导的疾病包括但不限于遗传性血管性水肿、抗体介导的排斥、视神经脊髓炎谱系病症、创伤性脑损伤、脊髓损伤、缺血性脑损伤、灼烧损伤、中毒性表皮坏死溶解、多发性硬化症、肌萎缩性脊髓侧索硬化(als)、帕金森氏病、中风、慢性炎症性脱髓鞘性多发性神经病变(cidp)、重症肌无力、多灶性运动神经病变。实施例本发明的其它特征、目标和优势在随后实施例中是显而易知的。然而，应了解尽管指示本发明的实施方案，但实施例仅通过说明而非限制方式给出。在本发明的范围内的各种变化和修改将根据实施例而变得为本领域技术人员显而易知。实施例1.fc融合蛋白这个实施例说明各种示例性融合蛋白构建体和此类融合蛋白构建体在哺乳动物细胞中的瞬时或按比例扩大表达。如以下所示，使野生型或突变fc部分融合于全长(1-478个氨基酸)或截短(98-478个氨基酸)的人c1-抑制剂。a.fc-c1-抑制剂融合物表达构建体根据上述方法制备全长c1-抑制剂与n末端igg1fc的融合蛋白，其具有以下氨基酸序列(fc部分加下划线)：dkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgknpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：11).根据上述方法制备截短的c1-抑制剂与n末端igg1fc的融合蛋白，其具有以下氨基酸序列(fc部分加下划线)：dkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgkgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：12).由于c1-inh多肽的截短部分上的丝氨酸和苏氨酸残基被移除，所以具有n末端igg1fc的截短的c1-抑制剂消除大量碳水化合物位点。这些氨基酸具有在翻译后加工时变成糖基化的oh部分。在不希望受任何理论束缚下，消除这个碳水化合物会降低通过去唾液酸糖蛋白受体来对分子的潜在清除，此可延长fc-c1-抑制剂融合蛋白的半衰期。在不希望受任何理论束缚下，去唾液酸糖蛋白不是唯一清除机理。也有基于存在其它聚糖的主动清除途径。fc结构域不结合fcrn受体直至复合物已被内化在内体中。内体内的ph下降允许发生结合。在一些实施方案中，通过操纵c1-inh融合构建体的糖基化特征，主动清除过程得以减少、减缓和/或消除。这允许被动fc再循环过程有效增加半衰期。在一些实施方案中，截短的c1-inh多肽是优选的。截短可移除与主动清除相关的糖基化部分。此外，截短形式在尺寸方面较小，此可增加吸收，特别是在皮下施用时。igg1lala突变消除可由于野生型igg1fc序列而发生的补体活化和adcc。制备全长c1-inhigg1fc效应物失效构建体与截短的c1-inhigg1fc效应物失效构建体两者。根据上述方法制备具有n末端igg1lalafc的全长c1-抑制剂，其具有以下氨基酸序列(fc部分加下划线，lala突变用粗体表示)：dkthtcppcpapeggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgknpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：13).根据上述方法制备具有n末端igg1lalafc的截短的c1-抑制剂，其具有以下氨基酸序列(fc部分加下划线，lala突变用粗体表示)：dkthtcppcpapeggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgkgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：14).根据上述方法制备截短的c1-抑制剂与n末端igg4fc的融合蛋白，其具有以下氨基酸序列(fc部分加下划线)：eskygppcpscpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgknpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：32).根据上述方法制备截短的c1-抑制剂与n末端igg4fc的融合蛋白，其具有以下氨基酸序列(fc部分加下划线)：eskygppcpscpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgkgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：33).根据上述方法制备具有n末端igg4s241pfc的全长c1-抑制剂，其具有以下氨基酸序列(fc部分加下划线，s241p突变用粗体表示)：eskygppcpcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgknpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：15).