1.一种如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列,所述核苷酸序列编码白喉毒素突变体CRM197。
2.含有如权利要求1所述核苷酸序列的表达载体。
3.根据权利要求2所述的表达载体,其特征在于,所述载体为pET32a,所述载体还含有硫氧还蛋白基因Trx。
4.一种含有权利要求2或3所述表达载体的宿主细胞。
5.根据权利要求4所述的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞为大肠杆菌。
6.如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列在制备白喉毒素突变体CRM197中的应用。
7.一种表达如SEQ ID NO.1所示核苷酸序列编码的白喉毒素突变体CRM197的方法,所述方法包括以下步骤:
(1)将含有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列连接入表达载体;
(2)将步骤(1)获得的表达载体转化入宿主细胞;
(3)诱导步骤(2)获得的宿主细胞表达白喉毒素突变体CRM197;
(4)纯化回收步骤(3)获得的白喉毒素突变体表达产物。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述表达载体为pET32a。
9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤(2)所述宿主细胞为大肠杆菌。
10.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤(4)所述的纯化包括经QFF柱、苯基疏水柱和SP柱纯化步骤。