>[0080] 9)按照"步骤4"和"步骤5"的操作，洗涂微载体两次。
[0081] 按照微载体与C&COOH溶液的体积比1:1，加入0.1 mM的C&COOH溶液。摇动3分 钟至均匀的息液。室温静置15分钟，然后用导液管，虹吸排走上清培养液。
[0082] 10)按照"步骤4"和"步骤5"的操作，洗涂微载体H次，最后一次洗涂时，取样在 显微镜下观察(见图4)，并测定抑值，其测定值在7. 2-7. 3。
[0083] 11)按照微载体与20mMPBS的体积比：1，加入20mMPBS溶液，摇动3分钟至均匀的 息液时，取样在倒置显微镜下观察，并按照40倍和100倍的放大倍数，各拍照5张存档。然 后，用5M的氨氧化轴溶液调整微载体混息液的抑值在7. 34-7. 45范围内，盖好透气瓶盖， 进打局压灭困。
[0084] 连施例3
[0085] 1)事先娃化好准备收集微载体的化玻璃瓶。
[0086] 2)收集化生物反应器培养结束的初次使用的微载体于娃化过的玻璃瓶，沉淀15 分钟，用导管虹吸的方法将上清液排到0. 5mol/L的氨氧化轴溶液中，上清液与0. 5mol/L氨 氧化轴溶液的比例为1:1 ;
[0087] 3)按照沉淀的微载体与氨氧化轴溶液的体积比1:1，加入0. 5mol/L的氨氧化轴溶 液，摇动3分钟至均匀的息浊液，然后静止15分钟后，用导液管虹吸排走上清，并取样在显 微镜下观察。
[0088] 4)按照沉淀的微载体与洗涂液的体积比1:2,加入洗涂液I (20mmol/L，抑值7. 4 磯酸盐缓冲液)。摇动3分钟至均匀的息浊液，然后静止15分钟后，用导液管虹吸排走上清。 再重复此洗涂操作2次，并取样在显微镜下观察。
[0089] 5)按照微载体与消化液体积比为1:1，加入质量百分比含量为0.2%膜蛋白酶、 0. 02%邸TA二轴的消化液。摇动5分种，使微载体与消化液混合成均匀的息浊液，然后，室温 下静止，自然沉降20分种，用导液管虹吸排走上清，并取样在显微镜下观察。
[0090] 6)按照微载体息液和洗涂液体积比1:2,加入洗涂液II (20mmol/L，抑值7. 4磯酸 盐缓冲液)，摇动5分种，使微载体在溶液中呈均匀息浊液，微载体息浊液自然沉降20分种， 使微载体沉淀下来，用导液管虹吸排走上清，重复此项操作2次，最后一次上清排走一半。
[0091] 7)取处理后的微载体息浊液样品，进行显微镜观察和抑测定。观察到的结果为， 5个视野，微载体颗粒表面均无细胞残骸；微载体息液的抑值测定结果为7. 3。
[0092] 8)将装有处理过的微载体瓶，盖好透气瓶盖，放入到高压柜中，进行12rc灭菌30 分钟，之后，室温冷却后，放入2-8C冰箱中放置备用。
[0093] 连施例4
[0094] 1)事先娃化好准备收集微载体的化玻璃瓶。
[0095] 2)收集化生物反应器培养结束的初次使用的微载体于娃化过的玻璃瓶，沉淀15 分钟，用导管虹吸的方法将上清液排到0. 5mol/L的氨氧化轴溶液中，上清液与0. 5mol/L氨 氧化轴溶液的比例为1:1 ;
[0096] 3)按照沉淀的微载体与氨氧化轴溶液的体积比1: 1，加入0. 5mol/L的氨氧化轴溶 液，摇动3分钟至均匀的息浊液，然后静止15分钟后，用导液管虹吸排走上清，并取样在显 微镜下观察。
[0097] 4)按照沉淀的微载体与洗涂液I的体积比1:2,加入洗涂液I (lOmmol/L，抑值 7. 4磯酸盐缓冲液，含有0. 01%聚山梨醋80)。摇动3分钟至均匀的息浊液，然后静止15分 钟后，用导液管虹吸排走上清。再重复此洗涂操作两次，并取样在显微镜下观察。