根据上述方法制备具有n末端igg4s241pfc的截短的c1-抑制剂，其具有以下氨基酸序列(fc部分加下划线，s241p突变用粗体表示)：eskygppcpcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgkgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：16).b.小规模瞬时表达fc-c1-抑制剂融合蛋白用各种c1-抑制剂融合质粒(n-hfc、n-hfclala和nhfcigg4m)转染freestyletm293-f细胞(悬浮人胚肾细胞，invitrogen，目录号r790-07)、freestyletmcho-s细胞(悬浮中国仓鼠卵巢细胞，invitrogen，目录号r800-07)和ht1080细胞，并且以不用dna转染作为对照。遵循invitrogen的方案(invitrogen方案公布号man0007818rev.1.0，可在https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/freestyle_max_reagent_man.pdf处获得)，使用293-freestyletmmax试剂(invitrogen，目录号16447-500)进行293-f和cho-s细胞转染。在转染之后，将293-f细胞接种至无血清freestyletm293表达培养基(invitrogen，目录号12338-018)中，并且将cho-s细胞接种至无血清freestyletmcho表达培养基(invitrogen，目录号12651-014)中，两者均具有30ml的最终培养体积。类似地，使用标准转染方案(350v，960uf，12e6个细胞，35μgdna)转染ht1080细胞。在转染后4天和7天(在再次补料之后积累3天)收获来自转染的细胞培养物的条件培养基(cm)。通过sds-page(8-16％tg凝胶，150v，持续1.5小时)来评估融合蛋白表达，并且用考马斯蓝(coomassieblue)加以显现。为产生效应物失效构建体的稳定汇合物，在37℃下以1x106个细胞/毫升接种ht1080经瞬时转染细胞。在恢复2天之后，在适合的具有250μg/ml博莱霉素(zeocin)的化学成分确定(cd)的培养基中持续2周选择细胞直至细胞展现95％活力。通过sds-page来评估融合蛋白表达，并且用考马斯蓝加以显现。发现c1-inhfc融合构建体的表达大于c1-inh白蛋白构建体的表达。c.使用freestyletm293-f细胞进行按比例扩大表达用lala-c1-抑制剂融合质粒(全长c1与截短的c1两者)以及igg4m-c1-抑制剂融合质粒(全长c1和截短的c1)转染freestyletm293-f细胞。如上所述使用293-freestyletmmax试剂进行转染。在1l振荡烧瓶中，以320ml工作体积转染细胞。从上述转染的30ml转染体积按比例扩大dna和freestyletmmax试剂量。在转染后4天收获来自转染细胞的cm，并且如上所述用sds-page评估表达。对细胞再次补料以进行第二次收获(转染后7天，3天分批收集)。c.表达数据概述相比于天然重组c1，fc与全长c1-抑制剂的融合物始终以较高水平表达。fc与截短的c1-抑制剂的融合物类似于天然重组c1-抑制剂进行表达。在关于任何测试构建体的任何宿主细胞培养物样品的情况下都未观察到重度蛋白质剪切。相较于其它测试细胞类型，hek293瞬时细胞表达尤其增加。相比于如果在c末端放置fc序列，在n末端放置fc序列导致表达尤其增加。实施例2.表征fc-c1-inh融合蛋白为表征fc-c1-抑制剂融合蛋白，首先使用涉及蛋白质a柱的方法纯化融合蛋白。示例性纯化结果显示于图3中。样品中检测到的c1-抑制剂融合物组合物浓度和总蛋白量描绘于图4中。在单次亲和柱纯化之后获得高度纯化的物质。使用上述纯化方法实现极好的蛋白质产量。样品中检测到的c1-抑制剂融合物组合物内毒素浓度描绘于图5中。低内毒素水平见于最终产物中，从而使得它们非常适于药物用途。分析以上概述的纯化的fc融合蛋白的蛋白质纯度、sec、热稳定性、与fcrn的结合、与c1q的结合和与fcgr1的结合。根据rphplc，用于pk分析的所有样品的纯度都高于97％。在以下示例性条件下进行c1-抑制剂融合蛋白的尺寸排阻色谱法：柱：tosohg3000swxl；流动相缓冲液：0.2m磷酸钠，ph6.8；流速：0.5ml/min。以40μl的体积注射样品。运行的样品是lalac1-抑制剂全长(fl)r1；lalac1-抑制剂截短(tr)r1；igg4c1-抑制剂全长(fl)r1；igg4c1-抑制剂截短(tr)r1；和20μlbsa对照注射液。结果sec-mals的示例性结果描绘于表1中。