一种检测致癌蛋白表皮生长因子受体的试剂及试剂盒的制作方法

文档序号:12697366阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种与EGFR激酶结合的EKBD结构域,其特征在于,它的编码核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示,它的氨基酸序列如SEQ.ID.NO.2所示。

2.一种检测致癌蛋白表皮生长因子受体的试剂,所述试剂包括EKBD结构域。

3.根据权利要求2所述的试剂,其特征在于,所述试剂为带有荧光染料、标签或蛋白标记的EKBD。

4.根据权利要求3所述的试剂,其特征在于,所述荧光染料为FITC、罗丹明、俄勒冈绿、德克萨斯红、Cy5或Cy3,优选FITC。

5.根据权利要求3所述的试剂,其特征在于,所述标记EKBD的蛋白为HPR或其它酶功能蛋白或标签蛋白。

6.一种检测致癌蛋白表达生长因子受体的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求3所述的试剂。

7. 根据权利要求6所述的试剂盒, 其特征在于,所述试剂盒包括:HPR-EKBD、二甲苯溶液、0.5M柠檬酸盐缓冲液、30%过氧化氢溶液、阻断液和DAB染色液。

8. 根据权利要求6所述的试剂盒, 其特征在于,所述试剂盒包括:FITC-EKBD、10×细胞固定液、10×细胞渗透液和10×清洗液。

9. 根据权利要求7所述的试剂盒, 其特征在于,所述阻断液为10% 山羊血清;

DAB染色液为1000μL染色液A、25μL染色液B 和10μL染色液C;其中的染色液A为DAB缓冲液,即50 mM Tris-HCl,pH7.6;染色液B为2% DAB;染色液C为1% H2O2

10. 根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述10×细胞固定液为30% 多聚甲醛;10×细胞渗透液为含浓度为1% Triton X-100 的PBS;

10×清洗液为0.5 M Tris-HCl,pH 7.5, 1.5 M NaCl ,0. 5% Tween-20。

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