本发明涉及一类1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪化合物及制备方法，具体地讲是公开了一类5-芳基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸酯化合物及其制备方法。
背景技术：
三氟甲基杂环是很多医药、农药、功能材料的核心结构单元，在生物生理活性和特殊功能性方面，起着不可替代的作用，因此合成三氟甲基杂环类化合物是受到化学家、药物学家及材料学家广泛关注，发展了大量方法构建各种三氟甲基杂环类化合物(l.yet,comprehensiveheterocyclicchemistryiii,1sted.,elsevier,oxford,2008和j.alvarez-builla,j.j.vaquero,j.barluenga,modernheterocyclicchemistry,1sted.,wiley-vch,weinheim,2011)。
含三氟甲基的1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪是全新结构化合物。因此发展有效的制备方法获得这类化合物，将有利于三氟甲基1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪在合成化学、药物化学、生命科学及材料化学中的应用。
技术实现要素：
本发明目的是提供一种新型的5-芳基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸酯化合物，其中ar是芳香基团、r是脂肪烷基和芳香基团：
另一方面，本发明的5-芳基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸酯化合物的制备方法，包括步骤如下：
将催化剂和碱加入干燥反应器中，在有机溶剂中，继续加入甘氨酸酯芳香醛亚胺与2，2，2-三氟甲基重氮乙烷，于室温下，完全反应1～48小时后，经洗涤、萃取、分离，得到目标化合物5-芳基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸酯；甘氨酸酯芳香醛亚胺、催化剂、碱及2,2,2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1:0.1～1:1～3:1～3。
所述的催化剂为氧化银、碳酸银、硝酸银、醋酸银或氟化银。
所述的碱为碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯。
所述的有机溶剂为乙醚、四氢呋喃、1，4-二氧六环或乙腈。
所述的芳香基团为苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-碘苯基、4-氰基苯基、4-硝基苯基、4-三氟甲基苯基、4-甲氧羰基苯基、3，5-双(三氟甲基)苯基、3，4，5-三氟苯基、1－萘基、2－萘基、9-蒽、9-菲、1-芘等。
所述的脂肪烷基团为甲基、乙基、丙基、丁基、叔丁基、苄基等。
本发明提供一种新型的5-芳基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸酯化合物及其制备方法，所得目标化合物是含有三氟甲基的1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪类杂环结构，其本身可作为药物，或作为药物合成的核心结构单元，用于药物活性筛选。
具体实施方式
通过下述实例有助于进一步理解本发明，但并不限制本发明。
实例1：5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
在一干燥100mlschlenk反应瓶中加入甘氨酸甲酯苯甲醛亚胺(0.71g,4mmol)，agoac(67mg,0.4mmol)和cs2co3(1.30g,4mmol)，向体系中加入15ml四氢呋喃，室温搅拌3分钟；再向体系加入cf3chn2的四氢呋喃溶液(4mmol,0.2m,20ml)，置于室温搅拌24小时。tlc检测反应完全后，减压将溶剂脱除；然后向体系加入40ml乙酸乙酯和20ml水，分液，水相用乙酸乙酯萃取(10mlx3)，合并有机相并用水(20ml)洗涤两次，无水mgso4干燥，柱层析(淋洗液：石油醚/乙酸乙酯＝10/1to5/1)即可得到目标产物5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯0.91g，收率80％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.36–7.32(m,3h),7.27(m,2h),5.87(s,1h),5.73(s,1h),4.84(s,1h),3.84(s,3h),3.53(m,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-73.00(d,3f).