样品名称g/mollalaflr1195,600lalatrr1峰1＝385,000峰2＝184,000igg4flr1峰1＝984,200峰2＝212,300igg4trr1峰1＝360,300峰2＝191,900表1：sec-mals结果通过差示扫描量热法(dsc)来评估c1-抑制剂融合蛋白构建体的热稳定性。a.fc融合蛋白与fcrn的结合和fc效应功能与fc新生儿受体(fcrn)结合允许分子进行再循环，并且导致fc融合蛋白的体内血清半衰期延长。当分子被被动带入细胞中，并且内体的ph较低时发生再循环。那导致分子的fc部分结合fcrn。当fcrn再循环回细胞表面时，ph于是呈中性，并且蛋白质被释放回血清中。使用biacore系统，通过表面等离子体共振(spr)测量与fcrn的细胞外结构域的结合。通过在以下条件下使cm5芯片与fcrn进行胺偶联来实现用fcrn直接固定：将fcrn(sinobiologicalinc或内部bd1)于ph5.0乙酸盐缓冲液(目录号br-1003-51)中稀释至10μg/ml。流速：10μl/min最终偶联信号354ru运行缓冲液：pbs-p+，调节ph至6.0使用以下方案进行动力学结合研究。将样品于pbs-p+中稀释至100、50、25、12.5、6.25、3.125、0nm。如下设置参数：在流速30μl/min下缔合300s以及解离600s用25mmtris、150mmnacl(ph8.0)再生与fcrn的示例性动力学结合数据的概述描绘于表2中。表2：与fcrn的动力学结合数据的概述b.fc融合蛋白与c1q的结合野生型fc分子具有不同量的效应功能，例如能够活化补体级联、adcc活性和/或结合不为达成本发明的目的所需的特定fc受体。需要本发明的c1-inh融合蛋白的患者罹患补体介导的疾病，因此本发明的一目标在于降低或消除与fc结构域相关的效应功能。本文公开的c1-inhfc融合构建体优选降低或消除效应功能。c1-inhfc融合构建体优选降低或消除补体活化、adcc和/或fcγ受体。可通过与c1q的结合，也通过与fcγ受体的结合来量度效应功能。c1q结合elisa所用c1q结合elisa方案是：●在4℃下将蛋白质过夜涂布于maxisorp板上，并且所述蛋白质于50mm碳酸盐缓冲液(ph9.6)中从100μg/ml至0μg/ml加以滴定●用elisa洗涤缓冲液(pbs/0.05％吐温-20(tween-20))洗涤3次●添加含2μg/mlc1q的测定缓冲液(pbs/0.05％吐温-20/0.1％鱼明胶)，并且在室温下孵育2小时●用elisa洗涤缓冲液(pbs/0.05％吐温-20)洗涤3次●以4μg/ml添加抗c1q-hrp抗体(thermopa1-84324)，并且在室温下孵育1小时●用elisa洗涤缓冲液(pbs/0.05％吐温-20)洗涤3次●tmb，在室温下持续15分钟●读取od450hfc、hfclala和igg4m与c1-inh和rhc1(血浆源性商业产品)抑制剂的融合物的示例性c1q结合elisa结果描绘于图6中，所述图6相对于各样品中蛋白质的浓度来绘制od450。样品是hfcigg1-c1-inh、hfclalaigg1-c1-inh和hfcigg4m-c1-inh融合物、重组人c1-inh(rhc1-inh)(在1080细胞中表达)、以及作为阳性对照的igg1fc-人卵泡抑素(hfcigg1-hfst-xten)融合物和作为阴性对照的人卵泡抑素-xten(hfst-xten)融合物。fc融合蛋白与fcγr1的结合使用biacore系统，通过表面等离子体共振(spr)测量与fcγr1的细胞外结构域的结合。biacore捕获方法描绘于图7中。测定设置如下：hbs-p+用作运行缓冲液使抗his(ge，抗his试剂盒)偶联于cm5上以获得16000ru捕获水平对于fcγri(5μg/ml，r&dsystem)，捕获水平为约350ru样品制备阳性对照：将n-hfc-c1-inh于hbs-p+缓冲液中稀释至12.5、6.25、3.175、1.59和0.79nm将其它样品(n-hfcigg4m-c1inh、n-hfcigg4m-c1-inhtr、n-hfclala-c1-inh和n-hfclala-c1-inhtr)于hbs-p+缓冲液中稀释至100、50、25、12.5、6.25nm结合动力学设置：捕获：以10μl/ml注射12s捕获稳定化：30s缔合：以流速30μl/ml进行300s解离：以流速30μl/ml进行600s再生：以30μl/ml用10mm磷酸盐500mmnacl(ph2.5)进行40s说明c1-inh构建体与fcγri的结合的示例性数据的概述显示于表3中。n-hfclala-c1-inh消除与fcγri的结合。n-hfcigg4m-c1-inh和n-hfcigg4m-c1-inhtr结合fcγri，但弱于n-hfc-c1-inh。截短的c1-inh与hfclala或hfcigg4m融合物使与fcγri的结合亲和力增加。