1.一种用于检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的LAMP检测用引物组,其特征在于,由内引物对FIP/BIP和外引物对F3/B3组成,FIP、BIP、F3、B3具体如下:
2.一种利用权利要求1所述的引物组检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的LAMP检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1、提取待测样品DNA;
步骤2、配制LAMP检测反应体系,反应体系包括引物:SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4;
步骤3、以步骤1中提取的DNA为模版进行LAMP扩增反应,用实时浊度法鉴定扩增结果。
3.如权利要求2所述的一种利用权利要求1所述的引物组检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的LAMP检测方法,其特征在于,LAMP检测反应体系具体为:2×反应液RM 12~13uL,FIP、BIP各3.7~4.3uL,F3、B3各0.4~0.6uL,Bst DNA聚合酶0.9~1.2uL,待测样品DNA1.8~2.2uL,补超纯水至25uL。
4.如权利要求3所述的一种利用权利要求1所述的引物组检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的LAMP检测方法,其特征在于,FIP、BIP的浓度是40umol/L,F3、B3的浓度是5umol/L。
5.如权利要求2所述的一种利用权利要求1所述的引物组检测肠出血性大肠杆菌O157:H7的LAMP检测方法,其特征在于,LAMP扩增反应的反应前的预热温度50.0℃,LAMP扩增反应的反应温度为64.0℃且进行40min,LAMP扩增反应的反应后的酶失活温度95℃进行2min。