技术领域
本发明涉及动物胶原蛋白提取技术，具体是一种生物胶原提取物的提取方法。
背景技术：
随着年龄的增长，成纤维细胞的合成能力下降，若皮肤中缺乏胶原蛋白，胶原纤维就会发生联固化，使细胞间粘多糖减少，皮肤便会失去柔软、弹性和光泽，发生老化，同时真皮的纤维断裂、脂肪萎缩、汗腺及皮脂腺分泌减少，使皮肤出现色斑、皱纹等一系列老化现象。
胶原蛋白由动物皮提取，皮中除胶原蛋白外还含有透明质酸、硫酸软骨素等蛋白多糖，它们含有大量极性基团，是保湿因子，且有阻止皮肤中的酪氨酸转化为黑色素的作用，故胶原蛋白有纯天然保湿、美白、防皱、祛斑等作用，可广泛应用于美容用品中。胶原蛋白的化学组成、结构赋予了它是美容的基础。胶原蛋白与人体皮肤胶原的结构相似，为非水溶性纤维状含糖蛋白质，分子中富含大量氨基酸和亲水基，具有一定的表面活性和很好的相容性，同时由于其分子中含有大量的羟基，因此它有着相当好的保湿作用。在相对湿度70%时，仍可保持其自身重量45%的水分。试验证明：0.01%的胶原蛋白纯溶液就能形成很好的保水层，供给皮肤所需要的全部水分。因而，一种提取简单、难度低、周期短的胶原提取方法将会对胶原应用带来广泛前景。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种生物胶原提取物的提取方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种生物胶原提取物的提取方法，包括以下步骤：
1）将新鲜猪皮去除杂质后清洗，对组织进行切片，再将切片组织清洗浸泡在0.1%~40%(W/V)的碱溶液中，浸泡0.5~24h；
2）脱脂:先将猪皮放在烧杯容器中，加猪皮重量4-5倍30-50℃的温水，然后再加水体积一半的脱脂液，充分搅拌10-30分钟后，滤去上层液体，按上述方法再重复脱脂一次，最后用30-50℃水漂洗；
3）盐提:取脱脂后猪皮加等量的等渗盐水于恒温水浴锅内，于60℃下保持2-4小时，恒温期间需要充分搅拌，使猪皮均匀受热，然后过滤，滤液留存，准备下一步酸提；
4）酸提:用与猪皮等量的醋酸缓冲液于50-70℃水浴条件下处理6-9小时，方法与盐
提相同，然后过滤，滤液留存；
5）斩拌:将步骤4）的提取剩余物放入斩拌机内斩拌至1-2mmz，边斩拌边加酶解液，使组织分散进酶解液中，2~40°C环境酶解1~72h；酶解完毕后碱液调PH值至7~13，2~40°C静置2~24h；30~150目滤网过滤，去除未酶解物；
6）冷冻干燥。
作为本发明进一步的方案：步骤5）中所述酶解液为酸性蛋白酶，效价为1:1500~1:12000，酸性蛋白酶：组织切片为1:50~1:1000(W/W);酶解液PH值为2~6。
作为本发明进一步的方案：步骤5）斩拌机的转速要求在1500转/分以上，并且斩拌机内温度低于20℃。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明通过脱脂、酸法技术的有效结合，改善了提取工艺，提高了胶原蛋白的提取效率。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种生物胶原提取物的提取方法，包括以下步骤：
1）将新鲜猪皮去除杂质后清洗，对组织进行切片，再将切片组织清洗浸泡在0.1%~40%(W/V)的碱溶液中，浸泡0.5~24h；
2）脱脂:先将猪皮放在烧杯容器中，加猪皮重量4-5倍30-50℃的温水，然后再加水体积一半的脱脂液，充分搅拌10-30分钟后，滤去上层液体，按上述方法再重复脱脂一次，最后用30-50℃水漂洗；
3）盐提:取脱脂后猪皮加等量的等渗盐水于恒温水浴锅内，于60℃下保持2-4小时，恒温期间需要充分搅拌，使猪皮均匀受热，然后过滤，滤液留存，准备下一步酸提；
4）酸提:用与猪皮等量的醋酸缓冲液于50-70℃水浴条件下处理6-9小时，方法与盐
提相同，然后过滤，滤液留存；
5）斩拌:将步骤4）的提取剩余物放入斩拌机内斩拌至1-2mmz，边斩拌边加酶解液，使组织分散进酶解液中，2~40°C环境酶解1~72h；酶解完毕后碱液调PH值至7~13，2~40°C静置2~24h；30~150目滤网过滤，去除未酶解物；
6）冷冻干燥。
步骤5）中所述酶解液为酸性蛋白酶，效价为1:1500~1:12000，酸性蛋白酶：组织切片为1:50~1:1000(W/W);酶解液PH值为2~6。
上述步骤5）斩拌机的转速要求在1500转/分以上，并且斩拌机内温度低于20℃。
1、本发明的脱脂过程脱脂时间和搅拌充分，不会出现脱脂后产物表面残存有油脂的现象，因此脱脂效果明显，为下一步盐提提供了有利的条件。2、本发明整个操作过程中要多次换水，由于水温的变化对提取的产物的纯度和色泽度均存在很大影响，因此本发明中脱脂过程、盐提过程、酸提过程中的水温保持水温一致，从而减少了提取中间产物在不同温度环境下的暴露时间。3、按工艺流程中的加水量最为适宜，如果含水量过低，则影响胶原蛋白的充分提取和产量;若过高，则在以后的使用中起不到粘结和乳化的作用。因此，本发明水的添加量适度。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。