实例2：5-对甲基苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以氟化银为催化剂，氢氧化钠为碱，乙醚为溶剂，甘氨酸甲酯对甲苯甲醛亚胺、氟化银、氢氧化钠及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/2/2，在室温反应12小时，合成5-对甲基苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率82％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.17(m,4h),5.77(s,1h),5.66(s,1h),4.81(s,1h),3.88(s,3h),3.50(m,1h),2.34(s,3h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.90(d,3f)。
实例3：5-对甲氧基苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以氧化银为催化剂，氢氧化钾为碱，1,4-二氧六环为溶剂，甘氨酸甲酯对甲氧苯甲醛亚胺、氧化银、氢氧化钾及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.4/1.5/3，在室温条件下反应36小时，合成5-对甲氧基苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率50％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.17(d,2h),6.86(d,2h),5.76(s,1h),5.69(s,1h),4.75(s,1h),3.83(s,3h),3.77(s,3h),3.47(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.93(d,3f)。
实例4：5-对氟苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以碳酸银为催化剂，氢氧化铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸甲酯对氟苯甲醛亚胺、碳酸银、氢氧化铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.1/3/2，在室温条件下反应2小时，合成5-对氟苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率96％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.30–7.24(m,2h),7.10–7.03(m,2h),5.79(s,1h),5.70(s,1h),4.86(s,1h),3.89(s,3h),3.51(dd,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.98(d,3f),-113.02–-113.33(m,1f)。
实例5：5-对氯苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸甲酯对氯苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.6/1.5/3，在室温条件下反应36小时，合成5-对氯苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率97％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.32(d,2h),7.19(d,2h),5.89(s,1h),5.75(s,1h),4.83(s,1h),3.84(s,3h),3.51–3.46(m,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.97(d,3f)。
实例6：5-对溴苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，乙腈为溶剂，甘氨酸甲酯对溴苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.1/3/3，在室温条件下反应48小时，合成5-对溴苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率99％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.50(d,2h),7.16(d,2h),5.91(s,1h),5.77(s,1h),4.85(s,1h),3.87(s,3h),3.51(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.98(d,3f)。
实例7：5-对碘苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸甲酯对碘苯甲醛亚胺、氟化银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/2/3，在室温条件下反应48小时，合成5-对碘苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率86％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.51(d,2h),7.14(d,2h),5.92(s,1h),5.79(s,1h),4.86(s,1h),3.89(s,3h),3.55(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.90(d,3f)。
实例8：5-对三氟甲苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸甲酯对三氟甲苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.6/1.5/3，在室温条件下反应1小时，合成5-对三氟甲苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率82％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.61(d,2h),7.39(d,2h),5.95(d,1h),5.79(s,1h),4.94(s,1h),3.84(s,3h),3.52(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-62.73(s,3f),-73.09(d,3f)。
实例9：5-对氰基苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，氢氧化铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸甲酯对氰基苯甲醛亚胺、醋酸银、氢氧化铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.8/1/3，在室温条件下反应4小时，合成5-对氰基苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率81％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.62(d,2h),7.38(d,2h),5.99(s,1h),5.83(s,1h),4.95(s,1h),3.83(s,3h),3.52(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.99(d,3f)。
实例10：5-(4-甲氧羰基)苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸甲酯(4-甲氧羰基)苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/1/3，在室温条件下反应24小时，合成5-(4-甲氧羰基)苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率93％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.00(d,2h),7.33(d,2h),5.90(d,1h),5.74(s,1h),4.92(s,1h),3.89(s,3h),3.86(s,3h),3.54(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-73.00(d,3f)。
实例11：5-对硝基苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸乙酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸乙酯对硝基苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/1/1/2，在室温条件下反应10小时，合成5-对硝基苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸乙酯，收率76％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.66(d,2h),7.39(d,2h),6.01(s,1h),5.85(s,1h),4.99(s,1h),3.80(q,2h),3.52(q,1h),1.28(t,3h),；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.99(d,3f)。
实例12：5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸丙酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸丙酯苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.5/1/2，在室温条件下反应36小时，合成5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸丙酯，收率70％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.60(d,2h),7.35(d,2h),6.00(s,1h),5.81(s,1h),4.96(s,1h),3.74(t,2h),3.52(q,1h),1.73(m,2h),0.91(t,3h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.89(d,3f)。
