调节pH :按照琼脂粉与混合物质量体积比1. 5:100的比 例添加琼脂粉，并混合后，采用IN盐酸溶液调节pH至6,得到培养基。
[0052] 实施例5
[0053] -种制作上述灰树花母种快速萌发培养基的方法：
[0054] (1)配制基质溶液：取干燥灰树花子实体和二纯水，按照1:10的质量体积比混合， 采用IN盐酸溶液调节pH为6. 0,80°C水浴2h，过滤，收集滤液得到基质溶液；
[0055] (2)配制辅料：取干燥橡树叶并粉碎，过60目筛，作为辅料；
[0056] (3)混合：将辅料与基质溶液按照质量体积比1:20的比例混合得到混合物；
[0057] (4)添加凝固剂琼脂粉并调节pH :按照琼脂粉与混合物质量体积比1. 5:100的比 例添加琼脂粉，并混合后，采用IN盐酸溶液调节pH至6,得到培养基。
[0058] 实施例6
[0059] -种制作上述灰树花母种快速萌发培养基的方法：
[0060] (1)配制基质溶液：取干燥灰树花子实体和二纯水，按照1:10的质量体积比混合， 测定PH为6. 8,不需调节，80°C水浴2h，过滤，收集滤液得到基质溶液；
[0061] ⑵配制辅料：取干燥橡树叶并粉碎，过60目筛，作为辅料；
[0062] (3)混合：将辅料与基质溶液按照质量体积比1:20的比例混合得到混合物；
[0063] (4)添加凝固剂琼脂粉并调节pH :按照琼脂粉与混合物质量体积比1. 5:100的比 例添加琼脂粉，并混合后，采用IN盐酸溶液调节pH至6,得到培养基。
[0064] 实施例7
[0065] -种制作上述灰树花母种快速萌发培养基的方法：
[0066] (1)配制基质溶液：取干燥灰树花子实体和二纯水，按照1:10的质量体积比混合， 采用IN氢氧化钠溶液调节pH为8. 0,80°C水浴2h，过滤，收集滤液得到基质溶液；
[0067] (2)配制辅料：取干燥橡树叶并粉碎，过60目筛，作为辅料；
[0068] (3)混合：将辅料与基质溶液按照质量体积比1:20的比例混合得到混合物；
[0069] (4)添加凝固剂琼脂粉并调节pH :按照琼脂粉与混合物质量体积比1. 5:100的比 例添加琼脂粉，并混合后，采用IN盐酸溶液调节pH至6,得到培养基。
[0070] 效果实施例1
[0071] 本实施例采用的灰树花母种为灰树花品种Gf-3(购自福建省）；采用实施例2-7 的培养基作为试验组，在图1-图2和表1中依次分别为1-6,采用市售真菌培养基作为对照 组（CK)，在图1-图2和表1中为CK ;市售真菌培养基的配方为：蛋白胨5g/L、酵母浸出粉 2g/L、葡萄糖20g/L、磷酸氢二钾lg/L、硫酸镁0. 5g/L。
[0072] 1、取市售真菌培养基并按说明配制，调节pH为6. 0,并灭菌，此培养基作为对照 (CK)。
[0073] 2、在无菌条件下，分别取灰树花品种Gf-3菌种块接种于对照培养基和实施例2-7 的培养基，接种块大小一致。
[0074] 3、于25± 1°C培养箱中避光培养。
[0075] 4、观察接种块菌丝体萌发情况和菌丝体生长情况等；其中，菌丝体萌发情况及菌 丝体菌落外观分别如图1和图2所示，菌丝体生长速度见表1。
[0076] 5、结果及分析：
[0077] (1)菌丝萌发情况
[0078] 在25土 TC培养箱中避光培养培养48h后，在各个配方培养基中接种灰树花Gf-3 的菌丝体的萌发情况如图1所示，每个培养基样品两个重复。
[0079] 从图1中可以看出，与市售真菌培养基（CK)相比，实施例2_7(图1中的1-6)的 培养基都使接种块加快萌发菌丝体。
[0080] (2)菌丝体生长速度
