一种复合磷酸酯酶的提取和干燥方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及天然产物提取，具体说是一种复合磷酸酯酶的提取和干燥方法。
技术背景
[0002]复合磷酸酯酶其主要成份含有磷酸单酯酶、磷酸二酯酶、核苷酸酶、淀粉酶等多种生物活性物质。用于治疗各类型肝炎、肝硬化、脂肪肝、银肩病等。是植物提取物科学精制而成，能促进人体正常代谢、具有磷酸酯酶活性的一种多酶制剂，能催化多种磷酸酯水解，促进或调节人体新陈代谢，有利于增进食欲，增强体质及疾病的改善或痊愈。
[0003]目前，关于复合磷酸酯的提取方面报道的文献和专利较少。中国专利CN101368176A提出了一种提取和干燥方法。大麦根须经水提后，以硫酸铵盐析，再以丙酮-水在-20°C条件下洗涤，出去产品表面的盐分。洗盐完毕的产品再以纯丙酮在_20°C洗涤，室温晾干。
[0004]此发明虽然得到了最终的产品，但是存在以下不足:
[0005](I)以硫酸铵分级析得到产品，操作复杂且不能保证硫酸铵在复合磷酸酯酶中没有残留；
[0006](2)使用了有机溶剂丙酮，有一定毒性并且容易造成酶活性降低；
[0007](3)操作中有-20°C步骤，对生产条件要求高，操作不便利；
[0008](4)最终产品是室温晾干，干燥效率低且丙酮在产品中有较多的残留；
[0009](5)晾干过程丙酮可能会导致复合磷酸酯酶的活性降低。
[0010]张宇红、王学东等在《复合磷酸酯酶提取工艺的研究》中提到复合磷酸酯酶遇热易失活，整个工艺过程温度不高于40°C。干燥温度低从理论上讲虽然会保持复合磷酸酯酶的活性，但实际上由于在湿态下时间太长反而会导致酶活性的降低，并且降低干燥效率，延长生产周期。
【发明内容】
[0011]本发明目的在于提供一种复合磷酸酯酶的提取和干燥方法。
[0012]为实现上述目的，本发明采用技术方案为:
[0013]—种复合磷酸酯酶的提取方法，以大麦根须为原料，将原料经水浸泡提取、离心，收集离心液经醇沉，使复合磷酸酯酶析出；析出的复合磷酸酯酶经水溶解分散，再经喷雾干燥的方式使分散体得以干燥，进而得水分低于8%的复合磷酸酯酶。
[0014]所述复合磷酸酯酶湿品用其重量5?10倍的水溶解分散，分散后采用喷雾干燥方式进行干燥，得到水分低于8%、酶活性在每毫克4000?10000单位的复合磷酸酯酶。
[0015]喷雾干燥机进风口温度110?160°C，出风口温度70?100°C。采用喷雾干燥的方式克服了传统工艺低温干燥时间长、酶活性易下降的缺点，既保持了较高的酶活性又提高了干燥效率，在短时间内得到水分含量低于8%的产品。
[0016]将原料浸泡在其重量4?8倍的水中，室温下浸泡6?12小时，浸泡提取得到复合磷酸酯酶水溶液，离心除去大麦根。
[0017]所述复合磷酸酯酶水溶液经其体积2?5倍的醇在0°C?30°C下进行醇沉I?2小时，而后以管式离心机离心，收集沉淀复合磷酸酯酶湿品。
[0018]所述醇沉后在0°C?30°C下，以管式离心机10000?16000转/分离心I?2小时，收集沉淀复合磷酸酯酶湿品。
[0019]所述醇为乙醇，浓度为80?95%。
[0020]本发明所具有优点:
[0021]本发明生产条件温和，提取和干燥周期短，只使用了乙醇为溶剂且可回收套用，工艺绿色环保，克服了其他专利方法中操作复杂、对生产条件要求高、干燥时间长等缺点。特别是采用了喷雾干燥的方式，克服了传统方法中低温或者室温干燥效率低、时间长的缺点，在缩短了干燥时间的同时很好的保持了复合磷酸酯酶的活性，适合工业化生产。
[0022]具体实施方法
[0023]实施例1
[0024]在1000L提取罐中，加入500kg水和10kg大麦根须，浸泡7h。浸泡结束后，分批离心，每批保持1200?1500转/分钟离心30min，合并液体得到离心液410L。将离心液转入醇沉釜，控制温度在20°C以下，加入1230L浓度为85%酒精。1.5h后，开始离心，保持离心机12000转/分离心2小时，检测离心液温度控制在不超过20°C。离心完毕，得到复合磷酸酯酶湿酶块9.1kg，湿品以50kg水溶解(分散)，过80目筛出去不溶物，滤液开始喷雾干燥。控制喷雾干燥机进风口温度约150°C，出风口温度约90°C。约2h干燥完毕，得粉末状固体3.5kg，取样检测，酶活性6300u/mg，水分?.2%。
