一种生产黄单胞菌多糖的培养基的制作方法

文档序号:90915阅读:805来源:国知局
专利名称:一种生产黄单胞菌多糖的培养基的制作方法
本发明属于微生物多糖工业生产方法。
微生物多糖,特别是由Xanthomonas属的一些种产生的胞外多糖,由于其结构的特殊性可广泛用于石油开发、地质钻探、消防灭火、搪瓷、轻工、食品等多个行业,具有一定的经济效益。1961年美国发表了利用Xanthomonas Campestris NRRL B-1459菌株发酵生产黄单胞菌多糖的研究报告,并于六十年代末开始工业生产,继之扩展到美国数家公司和欧洲。其发酵培养基组成为葡萄糖或淀粉水解物(2-3%)作碳源,DDS或无机氮源,K2HPO4和MgSO4作为无机盐,自来水配制。在不控制PH的分批发酵中,一般多糖产量为14-15克/升,发酵液粘度为4500-7000CP。(见U,S.Patent 3,391,060、4,154,654、3,594,280)本发明的目的在于选择一个适合工业生产并能高产的发酵培养基。
本发明的要点是利用自己筛选的Xanthomonas Campestris NK-01菌株发酵生产黄单胞菌多糖,其发酵培养基组成为2-5%的淀粉作碳源,0.2-0.4%的豆并粉和0.1-0.3%的鱼粉作氮源,0.15-0.35%的CaCO3作无机盐,自来水配制。这些发酵原料来源广,价格低,并能给出较高的多糖产量和发酵液粘度。适合工业生产。
实施例1由X、Campestris NK-01菌株斜面取一环接入装有80ml培养液的250ml摇瓶中,28℃振荡培养48小时即为摇瓶种子。摇瓶种子培养基组成如下蔗糖 1%,牛肉膏 0.3%,
蛋白胨 0.5%,酵母膏 0.1%,自来水配制,调PH7.0。蒸汽压1Kg/cm2,灭菌 30′。
取1.5ml摇瓶种子接入装有60ml发酵培养基的250ml摇瓶中。发酵培养基组成如下玉米淀粉 4%,豆并粉 0.3%,鱼粉 0.2%,CaCO30.25%,自来水配制,调PH7.0,蒸汽压力 1Kg/cm2灭菌 30′。
将发酵摇瓶振荡培养72小时后,发酵液粘度11000CP,多糖产量26克/升。
实施例2取例1所述摇瓶种子3升,接入200升发酵罐中(装130升发酵培养基,其组成同例1),控制罐压0.8-1.0Kg/cm2,通风搅拌,28-30℃培养74小时,终粘度为9400CP,多糖产量24.3克/升。
实施例3将例1所述摇瓶种子以2%的种量接入装有100升二级种子培养液的200升罐中。该种子培养基的组成是蔗糖 1%,蛋白胨 0.5%,CaCO30.2%,自来水配制,0.8-1Kg/cm2蒸汽压力灭菌30′。
接种后维持罐压0.8-1Kg/cm2,通风搅拌,28-30℃培养16-18小时,经检查无杂菌、菌浓合格即接入1200升发酵罐中,此罐装800升经灭菌的发酵培养基(其组成同例1),控制罐压0.8-1.0Kg/cm2,通风搅拌,28-30℃培养76小时,发酵液粘度7800CP,多糖产量22.4克/升。
参考文献1.Adv、Appl、Microbiol、,V、23,P、19-25(1978)2.S、P、Rogovin et al、,J、Biochem、Microbiol、Technol、eng、,V、Ⅲ,No、1,P、51-63(1961)3.M、C、Cadmus et al、Biotechnol、Bioeng、V、××,P、1003-1014(1978)4.M、C、Cadmus et al、Can、J、Microbl、V、22,P、942-948(1976)
权利要求
1.由碳源、氮源和无机盐组成的生产黄单胞菌多糖的发酵培养基,其特征是由淀粉、豆并粉、鱼粉、Caco3和自来水配制。
2.根据权利要求
1所说的发酵培养基组成比例如下淀粉 2-5%,豆并粉 0.2-0.4%,鱼粉 0.1-0.3%,Caco30.15-0.35%。
3.根据权利要求
1所说的淀粉,其特征是玉米淀粉或马铃薯淀粉。
专利摘要
本发明属于微生物多糖工业生产方法。寻求一种能高产的适合工业生产的发酵培养基。在由Xanthomonas campestris NK-01菌株直接利用淀粉原料发酵时,不同的氮源和无机盐类对多糖产量影响很大。用豆饼粉和鱼粉作为复合氮源,用CaCO
文档编号C12P19/04GK85102586SQ85102586
公开日1986年9月17日 申请日期1985年4月1日
发明者刘如林, 刁虎欣, 赵大健, 梁风来, 张燕珠 申请人:南开大学导出引文BiBTeX, EndNote, RefMan
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