胍基化壳聚糖的制备方法及其应用与流程

技术特征：

1.一种胍基化壳聚糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、羧基活化精氨酸的制备：取精氨酸与N,N'-羰基二咪唑的摩尔比为1：0.2～5，溶于无水甲醇中反应1～5h，反应温度为-20～25℃，备用；

所述步骤一的合成路线为：

步骤二、胍基化壳聚糖的制备：取一定量壳聚糖溶于2-(N-吗啉代)乙烷磺酸水溶液中，将步骤一制得的羧基活化精氨酸溶液直接滴加至壳聚糖溶液中，其中壳聚糖与步骤一中羧基活化精氨酸的摩尔比为1：30～300，室温下搅拌2～20h，真空状态下除去溶剂，产物溶解在超纯水中，透析，冻干，得到胍基化壳聚糖；

所述步骤二的合成路线为：

2.根据权利要求1所述的胍基化壳聚糖的制备方法，其特征在于：所述壳聚糖的分子量为5～60kDa，脱乙酰度>85％。

3.一种采用权利要求2制得的胍基化壳聚糖制备抗菌性纳米微球的方法，其特征在于：以硫酸葡聚糖的水溶液为底液，将含有溶菌酶的胍基化壳聚糖水溶液以一定速率滴加到所述底液中，室温下高速搅拌，自然沉降过夜，4℃离心(速率5000xg)，取下层沉淀，冻干，得到抗菌性纳米微球；其中，所述胍基化壳聚糖、所述硫酸葡聚糖及所述溶菌酶的质量比为：0.1～1:1:0.2～1。

4.根据权利要求3所述的制备抗菌性纳米微球的方法，其特征在于，所述抗菌性纳米微球的粒径为40～100nm。

5.根据权利要求3所述的制备抗菌性纳米微球的方法，其特征在于：所述溶菌酶的浓度为0.5～5mg/mL，所述胍基化壳聚糖的浓度为1～5mg/mL，所述硫酸葡聚糖的浓度为1～5mg/mL。

6.根据权利要求3所述的制备抗菌性纳米微球的方法，其特征在于：以2mL硫酸葡聚糖的水溶液为底液，将含有溶菌酶的胍基化壳聚糖水溶液以1～30mL/h速率滴加到所述底液中，滴加量为0.2～2mL，室温下高速搅拌，搅拌速率为100～1000rpm，搅拌时间为10～30min，自然沉降过夜，4℃离心(速率5000xg)20min，取下层沉淀，冻干，得到抗菌性纳米微球。

7.应用权利要求3～6所述的抗菌性纳米微球制备抗菌性生物制剂或抗菌材料。