本发明涉及医药
技术领域：
，具体涉及一种用于预防和治疗缺血性脑卒中的药物。
背景技术：
：脑血管疾病(脑卒中)为脑血管阻塞或破裂引起脑部血流受阻所致病症，分缺血性脑卒中和出血性脑卒中。据报道我国城镇和乡村人群抽样调查结果表明，年发病率分别为219/10万和185/10万，死亡率为116/10万和141.8/10万，且趋年轻化。我国每年新发脑卒中病人约150～200万人，其中缺血性脑卒中约占脑卒中病例的60～80％。1992年我国城乡人口死亡原因中，脑卒中均排在第二位，占死亡总人数的21.13％和16.18％。缺血性脑卒中又称脑缺血，是最常见的脑卒中类型，是以脑循环血流量减少为主要病理特征的中枢神经系统疾病，发病率高、致残率高、死亡率高，对人类的健康造成严重威胁，特别是老年人的健康和生活质量，已经成为全球社会健康资源的巨大负担。目前国内外应用于治疗缺血性脑血管病的有效药物较少。循证医学已经证实脑缺血发生后快速恢复脑血流量治疗的有效性。超早期静脉溶栓可以复通血管，恢复血供，从而达到限制梗死区域的扩大和保护半暗带区域的目的。然而，由于缺血性脑血管病发病机制复杂，临床治疗尚缺乏有效的药物，现已成为当今世界医学界研究的重点，因此积极研发治疗药物具有重要的临床意义。技术实现要素：本发明的目的在于克服现有技术缺陷，提供一种治疗缺血性脑卒中的药物。本发明提供了一种式I所示的化合物，或其药学上可接受的盐、对映异构体、非对映异构体、消旋混合物：其中：R1表示任选经取代的(C1-6)烷基；R2、R3各自独立地表示氢、任选经取代的(C1-6)烷基、任选经取代的(C6-C10)芳基(C1-2)烷基、任选经取代的(C3-C10)杂芳基(C1-2)烷基；R4表示氢、羟基、氰基、硝基、氨基、(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷基羰基、(C1-4)烷基磺酰基或(C1-4)烷氧基羰基；L表示-(CR5R6)s(CR7R8)t-，其中R5、R6、R7、R8各自独立地选自氢或(C1-4)烷基，或者R5和R6与其所连接的碳原子共同形成任选经取代的(C3-C7)环烷基；s表示0、1或2；t表示1、2、3、4、5、或6；n表示0、1、2或3。在一个实施方案中，R1表示经取代的(C1-6)烷基，所述取代基选自卤素、羟基、氧代、(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷氧基羰基、(C1-4)烷基磺酰基、(C1-4)烷基磺酰氨基、(C3-C10)杂环烷基。在一个实施方案中，R2、R3各自独立地表示是经取代的(C1-6)烷基、经取代的(C6-C10)芳基(C1-2)烷基、经取代的(C6-C10)杂芳基(C1-2)烷基，所述取代基选自卤素、羟基、(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷氧基羰基。在一个实施方案中，R5和R6与其所连接的碳原子共同形成任选经取代的(C3-C7)环烷基，所述取代基选自卤素、羟基、氧代、(C1-4)烷基、(C1-4)烷氧基、(C1-4)烷氧基羰基、(C1-4)烷基磺酰基、(C1-4)烷基磺酰氨基、(C3-C10)杂环烷基。在一个实施方案中，L表示-(CH2)m-。在一个实施方案中，L表示在一个实施方案中，所述(C6-C10)芳基选自苯基和萘基。在一个实施方案中，所述(C3-C10)杂芳基选自吡咯基、咪唑基、吡唑基、噻吩基、呋喃基、异噁唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基和哒嗪基。在一个实施方案中，所述(C3-C10)杂环烷基选自四氢吡喃基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基。在一个实施方案中，所述卤素选自氟、氟、溴及碘。