一种苯并吲唑化合物及其应用的制作方法

本发明涉及医药领域，具体涉及一种苯并吲唑化合物的制备方法及在医药中的应用。技术背景阿尔茨海默氏症，又称早老性痴呆，属于老年痴呆的一种，是一种由于蛋白质在脑部沉积而造成脑神经细胞死亡的神经退化性疾病，是大脑变性中最常见的疾病，是遗传和环境多因素引起的特征性脑痴呆综合症。在临床上以进行性记忆减退和后天获得的知识丧失直到最后丧失生活能力为特征。病理上有脑神经细胞外出现β-淀粉样蛋白聚集形成老年斑、脑神经细胞内tau蛋白异常聚集形成的神经原纤维缠结、选择性神经元丢失、脑萎缩及皮质动脉和小动脉的血管淀粉样变性等特点。20世纪80年代初提出的脑胆碱能损伤学说得到普遍认同:胆碱能神经功能降低是阿尔茨海默氏症发病的主要机制。患者脑内基底核和前脑的胆碱能神经最易受损，随着疾病进展，90％胆碱能神经元都会被破坏，使脑内乙酰胆碱(Ach)水平降低，降低程度与患者认知能力降低呈显著相关，提高脑内Ach水平，患者的记忆力、认知力就能得到改善。许多研究指出。当前现有的临床药物仅对早期老年痴呆有一定的效果，因此开发有效的老年痴呆药物受到了关注。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种苯并吲唑化合物的制备方法及在医药中的应用，所述苯并吲唑化合物的结构如式1所示，化学名称为2-对甲苯磺酰基-4,5-二氢苯并[g]吲唑：为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：本发明提供的苯并吲唑化合物的制备：氮气保护下将1mmol对甲苯磺酰肼加入3ml无水甲醇中，缓慢滴加1-萘酮1mmol，加入0.05mmol的柠檬酸作为催化剂，室温反应5h，浓缩后用硅胶柱分离得到第一步产物，取第一步产物0.5mmol、2-(二甲基氨基)丙二腈0.75mmol加入2mlDMF中，加入0.025mol的Zn(OTf)2、0.025mol的CoCl2作为催化剂，室温反应10h，浓缩后用硅胶柱纯化即可得到所述苯并吲唑化合物，反应路线如式2所示。所述苯并吲唑化合物在制备乙酰胆碱酯酶抑制剂中的应用。所述苯并吲唑化合物在制备治疗阿尔茨海默病药物中的应用。本发明所述苯并吲唑化合物以ATCh为底物，测定不同浓度所述苯并吲唑化合物对乙酰胆碱酯酶的抑制作用，结果显示所述苯并吲唑化合物对乙酰胆碱酯酶的半数抑制浓度IC50为10.8μmol/L；效果优于多奈哌齐，可用于治疗阿尔茨海默病。附图说明图1是本发明提供的苯并吲唑化合物1HNMR谱图；图2是本发明提供的苯并吲唑化合物13CNMR谱图。具体实施方式以下是本发明的具体实施例说明，对本发明的技术方案作进一步的描述，但不发明不限于这些实施例。实施例1所述苯并吲唑化合物的制备：氮气保护下将1mmol对甲苯磺酰肼加入3ml无水甲醇中，缓慢滴加1-萘酮1mmol，加入0.05mmol的柠檬酸作为催化剂，室温反应5h，浓缩后用硅胶柱分离得到第一步产物，取第一步产物0.5mmol、2-(二甲基氨基)丙二腈0.75mmol加入2mlDMF中，加入0.025mol的Zn(OTf)2、0.025mol的CoCl2作为催化剂，室温反应10h，浓缩后用硅胶柱纯化即可得到所述苯并吲唑化合物，产率84％。参阅图1和图2，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.99–7.92(m,3H),7.87–7.86(m,1H),7.32–7.27(m,4H),7.24–7.21(m,1H),2.92–2.89(m,2H),2.78(t,J＝7.2Hz,2H),2.40(s,3H)；13CNMR(100MHz,CDCl3)δ154.16,145.31,137.54,134.49,129.82,129.12,128.35,127.84,127.83,127.27,126.86,123.72,120.22,28.79,21.59,18.98；HRMS(ESI)calcdforC18H16N2O2S[M+H]+:325.1005,found325.1006。