本发明属于儿茶素的制备领域，具体涉及一种脱咖啡碱儿茶素的制备方法。
背景技术：
儿茶素是茶叶中最重要的生理活性物质，约占多酚类80%，属黄烷醇类，其基本结构是α-苯基苯并吡喃，分为酯型和非酯型两类，结构上的主要区别在于氢基取代的数量和位置不同。儿茶素主要由表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、表没食子儿茶素(EGC)、表儿茶素没食子酸酯(ECG)和表儿茶素(EC)等单体组成。儿茶素具有明显的抗衰老、防癌抗突变、降脂减肥、降低血糖、血脂和胆固醇、预防心血管疾病等药理功能，已广泛应用于食品加工、医药保健和日用化工等领域。卫生部已批准了茶多酚为我国食品添加剂。国内外研究成果表明，儿茶素可防心血管疾病，预防癌症，抗氧化作用，具有明显的抗衰老功能，有望开发成为一种天然的护肤品。从1990开始，由于有关茶多酚/儿茶素的保健与药理功能研究的突破，不仅扩大了绿茶在国际市场上的份额，而且极大地推进了我国茶叶深加工产业的快速发展，为茶叶功能成分的研究与开发奠定了良好的产业与市场基础，目前，我国已经形成年产5000 多吨茶多酚/儿茶素的产业规模。儿茶素粗品传统的提取分离工艺主要包括离子沉淀法、有机溶剂萃取法和吸附柱色谱法。由于茶叶的功能成分复杂，各功能成分的化学结构相似，从茶叶中制取脱咖啡碱儿茶素具有相当难度。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是提供从绿茶中脱咖啡碱儿茶素的方法，该方法简便，只使用食用添加剂，制备周期短，成本低，符合绿色和安全的要求，去咖啡碱儿茶素的提取率及产品纯度高，适宜规模化生产。
本发明提供的技术方案是：一种脱咖啡碱儿茶素的方法，包括如下步骤：
（1）加入纯水溶解小叶绿茶儿茶素提取物，配置成浓度为5%（w/v）的溶液，加入柠檬酸/盐酸调节pH为4.1-4.3，茶汤料液备用；
（2）按照茶汤料液1：1.5的重量添加层析树脂，在35℃-37℃下上柱吸附，分别用水及不同浓度的食用乙醇解吸，得解析液；
（3）调节解析液液PH=5，离心过滤；
（4）将步骤（3）中过滤后的上清液通过微孔陶瓷膜过滤器，滤去极微小杂质，并用2500D反向渗透浓缩器进行浓缩，收集浓缩液，将所述洗脱液浓缩至16-18波美度，得浓缩液；
（5）将所述浓缩液在180℃下通过离心喷雾干燥塔进行离心干燥，得脱去咖啡碱的儿茶素。
本发明方法的第（2）步中，加入层析树脂吸附并再解析，可以将绿茶提取物中的咖啡碱分离出来，从而降低产品中咖啡碱的含量。
上述的方法，第（2）步所述的吸附树脂材料为D101、AB-8、PA、LX-8、RS-24中的一种。
上述的方法，第(3)步所述的调节PH，其中，氢氧化钠用量：30倍小叶绿茶儿茶素重量，不得直接向酶解液中加入氢氧化钠。
上述的方法，第（4）步所述的分离、浓缩，所述膜材料为醋酸纤维素、芳香族聚酰胺、聚醚砜、聚偏氟乙烯其中之一。
本发明所述的制备去苦味儿茶素的方法，采用由吸附树脂直接对CAF进行选择性吸附，成功解决了CAF与儿茶素难以分离的技术难题。
本发明具有以下有益效果：
本发明方法以小叶绿茶儿茶素提取物为原料，联用柱层析技术，经过树脂吸附，微孔超滤及反向渗透浓缩技术，从绿茶提取物中分离脱咖啡碱儿茶素，优化了产品分离纯化工艺流程。产品可防心血管疾病，预防癌症，抗氧化作用，具有明显的抗衰老功能，有望开发成为一种天然的护肤品。也是许多功能食品开发的重要原料，可单独或者与维生素类、天然植物成分复配应用于保健食品、化妆品等领域。本发明方法简便，制备周期短，成本低，符合环保和安全的要求，适宜规模化生产。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。本发明中吸附树脂购自沧州宝恩吸附材料科技有限公司。