在一个实施方案中，所述(C1-6)烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基；所述(C1-4)烷基选自甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基。在一个实施方案中，所述化合物为：式I所示的化合物的药学上可接受的盐是指药学上可接受的酸加成盐，所述酸包括：盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、过氯酸盐、富马酸盐、马来酸盐、磷酸盐、乙醇酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、甲苯对硫酸盐、酒石酸盐、乙酸盐、柠檬酸盐、甲磺酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、丙二酸盐与苯磺酸盐。式I所示的化合物可包含一个或多个不对称碳原子。它们因此可以按对映异构体或非对映异构体的形式存在。这些对映异构体和非对映异构体以及它们的混合物(包括消旋混合物)，形成本发明的部分。本发明的另一个目的，在于提供一种药物组合物，其包含式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、对映异构体、非对映异构体、消旋混合物，以及药学上可接受的载剂或赋形剂。术语“药学上可接受的载体”是指对有机体无明显刺激作用，而且不会损害该活性化合物的生物活性及性能的那些载体。“药学上可接受的赋形剂”是指与活性成分一同给药的、有利于活性成分的给药的惰性物质。“药学上可接受的载体或赋形剂”包括但不限于可用于人或家畜动物的任何载体、赋形剂、助流剂、增甜剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、矫味增强剂、表面活性剂、润湿剂、分散剂、崩解剂、助悬剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂。本发明的药物组合物可通过将本发明式I所示的化合物与适宜的药学上可接受的载剂或赋形剂组合而制备，且可配制成固态、半固态、液态或气态制剂，如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、膏剂、悬浮剂、溶液剂、注射剂、吸入剂、凝胶剂、微球及气溶胶等等。本发明的药物组合物可以采用本领域众所周知的方法制造，如常规的混合法、溶解法、制粒法、制糖衣药丸法、磨细法、乳化法、冷冻干燥法等等。本发明的另一个目的，在于提供式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、对映异构体、非对映异构体、消旋混合物在制备药物中的应用，所述药物用于治疗缺血性脑卒中。本发明另一个目的为提供一种制备式I所示的化合物的方法，其包括以下步骤：其中R1、R2、R3、R4、L、m、n如上文所述。本发明式I所示的化合物在小鼠脑缺血再灌注模型中，能够显著降低行为评分、能够显著降低脑梗塞/全脑百分比、并且能够显著降低缺血再灌注损伤脑组织的含水量，减轻缺血侧脑半球水肿程度，因此能够用于预防和治疗缺血性脑卒中。具体实施方式在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。实施例1：N-{3-[5，7-二羟基-2-(4-甲氧基苯基)-4-氧代色满-3-基]丙基}丙烷-1-磺酰胺(化合物1)将N-(3-溴丙基)丙烷-1-磺酰胺(2.9g，12mmol)溶于100mL无水四氢呋喃，搅拌下滴入装有新刨镁屑(0.30g，12.5mmol)，1粒碘的烧瓶中，先滴少量，格氏反应引发后再慢慢滴入，约20min滴完，然后搅拌回流至镁屑基本全溶，停止加热，待格氏试剂冷却至30～40℃，加入催化剂二氯二茂锆(0.15g，0.5mmol)和5，7-二羟基-2-(4-甲氧基苯基)-4H-色烯-4-酮(2.8g，10.0mmol)，再回流反应2h，反应结束后将反应液冷却至室温，然后加入饱和NH4Cl水溶液(100mL)，用石油醚萃取(100mL×3)，无水Na2SO4干燥，减压蒸干，硅胶柱层析(甲苯-二氯甲烷：1∶9)，收集含产品的馏分，蒸干溶剂后得到白色固体N-{3-[5，7-二羟基-2-(4-甲氧基苯基)-4-氧代色满-3-基]丙基}丙烷-1-磺酰胺2.9g，产率65％。