[0025]实施例2
[0026]在1000L提取罐中，加入600kg水和10kg大麦根须，浸泡8h。浸泡结束后，分批离心，每批保持1200?1500转/分钟离心30min，合并液体得到离心液450L。将离心液转入醇沉釜，控制温度约15°C，加入1800L浓度为95%酒精。2h后，开始离心，保持离心机14000转/分离心2小时，检测离心液温度控制在15°C左右。离心完毕，得到复合磷酸酯酶湿酶块9.6kg，湿品以60kg水溶解(分散)，过80目筛出去不溶物，滤液开始喷雾干燥。控制喷雾干燥机进风口温度140°C，出风口温度80°C。约2h干燥完毕，得粉末状固体4.1kg，取样检测，酶活性9480u/mg，水分6.5%。
[0027]实施例3
[0028]在1000L提取罐中，加入450kg水和10kg大麦根须，浸泡12h。浸泡结束后，分批离心，每批保持1200?1500转/分钟离心30min，合并液体得到离心液370L。将离心液转入醇沉釜，控制温度在25°C，加入1110L浓度为85%的回收酒精。2h后，保持离心机16000转/分离心1.5小时，检测离心液温度控制在25°C左右。离心完毕，得到复合磷酸酯酶湿酶块8.5kg，湿品以45kg水溶解(分散)，过80目筛出去不溶物，滤液开始喷雾干燥。控制喷雾干燥机进风口温度135°C，出风口温度85°C。约2h干燥完毕，得粉末状固体3.7kg，取样检测，酶活性5190u/mg，水分?.2%。
[0029]以上所述，仅为本发明具有代表性的实例，并非对本发明做任何形式上的限制。依据本发明的技术方案中任何等效的变换，均属于本发明的保护范围。
【主权项】
1.一种复合磷酸酯酶的提取方法，其特征在于:以大麦根须为原料，将原料经水浸泡提取、离心，收集离心液经醇沉，使复合磷酸酯酶析出；析出的复合磷酸酯酶经水溶解分散，再经喷雾干燥的方式使分散体得以干燥，进而得水分低于8%的复合磷酸酯酶。2.按权利要求1所述的复合磷酸酯酶的提取方法，其特征在于:所述复合磷酸酯酶湿品用其重量5?10倍的水溶解分散，分散后采用喷雾干燥方式进行干燥，得到水分低于8%、酶活性在每毫克4000?10000单位的复合磷酸酯酶。3.按权利要求1或2所述的复合磷酸酯酶的提取方法，其特征在于:其特征在于??喷雾干燥机进风口温度I1?160°C，出风口温度70?100°C。4.按权利要求1所述的复合磷酸酯酶的提取方法，其特征在于:将原料浸泡在其重量.4?8倍的水中，室温下浸泡6?12小时，浸泡提取得到复合磷酸酯酶水溶液，离心除去大麦根。5.按权利要求4所述的复合磷酸酯酶的提取方法，其特征在于:所述复合磷酸酯酶水溶液经其体积2?5倍的醇在0°C?30°C下进行醇沉I?2小时，而后以管式离心机离心，收集沉淀复合磷酸酯酶湿品。6.按权利要求5所述的复合磷酸酯酶的提取方法，其特征在于:所述醇沉后在0°C?.30°C下，以管式离心机10000?16000转/分离心I?2小时，收集沉淀复合磷酸酯酶湿品。7.按权利要求5所述的复合磷酸酯酶的提取方法，其特征在于:所述醇为乙醇，浓度为.80 ?95%。
【专利摘要】本发明涉及一种复合磷酸酯酶的提取和干燥方法，包括以下步骤：(1)以大麦根须为原料，经水浸泡提取得到复合磷酸酯酶水溶液，离心除去滤渣；(2)在复合磷酸酯酶离心液中加入酒精醇沉，复合磷酸酯酶从混合液中析出；(3)复合磷酸酯酶醇沉液经过离心后得到复合磷酸酯酶湿品；(4)复合磷酸酯酶湿品以水溶解分散后，经喷雾干燥得到最终产品；(5)喷雾干燥后的产品酶活性每毫克4000～10000单位，产品水分低于8％，质量符合WS-10001-(HD-0858)-2002标准要求。本发明生产条件温和，提取和干燥周期短，只使用了乙醇为溶剂且可回收套用，工艺绿色环保，所得到的复合磷酸酯酶活性高。
【IPC分类】C12N9/16
【公开号】CN105112384
【申请号】CN201510616688
【发明人】李延顺, 仇中选, 黄清华, 王荣红, 薛益新, 姜国栋, 张燕飞
【申请人】青岛黄海制药有限责任公司, 青岛黄海生物制药有限责任公司
【公开日】2015年12月2日
【申请日】2015年9月24日