[0098] 5)按照微载体与消化液体积比为1:1，加入质量百分比含量为0. 2%膜蛋白酶、 0. 02%EDTA二轴、0. 85%NaCl、0. 01%聚山梨醋80的消化液。摇动5分种，使微载体与消化液 混合成均匀的息浊液，然后，室温下静止，自然沉降20分种，用导液管虹吸排走上清，并取 样在显微镜下观察。
[0099] 6)按照微载体与巧樣酸溶液体积比1:1，加入0. 05mol/L巧樣酸溶液，摇动5分 种，使微载体在溶液中呈均匀息浊液，然后，微载体息浊液自然沉降30分种，使微载体沉淀 下来，用导液管虹吸排走上清，并取样在显微镜下观察。
[0100] 7)按照微载体息液和洗涂液II体积比1:2,加入洗涂液II (lOmmol/L，抑值7. 4磯 酸盐缓冲液)，摇动5分种，使微载体在溶液中呈均匀息浊液，微载体息浊液自然沉降20分 种，使微载体沉淀下来，用导液管虹吸排走上清，重复此项操作3次，最后一次上清排走一 半。
[010。 8)取处理后的微载体息浊液样品，进行显微镜观察和抑测定。观察到的结果为， 5个视野，微载体颗粒表面均无细胞残骸；微载体息液的抑值测定结果为7. 8。
[0102] 9)将装有处理过的微载体瓶，盖好透气瓶盖，放入到高压柜中，进行12rc灭菌15 分钟，之后，室温冷却后，放入2-8C冰箱中放置备用。
[0103] 实施例5
[0104] 1)事先娃化好准备收集微载体的化蓝盖玻璃瓶。
[0105] 2)收集1化生物反应器培养结束的初次使用的微载体于娃化过的化蓝盖玻璃 瓶，沉淀30分钟，用导管虹吸的方法将上清液排到0. 5mol/L的氨氧化轴溶液中，上清液与 0. 5mol/L的氨氧化轴溶液的比例为1:2 ;
[0106] 3)按照沉淀的微载体与氨氧化轴溶液的体积比1:2,加入0. 5mol/L的氨氧化轴溶 液，摇动5分钟至均匀的息浊液，然后静止30分钟后，用导液管虹吸排走上清，并取样在显 微镜下观察。
[0107] 4)按照沉淀的微载体与洗涂液I的体积比1:2,加入洗涂液I (lOmmol/L，抑值 7. 6磯酸盐缓冲液，含有0. 05%聚山梨醋80)。摇动5分钟至均匀的息浊液，然后静止15分 钟后，用导液管虹吸排走上清。再重复此洗涂操作两次，并取样在显微镜下观察。
[0108] 5)按照微载体与消化液体积比为1:1，加入质量百分比含量为0.4%膜蛋白酶、 0. 02%邸TA二轴、0. 85%NaCl、0. 05%聚山梨醋80的消化液。摇动5分种，使微载体与消化液 混合成均匀的息浊液，然后，室温下静止，自然沉降40分种，用导液管虹吸排走上清，并取 样在显微镜下观察。
[0109] 6)按照微载体与巧樣酸溶液体积比1:1，加入0.1mol/L巧樣酸溶液，摇动3分种， 使微载体在溶液中呈均匀息浊液，然后，微载体息浊液自然沉降15分种，使微载体沉淀下 来，用导液管虹吸排走上清，并取样在显微镜下观察。
[0110] 7)按照微载体息液和洗涂液II体积比1:2,加入洗涂液II (30mmol/L，抑值7. 8磯 酸盐缓冲液)，摇动5分种，使微载体在溶液中呈均匀息浊液，微载体息浊液自然沉降40分 种，使微载体沉淀下来，用导液管虹吸排走上清，重复此项操作3次，最后一次上清排走一 半。
[01U] 8)取处理后的微载体息浊液样品，进行显微镜观察和抑测定。观察到的结果为， 10个视野，微载体颗粒表面均无细胞残骸；微载体息液的抑值为7. 0。
[0112] 9)将装有处理过的微载体瓶，盖好透气瓶盖，放入到高压柜中，进行12rc灭菌45 分钟，之后，室温冷却后，放入2-8C冰箱中放置备用。 。…]连施例6
[0114] 1)事先娃化好准备收集微载体的化玻璃瓶。
[0115] 2)收集化生物反应器培养结束的初次使用的微载体于娃化过的玻璃瓶，取样显 微镜下观察(见图5)，并沉淀20分钟，用导管虹吸的方法将上清液排到0. 5mol/L的氨氧化 轴溶液中，上清液与0. 5mol