反应路线如式2所示。实施例2实施例1得到苯并吲唑化合物的乙酰胆碱酯酶抑制活性，100μL乙酰胆碱酯酶(5U/mL)、50μLDTNB(10mmol/L)加入到730μLPBS(pH＝8.0)中，加入10μL所述苯并吲唑化合物的二甲基亚砜溶液，37℃下孵育10min，加入20μL碘化硫代乙酰胆碱(75mmol/L)，用紫外-可见光分光光度计测定405nm处吸光度值的变化，时间为半小时。乙酰胆碱酯酶抑制率(％)＝[1-(样品组吸光度变化)/(对照组吸光度变化)]×100％。结果显示，所述苯并吲唑化合物可有效抑制乙酰胆碱酯酶活性，半数抑制浓度IC50可达到10.8μmol/L，效果优于多奈哌齐。实施例1所得化合物与阳性对照多奈哌齐的活性结果见表1。表1实施例1化合物与多奈哌齐对乙酰胆碱酯酶的抑制效果注：平均数±SD；n＝4为了方便服用，本发明提供的苯并吲唑化合物其它辅料制备成片剂或者胶囊剂。片剂的制备：将10mg实施例1得到的苯并吲唑化合物与180mg乳糖、55mg淀粉、5mg硬脂酸镁，混合物后压片成型即可得到。胶囊剂：将10mg实施例1所得苯并吲唑化合物与187mg乳糖、3mg硬脂酸镁混合均匀，装入硬明胶胶囊中即可得到。实验例健康昆明种雄性小鼠30只,体重(30±4)g,月龄(12±2)月,随机分为3组。模型组、药物组、对照组。对照组和模型组组用蒸馏水灌胃(体积与药物组相当,0.3～0.5mL/次),药物组10mg/(kg·d)，共55d。除对照组外，模型组和药物组从灌胃给药第5天造模，每组动物用氯化铝100mg/kg，腹腔注射，隔日1次,连续50d，以建立慢性铝中毒老年痴呆模型。空白组用注射生理盐水(体积与其余各组相当,0.2mL/次)腹腔注射,隔日1次,连续50d。1胆碱酯酶活性的检测断头处死，冰台快速取出大脑，加到玻璃匀浆器中进行冰浴匀浆。按脑组织质量与匀浆总体积1∶10的比例，加入冰冻的磷酸盐缓冲液稀释混匀。将制备好的10％脑匀浆在4℃条件下以2500r/min离心10min，取上清液，严格按照乙酰胆碱酯酶测定试剂盒方法测定，如表1。结果显示，与模型组比较，药物组脑组织乙酰胆碱酯酶浓度显著降低，提示了药物可有效改善老年痴呆的胆碱功能。表1各组脑组织乙酰胆碱酯酶浓度比较脑组织乙酰胆碱酯酶浓度(U/mgprot)正常对照组0.66±0.11模型组1.06±0.26药物组0.79±0.182海马细胞形态学观察以上各组每组取3只动物,最后一次腹腔注射,灌胃后行病理学观察。心脏灌注后,取出完整小鼠大脑,用上述固定液固定72h,常规包埋石蜡切片,冠状连续切片(厚度50μm),海马组织每5张取1张。HE染色；光学显微镜下观察小鼠海马CA1区细胞形态,细胞计量采用每200μm(×400)长度下正常细胞数目,取平均值,为该切片的细胞计数。结果显示，相比于模型组，药物组小鼠神经元数量明显增多，提示药物可有效改善小鼠的神经功能。表2各组神经元数量比较神经元数量(个/200μm)正常对照组101.56±10.94模型组47.56±4.72药物组72.64±8.95通过上述实验分析可得，本申请提供的苯并吲唑化合物具有良好的抑制乙酰胆碱酯酶活性，可以作为制备乙酰胆碱酯酶活性抑制剂药物，尤其是做为制备治疗阿尔茨海默病的药物。以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出对于本领域的技术人员来说，在不脱离本发明结构的前提下，还可以作出若干变形和改进，这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。当前第1页1 2 3