实施例1
1、取小叶绿茶儿茶素提取物100克，配成2000 ml儿茶素溶液，加入柠檬酸/盐酸调节pH为4.1-4.3，茶汤料液备用。茶汤液通过处理过的吸附树脂，控制吸附及解析流速，分段收集解析液。将解析液调节PH至5，在3500 r/min条件下离心过滤；
2、将步骤1中过滤后的上清液缓慢通过微孔陶瓷膜过滤器，出去部分肉眼不可见杂质，再通过反向渗透浓缩器浓缩至16~18波美度，得浓缩液；
3、将所述浓缩液在180℃温度下离心喷雾干燥，得到87.25g淡黄色固体。将步骤3得到的淡黄色固体与儿茶素标准品（购自美国Sigma-Aldrich 公司，C15H14O6，M.W. 290.27，编号：E4018，纯度≥ 98%（HPLC））对照鉴定并经高效液相色谱法分析检测（鉴定、检测结果为：所述淡黄色固体，分子量为290，(-)ESI-MS m/z ：289 [M－H]-，熔点240ºC，分子式为：C15H14O6，CAF含量≤1%,表明所述淡黄色固体为脱咖啡碱儿茶素，而且纯度≥80%。
实施例2
1、取小叶绿茶儿茶素提取物100克，配成2000 ml儿茶素溶液，加入柠檬酸/盐酸调节pH为4.1-4.3，茶汤料液备用。茶汤液通过处理过的吸附树脂，控制吸附及解析流速，分段收集解析液。将解析液调节PH至5，在3500 r/min条件下离心过滤；
2、将步骤1中过滤后的上清液缓慢通过微孔陶瓷膜过滤器，出去部分肉眼不可见杂质，再通过反向渗透浓缩器浓缩至16-18波美度，得浓缩液；
3、将所述浓缩液在180℃温度下离心喷雾干燥，得到87.25g淡黄色固体。将步骤3得到的淡黄色固体与儿茶素标准品（购自美国Sigma-Aldrich 公司，C15H14O6，M.W. 290.27，编号：E4018，纯度≥ 98%（HPLC））对照鉴定并经高效液相色谱法分析检测（鉴定、检测结果为：所述淡黄色固体，分子量为290，(-)ESI-MS m/z ：289 [M－H]-，熔点240ºC，分子式为：C15H14O6，CAF含量≤1%,表明所述淡黄色固体为脱咖啡碱儿茶素，而且纯度≥80%。
实施例3
1、取小叶绿茶儿茶素提取物100克，配成2000 ml儿茶素溶液，加入柠檬酸/盐酸调节pH为4.1-4.3，茶汤料液备用。茶汤液通过处理过的吸附树脂，控制吸附及解析流速，分段收集解析液。将解析液调节PH至5，在3500 r/min条件下离心过滤；
2、将步骤1中过滤后的上清液缓慢通过微孔陶瓷膜过滤器，出去部分肉眼不可见杂质，再通过反向渗透浓缩器浓缩至16-18波美度，得浓缩液；
3、将所述浓缩液在180℃温度下离心喷雾干燥，得到87.25g淡黄色固体。将步骤3得到的淡黄色固体与儿茶素标准品（购自美国Sigma-Aldrich 公司，C15H14O6，M.W. 290.27，编号：E4018，纯度≥ 98%（HPLC））对照鉴定并经高效液相色谱法分析检测（鉴定、检测结果为：所述淡黄色固体，分子量为290，(-)ESI-MS m/z ：289 [M－H]-，熔点240ºC，分子式为：C15H14O6，CAF含量≤1%,表明所述淡黄色固体为脱咖啡碱儿茶素，而且纯度≥80%。