实例13：5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸丁酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸丁酯苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/1/2，在室温条件下反应24小时，合成5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸丁酯，收率78％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.60(d,2h),7.33(d,2h),5.98(s,1h),5.810(s,1h),4.92(s,1h),3.71(t,2h),3.50(q,1h),1.60-1.64(m,2h),1.42-1.46(m,2h),0.90(t,3h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.82(d,3f)。
实例14：5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸叔丁酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸叔丁酯苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/2.5/2，在室温条件下反应48小时，合成5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸叔丁酯，收率55％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.56(d,2h),7.32(d,2h),6.01(s,1h),5.80(s,1h),4.92(s,1h),3.53(q,1h),1.37(s,9h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.79(d,3f)。
实例15：5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸苄酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸苄酯苯甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/2/2，在室温条件下反应48小时，合成5-苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸苄酯，收率71％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.38-7.47(m,7h),7.27-7.30(d,3h),6.01(s,1h),5.80(s,1h),5.22(s,2h),3.53(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.91(d,3f)。
实例16：5-(1-萘基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以氟化银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸甲酯1-萘甲醛亚胺、氟化银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/3/2，在室温反应30小时，合成5-(1-萘基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率96％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.88(t,2h),7.80(d,1h),7.60–7.53(m,1h),7.53–7.48(m,1h),7.43(t,1h),7.35(d,1h),5.96(s,1h),5.69(s,1h),5.62(s,1h),3.85(s,3h),3.65(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.79(d,3f)。
实例17：5-(2-萘基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，四氢呋喃为溶剂，甘氨酸甲酯2-萘甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/1/3，在室温反应24小时，合成5-(2-萘基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率95％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.88–7.80(m,3h),7.73(s,1h),7.54–7.47(m,2h),7.38(dd,1h),5.87(d,1h),5.71(s,1h),5.02(s,1h),3.91(s,3h),3.63(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.89(d,3f)。
实例18：5-(9-蒽基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，乙腈为溶剂，甘氨酸甲酯9-蒽甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/1/2，在室温反应48小时，合成5-(9-蒽基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率88％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.22(s,1h),7.88–8.00(m,4h),7.35-7.40(m,4h),5.80(d,1h),5.72(s,1h),5.00(s,1h),3.91(s,3h),3.60(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.89(d,3f)。
实例19：5-(9-菲基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，乙腈为溶剂，甘氨酸甲酯9-菲甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/1/3，在室温反应48小时，合成5-(9-菲基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率80％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.92(d,2h),8.10(d,2h),7.80–7.88(m,4h),7.60(s,1h),5.82(d,1h),5.75(s,1h),5.02(s,1h),3.92(s,3h),3.62(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.76(d,3f)。
实例20：5-(1-芘基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯的制备
与实验1类似的方法，以醋酸银为催化剂，碳酸铯为碱，乙腈为溶剂，甘氨酸甲酯1-芘甲醛亚胺、醋酸银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/2/3，在室温反应48小时，合成5-(1-芘基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸甲酯，收率62％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ8.05-8.12(m,2h),7.82-7.88(m,2h),7.65–7.71(m,5h),5.79(d,1h),5.70(s,1h),5.01(s,1h),3.90(s,3h),3.61(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.88(d,3f)。
实例21：5-(3,5-双三氟甲基)苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸苄酯的制备
与实验1类似的方法，以氧化银为催化剂，碳酸铯为碱，乙腈为溶剂，甘氨酸苄酯3,5-双三氟甲基苯甲醛亚胺、氧化银、碳酸铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/3/3，在室温反应20小时，合成5-(3,5-双三氟甲基)苯基-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸苄酯，收率78％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ7.88(s,1h),7.53(s,2h),7.45–7.49(m,2h),7.33–7.38(m,3h),5.79(d,1h),5.70(s,1h),5.20(s,2h),5.00(s,1h),3.63(q,1h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.78(d,3f),-73.24(s,6f)。
实例22：5-(3,4,5-三氟苯基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸乙酯的制备
与实验1类似的方法，以氟化银为催化剂，氢氧化铯为碱，1,4-二氧六环为溶剂，甘氨酸乙酯3,4,5-三氟苯甲醛亚胺、氟化银、氢氧化铯及2，2，2-三氟甲基重氮乙烷的摩尔配比为1/0.2/1/1，在室温反应28小时，合成5-(3,4,5-三氟苯基)-6-三氟甲基-1,2,5,6-四氢-1,2,4-三氮嗪-3-甲酸乙酯，收率69％。1hnmr(600mhz,cdcl3)δ6.68(s,2h),5.71(d,1h),5.65(s,1h),4.97(s,1h),4.32(q,2h),3.60(q,1h),1.32(t,3h)；19fnmr(565mhz,cdcl3)δ-72.52(d,3f),--113.00–-113.47(m,3f)。
生物活性实验
采用离体平皿法，测定这些化合物对水稻纹枯病菌、番茄早役病菌、苹果轮纹病菌、小麦赤霉病菌、黄瓜枯萎病菌和花生褐斑病菌的生物活性，测试浓度为50μg·ml-1，测试结果见下表。
离体平皿法：将一定量化合物溶解在适量丙酮中，然后用含有200μg·ml-1乳化剂水溶液稀释至所需浓度，然后各吸取1ml配合的药液注入培养皿中，再分别加入9ml培养基，摇匀后制成50μg·ml-1的含药平板，以添加1ml灭菌水的平板作为空白对照。用直径4mm的打孔器沿菌丝外沿切取菌盘，移至含药平板上。每处理重复三次。将培养皿放在24±1℃恒温培养箱内培养。48小时后调查各处理菌盘扩展直径，求取评价值，与空白对照比较计算相对抑菌率。
上表结果表明，这些化合物经过初步生物活性试验，发现部分具有很好的杀菌活性。
本发明并不局限于实施例中所描述的技术，它的描述是说明性的，并非限制性的，本发明的权限由权利要求所限定，基于本技术领域人员依据本发明所能够变化、重组等方法得到的与本发明相关的技术，都在本发明的保护范围之内。