ESI-MS：450.15[M+H]+元素分析：理论值/实测值，C(58.78/58.61)，H(6.05/6.17)，N(3.12/3.15)，O(24.91/24.85)，S(7.13/7.22)1HNMR(400MHz，CDCl3)δ11.81(s，1H)，10.23(s，1H)，7.25(d，2H)，6.81(d，2H)，6.54(s，1H)，6.15(s，1H)，5.85(s，1H)，5.40(d，1H)，3.87(s，3H)，3.65(m，1H)，3.17(t，2H)，2.75(t，2H)，1.66(m，2H)，1.54(m，2H)，1.46(m，2H)，0.98(t，3H)。实施例2：N-[(5，7-二甲氧基-4-氧代-2-苯基色满-3-基)甲基]-2-(吡咯啉-1-基)乙烷磺酰胺(化合物2)按照实施例1的方法，用N-(溴甲基)-2-(吡咯啉-1-基)乙烷磺酰胺代替N-(3-溴丙基)丙烷-1-磺酰胺，用5，7-二甲氧基-2-苯基-4H-色烯-4-酮代替5，7-二羟基-2-(4-甲氧基苯基)-4H-色烯-4-酮，得到浅黄色固体N-[(5，7-二甲氧基-4-氧代-2-苯基色满-3-基)甲基]-2-(吡咯啉-1-基)乙烷磺酰胺，产率72％。ESI-MS：475.18[M+H]+元素分析：理论值/实测值，C(60.74/60.89)，H(6.37/6.27)，N(5.90/5.81)，O(20.23/20.33)，S(6.76/6.80)。实施例3：N-(2-{1-[5，7-双(2-乙氧基乙氧基)-4-氧代-2-苯基色满-3-基]环丙基}乙基)甲烷磺酰胺(化合物3)按照实施例1的方法，用N-[2-(1-溴环丙基)乙基]甲烷磺酰胺代替N-(3-溴丙基)丙烷-1-磺酰胺，用5，7-双(2-乙氧基乙氧基)-2-苯基-4H-色烯-4-酮代替5，7-二羟基-2-(4-甲氧基苯基)-4H-色烯-4-酮，得到白色固体N-(2-{1-[5，7-双(2-乙氧基乙氧基)-4-氧代-2-苯基色满-3-基]环丙基}乙基)甲烷磺酰胺，产率52％。ESI-MS：562.24[M+H]+元素分析：理论值/实测值，C(62.01/62.12)，H(7.00/6.87)，N(2.49/2.58)，O(22.79/22.73)，S(5.71/5.60)。生物活性测定实施例：本发明式I所示的化合物用于治疗缺血性脑卒中的动物实验小鼠线栓法制作局灶性脑缺血模型的药理实验是验证药物具有防治缺血性脑卒中作用常用的动物实验。用栓线法制备ICR小鼠脑缺血再灌注模型(制备方法详见《西药新药临床前研究指导原则汇编》的药学药理学毒理学部分，中华人民共和国卫生部药政管理局，1993：73；《药理实验方法学》第二版，人民卫生出版社，1982：830、1113)，除假手术组外，其余各组均用该模型鼠试验。1、动物ICR小鼠，雄性，体重20～22g。每组20只，共分7组，化合物1低剂量组：0.5mg/kg；化合物1中剂量组：1mg/kg；化合物1高剂量组：2mg/kg；化合物2中剂量组：1mg/kg；化合物3中剂量组：1mg/kg；假手术组：给予与药物实验组等量的生理盐水进行假手术；模型组：给予与药物实验组等量的生理盐水进行脑缺血再灌注手术。2、实验方法将小鼠用10％水合氯醛腹腔注射麻醉，颈正中切口，分离、结扎右侧颈总动脉近心端、颈外动脉及其分支动脉。分离右侧颈内动脉，沿颈内动脉向下分离翼颚动脉，根部结扎该分枝。在颈内动脉近端备线、远端放置动脉夹，颈总动脉分叉处切口，插入尼龙线，栓线进入颈内动脉，入颅至大脑前动脉，阻断大脑中动脉所有血流来源。撤掉动脉夹，扎紧备线，外留1cm长线头，缝合皮肤。缺血1小时后静脉注射给药。