本发明属于磷脂技术领域，涉及一种微水相制备磷脂酸的方法。
背景技术：
磷脂酸（Phosphatidic acid, PA），学名3-磷酸基-1,2-甘油二酯，为含磷酸根的单脂衍生物，属于天然类脂化合物。作为动植物细胞膜、核膜、脂膜的基本成分，是生命体的基础物质。具有调节多种酶的活性的作用，还可作为天然乳化剂、苦味抑制剂、药物载体、脂质信使等在食品、医药、化妆品、健身等领域有广阔用途。从化学结构上看，PA 为两性化合物，脂肪酸基团的一端具有强的亲油性，而磷酸基团的一端具有强的亲水性。磷脂酸在生物体内含量虽然很少，但却是甘油酯和大多数磷脂的合成的中间体，同时磷脂酸是细胞内重要的第二信使。磷脂酸广泛应用于在食品、药品、化妆品中。
磷脂酸广泛存在于自然界中，例如大麦胚芽、玉米胚芽、大豆、葵花籽、蛋黄等都含有。当前，磷脂酸的主要制备方法有化学合成法，从大豆、葵花籽、蛋黄等天然原料中提取或转化磷脂酸的薄层色谱法、有机溶剂提取法、超临界流体萃取法和酶转化法等。但上述方法普遍存在制备操作繁琐、制备周期长、废弃物多、能耗大、成本高等缺点。
技术实现要素：
为克服上述问题，本发明提供一种微水相制备磷脂酸的方法，该制备方法工艺简单，生产周期短，生成废弃物少，成本和能耗很低，便于实现工业规模连续生产高含量磷脂酸。
为实现上述目的及其他相关目的，本发明提供一种微水相制备磷脂酸的方法，包括以下步骤：以卵磷脂为原料，以水为反应溶剂，二者充分混匀后形成微水相体系，加入高活性的磷脂酶D浓缩酶液进行酶催化反应，充分反应后，向反应物料中加入食用级无水乙醇，剧烈搅拌析出固体不溶物，离心去除乙醇，所得沉淀加水溶解后加入食品级丙酮剧烈搅拌析出固体不溶物，再离心去除丙酮，所得固体采用真空干燥，即可得到高含量的磷脂酸产品。
上述方案中，有关内容解释如下：
1、上述方案中，所述卵磷脂为丙酮不溶物大于等于50%的液体磷脂。
2、上述方案中，所述卵磷脂与水混匀时的质量比为1:0.08-1:0.05。
3、上述方案中，所述磷脂酶D酶液为天蓝色链霉菌所产含磷脂酶D的浓缩酶液，酶活为500-1000U/ml。
4、上述方案中，所述卵磷脂与磷脂酶D浓缩酶液的质量比为1:0.05-1:0.01。
5、上述方案中，所述磷脂酶D催化反应的温度为45-65℃，反应时间为12-24小时。
6、上述方案中，所述反应后的物料与加入的乙醇的质量比为1:3-1:1。
7、上述方案中，所述离心沉淀与丙酮质量为1:3-1:1.5。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明总体工艺步骤简单，生产周期短，生成废弃物少，成本和能耗很低，便于实现工业规模连续生产高含量磷脂酸，纯度较高，对于磷脂酸的广泛使用，以及保健食品以及药品工业都具有重大意义。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术内容做进一步说明，但本发明不只限于这些实施例，不能以下述实施例来限定本发明的保护范围。
实施例：
一种微水相制备磷脂酸的方法，包括以下步骤：以卵磷脂为原料，以水为反应溶剂，二者充分混匀后形成微水相体系，加入高活性的磷脂酶D浓缩酶液进行酶催化反应，充分反应后，向反应物料中加入食用级无水乙醇，剧烈搅拌析出固体不溶物，离心去除乙醇，所得沉淀加水溶解后加入食品级丙酮剧烈搅拌析出固体不溶物，再离心去除丙酮，所得固体采用真空干燥，即可得到高含量的磷脂酸产品。
所述卵磷脂为丙酮不溶物大于等于50%的液体磷脂。
所述卵磷脂与水混匀时的质量比为1:0.08-1:0.05。
所述磷脂酶D酶液为天蓝色链霉菌所产含磷脂酶D的浓缩酶液，酶活为500-1000U/ml。
所述卵磷脂与磷脂酶D浓缩酶液的质量比为1:0.05-1:0.01。
所述磷脂酶D催化反应的温度为45-65℃，反应时间为12-24小时。
所述反应后的物料与加入的乙醇的质量比为1:3-1:1。
所述离心沉淀与丙酮质量为1:3-1:1.5。
实施例1
以0.1kg卵磷脂（丙酮不溶物大于等于50%的液体磷脂）为原料，以0.005kg水为反应溶剂，二者充分混匀后，加入0.005kg高活性的磷脂酶D浓缩酶液在55℃进行酶催化反应，12小时后向该反应体系补给0.005kg水，继续反应12小时后向反应物料中加入0.12kg的食用级无水乙醇，剧烈搅拌析出固体不溶物，离心去除乙醇，所得沉淀加水溶解后加入0.16kg食品级丙酮剧烈搅拌析出固体不溶物，离心去除丙酮，所得固体采用真空干燥即可得到高含量的磷脂酸产品，HPLC检测显示磷脂酸含量为64.2%。
实施例2
以1kg卵磷脂（丙酮不溶物大于等于50%的液体磷脂）为原料，以0.08kg水为反应溶剂，二者充分混匀后，加入0.05kg高活性的磷脂酶D浓缩酶液在55℃进行酶催化反应，12小时后向该反应体系补给0.08kg水，继续反应12小时后向反应物料中加入2.4kg食用级无水乙醇，剧烈搅拌析出固体不溶物，离心去除乙醇，所得沉淀加水溶解后加入2.0kg的食品级丙酮剧烈搅拌析出固体不溶物，离心去除丙酮，所得固体采用真空干燥即可得到高含量的磷脂酸产品，HPLC检测显示磷脂酸含量为68.2%。
实施例3
以50kg卵磷脂（丙酮不溶物大于等于50%的液体磷脂）为原料，以2.5kg水为反应溶剂，二者充分混匀后，加入2.5kg高活性的磷脂酶D浓缩酶液在65℃进行酶催化反应，12小时后向该反应体系补给2.5kg水，继续反应12小时后向反应物料中加入120kg食用级无水乙醇，剧烈搅拌析出固体不溶物，离心去除乙醇，所得沉淀加水溶解后加入100kg的食品级丙酮剧烈搅拌析出固体不溶物，离心去除丙酮，所得固体采用真空干燥即可得到高含量的磷脂酸产品，HPLC检测显示磷脂酸含量为72.7%。
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