一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体及其用于制备鸡包涵体肝炎治疗药物的应用的制作方法

文档序号:12573269阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体,其特征在于是由以下方法制备的:

1)以腺病毒AV208株、AV209株、AV211株为抗原制备多价疫苗;

2)首免:取120日龄蛋鸡,每只胸部肌肉注射1.5~2.5ml步骤1)所得的多价疫苗;

3)二免:首免10日后,每只胸部肌肉注射1.5~2.5ml步骤1)所得的多价疫苗;

4)三免:二免10日后,每只胸部肌肉注射1.5~2.5ml步骤1)所得的多价疫苗;

5)三免7日后,收集所述蛋鸡所产的鸡卵,制备卵黄抗体。

2.根据权利要求1所述的一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体,其特征在于步骤5)所述鸡卵的抗体效价不低于1:256。

3.根据权利要求1所述的一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体,其特征在于步骤1)具体包括以下操作:

A)取7日龄SPF鸡胚,接种毒价为104.0ELD50的腺病毒AV208株病毒液0.2mL,取从接种开始48~120h范围内死亡的鸡胚,收集尿囊液灭活,即得到腺病毒AV208株灭活病毒液;

B)取7日龄SPF鸡胚,接种毒价为104.0ELD50的腺病毒AV209株病毒液0.2mL,取从接种开始48~120h范围内死亡的鸡胚,收集尿囊液灭活,即得到腺病毒AV208株灭活病毒液;

C)取7日龄SPF鸡胚,接种毒价为104.0ELD50的腺病毒AV211株病毒液0.2mL,取从接种开始48~120h范围内死亡的鸡胚,收集尿囊液灭活,即得到腺病毒AV208株灭活病毒液;

D)分别取所述腺病毒AV208株灭活病毒液、腺病毒AV208株灭活病毒液、腺病毒AV208株灭活病毒液以(0.8~1.2):(0.8~1.2):(0.8~1.2)的体积比混合,得到疫苗水相;

E)取白油灭菌,加入硫柳汞,得到疫苗油相,而后对所述疫苗油相在2000~3000r/min搅拌条件下加入步骤D)所得的疫苗水相,而后以8000~12000r/min的转速乳化12~18min,即得到所述多价疫苗;其中所述疫苗油相与疫苗水相的体积比为(0.8~1.2):(0.8~1.2);硫柳汞的用量为所述多价疫苗中硫柳汞的含量为0.002~0.008%(w/w)。

4.根据权利要求3所述的一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体,其特征在于步骤A)中或步骤B)或步骤C)中收集尿囊液后,先浓缩8~12倍,再加入甲醛灭活。

5.根据权利要求1所述的一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体,其特征在于步骤5)所述的制备卵黄抗体,具体包括以下操作:

α)收集所述蛋鸡所产的鸡卵,取卵黄液加水稀释后于62~68℃加热25~35min,加入6倍体积的酸化水;

β)于1~4℃条件静置2~5h,而后固液分离取上清,加入正辛酸至终浓度为0.2~0.4%(v/v),于室温条件静置5~12h,即得到粗产物;

γ)取步骤β)所得的粗产物,先后经澄清处理、过滤除菌、超滤浓缩,而后加入甲醛至终浓度为0.2%(w/v),即得到所述鸡包涵体肝炎卵黄抗体。

6.根据权利要求5所述的一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体,其特征在于步骤β)所述的固液分离是以14000r/min的转速离心。

7.根据权利要求5所述的一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体,其特征在于步骤γ)所述的澄清处理是以0.45μm孔径的滤器过滤。

8.根据权利要求5所述的一种鸡包涵体肝炎卵黄抗体,其特征在于步骤γ)所述超滤浓缩的截留分子量是100KD。

9.一种权利要求1所述鸡包涵体肝炎卵黄抗体用于制备鸡包涵体肝炎治疗药物的应用。

10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于所述药物是胸肌注射药物,单次注射剂量为2mL。

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