表3：c1-inh构建体fcγri结合的概述c1-抑制剂fc融合蛋白的c1-抑制剂活性c1-抑制剂能够抑制来自凝血、接触和补体途径的许多酶，并且因此适用于治疗诸如hae、amr、nmosd和pnh的疾病。c1-inh是一种自杀性抑制剂，这意味着它在抑制过程期间被失活。它与靶标蛋白酶形成1:1化学计量复合物，继之以整个复合物被清除。c1-inh接着不可再用于抑制其它酶。以下实验通过两种示例性方法来考查fc-c1-抑制剂融合蛋白抑制c1s的能力。采用两种示例性体外方法来考查c1-抑制剂对c1s活性的抑制活性：以基于elisa的方法(功能性elisa)测量c1s和c1-抑制剂的复合物-仅对效应物失效构建体使用，以及测量对c1s裂解比色底物的能力的抑制。两种测定产生一致数据。测量c1s和c1-抑制剂的复合物的功能性elisa这个方法用于测试被制备来进行pk研究的效应物失效fc构建体，图8。elisa方案如下：●60μl稀释的c1-inh+12μl生物素-c1s○在室温下孵育30分钟●将50μl复合物转移至链霉亲和素涂布的板中○在室温下孵育10分钟，洗涤5次●添加50μl抗c1-inh-hrp○在室温下孵育60分钟，洗涤5次●添加100μltmb底物○在室温下孵育15分钟●添加100μl终止溶液(4％hcl)●在od450下进行读取通过凝胶将血浆源性c1-inh分子量(mw)估计为约93,000da。这个值用于计算spr分析中使用的蛋白质的浓度。通过如使用质谱测定法测定的各构建体的重量来计算构建体的浓度。flc1-inhhfcigg1lala和flc1-inhhfcigg4m具有约200,000da的分子量。trc1-inhhfcigg1lala和trc1-inhhfcigg4m具有约160,000da的分子量。在多个测试中，融合蛋白显示对c1s的亲和力高于天然c1-抑制剂。截短的c1-inh融合蛋白类似地显示对c1s的亲和力高于天然c1-抑制剂。对c1s裂解比色底物的能力的抑制使用r&dsystemsc1-抑制剂活性测定测试效应物失效构建体抑制由c1s+/-cl-inh对比色肽的c1s裂解的能力。测定方案可见于https://www.rndsystems.com/products/human-serpin-g1-c1-inhibitor-plasma-protein-cf_2488-pi处。每孔最终测定条件：●rhc1s：0.010μg(1.33nm)●人丝氨酸蛋白酶抑制剂g1曲线：100、50、25、5、2.5、1.25、0.625、0.2、0.04和0.01nm●底物：100μm●dtnb：100μm活性测定设置25μlc1-抑制剂+25μlc1s(2μg/ml)在室温下孵育30分钟用测定缓冲液将复合物稀释5倍50μl稀释的c1-inh-c1s复合物+50μl底物(500um)/反应物(200um)在室温下孵育15分钟在od405下进行读取使用质谱或凝胶分子量估计值计算测定中测试的各效应物失效构建体的滴定曲线，如图9a和9b中所示。全长融合蛋白显示对c1s的亲和力高于天然c1-抑制剂。截短的c1-inh融合蛋白类似地显示对c1s的亲和力高于天然c1-抑制剂。溶血测定图10a和10b描绘替代性补体途径和经典补体途径的溶血测定的示意性概述。seelen等,j.ofimmun.methods,296:187-198(2005)。图11a、11b和11c描绘由血浆源性c1-inh、igg1lalafc截短的c1-抑制剂、igg1lala全长c1-抑制剂以及两种血浆源性c1-inh制剂展现的溶血活性(例如替代性补体途径的活化程度)的比较。融合蛋白的表现类似于血浆源性c1抑制剂。c1-抑制剂fc融合蛋白活性的概述所有fc-c1-抑制剂融合蛋白都能够抑制c1s活性。fc融合蛋白，特别是全长c1-抑制剂融合蛋白抑制c1s的亲和力始终高于血浆源性c1-抑制剂。全长c1-抑制剂融合蛋白与截短的c1-抑制剂融合蛋白(例如以fcigg1lala制备)两者均能够抑制体外红血细胞的溶解。fc融合蛋白的体内pk曲线图12显示效应物失效融合构建体相较于血浆源性c1-抑制剂和重组c1-inh的兔pk研究的示例性结果。通过静脉内施用的血浆源性c1-inh展现单相血清浓度-时间曲线。通过静脉内施用的rhc1-inh-igg构建体展现双相血清浓度-时间曲线。初始快速清除相(约2小时)指示受体介导的细胞摄取。构建体展现第二较缓慢清除相。实施例3.白蛋白融合蛋白a.白蛋白-c1-抑制剂融合物表达构建体产生许多白蛋白蛋白构建体。这些构建体的示意图描绘于图13a-f中。制备包含白蛋白或白蛋白的d3结构域直接接合于全长c1-inh和截短的c1-inh的n末端的融合构建体表达载体。也制备包含白蛋白或白蛋白的d3结构域使用接头接合于全长c1-inh和截短的c1-inh的n末端的融合构建体表达载体。