[0081] 在培养过程中，通过每日对灰树花Gf-3菌丝体前端进行划线记录，测量菌丝日平 均生长距离，即为菌丝体在各个配方培养基中的生长速度，生长速度结果见表1，每个培养 基样品三个重复。
[0082] 从表1可见，在实施例2-4的培养基中（1-3,即5%辅料量添加的三个pH值基质 溶液的配方的培养基），菌丝体平均长速要大于市售真菌培养基CK，并且差异显著（LSD，α =0. 05);而在实施例5-7的培养基（4-6,即2%辅料量添加的三个pH值基质溶液的配方 的培养基）中，菌丝体平均生长速度与市售真菌培养基CK无明显差异。
[0083] 表1各培养基中菌丝体生长速度结果
[0084]
【主权项】
1. 一种灰树花母种快速萌发培养基，其特征在于，包括灰树花子实体、水、橡树叶、凝固 剂制备而得。
2. 如权利要求1的一种灰树花母种快速萌发培养基，其特征在于，所述培养基pH为6， 包括基质溶液、辅料和凝固剂，所述基质溶液由灰树花子实体和水制备而得，所述辅料由橡 树叶粉碎而得。
3. -种如权利要求1-2所述的灰树花母种快速萌发培养基的制作方法，其特征在于， 包括以下步骤： (1) 配制基质溶液：取灰树花子实体和水，混合，调节pH在6. 0-8. 0之间，水浴后过滤， 收集滤液得到基质溶液； (2) 配制辅料：取橡树叶并粉碎，作为辅料； (3) 混合：将辅料与基质溶液按照质量体积比1:20-1:50的比例混合得到混合物； ⑷添加凝固剂并调节pH :添加凝固剂并混合后，调节pH至6,得到培养基。
4. 如权利要求3所述的一种灰树花母种快速萌发培养基的制作方法，其特征在于，所 述步骤1的pH调节为6. 0,或6. 8,或8. 0。
5. 如权利要求3所述的一种灰树花母种快速萌发培养基的制作方法，其特征在于，所 述灰树花子实体和水按照1:10的质量体积比混合。
6. 如权利要求3所述的一种灰树花母种快速萌发培养基的制作方法，其特征在于，所 述水浴为80°C水浴2h。
7. 如权利要求3所述的一种灰树花母种快速萌发培养基的制作方法，其特征在于，所 述调节pH采用1N盐酸溶液或1N氢氧化钠溶液进行pH调节。
8. 如权利要求3所述的一种灰树花母种快速萌发培养基的制作方法，其特征在于，所 述凝固剂为琼脂粉。
9. 如权利要求8所述的一种灰树花母种快速萌发培养基的制作方法，其特征在于，所 述琼脂粉与混合物的混合比例为质量体积比1. 5:100。
10. -种如权利要求3-9中任一权利要求所述的制作方法制作的灰树花母种快速萌发 培养基。
【专利摘要】本发明提供一种灰树花母种快速萌发培养基，包括灰树花子实体、水、橡树叶、凝固剂制备而得，另还提供一种制作方法，包括：(1)取灰树花子实体和水，混合，调节pH在6.0-8.0之间，水浴后过滤，收集滤液得到基质溶液；(2)取橡树叶并粉碎得到辅料；(3)将辅料与基质溶液按质量体积比1:20-1:50混合得到混合物；(4)添加凝固剂并混合后，调节pH至6即得。综上所述，本发明提供一种如上述制作方法制作的灰树花母种快速萌发培养基。该培养基以天然原料经适当处理制成，专用于灰树花母种的萌发，实验证实，该培养基有利于灰树花母种的生长，也有利于保持灰树花菌丝体活力，不至于长期生长在化学试剂培养基中导致退化。
【IPC分类】C12R1-645, C12N1-14
【公开号】CN104531542
【申请号】CN201410810550
【发明人】张一帆, 杨小兵, 谢意珍, 夏凤娜
【申请人】广东省微生物研究所, 广东粤微食用菌技术有限公司
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月19日