一种稳定表达NS1蛋白细胞株的构建方法与流程

文档序号:11293041阅读:来源:国知局

技术特征:

技术总结
本发明涉及一种稳定表达NS1蛋白细胞株的构建方法。在pLenti‑CMV‑EGFP‑3Flag‑PGK‑Puro载体的EcoR I多克隆位点处插入NS1基因,用构建好的pLenti‑CMV‑NS1‑EGFP‑3Flag‑PGK‑Puro重组质粒与病毒包装质粒共转染293T细胞,培养、出毒、收取病毒上清、过滤得重组慢病毒液。将包装好的重组慢病毒感染A549细胞,通过嘌呤霉素筛选,免疫荧光及Western blot鉴定,得稳定表达NS1蛋白细胞株。本发明利用重组慢病毒系统制备一种融合标签蛋白并能稳定表达NS1蛋白的细胞株,该细胞株为研究NS1蛋白的生物学功能提供一个很好的工具。

技术研发人员:刘宏生;陈思瑶;朱俊丰;李雪
受保护的技术使用者:辽宁大学
技术研发日:2017.06.07
技术公布日:2017.09.22
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