由这些构建体表达的融合蛋白的氨基酸序列包括以下序列：白蛋白全长c1-inh直接融合物(白蛋白结构域加下划线)：mkwvtfisllflfssaysrgvfrrdahksevahrfkdlgeenfkalvliafaqylqqcpfedhvklvnevtefaktcvadesaencdkslhtlfgdklctvatlretygemadccakqepernecflqhkddnpnlprlvrpevdvmctafhdneetflkkylyeiarrhpyfyapellffakrykaafteccqaadkaacllpkldelrdegkassakqrlkcaslqkfgerafkawavarlsqrfpkaefaevsklvtdltkvhtecchgdllecaddradlakyicenqdsissklkeccekpllekshciaevendempadlpslaadfveskdvcknyaeakdvflgmflyeyarrhpdysvvlllrlaktykttlekccaaadphecyakvfdefkplveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglnpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：18).白蛋白截短的c1-inh直接融合物(白蛋白结构域加下划线)：mkwvtfisllflfssaysrgvfrrdahksevahrfkdlgeenfkalvliafaqylqqcpfedhvklvnevtefaktcvadesaencdkslhtlfgdklctvatlretygemadccakqepernecflqhkddnpnlprlvrpevdvmctafhdneetflkkylyeiarrhpyfyapellffakrykaafteccqaadkaacllpkldelrdegkassakqrlkcaslqkfgerafkawavarlsqrfpkaefaevsklvtdltkvhtecchgdllecaddradlakyicenqdsissklkeccekpllekshciaevendempadlpslaadfveskdvcknyaeakdvflgmflyeyarrhpdysvvlllrlaktykttlekccaaadphecyakvfdefkplveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：19).d3白蛋白全长c1-inh直接融合物(d3白蛋白结构域加下划线)：metpaqllfllllwlpdttgveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglnpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：21).d3白蛋白截短的c1-inh直接融合物(d3白蛋白结构域加下划线)：metpaqllfllllwlpdttgveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：22).白蛋白全长c1-inhggg接头融合物(白蛋白结构域加下划线，接头用粗体表示)：mkwvtfisllflfssaysrgvfrrdahksevahrfkdlgeenfkalvliafaqylqqcpfedhvklvnevtefaktcvadesaencdkslhtlfgdklctvatlretygemadccakqepernecflqhkddnpnlprlvrpevdvmctafhdneetflkkylyeiarrhpyfyapellffakrykaafteccqaadkaacllpkldelrdegkassakqrlkcaslqkfgerafkawavarlsqrfpkaefaevsklvtdltkvhtecchgdllecaddradlakyicenqdsissklkeccekpllekshciaevendempadlpslaadfveskdvcknyaeakdvflgmflyeyarrhpdysvvlllrlaktykttlekccaaadphecyakvfdefkplveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglnpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：23).