继续缺血1小时后再灌注。再灌注8小时再次注射给药。假手术组除不插线外，其余步骤同上。观察再灌注24小时后存活鼠以下指标：(1)观察存活鼠24小时后行为变化，进行行为学评分：参考ZeaLonga的5分制评分标准：0分为正常，无神经损伤症状；1分为不能完全伸展对侧前爪；2分为向外侧转圈；3分为向对侧倾倒；4分为不能自发行走，意识丧失。(2)对脑梗塞体积的影响：每组取10只小鼠，处死取大脑，切下厚约2mm冠状脑片，立刻置于2％TTC溶液中，37℃孵育30分钟。梗塞区呈现白色，非梗塞区呈现红色。数码相机拍摄记录，用计算机图像处理测出各区面积，并计算梗塞区占整个脑组织的百分比(％)。(3)对脑组织含水量的影响：每组取10只小鼠快速断头取大脑，分别称左右脑半球湿重，置100℃烤箱内烘干，24小时后称干重，按以下公式计算脑组织含水量：脑组织含水量(％)＝(湿重-干重)/湿重×100％。3、实验结果(1)式I所示的化合物对小鼠脑缺血再灌注模型行为学评分的影响观察结果表明：假手术组小鼠均无异常症状。模型组小鼠出现不能完全伸展对侧前爪或向外侧转圈或向对侧倾倒的神经损伤症状。化合物1低、中、高剂量组均可显著降低行为评分，降低程度与药物有剂量依赖关系，化合物2和3也可显著降低行为评分，同模型组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。上述结果表明本发明式I所示的化合物可以明显改善因缺血再灌注引起的神经损伤症状。表1实验各组小鼠脑缺血再灌注后的行为学评分组别行为学评分(分)假手术组0模型组3.4±0.6化合物1低剂量组2.4±0.6＊化合物1中剂量组1.6±0.5＊＊化合物1高剂量组1.2±0.5＊＊化合物2中剂量组1.7±0.6＊＊化合物3中剂量组1.8±0.5＊＊与模型组相比，＊＊P＜0.01，＊P＜0.05(2)式I所示的化合物对小鼠脑缺血再灌注模型脑梗塞面积的影响试验结果表明：假手术组脑组织无梗塞，脑缺血再灌注小鼠缺血侧脑组织有梗塞现象。模型组的脑梗塞/全脑(％)为42.5±3.6％，化合物1低、中、高剂量组均可显著降低脑梗塞/全脑(％)，降低程度与药物有剂量依赖关系，化合物2和3也可显著降低脑梗塞/全脑(％)，同模型组比较有显著性差异(P＜0.01)。上述结果表明本发明式I所示的化合物对小鼠脑缺血再灌注损伤引起的脑梗塞有显著保护作用。表2实验各组小鼠脑缺血再灌注后的脑梗塞面积与模型组相比，＊＊P＜0.01(3)式I所示的化合物对小鼠脑缺血再灌注模型脑组织含水量的影响试验结果表明：模型组缺血侧的脑组织含水量显著高于假手术组，化合物1低、中、高剂量组缺血侧的脑组织含水量显著低于模型组，并显示出一定的剂量依赖关系，化合物2和3也可显著降低脑组织含水量，同模型组比较有显著性差异(P＜0.05，P＜0.01)。说明本发明式I所示的化合物可显著降低缺血再灌注损伤脑组织的含水量，减轻缺血侧脑半球水肿程度。表3对小鼠缺血再灌注脑组织含水量的影响组别大脑左半球含水量(％)大脑右半球含水量(％)假手术组70.2±1.370.4±1.7模型组70.5±1.677.6±1.8化合物1低剂量组70.4±1.374.3±1.5＊化合物1中剂量组70.0±1.173.2±1.3＊＊化合物1高剂量组70.9±1.372.4±0.9＊＊化合物2中剂量组70.2±1.073.4±1.4＊＊化合物3中剂量组70.1±0.973.1±1.1＊＊与模型组相比，＊＊P＜0.01，＊P＜0.05综上所述，本发明式I所示的化合物在小鼠脑缺血再灌注模型中，能够显著降低行为评分、能够显著降低脑梗塞/全脑百分比、并且能够显著降低缺血再灌注损伤脑组织的含水量，减轻缺血侧脑半球水肿程度，因此能够用于预防和治疗缺血性脑卒中。以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。当前第1页1 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