白蛋白截短的c1-inhggg接头融合物(白蛋白结构域加下划线，接头用粗体表示)：mkwvtfisllflfssaysrgvfrrdahksevahrfkdlgeenfkalvliafaqylqqcpfedhvklvnevtefaktcvadesaencdkslhtlfgdklctvatlretygemadccakqepernecflqhkddnpnlprlvrpevdvmctafhdneetflkkylyeiarrhpyfyapellffakrykaafteccqaadkaacllpkldelrdegkassakqrlkcaslqkfgerafkawavarlsqrfpkaefaevsklvtdltkvhtecchgdllecaddradlakyicenqdsissklkeccekpllekshciaevendempadlpslaadfveskdvcknyaeakdvflgmflyeyarrhpdysvvlllrlaktykttlekccaaadphecyakvfdefkplveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：24).d3白蛋白全长c1-inhggg接头融合物(d3白蛋白结构域加下划线，接头用粗体表示)：metpaqllfllllwlpdttgveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglnpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：25).d3白蛋白截短的c1-inhggg接头融合物(d3白蛋白结构域加下划线，接头用粗体表示)：metpaqllfllllwlpdttgveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkotalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：26).白蛋白全长c1-inh(ggggs)2接头融合物(白蛋白结构域加下划线)：mkwvtfisllflfssaysrgvfrrdahksevahrfkdlgeenfkalvliafaqylqqcpfedhvklvnevtefaktcvadesaencdkslhtlfgdklctvatlretygemadccakqepernecflqhkddnpnlprlvrpevdvmctafhdneetflkkylyeiarrhpyfyapellffakrykaafteccqaadkaacllpkldelrdegkassakqrlkcaslqkfgerafkawavarlsqrfpkaefaevsklvtdltkvhtecchgdllecaddradlakyicenqdsissklkeccekpllekshciaevendempadlpslaadfveskdvcknyaeakdvflgmflyeyarrhpdysvvlllrlaktykttlekccaaadphecyakvfdefkplveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglnpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：28).白蛋白截短的c1-inh(ggggs)2接头融合物(白蛋白结构域加下划线，接头用粗体表示)：mkwvtfisllflfssaysrgvfrrdahksevahrfkdlgeenfkalvliafaqylqqcpfedhvklvnevtefaktcvadesaencdkslhtlfgdklctvatlretygemadccakqepernecflqhkddnpnlprlvrpevdvmctafhdneetflkkylyeiarrhpyfyapellffakrykaafteccqaadkaacllpkldelrdegkassakqrlkcaslqkfgerafkawavarlsqrfpkaefaevsklvtdltkvhtecchgdllecaddradlakyicenqdsissklkeccekpllekshciaevendempadlpslaadfveskdvcknyaeakdvflgmflyeyarrhpdysvvlllrlaktykttlekccaaadphecyakvfdefkplveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：29).d3白蛋白全长c1-inh(ggggs)2接头融合物(d3白蛋白结构域加下划线，接头用粗体表示)：metpaqllfllllwlpdttgveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeolkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglnpnatssssqdpeslqdrgegkvattviskmlfvepilevsslpttnsttnsatkitanttdepttqpttepttqptiqptqpttqlptdsptqpttgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：30).d3白蛋白截短的c1-inh(ggggs)2接头融合物(d3白蛋白结构域加下划线)：metpaqllfllllwlpdttgveepqnlikqncelfeqlgeykfqnallvrytkkvpqvstptlvevsrnlgkvgskcckhpeakrmpcaedylsvvlnqlcvlhektpvsdrvtkccteslvnrrpcfsalevdetyvpkefnaetftfhadictlsekerqikkqtalvelvkhkpkatkeqlkavmddfaafvekcckaddketcfaeegkklvaasraalglgsfcpgpvtlcsdleshsteavlgdalvdfslklyhafsamkkvetnmafspfsiaslltqvllgagentktnlesilsypkdftcvhqalkgfttkgvtsvsqifhspdlairdtfvnasrtlysssprvlsnnsdanlelintwvakntnnkisrlldslpsdtrlvllnaiylsakwkttfdpkktrmepfhfknsvikvpmmnskkypvahfidqtlkakvgqlqlshnlslvilvpqnlkhrledmeqalspsvfkaimeklemskfqptlltlprikvttsqdmlsimekleffdfsydlnlcgltedpdlqvsamqhqtvleltetgveaaaasaisvartllvfevqqpflfvlwdqqhkfpvfmgrvydpra(seqidno：31).b.白蛋白融合蛋白的表达如上所述用这些融合构建体表达载体转染freestyletmcho-s细胞。制备cho-gs稳定汇合物，并且用于产生供收集和分析的cm。以2x106个细胞/毫升接种细胞，并且在33℃下孵育4天。在第3天补充谷氨酰胺。在转染后4天收获来自转染的细胞培养物的条件培养基(cm)，并且在考马斯凝胶上跑胶以评估表达。使用50kda20离心浓缩器(vivaproducts,inc.，目录号vs2031)浓缩第4天的分批收获物，并且使用invitrogen的captureselect白蛋白亲和基质(invitrogen，目录号19129701l)加以纯化。洗脱缓冲液是20mmtrisph7.4+2mmgcl2)。在考马斯凝胶上相对于bsa使样品跑胶以评估表达。基于这个纯化，hsa-c1-inh的产量是约3.6mg/l，并且d3-c1-inh的产量是约1.6mg/l。使用50kda将蛋白质浓缩至约2mg/ml，并且储存在-20℃下。将纯化的蛋白质过夜透析至c1-inh配制缓冲液(50mmtris(ph7.2)、50mm山梨糖醇、150mm甘氨酸)中并浓缩。检查蛋白质的c1s活性。数据显示于图14中，所述图14呈现用以测量一些示例性白蛋白c1-inh融合构建体抑制c1s裂解比色肽的能力的测定的结果，包括血浆源性c1-inh和ht1080表达的重组c1-inh以进行比较。在sec-mals上运行蛋白质以检查聚集和测定尺寸。测定的示例性参数是：柱：tosohg3000swxl流动相缓冲液：0.2m磷酸钠，ph6.8流速：0.5ml/min样品：hsad3c1-inh，注射30μghsac1-inh，注射35μgbsa对照，注射40μgc1-inhigg1lalafc，以35μg进行注射使用对于293c1-inh样品开发的sec方法，对hsa-c1-inh分子使用sec-mals测定。使用这种方法，未检测到hsa样品中的大分子量分子。接着对c1-抑制剂白蛋白融合蛋白进行动态光散射(dls)分析。hsa和c1-inhc46用作对照。所有样品和对照都于dpbs缓冲液中稀释成0.5mg/ml。c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的示例性dls结果显示于表4中。样品mg/mlhsa5c46c1-inh2.5hsa-ggg-c1-inhcho-gne3.5d3-ggg-c1-inhcho-gne8d3-ggggs-c1-inhcho-gne3.4表4：对c1-抑制剂白蛋白融合蛋白的dls分析使用invitrogencaptureselect人白蛋白亲和基质从cho-gscm纯化hsa-c1-inh以及hsa_d3-c1-inh两者均适用。纯化的蛋白质与血浆源性c1-inh具有类似c1s活性。sec-mals显示仅有处于预期尺寸下的单一峰而不具有hmw物质。产生表达白蛋白-c1-inh+/-接头构建体的稳定汇合物。通过遵循制造商方案进行电穿孔来转染cho-gsgne细胞。选择稳定汇合物，并且在33℃下进行7天分批收获物产生。通过考马斯凝胶来评估分批收获物的表达。考马斯结果显示相比于hsa_d3融合物，全长hsa-c1-inh融合蛋白显示较小程度表达。在添加接头序列的情况下未见显著差异。等效案和范围本领域技术人员将仅使用常规实验即会认识到或能够确定本文所述的本发明的特定实施方案的许多等效案。本发明的范围不意图限于以上描述，而是如以下权利要求中所阐述。当前第1页12